甲基化酶DNMT3B基因敲除的CHO-K1细胞系构建
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Construction of CHO-K1 Cell Line with DNMT3B
Gene Knockout
作者： 陈奇娜[1];王斌[2];郭庆[2];王静[2];黄伟[2];王霄[2];纪华[3]
作者机构： [1]大理大学药学院,云南大理671000;[2]昆明学院农学与生命科学学院,云南昆明650214;[3]解放军联勤保障部队第920医院肿瘤科,云南昆明650032
出版物刊名： 昆明学院学报
页码： 114-119页
年卷期： 2021年 第6期
主题词： CRISPR/Cas9;基因敲除;DNMT3B;表观遗传学;T7E1核酸内切酶
摘要：构建敲除DNMT3B基因的细胞系,为重组蛋白药物生产使用的高效表达系统提供DNMT3B基因缺失的稳定细胞株.采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建敲除DNMT3B基因的质粒,并利用脂质体转染CHO-K1细胞进行基因编辑、T7E1核酸内酶切及筛选DNMT3B基因敲除细胞,以及软琼脂法获得单克隆.结果表明,通过对获得的单细胞克隆进行测序比对,确定DNMT3B基因第4个外显子处被编辑产生移码突变.最终获得DNMT3B基因特异位点删除的CHO细胞单克隆.。