小剂量氨茶碱对哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖及转化生长因子-Β1表达的影响

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间比较 差异无显著性 。结论 ： 反复 的变应原吸入 可导致 气道重塑 尤其 是 Ａ ＭＣ增 殖 ，Ｇ ． １ Ａ Ｍｃ增殖 中可能 Ｓ Ｔ ＦＢ 在 Ｓ
具有 重要 作用 ， 小剂量氨茶碱干预 可能减缓气道重 塑尤其 是 Ａ Ｍｃ增 殖的发生 。 ｓ
关键词 哮喘 转 化 生 长 因子 Ｂ 氨 茶 碱 气道 平 滑肌 细 胞
反 应 ， 出现 烦 躁 不 安 、 吸急 促 、 涎 、 如 呼 流 大小 便 失禁 等 为 阳性 反 应 。对 照 组 小 鼠经 Ｐ Ｓ溶 解 的 Ａ （ Ｈ） Ｂ ｌＯ ， 致 敏后 ． 相应 时 间 给予 Ｐ Ｓ雾 化 吸入 。茶 碱 组 小 鼠 在 Ｂ 于 每次 雾 化前 １ 腔 注射 氨 茶碱 （０ｍｇｋ ， 东鲁 ｈ腹 ２ ／ ｇ 山 抗 ， 号 ：７ １７ ）对 照组 和哮 喘组 小 鼠于 每 次雾 化 批 ００ ０ １ ， 前 １ｈ腹 腔注 射 ０２ｍＬＰ Ｓ 对 照 。 ． Ｂ 作 １ 标 本 收 集 于末 次 雾 化 激 发 ２ ． ２ ４ｈ后 ，以 ５ ％的 水 合氯 醛 ４ ０ｍ ／ ｇ 腔 注射 麻 醉 小 鼠 ，分 离 气 管 ， ０ ｇｋ 腹 插 入 套 管 针 ， 露 胸 腔 ， 扎 右 肺 ， 冷 Ｐ Ｓ０３ｍ 暴 结 用 Ｂ ． Ｌ 灌 洗 左肺 ， 次 在 肺 内停 留 约 ３ ， 续 ３次 并 收集 每 ０Ｓ连
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出现 管壁、 平滑肌 层增厚及 Ａ ＭＣ增殖等气道 重塑的特征 ， Ｔ Ｆ １ 的表 达呈正相 关 ， Ｓ 与 Ｇ ＝１ ３ 嗜酸性粒 细胞 计数 明显升
高。（ ） ２ 茶碱组与哮喘组比较炎症反应减轻， 管壁、 平滑肌层增厚及 Ａ Ｍ Ｓ Ｃ增殖减 少，Ｇ ． １ Ｔ ＦＢ 表达减弱； 与对照组
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通讯作者： 朱述阳 Ｅｍｉｊｃｅｚ ５ｓ ｕｏ —ａ： ｈｎ ６＠ｏ ．ｍ ｌｉ ３ ｈ ｃ ｅ
第２ ８～５ ０天 隔天 雾 化 １ ， 次 共雾 化 １ 。观 察 小 鼠 ８次
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实 用 医 学 杂 志 ２０ ０ ８年 第 ２ ４卷 第 １ 期
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要 目的 ： 讨 小剂量氨 茶碱 干预 对哮 喘小 鼠气道 平滑肌 细胞 （ Ｓ ） 殖及 转化 生长 因子一 １ Ｔ Ｆ 探 Ａ Ｍｃ 增 １ （Ｇ ． ３
Ｂ ） 达的影响。方法 ： １表 建立哮喘 小鼠气道重 塑模 型 ， 实验 分为对照组 、 哮喘组 、 茶碱 组 。测定 支气 管肺 泡灌洗液 中
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实用 医学 杂志 ２ ０ ０ ８年第 ２ 卷 第 ｌ ４ 期
小 剂 量 氨茶 碱 对 哮 喘 小 鼠气 道 平 滑 肌 细 胞 增 殖 及 转 化 生 长 因子 －３ 表 达 的影 响 １ １
刘平莉 吕丽丽 夏春伟 李ｔ ｃ ｒ１ ａｔｍａｉ ｃ ＬＵ Ｐｎ － ． Ｖ Ｌ— ， Ｉ ｈ ｎｗ ｉ Ｌ ｕ －ｌ，Ｙ ｏｇｗ ｉ Ｚ ｈ ・ ｒ ｗ ｈｆ ｔ ・ １ ａｏ ３ ｓ ｈ ｔ ｍｉ ｃ ｅ ｌ ｉｇｌ Ｌ ｉ ｉ ＸＡ Ｃ ｕ －ｅ ． Ｉ ｏｒ ｔ Ａ０ Ｈ ｎ －ｅ ， ＨＵ Ｓ ｕ ｉ ｌ Ｒ ｏ
气 道重 塑 是 哮 喘 的重 要 病 理 特 征 之一 …． 会 影 它 响药 物治疗哮喘的效果 ，如影响糖皮质激素和 １ 受 ３ ２ 体激 动 剂逆 转 气 道 阻塞 的 能力 ． 因此 针 对 气 道重 塑 的
干预措施成为 目前研究哮 喘的热点之一。 气道平滑肌
殖 中 的作 用 ， 以及 小剂 量 氨 茶碱 干 预 对 Ａ ＭＣ增 殖 的 Ｓ 影响。 １ 材 料 与方 法 １１ 哮 喘 小 鼠 模 型 的 建 立 与 分 组 雌 性 清 洁 级 ．
ｗ ｉｈｗ ｒ ｐ ｓｉ ｌ ｒ ａ ｄ ｗｔ ｔｅｅｐｅｓ ｎ ｌ ｅ ｏ Ｔ Ｆ１ ． Ｅ ｓ ｏｈｌｃｕ ｔ ｉｃｅｓｄ ｓ ｎ ｉａｔ ． （ ） ｓ ｈｃ ｅｅ ｏｉｖ ｙ ｅ ｔ ｉ ｈ ｘｒｓｉ ｅ ｌ ｆ Ｇ － １ ｔｅ ｌｅ ｈ ｏ ｖ ３ ｏｉ ｐ ｉ ｏ ｎｓ ｎｒａｅ ｉ ｉｃｎ ｙ ２ Ａ ｎ ｇ ｆ ｌ
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壁 总面 积 （ ｔ、 道平 滑 肌 面积 （ ＷＡ ）气 ＷＡｍ） Ａ ＭＣ核 及 Ｓ 数 （ ， 果 以单 位 长 度 基 底 膜 的 面 积 表 示 ， 别 为 Ｎ）结 分 ＷＡ ／ ｂ ＷＡ ／ ｂ Ｎ Ｐ ｍ。 ｔＰ ｍ、 ｍ Ｐ ｍ、 ／ ｂ 灰度 分 析测 定 Ｔ Ｆ ［ Ｇ ．１ ３ 在 ＡＳ ＭＣ的灰 度 值 ． 张 切 片取 ５个 气 道 ． 每 每个 气 道 测５ 个灰度值减去空白灰度值取绝对数 ． 平均后作 为 该标 本 的灰 度值 。 １ 统 计 学 处 理 实 验 数 据 以 Ｓ Ｓ １５统 计 软 件 ． ７ Ｐ Ｓ１． 包分析 ， 所有结果 以 ｓ ± 表示 ， Ｆ检验 ， 用 以Ｐ＜０ ５ ． ０ 为差 异 有统 计 学 意义 。
ｗｅ ｅ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ Ｐ ｒ ｔ ｒｏ ａ ｅ ｎ ｍｂ ａ ｅ， ｔ ｔ ｒ ｎ ｈ ａ ａ ｌａ ｅ ｒ ｅｅ ｍｉ ｅ ． ｅｉ ｅ ｆｂ ｓ ｍｅ ｔｍｅ ｒ ｎ ｍｅ ｏａ ｂ ｃ ｉｌｗ ｌ ｒ ａ， ｍｕ ｃ ｅ ｗａｌａ ｅ ， ｎ ｃ ｅ ｒ ｎ ｍｂ ｒｏ ｌ ｏ ｓ ｌ ｌ ｒ ａ ｕ ｌ ａ ｕ ｅ ｆ
Ｃ ｒ ｓｏ ｄｎ ｔｏ：ＨＵ Ｓ ｕｙ ｎ Ｅ ｍ ｉ：ｅ ｈ ｎ３ ５ ｓｈ ． ｒ ｏｒ ｐ ｎ ｉ ａ ｈ ｒＺ ｈ —ａｇ － ａｌ ｃｅｚ ６ ＠ ｏ ｕ ｏ ｅ ｇｕ ｉ ｆ ｃｎ
［ ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊｃ ｖ Ｔ ｖｓｇｔ ｔ ｆｃ ｆｏ — ｓ ａ ｉ ｐｙｉ ｎ ｐ ｌｅ ｔｎｏ ａ ｗｙｓ ｏｔ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂｅｔ ｅ ｏｉ ｅｉ ｅ ｈ ｅｅｔ ｏ ｌ ｄ ｅ ｍｎ ｈｌ ｅｏ ｒｉｒｉ ｆ ｉ ａ ｏ ｉ ｎ ｔａ ｅ ｓ ｗ ｏ ｏ ｌ ｎ ｏｆ ａｏ ｒ ｍ ｈ
１ 图像分析 图像采集及分 析（ｅ ａＱ ｉ， 国） ． ６ Ｌｉ ｗｎ 德 ｃ ； Ｈ Ｅ及 Ｐ Ｎ Ｃ Ａ切 片 图像 采 集 ［５ 切 片在 显 微 镜 下放 大 ４ －： ３ ２ ０倍 ， 组 随机选 取 直径 １ ０～２ ０ ｍ完 整 的小 支 ０ 每 ０ ０ 气 管横 截 面 ３ ０个 ， 定 管腔 基 底 膜 周 长 （ｂ 、 管 测 Ｐ ｍ）气
ｇ ｕ ， ａｄ ａ ｉｏｈ ｌｎ ｒｕ ． Ｅ ｓ ｏ ｈ ｏｎｓａｄｅｐｅｓ ｎｏ ｃ ｖ Ｇ 一 １ｉ ｒｎｈ ａ ｅｌ ａａｅｆ ｉ ｒ ｐ ｏ ｎ ｍｎ ｐ ｙ ｉｅｇ ｐ ｌ ｏ ｏｉ ｐ ｉ ｃｕ ｔ ｎ ｘｒｓｉ ｆａｔ ｅＴ Ｆ１ ｎｂ ｃ ｏｌ ｏ ｒｌｖｇ ｕｄ ｎ ｌ ｏ ｉ ３ ｏ ｖ ａ ｌ
嗜酸性粒 细胞 计数及 活性 Ｔ ＦＢ 表 达的变化 ， Ｇ ．１ 行增 殖细胞核 抗原 （ Ｃ Ａ） Ｔ Ｆ１ Ｐ Ｎ 及 Ｇ ． １免疫组 化染 色， ３ 图像 分析 测 定管腔基底膜 周长 、 气管壁 总面积 、 气道 平滑肌 面积 、 Ｓ Ａ ＭＣ核数 及 Ｔ Ｆ １ Ｇ ． １在 Ａ ＭＣ的灰度值 。结果 ： １ 哮喘 组 ３ Ｓ （）