毛细管电泳仪分离测定雪碧中苯甲酸钠
毛细管电泳仪分离测定雪碧 化学实验教学中心
饮料中各组分的分离测定色谱科学自从1903年俄国的茨维特发明了液固柱色谱之后，已有近100年的历史。
但是在20世纪末的20年间，以前所未有的速度发展，特别是进人生命科学。
材料科学和信息科学时代，对分离分析提出越来越高的要求。
常见的色谱可分为气相色谱、液相色谱、毛细管电泳。
气相色谱法（GC）分离效率、选择性、灵敏度都很高，但是它只适用于热稳定性好、易挥发的物质。
高效液相色谱法（HPLC）不受热稳定性及挥发性的限制，可以分析热稳定性差。
难挥发的物质，但是和GC相比，缺乏灵敏的通用型检测器，实验中需消耗大量的有机溶剂，特别是对于大分子物质因其分子扩散系数小、传质阻力大，使柱效率大大降低，以至于难以分离分子量大于2000的物质。
经典电泳技术和色谱理论相结合，利用毛细管电泳的分离模式多样化，毛细管内壁的修饰方法及流动的缓冲液中的添加剂的不同，以及新检测技术的发展，使毛细管电泳的应用非常广泛。
可分离多种阴阳离子、生物大分子等，利用多种手性选择剂，具有高分离能力的毛细管电泳在手性分离中极为重要。
饮料中的成份相对比较复杂，其中各种不同的物质选择不同的色谱分离检测方法至关重要。
本实验选取饮料中不同物质分别采用气相色谱、液相色谱、毛细管电泳等方法分离检测。
通过实验对比，对各类色谱进行较深入了解。
气相色谱仪分离测定奶茶中胆固醇1 实验目的（1）了解外标法定量的基本原理及操作步骤，掌握其计算方法及注意事项。
（2）了解奶茶的前处理过程，掌握仪器的基本操作。
2 实验原理外标法也叫标准曲线法，适用于在成分很复杂的样品中对某一种或几种组分定量，常用于常规分析。
外标法首先要配置一系列浓度的标准溶液，分别测定峰面积，以峰面积对浓度作图（下图）：A i～c i 关系曲线A i=fC i+a(a是常数)，用线性回归法求出f 和a，代入未知样的峰面积求出未知样的组分含量。
在用外标法定量时，要注意进样量一定要标准不能有误差，否则会导致标准曲线上的点偏高或偏低，影响结果的准确性。
毛细管电泳法同时分离检测饮料中的六种食品添加剂
毛细管电泳法同时分离检测饮料中的六种食品添加剂代语林;董婵婵;邓宁;何建波;王燕;朱燕舞【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)005【摘要】建立毛细管电泳法同时测定饮料中苯丙氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、肉桂酸、山梨酸钾、抗坏血酸和苯甲酸6种食品添加剂的分析方法.在Peakmaster 5.3软件对电泳参数模拟的基础上,考察了缓冲液浓度、pH值以及分离电压对6种食品添加剂分离效果的影响.结果表明,在检测波长214 nm,进样时间10s的情况下,确定最佳电泳条件为40 mmol/L pH 9.0Na2HPO4-H3PO4的缓冲液,分离电压12 kV.在此条件下,6种食品添加剂在20～160mg/L范围内呈良好的线性关系(R＞0.9800),检出限为0.23～0.77 mg/L,加标回收率为97.3％～103.0％,相对标准偏差(RSD)为2.0％～3.8％,精密度试验结果相对标准偏差(RSD)为2.0％～3.8％,表明该方法操作简便、准确度高、精密度良好,能满足饮料中6种食品添加剂的检测需求.【总页数】5页(P187-191)【作者】代语林;董婵婵;邓宁;何建波;王燕;朱燕舞【作者单位】合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学与化工学院,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】O657.8【相关文献】1.毛细管电泳法分离检测饮料中的防腐剂 [J], 王钰;杨思文;代语林;邓宁;王燕;何建波;朱燕舞2.用高效毛细管电泳法分离六种肽类混合物的方法探讨 [J], 王玉洁;黄志东3.高效毛细管电泳法同时检测饲料中六种抗氧化剂 [J], 庞军;刘文红;宋合兴;曹小妹;高文惠4.毛细管电泳法快速分离检测六种苯的取代物 [J], 王昕5.高效毛细管电泳法同时分离检测六种地龙多肽 [J], 周鑫悦;张诗琪;林露;陈莉;李琦;赖昕;余丽双因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
区带毛细管电泳法(CZE)测定饮料中苯甲酸的含量
『 ２ 】 中华人 民 共 和国国家标准 Ｇ Ｂ ／ Ｔ ５ ０ ０ ９ ． １ ３ — ２ ０ ０ ３ ． 食 品中铜 的测定 【 ｓ 】 ． 中华人 民共和国卫生部 ２ ０ ０ ３ — ０ ８ — １ １ 发布 ， ２ ０ ０ ４ — ０ １ — ０ １ 实施． 【 ３ 】 邱德仁． 原子光谱分析【 Ｍ 】 ． 上海： 复旦大学出版社 ， ２ ０ ０ ２ ． 【 ４ 】 世界卫生组织（ ｗＨ ０） 《 饮用水 质准￣ Ｊ １ ） （ ２ ０ ０ ２ 年英文版 ） ． 【 ５ 】 中华人 民共和国农 业行业标 准 Ｎ Ｙ ／ Ｔ ４ ３ ４ — ２ ０ ０ ０ ． 绿色食品 果 汁饮 料 Ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｆ ｏ ｏ ｄ － ｆ ｒ ｕ ｉ ｔ ｄ ｒ ｉ ｎ ｋ ｉ ｎ ｇ ） ［ Ｓ ］ ． 农业部 ２ ０ ０ ０ — １ ２ — ２ ２ 批准 ， ２ ０ ０ １ — ０ ４ 一
表 １ 苯 甲酸 浓 度 与 相 应 的 峰 值
ＩＩ １ ２ １３ １ ４ １ ５ １ ６
时间 ｒ ａｉ ｎ 样品 ３
对 数 据 进 行 分 析 得 如 图 １的 标 准 曲 线 ， 其 中 峰 值 ＝１ ／ 峰高 的绝 ｘ － ｊ － 值 。 ３
图２ ３种 样 品 的 毛 细 管 电 泳 色 谱 图 讨 论 本 文 采 用 峰 高 作 为 定 量 依 据 ，简 便 易 行 。 该 实 验 采 用 毛 细 管 电 泳 法 ， 只 需 经 过 对 样 品 的 简 单 稀 释 、过 滤 、脱 气 处 理 ，在 很 短 的 时 间 内 就 能 对 样 品
表２
其 中 ，１ 、 ２和 ３号 峰 分 别 代 表 １ 、 ２和 ３号 样
品 中的苯 甲酸 的毛 细管 电泳谱 图。 国 家 标 准 规 定 ，果 汁 饮 料 中 的 苯 甲酸 含 量 不 得
雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究【开题报告】
毕业论文开题报告化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、选题的背景、意义食品的营养丰富，极易受微生物污染而腐败变质。
含乳饮料含有丰富的蛋白质类及多种维生素，为了延长保存期和改善口味，一般在产品中添加一些防腐剂，防腐剂便成为重要的食品添加剂之一，防止食品腐败变质，延长食品保存期，抑制食品中微生物繁殖；添加剂在食品加工过程中被广泛使用。
《食品安全法》于2009年6月1日起颁布实施，食品安全引起社会各界的广泛关注，苯甲酸是有机化学防腐剂，添加到食品中用于抑制微生物、糖的生长，但使用量过大对人体会造成一定危害。
能引起哮喘等一系列过敏症状。
因此对食品中苯甲酸的含量进行检测有重要意义。
二、相关研究的最新成果及动态高效液相色谱法测定酸奶中苯甲酸。
高效液相色谱法直接测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠，在国际(GB／TS009 28—1996)和(GB／TSO09 29—1996)方法中只适用于汽水、果汁、配制酒等液体样品．而对固体或半固体的样品前处理多采用有机溶剂提取，操作过程繁琐．有机溶剂对操作者的健康造成危害。
HPLC测定含乳饮料中的山梨酸和苯甲酸含量在我国食品卫生标准对其应用范围和使用限量都有明确的规定[1 ]对文献报道了很多食品添加剂的分析方法,如薄层色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法及传统的高效液相色谱法。
高效液相色谱法在对多种添加剂同时分析方面有其十分有利的条件。
在高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中苯甲酸时，测量速度较慢，往往一针需要7—10 min，做一条工作曲线需要两小时左右，再测样品时仪器的灵敏度发生了改变，所以国家标准采用单点校正法测定，尽量缩短测量时间。
标准溶液的浓度尽量与待测溶液的浓度接近，可以消除仪器非线性影响，否则不在同一·线性范围内，可能引起较大的不确定度，而单点校正法并没有考虑线性影响，认为是绝对线性，不存在不确定度的。
根据小分量不确定度不足最大分量不确定度的1／3时，小分量不确定度可以忽略不计的原则，在本实验中，对于玻璃器皿的膨胀系数、A级吸量器具的不确定度均可以忽略，但对于样品预处理时使用的具塞比色管等给实验带来较大的不确定度，实验时必须加以控制，通过这样分析来源后，对于我们评定HPLC测量其他成分有很大的帮助。
测定碳酸饮料中苯甲酸钠含量
碳酸饮料中苯甲酸钠含量的测定与分析[实验日期]：年月日——月日[实验操作人]：[实验地点]：[实验目的]：1.学习使用双相滴定法进行饮料中苯甲酸钠的测定操作2.学习使用紫外—可见分光光度计，并将测定结果与双相滴定法进行比较。
3.体会化学分析方法和仪器分析方法在低含量测定中的优缺点[实验原理]：本实验采用双相滴定法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量。
本实验选做紫外-可见分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量，并将结果与双相滴定法进行对照苯甲酸钠的测定可以使用HCl滴定，但因为生成的苯甲酸常温下溶解度很小，几乎不溶于水，由此造成滴定终点的pH突越不够明显，另外游离的苯甲酸附着在容器和液面表面会影响观察滴定结果，并在一定程度上吸附少量的指示剂，不利于终点判断。
而苯甲酸在常温下难溶于水（0.34g/100ml），在空气中微挥发，有吸湿性，溶于热水，也溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。
苯甲酸钠常温易溶于水（53.0g/100ml，PH≈8）。
综合考虑，在本实验中采用乙醚来吸收水相中的游离苯甲酸，将苯甲酸提取入乙醇溶液中，之后在乙醇溶液中使用0.01mol/L的标准NaOH溶液以PP为指示剂滴定碳酸饮料样品至显粉红色，根据滴定消耗的NaOH标准溶液的体积计算碳酸饮料中苯甲酸钠的含量。
1注：选作部分相关内容见后。
[实验仪器]：50ml酸式滴定管，50ml碱式滴定管，250ml锥形瓶×3，500ml分液漏斗，1000ml1根据最新GB2760- 2003国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
烧杯，250ml容量瓶×n，25ml移液管，10ml量筒，100ml量筒，玻璃棒，表面皿，带橡胶塞的细口瓶×2，50ml具塞量筒×2，2ml吸量管，10ml移液管。
电子分析天平（0.0001g），紫外-可见分光光度计，电热恒温水浴锅（室温+5℃~99℃）。
[实验试剂]：HCl溶液（1+1），40%NaOH溶液，草酸/邻苯二甲酸氢钾基准试剂，苯甲酸基准试剂，PP，无水硫酸钠(分析纯)，乙醚(分析纯)，NaCl(分析纯)，乙醇(分析纯)。
毛细管电泳法分离测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精
毛细管电泳法分离测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精胡美珍;王文铮;张燕琴【摘要】采用毛细管电泳-紫外检测法,考察了波长,电压,缓冲试剂、浓度、pH对山梨酸、苯甲酸、糖精分离的影响,得到了优化的实验条件.以硼砂20mmol/L(pH=7.5)为运行缓冲溶液,20kV为分离电压,检测波长为230nm的电泳条件下,进样时间为10s,山梨酸、苯甲酸、糖精可在12min内实现分离.山梨酸在5mg/L～50mg/L,苯甲酸在5mg/L～50mg/L,糖精在15mg/L～150mg/L范围内呈良好线性关系,迁移速度、峰面积相对标准偏差均小于4.5%,(n=5).用上述方法对实际样品进行测定,回收率在95%以上.【期刊名称】《上海师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2004(033)003【总页数】4页(P63-66)【关键词】毛细管电泳-紫外检测法;添加剂;山梨酸;苯甲酸;糖精【作者】胡美珍;王文铮;张燕琴【作者单位】上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234【正文语种】中文【中图分类】O6570 引言毛细管电泳(简称CE)，是80年代初发展起来的一种新型高效的分离技术[1].它具有高效、快速、样品用量少、测定成本低等优点，自其产生以来，迅速渗透到与分析化学相关的各个学科.如：医药、环境、食品等各个领域.苯甲酸、山梨酸、糖精是常用的食品添加剂.国家规定限量使用.所以测定食品中苯甲酸、山梨酸、糖精的含量十分重要.目前上述三种添加剂，大都采用紫外分光光度法、薄层层析法、气相色谱法和高效液相色谱法等[2～4].本文用CE法分离测定上述三种添加剂，方法简便，灵敏度和重现性均符合食品分析的要求，样品前处理测定步骤较紫外光度法、薄层层析法简单，测定成本较HPLC低，有很好的实用价值.1 实验部分1.1 主要仪器与试剂仪器高效毛细管电泳仪、ACS2000紫外检测器(北京彩陆科学仪器有限公司)(中科院研究生院应用化学研究所); 毛细管总长度：60cm, 有效长度：54cm, 直径：50μm; CQ50超声波清洗器(上海超声波仪器厂);pHs-3C 型酸度计(上海华侨仪表厂);过滤器Ø25(上海市医工院);0.22μm 滤膜(上海兴亚净化材料厂);注射器5mL试剂硼砂(优级纯)、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、三(羟甲基)氨基甲烷(简称Tris)、山梨酸、苯甲酸、糖精均为分析纯，样品为汽水、番茄沙司，蜜饯，水为二次蒸馏水.1.2 实验方法1.2.1 标准样品的制备参照国标法，准确称取山梨酸、苯甲酸、糖精.分别溶解、定容，使其质量浓度均为1.0mg/mL.以0.22μm滤膜过滤备用.1.2.2 样品的制备汽水，经超声波超声，除去二氧化碳，0.22μm滤膜过滤，待用.番茄沙司、蜜饯：准确称取2g左右样品置于具塞小量筒中，加H3PO4数滴，准确加入乙醚10mL，连同量筒称其总量，猛烈振摇2min，再次称重，如重量减少，加入乙醚补充至原有重量，混匀.取乙醚5mL，置于烧杯中，经40℃水浴加热，将乙醚挥发后，用硼砂缓冲液定容至10 mL.经0.22μm滤膜过滤，待用.1.2.3 电泳条件以硼砂20mmol/L(pH=7.5)为电泳缓冲液，在20kV恒压下进行电泳分离，在230nm波长处检测，电动进样，进样时间10s.毛细管使用前用0.10mol/L的NaOH，水和电泳缓冲液分别冲洗30min.每次电泳后，用上述溶液各冲洗2min.2 结果与讨论2.1 测定波长的选择据有关资料[3,4]报道苯甲酸的最大吸收波长为227nm，山梨酸为250nm，糖精为207nm，综合考虑以230nm为测定波长.2.2 分离电压的选择分别配制山梨酸、苯甲酸、糖精浓度均为10mg/L的混合标准溶液.在波长为230nm，进样时间为10s，缓冲液为硼砂30mmol/L(pH=7.5)的电泳条件下，改变电压(10～25kV)，并观察分离情况.结果表明，电压在10～20kV范围内各组分的迁移时间随着分离电压增高，迁移时间减小，峰高增大，但分离度有所降低.电压增高，电流增大，产生焦耳热，使谱线变宽.综合考虑，实验选用20kV作为分离电压.2.3 缓冲试剂的选择分别配制浓度均为30mmol/L的硼砂、磷酸体系(磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合液)、Tris的缓冲体系，调节pH到7.5，进行试验.用山梨酸、苯甲酸、糖精浓度均为10mg/L的混合标准溶液试验.电泳条件：波长为230nm，进样时间为10s，电压20kV.结果表明，山梨酸、苯甲酸、糖精在在硼砂体系中分离情况最好，选择硼砂体系作为缓冲体系.2.4 缓冲液浓度选择以硼砂为缓冲液，分别配制20，30，40mmol/L硼砂溶液，pH均调节为7.5，按上述电泳条件进行.结果表明，硼砂浓度为20mmol/L时，山梨酸、苯甲酸、糖精可在12min内得到很好的分离，峰面积、峰高和峰形较30 mmol/L，40 mmol/L好，故选择20 mmol/L硼砂作为运行缓冲溶液.2.5 缓冲液pH的选择以20mmol/L硼砂溶液为缓冲介质，分别调节溶液的pH为7.5，8.0，8.5，9.0.在上述试验确定的条件下，观察上述3种组分的迁移行为，实验结果表明在pH为7.5时山梨酸、苯甲酸、糖精迁移时间差别最大，而且其中糖精的峰高较其他pH值时高，故缓冲液pH选择7.5.2.6 优化条件下的电泳图配制30 mg/L的山梨酸、30 mg/L的苯甲酸和90 mg/L的糖精混合标准溶液，按上述确定的分离条件进行，分离情况，见图1.2.7 工作曲线及检测限在上述优化条件下，对一系列山梨酸、苯甲酸、糖精的标准混合样品进行分析测定，测定其峰面积与浓度的关系，所得山梨酸、苯甲酸、糖精的线性范围相关系数及检测限.结果见表1.1-山梨酸；2-苯甲酸；3-糖精图1 混合标准液电泳图表 1 山梨酸、苯甲酸、糖精的线性范围及检测限被测物线性范围mg/L相关系数γ检测限mg/L山梨酸5.0^500. 99583.0苯甲酸5.0^500.99504.0糖精15^1500.99535.0*检测限按3倍噪声计算2.8 精密度试验配制浓度分别为30 mg/L的山梨酸、苯甲酸和90 mg/L的糖精的标准混合液平行进样5次，测得山梨酸迁移时间的RSD为1.9%，峰面积的RSD为4.5%；苯甲酸的迁移时间的RSD为2.2%，峰面积的RSD为4.2%；糖精的迁移时间的RSD 为3.8%，峰面积的RSD为3.3%.2.9 实际样品的测定取汽水、番茄沙司、蜜饯，经预处理后，按上述确定的电泳条件进行分离测定，结果见表2：表 2 实际样品测定结果(n=3)样品名称组分实际含量 (mg/L)添加量(mg/L)测得量(mg/L)回收率(%)汽水苯甲酸81.4440119.495.0番茄沙司苯甲酸82.2080169.4109山梨酸68.3580149.2101蜜饯苯甲酸107.080183.295.0糖精104.040145.11032.10 结论本法选用20mmol/L(pH=7.5)的硼砂作为缓冲溶液，20kV为采样和分离电压，10s进样，检测波长为230nm的电泳条件下，，山梨酸、苯甲酸、糖精可在12min内得到分离.本法线性关系良好(R>0.995)，迁移时间和峰面积相对标准偏差均小于4.5%，实际样品测定的回收率在95%以上，方法简单、快速，相对于其他分析方法，具有预处理简便，检测成本低等特点.由此可见，毛细管电泳法在食品分析领域有良好的应用前景.参考文献:[1] 陈义. 毛细管电泳技术及应用[M]. 北京：化学工业出版社,2000.[2] 胡慰望，谢笔钧.食品化学[M].北京：科学出版社,1992.[3] 国家技术监督局. 中华人民共和国国家标准[S].1996.[4] 黄伟坤.食品检验与分析[M]. 北京：中国轻工业出版社,1993.。
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析摘要碳酸饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。
碱滴定法测定笨甲酸钠用标准氢氧化钠溶液滴定处理液至初显粉红色为终点，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再运用公式计算出样品中苯甲酸钠含量。
紫外分光光度法测碳酸饮料中的苯甲酸钠在酸性条件下经乙醚提取分离后,测定样品中苯甲酸钠的吸光度, 通过标准曲线的回归方程查得样品中苯甲酸钠的含量。
这两种方法不需要贵重的气相或液相色谱仪, 样品处理简单易于操作, 检验结果与国家标准中高效液相色谱法测定结果基本一致。
可作为饮料产品中苯甲酸钠含量监控的有效方法。
关键词：碳酸饮料苯甲酸钠碱滴定法紫外分光光度计1、前言苯甲酸钠又称安息香酸钠，分子式为C7H5NaO2，性状白色颗粒或结晶性粉末。
无臭或微带安息香气味,味微甜,有收敛性;易溶于水（常温）53.0g/100ml 左右,PH在8左右；是酸性防腐剂,在碱性介质中无杀菌,抑菌作用;其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好.苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进,细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。
苯甲酸钠是用于内服液体药剂的防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。
我国食品防腐剂主要采用苯甲酸钠及山梨酸钾，由于苯甲酸钠价格便宜，在碳酸饮料等饮品中作为防腐剂被广泛使用。
但苯甲酸钠用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌。
为确保食品添加剂的绝对安全使用, 根据GB2760- 1996国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
在中国大多数地区,碳酸饮料生产企业众多,规模较大,对防腐剂苯甲酸钠的添加控制水平较高,然而也有可能会发生防腐剂苯甲酸钠超标的情况。
高效毛细管电泳法同时测定药品中苯甲酸和山梨酸钾
硝酸咪康唑乳膏 : 准确称取 0. 3540 g 硝酸咪 康唑乳膏 , 加入少量重蒸乙醇溶解 , 转移到 50 mL 容量瓶中 , 加入 2. 50 mL , 1000 mgΠL 焦性没食子酸 溶液 , 然后用 20 mmolΠL 硼砂溶液定容 。用滤膜过 滤后备用 。 2 结果与讨论 2. 1 检测波长与内标物的选择
图 1 苯甲酸和山梨酸钾溶液紫外吸收光谱图 Fig. 1 The ultraviolet2visible absorption spectra of benzoic
acid and potassium sorbate 1 - 苯甲酸 ; 2 - 山梨酸钾
在 20 mmolΠL 的硼砂 (pH 9. 2) 缓冲溶液中 , 4 种不同的内标物质都能够出峰 , 但是焦性没食子 酸的迁移时间和苯甲酸及山梨酸钾的迁移时间较
4
漂移 , 考虑迁移时间以及基线的稳定等因素 , 选 择 25 ℃作为分离温度 。 2. 7 线性范围 、检出限及精密度
分别配制 1 、10 、100 、200 、400 mgΠL 的苯甲酸 和山梨酸钾的混合溶液 (内含 50 mgΠL 的焦性没食 子酸) , 在上述选定条件下进行电泳分析 。以苯甲 酸的相对峰面积 y1 和山梨酸钾的相对峰面积 y2 (即被测物的峰面积与内标物的峰面积之比) 分别 对它们的质量浓度 ρ( mgΠL) 进行线性回归分析 。 实验发现 , 苯甲酸和山梨酸钾在 1～400 mgΠL 的范 围内具有良好的线性关系 , 线性回归方程分别为 : y1 = 0103167ρ + 0103713 , R1 = 019999 ; y2 = 0103436ρ+ 0101094 , R2 = 019999 。以噪音的 3 倍 (SΠN = 3) 推算得苯甲酸和山梨酸钾的检出限均为 0115 mgΠL 。在上述最佳的条件下 , 取 10 mgΠL 的苯 甲酸和山梨酸钾的混合液 (含有 50 mgΠL 的焦性没 食子酸) 连续进样 7 次 , 迁移时间和峰面积的相对 标准偏差 (RSD) 如表 1 。
毛细管电泳法分离检测饮料中的防腐剂
毛细管电泳法分离检测饮料中的防腐剂王钰;杨思文;代语林;邓宁;王燕;何建波;朱燕舞【摘要】采用高效毛细管电泳法,同时在线分离检测对羟基苯甲酸甲酯、山梨酸钾和苯甲酸3种防腐剂.考察了运行缓冲液的浓度、pH值、分离电压、进样时间等因素对电泳分离的影响.在检测波长为230nm时,获得了3种防腐剂分离检测的最优化实验条件为:20mmol/L pH 9.2的硼砂缓冲溶液,分离电压为22kV,进样时间15s.在最优化实验条件下,3种防腐剂检测的线性相关系数均大于0.98,检出限为1.0×10-2g/kg.利用此方法检测了市售3种饮料中所含防腐剂的种类和含量,各种防腐剂的回收率在88％～102％之间.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2014(033)004【总页数】5页(P124-128)【关键词】毛细管电泳;防腐剂;分离;检测【作者】王钰;杨思文;代语林;邓宁;王燕;何建波;朱燕舞【作者单位】合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】O657.8食品是人类生存的基本物质保障，现代化的食品生产要求食品能够方便贮存和运输，防腐剂既能使食品保存期延长，也能防止食品腐败变质，因此被广泛应用于食品生产中。
但是食品防腐剂的过量使用会对人体健康造成较大的危害，伤害人体正常机能，降低人体免疫力。
我国明确规定了防腐剂使用标准，但仍然有一些商家没有按照标准合理使用防腐剂。
2007年国家质检总局对北京等13个省、直辖市96家企业生产的117种产品进行抽查，抽查中发现部分碳酸饮料中防腐剂的含量超标[1]。
雪碧中苯甲酸钠的测定
• ① 针头滤器过滤试样溶液（注射液可不必过滤），用试样溶 液清洗进样注射器，排除气泡后抽取适量。
• ② 用定量环定容进样时，进样量应不小于定量环体积的2倍 （5～10倍准确性更佳）。
• ③ 将进样阀手柄转动至Load位置，将进样注射器针完全插入 进样阀入口中，平稳地注入试样溶液，除另有规定外，让进样 注射器留在进样阀上，将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系 统将自动运行，采集数据并记录图谱。
FL2200型高效液相色谱仪操作步骤
• ⒈开机前准备
• ⑴开机前应根据待测检测样品的检测方法准备所需的流动 相，流动相必须使用0.45um滤膜过滤，并用超声波清洗脱 气10~15分钟。
• ⑵配置样品和标准溶液，并用~ 合适的0.45um滤膜过滤。
• ⑶更换合适的色谱柱（注意色谱柱进出口位置应与流动相 流向一致，不要装反）
序号 保留时间 名称 塔板数
浓度（mg/ml) 校正因子 峰面积 峰标志 峰分离度 理论
────────────────────────────────────────────────── 1 4.967 苯甲酸钠 0.04 7.78945e-007 51352 LMV 0.61 4792
──────────────────────────────────────────────────
• ④ 让进样阀手柄保持在Inject位置，到下次进样前1～2min切 换回Load位置，将注射器从进样阀中拔出
④
先用水再用试样溶液清洗进样注射器后，按以上程序继
续进样，直至完成。
七、清洗进样阀
① 用注射器吸10ml超纯水，将注射针导入口冲洗头 连接到注射器出口上（不要针），并将它们一起接到 进样口上；
雪碧中苯甲酸钠的测定
雪碧中苯甲酸钠的测定在国标中规定碳酸饮料中苯甲酸钠的使用限量为 0.2g/kg苯甲酸钠的危害：苯甲酸钠是苯甲酸的钠盐，其作用原理是干扰微生物细胞膜的通透性、阻碍氨基酸的吸附、降低酶的活性。
有报导称，广东一个13岁少年因长期饮用含苯甲酸钠防腐剂的饮料当水喝，导致大脑严重萎缩。
这是因为，苯甲酸钠与人体内的胃酸会发生反应，生成苯甲酸。
苯甲酸有一定的毒性，长期饮用会引起人慢性苯中毒。
慢性苯中毒的症状主要表现为神经衰弱，比如头痛、头晕、记忆力减退、失眠、乏力等；同时，病人还会出现白细胞减少，严重的还会造成再生障碍性贫血。
苯甲酸钠（分析纯）仪器：T6新世纪紫外-可见分光光度计、试剂：苯甲酸钠一、紫外分光度法测苯甲酸钠紫外可见分光光度计实验原理苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
配制苯甲酸钠标准液称取0.2500g苯甲酸钠，加蒸馏水溶解，定容250ml(此溶液为1000ug/ml)，在取上述溶液10ml定容到100容量瓶（此溶液为100ug/ml）测定方法：测定100ug/ml苯甲酸钠溶液的A值，根据比值计算出，使标准曲线的吸光度落在0.2-08之间.进试验得：分别移取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00，100ug/ml苯甲酸钠溶液，定容到50ml的容量瓶中.移取试样试样1ml,定容到50ml中，待测。
将y1=0.281和y2=0.282代入y = 0.0599x + 0.0016求得X1=4.66,X2=4.68,平均X=4.674.67*50/1.00=233.5ug/mlT6新世纪紫外-可见分光度计在温度为11度时，测得苯甲酸钠的含量为233.5ug/ml。
二、高效液相色谱实验原理样品超声脱气后，经0.45μm滤膜过滤后进样高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，用紫外检测器在特定波长（λmax=230nm）下测定被测组分的吸光度，根据保留时间和峰面积与标准比较定性和定量。
实验8 毛细管电泳仪分离测定苯甲酸、山梨酸
正因子分别为：1.000、0.262、0.224，苯甲酸通过归一化公式可以计算出：
未知样中苯甲酸的百分含量：
0.262 22 .2364
100 % 8.40 %
1.000 59 .4683 0.262 22 .2364 0.224 18 .2952
未知样中山梨酸的百分含量：
测器上都能产生信号的样品，可用归一化法定量，其中组分 i 的质量分数按如下公式计算：
Wi
fi Ai
fi Ai
100%
式中 Ai 为组分 i 的峰面积，fi 为组分 i 的质量（或摩尔、体积）校正因子。
优点：简便、准确，特别是在进样量不容易控制时，进样量以及流速、柱温等测定条件对定量结果影响很小。
过.45μm 的滤膜过滤后，转移至进样瓶中备用。 称量 0.1g 的苯甲酸样品，用超纯水加热溶解于 100ml 的容量瓶中，再从中移取 5mL 溶液至 50ml 容量
管中定容。 称量 0.1g 的山梨酸样品，用超纯水加热溶解于 100ml 的容量瓶中，再从中移取 5mL 溶液至 50ml 容量
管中定容。
• 粒子的运动速度：由于同时存在着泳流和渗流，粒子在毛细管电介质中的运动速度应当是这两种速度的矢量 和，其迁移速率是电泳和电渗力的函数：
正离子：运动方向和电渗一致，应当最先流出；中性离子：泳流速度为 0，将随电渗而行； 负离子：因其运动方向和电渗相反，在电渗速度大于电泳速度时，它将在中性离子之后流出；
3、归一化定量的优缺点是什么？
答：优点：简便、准确，特别是在进样量不容易准确控制时，进样两的变化对定量结果的影响很小。其他操作条 件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。
缺点：校正因子测定很麻烦。
毛细管电泳法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量(1)
实验毛细管电泳法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量一、实验目的1、掌握毛细管电泳法的基本原理2、熟悉Beckman P/ACE™ MDQ 毛细管电泳仪以及其32Karat工作站的使用方法。
3、掌握毛细管电泳法测定苯甲酸和山梨酸含量的方法。
二、实验原理苯甲酸和山梨酸是广泛使用在饮料、调味品中的防腐剂，由于此类防腐剂带有一定的负效应，甚至还有微量毒素，使用不当会给人体带来危害，应严格限制其在食品中的添加量，所以其检测工作也变得极其重要。
毛细管电泳（CE）技术是以高电场为驱动力，在细内径毛细管内荷电粒子按其淌度或（和）分配系数的不同而进行分离的一种新技术。
毛细管电泳具有高效快速、进样体积小、溶剂消耗少和样品预处理简单等优点，现已广泛地用于分离分析领域。
传统的食品添加剂的测定一般采用气相色谱（GC）和高效液相色谱（HPLC）方法，当采用GC与HPLC分析时一般都必须对样品进行复杂的前处理。
而CE与之相比，实验成本低，分析时间短，适用范围宽，可同时分离和检测多个组分。
本实验使用的毛细管区带电泳法（CZE），在毛细管中仅填充缓冲液，基于溶质组分的迁移时间或淌度的不同而分离，除了溶质组分本身的结构特点和缓冲溶液组成，不存在其他因素如聚合物网络、pH梯度的影响。
实验采用硼砂为缓冲液，待测饮料只需用缓冲液稀释，在特定的条件下，以峰高为定量依据，测定3种待测饮料中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂仪器：Beckman P/ACE™ MDQ 毛细管电泳仪试剂：硼砂缓冲溶液（45mmol/L）、NaOH溶液（0.1mol/L）、苯甲酸钠和山梨酸钠的混标1mg/ml。
市售3种果汁饮料四、实验步骤1、制作标准曲线分别吸取上述苯甲酸钠储备液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml于50ml容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，配置成折合苯甲酸、山梨酸浓度为10、20、40、60、80μg/ml的标准液，在上述实验条件下，测各苯甲酸的峰值，和山梨酸的峰值，绘制各标准曲线。
雪碧中苯甲酸钠的测定.
49 48 47 46 45 44 43 42 41 40 min
碧 (1) 3.669' 雪
0.9
1.8
2.7
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3.6
4.5
5.4
6.3
7.2
8.1
9
实验结果评估
项目 苯甲酸钠 mg/ml 平均值 相对极差 /% 1 2 项目 苯甲酸钠 mg/ml 平均值 相对极差/% 1 0.1761 0.1736 2.82 2 0.1712
雪碧中苯甲酸钠的测定.
双号5组
提
纲
• 认识高效液相色谱仪仪器 • 高效液相色谱仪的工作原理 • 液相色谱仪的具体操作步骤以及注意 事项 • 实 验
高效液相色谱仪
高效液相色谱仪的相关器件
高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱用高压输液泵将具 有不同极性的单一溶剂或不同比例的 混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有 固定相的色谱柱，经进样阀注入待测 样品，有流动相带入柱内，在柱内各 成分被分离后，依次进入检测器进行 检测，从而实现对试样的分析。
FL2200型高效液相色谱仪操作步骤
• ⒈开机前准备 • ⑴开机前应根据待测检测样品的检测方法准备所需的流动 相，流动相必须使用0.45um滤膜过滤，并用超声波清洗脱 气10~15分钟。 ~ • ⑵配置样品和标准溶液，并用合适的0.45um滤膜过滤。 • ⑶更换合适的色谱柱（注意色谱柱进出口位置应与流动相 流向一致，不要装反） • ⑷检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接 正常。
五、平衡系统
• • ① 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。 ② 换检验方法规定的流动相冲洗系统，观察基线和压力变化。如果冲洗至基线和压 力平稳时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。
毛细管电泳
毛细管电泳分离混合样品
摘要：区带电泳
1、试药与仪器：苯甲酸钠、吡啶、苯酚及三者的混合样品
2、方法和结果：
2.1原理
在电场作用下，毛细管柱中出现电泳现象和电渗流现象。
毛细管壁带负电，靠外层带正电，加高压电场下形成向负极移动的电渗流，电泳是正、负电粒子自身的差速迁移，因此：
正离子：本身迁移速度＋电渗流速度，最快，在负极最先流出。
中性离子：本身无电泳现象，受电渗流影响，在正离子后流出。
阴离子：电渗流速度－本身迁移速度，最慢，在负极最后流出。
在PH=5.8时，吡啶为正离子，苯酚为中性，苯甲酸钠为负离子。
本实验主要看分离电压对迁移时间、分离度的影响。
采用PH=5.8的缓冲盐，估计出峰顺序为吡啶、苯酚、苯甲酸钠。
2.2方法：254nm下分离混合样品
先采用20KV的电压分离，迁移时间太长。
改用30KV的电压分离，分离效果较好，记录出峰时间t R分别为吡啶
7.218min，苯酚10.237min，苯甲酸钠21.597min。
3、讨论：
毛细管电泳时，分离电压小会使分析时间长，进样前需用水冲洗后用缓冲液冲洗，冲洗2~3min，使毛细管柱充满缓冲溶液；设定方法时，将工作站INI 下进行初始化。
毛细管区带电泳法同时测定饮料中16种食品添加剂
毛细管区带电泳法同时测定饮料中16种食品添加剂龙巍然;岑怡红;王兴益;白玉;刘虎威【摘要】建立了毛细管区带电泳法测定饮料中酸性红92、专利蓝V、荧光素二钠、酸性红1、靛蓝胭脂红、亮黑、丽春红6R、日落黄、苋菜红、柠檬黄等10种人工合成色素和苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯等6种防腐剂的分析方法.考察了缓冲溶液种类、浓度、pH值及运行电压、温度等对分离的影响,确定最佳电泳条件为:未涂层弹性石英毛细管柱(46 cm×50 μm),缓冲溶液为70 mmol/L硼酸(pH=9.5)(含体积分数为4％的乙腈),检测波长220 nm,电泳电压30 kV,进样时间5s,电泳温度25℃.该法用于测定市售饮料样品得到满意结果:在1 ～ 250 mg/L范围内线性关系良好,相关系数不小于0.993 8,回收率在95.8％与108.7％之间.该法简便、准确,能够满足食品添加剂的常规检测要求.%A capillary zone electrophoretic (CZE) method for the separation of ten synthetic colorants such as acid red 92, patent blue V, uranine, acid red 1, indigo carmine, black BN, ponceau 6R, quinoline, amaranth, lemon yellow, and six preservatives including benzoic acid, sorbic acid, methyl paraben, ethyl paraben, propyl paraben, butyl paraben in beverages was developed. The effects of separation voltage, capillary temperature, pH and concentration of running buffer on the separation were investigated. A 46 cm x 50μm uncoated fused silica capillary wasused with 70 mmol/L boric acid (pH 9. 5) containing 4% (v/v) acetonitrileas background electrolyte solution. The detection wavelength was set at 220 nm, and the run voltage was 30 kV. The injection time was 5 s at 500 mPa and the temperature was 25℃. The linear relationship between themass concentration and peak area for each of these analytes was obtained in the concentration range of 1 -250 mg/L, with a correlation coefficient not less than 0. 993 8. The recoveries were between 95. 8% and 108. 7%. The method has been applied to the determination of food additives in real samples. The results showed that the method is simple, accurate, and suitable for the simultaneous determination of the sixteen food additives in beverage.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2012(030)007【总页数】5页(P747-751)【关键词】毛细管区带电泳;食品添加剂;防腐剂;色素;饮料【作者】龙巍然;岑怡红;王兴益;白玉;刘虎威【作者单位】北京大学化学与分子工程学院,北京100871;兴义民族师范学院化学与生物系,贵州兴义562400;兴义民族师范学院化学与生物系,贵州兴义562400;兴义民族师范学院化学与生物系,贵州兴义562400;北京大学化学与分子工程学院,北京100871;北京大学化学与分子工程学院,北京100871【正文语种】中文【中图分类】O658Abstract:A capillary zone electrophoretic(CZE)method for the separation of ten synthetic colorants such as acid red 92，patentblue V，uranine，acid red 1，indigo carmine，black BN，ponceau 6R，quinoline，amaranth，lemon yellow，and six preservatives including benzoic acid，sorbic acid，methyl paraben，ethylparaben，propyl paraben，butyl paraben in beverages was developed.The effects ofseparation voltage，capillary temperature，pH and concentration of running buffer on the separation were investigated.A 46 cm×50μm uncoated fused silica capillary was used with 70 mmol/L boric acid(pH 9.5) containing 4%(v/v)acetonitrile as background electrolyte solution.The detection wavelength was set at 220 nm，and the run voltage was 30 kV.The injection time was 5 s at500 mPa and the temperature was 25℃.The linear relationship between the mass concentration and peak area for each of these analytes was obtained in the concentration range of1－250 mg/L，with a correlation coefficient not less than 0.993 8.The recoveries were between 95.8%and 108.7%.The method has been applied to the determination of food additives in realsamples.The results showed that the method is simple，accurate，and suitable for the simultaneous determination of the sixteen food additives in beverage. Key words:capillary zone electrophoresis(CZE);foodadditives;preservatives;pigments;beverage毛细管电泳(CE)技术是20世纪80年代发展起来的一种液相色谱分离技术，因其具有高效、灵敏、快速、低耗的特点，受到了广泛的关注。
毛细管电泳法分离检测饮料中的防腐剂
毛细管电泳法分离检测饮料中的防腐剂王钰;杨思文;代语林;邓宁;王燕;何建波;朱燕舞【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2014(033)004【摘要】采用高效毛细管电泳法,同时在线分离检测对羟基苯甲酸甲酯、山梨酸钾和苯甲酸3种防腐剂.考察了运行缓冲液的浓度、pH值、分离电压、进样时间等因素对电泳分离的影响.在检测波长为230nm时,获得了3种防腐剂分离检测的最优化实验条件为:20mmol/L pH 9.2的硼砂缓冲溶液,分离电压为22kV,进样时间15s.在最优化实验条件下,3种防腐剂检测的线性相关系数均大于0.98,检出限为1.0×10-2g/kg.利用此方法检测了市售3种饮料中所含防腐剂的种类和含量,各种防腐剂的回收率在88％～102％之间.【总页数】5页(P124-128)【作者】王钰;杨思文;代语林;邓宁;王燕;何建波;朱燕舞【作者单位】合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009;合肥工业大学化学工程学院,安徽合肥230009【正文语种】中文【中图分类】O657.8【相关文献】1.毛细管电泳法同时分离检测饮料中的六种食品添加剂 [J], 代语林;董婵婵;邓宁;何建波;王燕;朱燕舞2.毛细管电泳法检测化妆品中对羟基苯甲酸酯类防腐剂 [J], 谷学新;田莉;叶能胜;纪晓慧3.毛细管电泳法检测饮料中的防腐剂 [J], 陈林情;杨昆;苏安梅;钟青梅;王益林4.高效毛细管电泳法同时分离测定化妆品中7种防腐剂 [J], 张帅; 高立娣; 梁辉; 秦世丽; 蒋春红; 段圣村; 徐蕾; 林肖同; 王媛媛5.高效毛细管电泳法同时检测饲料中七种防腐剂 [J], 曹小妹;薛江超;高文惠;闫路娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
聚合离子液体为添加剂的毛细管电泳法用于快速高效分离饮料中7种有机酸
聚合离子液体为添加剂的毛细管电泳法用于快速高效分离饮料中7种有机酸韩海峰;王庆;刘霞;蒋生祥【摘要】用一种聚合离子液体(聚1.乙烯基-3-丁基咪唑溴盐)为添加剂,以毛细管电泳法(CE)快速直接分离饮料中7种有机酸(丙二酸、酒石酸、抗坏血酸、反丁烯二酸、苯甲酸、山梨酸和柠檬酸).详细考察了几种影响分离效果的条件,最佳背景电解质条件是125 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH 6.5)添加0.0l g/L聚合离子液体.7种分析物在4 min内能够快速高效分离(105000 ～ 636 000塔板/m).迁移时间的标准偏差(n=3)都不大于0.021 3 min.7种分析物的检出限(以信噪比为3计)在0.001与0.05g/L之间.这种方法被应用于一种美年达葡萄汁饮料中的有机酸检测.柠檬酸钠、苯甲酸和山梨酸被检测出,含量分别是2.64、0.10和0.08 g/L,其加标回收率分别为100.3％100.7％和131.7％.该方法简单、快速、低廉,可以用作食品中有机酸添加剂的检测.%A new capillary electrophoretic method for the rapid and direct separation of seven organic acids in beverages was developed, with poly( l-vinyl-3-butylimidazolium bromide) as the reliable background electrolyte modifier to reverse the direction of anode electroosmotic flow (EOF) severely. Several factors that affected the separation efficiency were investigated in detail. The optimal running buffer consisted of 125 mrnol/L sodium dihydrogen phosphate (pH6. 5) and 0.01 g/L poly(l-vinyl-3-butylimidazolium bromide). Highly efficient separation ( 105 000 to 636 000 plates/m) was achieved within 4 min and standard deviations of the migration times (n =3) were lower than 0. 0213 min under optimal conditions. The limits of detection (S/JV = 3) rangedfrom 0. 001 to 0. 05 g/L. The present method was applied to determine a beverage sample (Mirinda) for sodium citrate, benzoic acid and sorbic acid with concentration of 2. 64, 0. 10 and 0.08 g/L, respectively. The recoveries of the three analytes in the sample were 100.3%, 100.7% and 131.7%, respectively. The method is simple, rapid, inexpensive, and can be applied to determine organic acids as additives in beverages.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2012(030)005【总页数】5页(P538-542)【关键词】毛细管电泳;有机酸;饮料;聚合离子液体;阳极电渗流【作者】韩海峰;王庆;刘霞;蒋生祥【作者单位】中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃兰州 730000;中国科学院研究生院,北京 100049;中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃兰州 730000;中国科学院研究生院,北京 100049;中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃兰州 730000;中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃兰州 730000【正文语种】中文【中图分类】O658在食品生产过程中，多种添加剂被加入食品中以保证食品质量［1］。
毛细管电泳仪分离测定雪碧中苯甲酸钠(精)
毛细管电泳仪分离测定雪碧中苯甲酸钠实验时间 2015-04-03前言实验通过毛细管电泳来分离测定雪碧中苯甲酸钠, 用外标法测定含量。
毛细管电泳仪分离原理是基于电泳与电渗两者的共同作用。
关键词毛细管电泳仪电泳电渗外标法实验原理电泳指带电粒子在电场作用下作定向运动的现象。
电泳有自由电泳和区带电泳两类, 区带电泳是将样品加于载体上,并加一个电场。
在电场作用下,得到良好的分离。
因此, 电泳又称电色谱。
本实验通过使用毛细管电泳法对饮料中苯甲酸钠含量进行定性定量测量,得出了饮料中苯甲酸钠的含量。
毛细管电泳的特色在于其电泳过程在散热效率极高的毛细管内进行,故能够引入高的电场强度,从而全面改善分离质量。
细柱子的最大优点有两个,一是减小电流,因此减少自热。
二是增大散热面积(侧面积与截面积之比,加快散热。
但也带来了进样和检测等技术方面的困难。
电泳与电渗:电泳是在电场作用下带电粒子在缓冲溶液中的定向移动。
电渗是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。
由于毛细管材料通常为熔融硅胶,其中的硅醇基团,是构成氢键吸附并使毛细管内电介质产生电渗流的重要原因。
在常用缓冲液 pH 值下,毛细管壁带负电,于是在贴近管壁的液体表面形成了一个和管壁电荷异号的偶电层。
在毛细管电泳中,电渗是指高电场作用下,偶电层中水和阳离子或质子引起流体朝负极方向运动。
电渗是毛细管电泳中最重要和最有趣的性质之一。
既然同时存在着泳流和渗流,故粒子在毛细管电介质中的运动速度应当是这两种速度的矢量和,其迁移速率是电泳和电渗力的函数:正离子的运动方向和电渗一致,故它应当最先流出,中性离子的泳流速度为“零”,将随电渗而行。
负离子因其运动方向和电渗相反,在电渗速度大于电泳速度时,它将在中性离子之后流出。
电渗流的值是缓冲液 pH 值的函数,一般随该值的增加而增大。
另外,电渗流还和缓冲液的浓度及其添加剂,管子表面的修饰程度有关。
检测电泳毛细管的直径极小,产生的溶质谱带体积也极小。
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毛细管电泳仪分离测定雪碧中苯甲酸钠
实验时间 2015-04-03
前言
实验通过毛细管电泳来分离测定雪碧中苯甲酸钠，用外标法测定含量。
毛细管电泳仪分离原理是基于电泳与电渗两者的共同作用。
关键词
毛细管电泳仪电泳电渗外标法
实验原理
电泳指带电粒子在电场作用下作定向运动的现象。
电泳有自由电泳和区带电泳两类，区带电泳是将样品加于载体上，并加一个电场。
在电场作用下，得到良好的分离。
因此，电泳又称电色谱。
本实验通过使用毛细管电泳法对饮料中苯甲酸钠含量进行定性定量测量，得出了饮料中苯甲酸钠的含量。
毛细管电泳的特色在于其电泳过程在散热效率极高的毛细管内进行，故能够引入高的电场强度，从而全面改善分离质量。
细柱子的最大优点有两个，一是减小电流，因此减少自热。
二是增大散热面积（侧面积与截面积之比），加快散热。
但也带来了进样和检测等技术方面的困难。
电泳与电渗：
电泳是在电场作用下带电粒子在缓冲溶液中的定向移动。
电渗是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。
由于毛细管材料通常为熔融硅胶，其中的硅醇基团，是构成氢键吸附并使毛细管内电介质产生电渗流的重要原因。
在常用缓冲液pH值下，毛细管壁带负电，于是在贴近管壁的液体表面形成了一个和管壁电荷异号的偶电层。
在毛细管电泳中，电渗是指高电场作用下，偶电层中水和阳离子或质子引起流体朝负极方向运动。
电渗是毛细管电泳中最重要和最有趣的性质之一。
既然同时存在着泳流和渗流，故粒子在毛细管电介质中的运动速度应当是这两种速度的矢量和，其迁移速率是电泳和电渗力的函数：正离子的运动方向和电渗一致，故它应当最先流出，中性离子的泳流速度为“零”，将随电渗而行。
负离子因其运动方向和电渗相反，在电渗速度大于电泳速度时，它将在中性离子之后流出。
电渗流的值是缓冲液pH值的函数，一般随该值的增加而增大。
另外，电渗流还和缓冲液的浓度及其添加剂，管子表面的修饰程度有关。
检测电泳毛细管的直径极小，产生的溶质谱带体积也极小。
通常采用的检测方法是电泳的柱上检测。
此时峰宽对迁移时间将有一定的依赖性。
移动较快的组分通过检测窗所需的时间较短，反之则较长。
毛细管电泳的紫外检测属柱上检测，检测点靠近管子的末端。
毛细管的外壁通常有一层几微米的聚酰亚胺涂层。
使用时需要将一小段管子（小于1cm）的聚酰亚胺涂层去掉，以
形成观察池。
苯甲酸钠是苯甲酸的钠盐，无味或略带安息香气味，在空气中十分稳定，易溶于水，由于比苯甲酸更易溶于水，比苯甲酸更常用与工业生产。
但有研究显示，苯甲酸类具有叠加毒性作用，普遍已改用山梨酸盐作为防腐剂。
仪器与试剂
实验步骤
1.样品制备
将雪碧、芬达倒入烧杯后放在超声波仪中超声脱气，去除饮料中溶解的空气以及大量二氧化碳气体。
脱气后的雪碧、芬达溶液通过0.45μm的滤膜过滤后，转移至进样瓶中备用。
母液浓度为1.098mg/mL,再分别从母液中移取2mL、4mL、6mL、8mL、10mL溶液至25mL容量瓶中定容。
2.仪器的前期准备
打开计算机，等计算机启动完毕后，打开毛细管电泳仪电源开关。
通讯完毕后，分别在进样盘中放入相应的溶液：1、NaOH溶液；2、纯水；3、纯水；4、5、6、缓冲液（硼酸钠）；
7、空；8、废液。
11、12、13、14、15为苯甲酸钠的标准溶液；17、18为待测的雪碧、芬达。
CE平衡步骤：
第一步，纯水冲洗5分钟。
点击相应图标，设定inlet为2号位置，outlet为8号位置，冲洗（flush）300秒。
第二步，缓冲液冲洗5分钟。
操作同上，设定inlet为6号位置，outlet为8号位置，冲洗300秒。
3.设定参数并测量
设置好参数，获得标准溶液和雪碧中苯甲酸钠的保留时间及峰面积。
4.关机
用纯水冲毛细管约半小时，观察基线平稳后，可在工作站上关闭电泳仪及检测器，然后关闭工作站，再依次关闭仪器电源及计算机电源。
数据处理
1.实验数据
实验中得到的原始数据如表2所示：
表2 实验原始数据
2.将表2中的数据代入Origin8.0
绘制标准曲线，得到图1
峰面积/m A U *s
约化浓度/mg/mL
图1 苯甲酸钠标准曲线
注：图中的浓度为约化浓度，其单位长度的真实浓度为： c =
1.098mg mL
×
225
=0.08784mg/mL
线性拟合曲线：y=34.09863x-9.54746 3.计算雪碧中苯甲酸钠浓度
C=(182.24857+9.54746)÷34.09863×0.08784mg/mL =0.49408mg/mL
实验结果及讨论
1.实验结果
标准曲线为：y=34.09863x-9.54746
雪碧中苯甲酸钠浓度为C=0.49408mg/mL
2.讨论
实验中可能影响毛细管电泳的因素：
毛细管电泳是基于电泳和电渗对离子的共同作用，因此影响电泳和电渗的因素都有可能影响到实验。
○1分离电压：
高电压是实现CE快速、高效的前提，电压升高，样品的迁移加大，分析时间缩短，但毛细管中焦耳热增大，基线稳定性降低，灵敏度降低；分离电压越低，分离效果越好，分析时间延长，峰形变宽，导致分离效率降低。
○2温度：
控制温度可以调控电渗流的大小。
温度升高，缓冲液粘度降低，管壁硅轻基解离能力增强，电渗速度变大，分析时间减短，分析效率提高。
但温度过高，会引起毛细管柱内径向温差增大，焦耳热效应增强，柱效降低，分离效率也会降低。
思考题
（1）毛细管电泳分离原理：
粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。
正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳速度为“零”，故其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向与电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。
（2）色谱的定性依据：在相同实验条件下，同种离子或粒子的保留时间是相同的；还可以后接检测器。
（3）外标法属于比较法。
优点：方法简便，不需用校正因子，不论样品中其他组分是否出峰，均可对待测组分定量；缺点：准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。