工业微生物菌种
发酵工程2发酵工业菌种(精)
增殖、纯化和性能测定。
1、样品的采集 采样原则： 材料来源越广泛，越有可能获得新的菌种。在一 些极端环境（高温、高压、高盐等），可找到能
适应苛刻条件的微生物类群。
了解目标产物的性质和可能产目标产物的微生物
种类及其生理特征，可提高效率，事半功倍。
2、样品的预处理 目的：提高菌种分离效率。
物理方法：热处理（用于减少样品中的细菌数）；
1、退化的表现
菌落和细胞形态的改变：如苏云金芽孢杆菌的芽
孢和伴孢晶体变得小而少； 生长速度缓慢，产孢子越来越少：如细黄链霉菌 的菌苔变薄、生长缓慢，不再产生典型而丰富的 橘红色分生孢子层；
代谢产物生产能力下降：如藤仓赤霉产赤霉素
能力下降；
抗不良环境条件（抗噬菌体、抗低温等）能力
的减弱。
4、菌种分离
平板划线分离法
稀释分离法 涂布分离法
5、菌种的筛选 对菌株的筛选必须要有一个好的方法（最 简单的方法）来加以鉴定，如颜色的变化、抑
菌圈、透明圈等。
四、发酵工业菌种鉴定
1、经典的分类鉴定方法
形态学特征： 生理生化特性： 血清学试验与噬菌体分型： 氨基酸顺序和蛋白质分析：
2、现代分类鉴定方法
2
思考题
发酵工业菌种
1、常见的工业微生物包括哪些类群？
2、作为工业生产菌株应具备哪些基本特性？ 3 、了解发酵工业中的细菌、酵母菌、霉菌、放 线菌及其生产的产品。 4、掌握菌种分离筛选的基本过程。
5、诱变育种及其原理。
6、常用的化学诱变剂。
7、菌种退化、原因与防治。
8、菌种保藏的方法。
广义的微生物：
现象。有些霉菌如用其分生孢子传代易于衰退，
而改用其子囊孢子接种，则能避免退化。 5）采用有效的菌种保藏方法
第三章 工业发酵菌种
第三章发酵工业微生物菌种微生物发酵工业是利用微生物的生长和代谢活动生产各种有用物质的现代工业，它是以培养微生物进行发酵为主。
而在这个过程中，优良的菌种是一个现代化的发酵工业必不可少的，最为重要的环节。
其他如先进的生产工艺和先进的设备，则是为了更充分发挥优良菌种的性能而设计的。
第一节工业微生物菌种的分离和选育第二节工业微生物菌种的改良第三节发酵工业中菌种的退化第四节工业微生物菌种的保藏第五节工业微生物菌种的扩大培养第一节工业微生物菌种的分离和选育一般来说，从自然界直接分离到的菌种，不能立即适应实际的生产需要，只有通过选育，才能提高代谢产物的产量、改进产品质量直至简化工艺。
在微生物发酵工业中生产菌种的选育方法有：•微生物菌种的分离和选育•菌种的改良第一节工业微生物菌种的分离和选育一、微生物菌种的选育二、微生物常规育种三、根据代谢的调节机理选择高产突变菌株一、微生物菌种的选育从自然界分离新菌种一般包括以下几个步骤：1、采样2、增殖培养3、纯种分离4、性能测定1、采样采样地点的确定要根据筛选的目的、微生物的分布概况及菌种的主要特征与外界环境关系等，进行综合、具体地分析来决定。
如果不了解某种生产菌的具体来源，一般可以从土壤中分离。
①、确定选好地点取离地面5——15cm处的土壤几十克，盛入预先消毒好的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，记录采样时间、地点、环境情况等，以备查考。
②、尽快分离一般土壤中芽孢杆菌、放线菌和霉菌孢子忍耐不良环境能力较强，不太容易死亡。
但一般应尽快分离。
③、酵母菌或霉菌类微生物采样酵母菌或霉菌类微生物，它们对碳水化合物的需要量比较多，一般又喜欢偏酸环境，所以在普通植物花朵、瓜果种子及腐植质等上面比较多。
2、增殖培养收集到的样品，如含有所需的菌种较多，可直接进行分离。
如果样品含有所需要的菌种很少，就要设法增加该菌种的数量，进行增殖（富集）培养。
富集培养：富集培养就是指利用不同微生物之间的生命活动特点的不同，制定出特定的环境条件，使仅仅适应于这种条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加的微生物的分离方法。
工业微生物菌种
微生物工业对菌种的要求
①培养基原料来源广、廉价 ②培养条件易控制（pH值、温度、渗透压） ③发酵周期短； ④菌株高产 ⑤抗病毒（噬菌体）能力强； ⑥菌株性状稳定，不易变异退化； ⑦菌体本身不能是病原菌；
工业常用的微生物
1、细菌类： 短杆菌：氨基酸发酵（谷氨酸） 枯草芽孢杆菌：淀粉酶（BF7658）、碱性蛋白酶等 地衣芽孢杆菌：耐高温α-淀粉酶) 苏云金芽孢杆菌：BT生物农药 梭状芽孢杆菌：丙酮、丁酸等发酵
5、过滤除菌法：利用过滤方法阻留微生物 以达到灭菌目的的方法
培养基的灭菌方法 1、连续灭菌：培养基在发酵罐外经过一 套灭菌设备连续的加热灭菌，冷却后送 入空消后的发酵罐的灭菌法 2、间歇灭菌：指将配制好的培养基输入 发酵罐内直接通入蒸汽，使培养基和设 备同时灭菌的一种灭菌方式 3、固体培养基灭菌
4、放线菌 5、担子菌 6、藻类
常用菌种保藏方法
方法名称
主要措施
适宜菌种
保藏期
冰箱保藏法 （斜面）
低温
各ห้องสมุดไป่ตู้类
3~6月
液氮超低温保藏 法
超低温
甘油低温封藏法 低温、缺氧
各类 各大类
长期 1年以上
沙土保藏法 冷冻干燥法
干燥、无营养 产孢子微生物
1~10年
干燥、无氧、低 温、有保护剂
各大类
5~15年以上
灭菌与消毒的区别
灭菌：指利用物理或化学的方法杀灭或 去除物料及设备中所有的生命物质（包 括营养细胞、细菌芽孢和孢子）的技术 或工艺过程。
消毒：是利用物理或化学的方法杀死物 料、容器、器具内外及环境中的病源微 生物的技术或工艺过程，一般只能杀死 营养细胞而不能杀死芽孢。
消毒不一定能达到灭菌要求，灭菌则可 达到消毒的目的。
工业微生物
☐第二章工业微生物☐本章知识概要☐工业用微生物菌种要求☐工业用微生物常用菌种☐第一节工业用微生物菌种要求☐微生物菌体发酵☐微生物酶发酵☐微生物代谢产物发酵☐微生物转化发酵☐基因工程药物☐第一节工业用微生物菌种要求☐1、菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物活性活性物质和毒素，保证产品的安全性。
☐2、生长速度快、发酵周期短、表达目的产物产量高。
☐3、菌种纯净、健壮，遗传稳定性强、不宜退化，产品产量、质量稳定。
☐4、能在要求不高，易于控制的条件下（糖浓度、温度、pH、O2、渗透压）生长，对设备要求低。
☐5、抗噬菌体能力强，不易被噬菌体感染。
☐6、对诱变剂敏感，可通过诱变达到提高菌种优良性状的目的。
☐7、能够利用廉价原材料，对原材料成分波动敏感性小。
☐8、目的产物最好分泌到细胞外、以利于产物分离。
☐第二节工业微生物常用菌种☐细菌：分布最广、形状、G、质粒。
1、枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）：芽孢杆菌属G+、周生鞭毛、无荚膜。
淀粉酶和蛋白酶的产生菌。
BF7658－生产淀粉酶，AS1.398生产中性蛋白酶和制造风味独特食品纳豆。
2、大肠杆菌（Escherichia coli）：G－、运动者周身鞭毛、一般无荚膜。
存在表示动物排泄物污染，食品卫生、公共卫生安全指标，发酵生产Asp、Thr、Val，分子生物学、基因工程材料。
3、乳酸菌（lactic acid bacteria）：杆状、球状G+☐表1 产生乳酸的细菌属①乳杆菌属：营养要求严格在无糖和酵母膏培养基上不生长，pH3-4.5能生长，德氏乳杆菌属、保加利亚乳杆菌、巴氏乳杆菌。
②乳链球菌属：卵球形，呈短链或长链状排列，发酵多种糖类，乳制品生产和传统食品工业中。
③肠膜状明串球菌：制糖工业中有害菌，但是在蔗糖溶液中，细胞外常有一层厚的胶质状的，葡聚糖荚膜（代血浆）4、醋酸菌（Acetobacter）:椭圆形，杆状，无芽孢。
5、其他菌种：①产氨短杆菌：氨基酸、核苷酸工业生产中的常用菌种，合成辅酶A的菌种。
最新21工业常用菌种汇总
– 常用啤酒酵母、假丝 酵母、类酵母等，
– 用于酿酒、制造面包 、生产脂肪酶以及可 食用、药用和饲料用 酵母菌体蛋白等。
• 霉菌：
– 在培养基质上形成绒 毛状、网状或絮状菌 丝真菌
– 以无性孢子或有性孢 子繁殖
– 根霉、毛霉、犁头霉、 红曲霉、曲霉、青霉 等，
– 用于生产多种酶制剂、 抗生素、有机酸及甾 体激素等。
• 宏基因组（Metagenome ）分析法
– 筛选功能基因或集群基因组，了解代谢途 径和基因调控机制，构建超级基因工程菌
目前主要研究的是油层、环境污水及火 山口、温泉、高盐等极端环境中的未培 养微生物及代谢基因
• Patrick Lorenz, Jürgen Eck. Metagenomics and industrial applications. Nature Reviews Microbiology 3, 510-516 (June 2005)
21工业常用菌种
第一节 工业生产常用的微生物及要求
一、工业生产常用的微生物
• 可培养微生物 • 未培养微生物
（1）可培养微生物
1. 细菌（bacteria）
2. 酵母菌（yeast）
3. 霉菌（mould）
4. 放线菌（actinomycetes）
5. 担子菌（basidiomycetes） 6. 藻通用类常于（所 多说糖al菇、ga类橡e（胶）物mu质s和hr抗oo癌m药）物微的生开物发，。
二、微生物工业对菌种的要求
① 原料廉价、生产迅速、目的产物产量高。 ② 易于控制培养条件，酶活性高，发酵周期
较短。 ③ 抗杂菌和噬菌体污染的能力强。 ④ 菌种遗传性能稳定，不易变异和退化， ⑤ 菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物
工业微生物菌种3篇
工业微生物菌种第一篇：工业微生物菌种的分类与应用工业微生物菌种是指能够利用化学物质或有机物质转化成特定化合物，以达到一定目的的微生物菌株。
依据其代谢能力和异质化位置，可分为原核菌和真核菌，其中原核菌包括细菌、古细菌；真核菌包括酵母菌、放线菌等。
在工业上，微生物菌种具有广泛的应用，与生活息息相关，主要包括以下几个领域：1. 食品工业：微生物菌种常用于食品生产中，如酵母菌用于发酵生面团糕点，用于制作面包、饮料和乳制品等。
2. 医药工业：微生物菌种还常用于生产药品，如链霉菌可以生产许多抗生素，烟酸噻唑可以生产类固醇药品，还有其他微生物菌株用于生产胰岛素、维生素等。
3. 化工工业：微生物菌株也可以生产某些有机化合物，如酪氨酸或芳香族氨基酸等。
4. 冶金工业：微生物菌株可以生产有色金属和稀土，提高金属矿物的回收率和分离纯度。
5. 废水处理：微生物菌株可以用于废水处理，将污染物转化为无害物质。
总之，微生物菌株在工业生产中发挥了极为重要的作用，能够提高工业生产效率，减少资源浪费，发挥环保作用，同时也推动了生态文明建设。
第二篇：工业微生物菌种的筛选与改良不同的工业微生物菌种在特定条件下具有不同的代谢能力和异质化位置，因此为了实现特定的工业目的，需要筛选合适的微生物菌株进行改良。
常用的微生物菌株改良方法包括自然选择、基因重组、适应性进化等。
1. 自然选择：生境中的微生物菌株不断进行自然选择和适应性进化，这种方式可以得到一定程度的微生物菌株改良，但改良效果较为有限。
2. 基因重组：通过DNA重组技术，将外源基因植入到微生物菌株中，使其获得特定的代谢能力。
这种方式可针对单一化合物进行改良，但同时也会增加微生物菌株的复杂度和不稳定性。
3. 适应性进化：通过连续的培养和筛选，逐步培育出筛选出符合特定目的的微生物菌株，此方式是较为广泛和有效的微生物菌株改良方法。
总之，针对不同的工业目的，需要选取不同的微生物菌株进行改良，以得到更加适应工业要求的工业微生物菌株，在最大限度的发挥微生物菌株的作用的同时，也提高了工业的生产效率和产品质量。
工业微生物常用菌种
制性因子的环境下顽强生存的微生物，一般统称为极端环
境微生物。
高温环境 极寒环境 高压环境 强酸碱环境
嗜热菌 嗜冷菌 嗜压菌 嗜碱菌 或嗜酸菌 嗜盐菌
热稳定性好、催化反应速率高，易于在室 温下保存 避免了一些高温下不必要的化学反应 的发生，在食品工业中保持食品风味 耐高温和厌氧生长的嗜压菌有望用于 油井下产气增压和降低原油粘度
嗜碱菌在发酵工业中，可作为许多 种酶制剂的生产菌
嗜酸细菌被广泛用于铜等金属的细菌浸出
高盐环境
可用于海水淡化、盐碱地改造利用以 及能源开发
微生物代谢产物据统计已超过1300多种，而大规模工业生 产总计不超过100多种；微生物的酶有近千种，而已在工业上 利用的不过四五十种。 微生物资源非常的丰富，而目前利用起来的只是冰山一角。
“问渠哪得清如许，为有源头活水来。”
无处不在的微生物
空气
“微生物只是匆匆过客。”
解释一下空气污染和呼吸道传染病之间的关系。
无处不在的微生物
极端环境
所谓极端环境是指高低温环境，高盐环境，高酸碱环 境，高压环境，还有其他特定环境如油田、矿山、火山地、 沙漠的干旱地带、地下的厌气环境、原子炉等高放射能环 境、高卤环境以及低营养环境等。能够在这些具有强烈限
中取样应当注意的事项。
第二章 工业微生物菌种的选育、保藏与培养
第一节，工业微生物常用菌种
了解微生物在自然界中分布的广泛性
熟悉不同发酵产品所对应的微生物类型
了解极端环境微生物用作工业菌种的特殊之处
初步了解从自然界中选育菌种的一般规律和原则
发酵产品离我们有多远？
常见工业微生物 啤酒 味精 醋 酸奶 柠檬酸 青霉素 红霉素 沼气 酱油
17世纪80年代 19世纪60年代 20世纪40年代 21世纪
发酵工程(2)第二章 工业微生物菌种的选育与扩大培养
单细胞真核，主 分布于含糖质较多的 偏酸性环境中，如水 果、蔬菜、花蜜和植 物叶子上，以及果园 土壤中。
1、酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)
又称啤酒酵母。细胞多为圆形、 卵形，能产生子囊孢子。能发酵 葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和半乳糖 等多种糖类，但不发酵乳糖和蜜 二糖。
5、白地霉 ( Geotrichum candidum )
➢ 节孢子单个或连接成链。
➢ 白地霉菌体蛋白营养价值很高，可供食用和饲 料用，也可用来提取核酸，在废料废水的利用上很 用价值。
6、产黄头孢霉 ( Cephalosporium chrysogen ) 头孢霉素、先锋霉素
3、游动放线菌属 （Actinoplanes）
➢ 一般不形成气生菌丝，孢子球形，有时端生1-40 根鞭毛，能运动。 ➢ 济南游动放线菌生产创新霉素(creatmycin; 1964).
4、诺卡氏菌属 (Norcadia)
➢ 菌落较小，边缘多呈树根 毛状。 ➢ 生产利福霉素、蚊霉素等
5、孢囊链霉菌属 (Streptosporangium)
4、青霉 ( Penicillum )
产黄青霉 ( Penicillum chrysogenum ) 生产青霉素，也可用来生产葡萄
糖氧化酶、葡萄糖酸、柠檬酸和抗坏 血酸。
娄地青霉 ( Penicillum roqueforti ) 属不对称青霉组，具有分解油
脂和蛋白质的能力，用于制造干酪； 该菌孢子能将甘油三酯氧化为甲基 酮。
第二章 工业微生物菌种的选育与扩大培养
第一节 发酵工业常用微生物 第二节 菌种来源 第三节 菌种选育 第四节 种子扩大培养 第五节 菌种保藏
工业微生物菌种
工业微生物菌种工业微生物菌种对于工业生产具有重要的意义。
微生物菌种是指一类具有特定功能的微生物种类，经过筛选和培养得到的。
在工业生产中，微生物菌种主要用于发酵过程，通过微生物的代谢活动产生有价值的化学物质，如酶、抗生素、有机酸等。
微生物菌种在工业生产中应用广泛，以提高产品质量和增加产量，促进工业发展。
工业微生物菌种的筛选和培养是一个重要的过程。
首先，需要从自然界中筛选出具有特定功能的微生物，这些微生物可以产生工业所需的化学物质。
筛选的方法包括采集样品，如土壤、水体等，然后通过培养方法将菌落分离并筛选出有特殊功能的微生物。
在筛选过程中，需要进行对微生物进行鉴定，确定其属于哪种微生物，并进一步进行培养。
微生物菌种的培养是将筛选出的微生物在实验室中进行培养的过程。
培养的目的是为了增加菌种数量，以便后续工业生产中的使用。
培养需要提供适当的培养基和培养条件，以保证微生物在培养过程中获得最佳的生长环境。
培养基是一种提供营养物质和能量的物质，可以通过调整培养基的成分和浓度来满足微生物的生长需求。
培养条件包括温度、pH值、气体和液体状态等，需要根据不同微生物的特性进行调控。
工业微生物菌种的应用广泛。
以酶制剂为例，酶是一类能够催化化学反应的生物催化剂，可以在不同工业过程中起到加速反应速度和提高产品质量的作用。
酶制剂是通过微生物发酵过程得到的，微生物菌种的选取和培养对于酶制剂的产量和活性具有重要影响。
此外，微生物菌种还用于生产抗生素、有机酸等。
抗生素是一种可以抑制或杀灭细菌的药物，是常见的临床用药物质。
有机酸是一类广泛应用于食品工业和化工工业中的物质，具有调味、抗菌、保鲜等功能。
工业微生物菌种的研究和应用为工业生产带来了许多好处。
首先，微生物菌种可以代替传统化学合成方法，从而减少对化石能源的消耗和环境的污染。
微生物发酵过程相对环保，产生的废物可以进行资源化利用，减少对环境的负担。
其次，微生物菌种可以提高产品的质量和产量。
第二节 工业微生物菌种选育
1.选择出发菌株
• 出发菌株是指用于诱变的原始菌种。 • 选择原则：菌种对诱变剂的敏感性强、变 异幅度大、产量高。 • 获得途径： （1）从自然界的土样或水样中分离出来的野 生型菌种； （2）生产中正在使用的菌种； （3）从菌种保藏机构购买
2.同步培养
• 培养中的细胞不处于同一生长阶段，它们 的生理状态和代谢活动也不完全一样。 • 同步培养法：使培养的微生物比较一致， 生长发育在同一阶段上的培养方法。 • 在诱变育种前，最好选用生理状态一致的 单细胞或单孢界直接分离筛选菌种的步骤
• 1.采样： （1）选择采样地点 中性偏碱：细菌和放线菌多 酸性红土壤及森林土壤：霉菌多 果园、菜园、野果生长区（富含碳水化合物）和沼泽池：酵母和霉 菌多。 （2）确定采样时间 秋初好：温度适中，雨量不多。 夏季或冬季土壤微生物存活量少，暴雨后显著减少。 （3）采样 5cm~15cm处取土。放在牛皮纸袋或玻璃屏或聚乙烯袋中，标明 样品种类、采集日期、地点以及采集地点的地理、生态参数等 采集的样品应及时处理，暂不处理应放在4℃保存。
机械法 （选择法） 离心沉降分离法
同步培养方法 诱导法 温度调整法
膜洗脱法
营养条件调整法
特点：同步生长只能维持几代
机械法
膜洗脱法
通过大小不同 的微孔过滤器
离心沉降分离法
小细胞 沉淀慢
• 主要通过控制环境条件：如温度、营养物质等来诱导同步生 长。 • （1）温度调整法 • 将温度控制在接近最适温度条件下一段时间，缓慢进行新陈 代谢，但不进行分裂。然后再将温度提高到最适生长温度， 大多数细胞进行同步分裂。 • （2）营养条件调整法 • 控制培养基的浓度或培养基的组成以达到同步生长。例如限 制碳源或其他营养物，使细胞只能进行一次分裂而不能继续 生长，从而获得刚分裂的细胞群体，然后转入适宜的培养基 中，它们便进入了同步生长。 • 另外有在培养基中加入某种抑制蛋白质合成的物质（如氯霉 素）诱导一定时间后再转到另一种完全培养基中培养；或用 紫外线处理；对光合行微生物的菌体可采用光照与黑暗交替 处理法等。 • 总之：不管采用哪种诱导因子，都必须具有以下特性：不影 响生物的生长，但可特异性地抑制细胞分裂，当移去（或消 除）该抑制条件后，微生物又可立即同时出现分裂。
第二章 工业微生物
培养分离
增殖培养效果显著，但目的微生物还在混 杂生长，必须进一步纯化分离。 纯种分离方法有划线分离，稀释分离法。
筛选
1、从产物角度 通过培养，依据在设计的培养基上形成目的产 物，利用简单、快速鉴定方法，入抗生素 采用与生产相近培养基和培养条件，在三角瓶 中小型发酵实验，以得到适合工业生产用菌种。
基因突变
定向育种：杂种育种，分子育种
基因重组
1、自然选育 （1）概念 （2）目的 （3）一般程序
（1）概念 不经过人工处理，利用菌种自然突变进行 菌种筛选过程。 原因：多因素低剂量诱变效应 各种短波辐射、低浓度诱变物质和微生物 自身产生诱变物质等。
互变异构效应 T和G碱基第六位可以形成酮式或烯醇式，C 和A碱基第六位可以形成氨基式或亚氨基式， 平衡后趋于酮式和氨基式，偶然也会出现烯醇 式和亚氨基式，导致DNA出现AT和GC碱基对 变成GT和AC，发生几率为10-8-10-9突变。
商品化生产菌介绍 1、抗生素生产菌 放线菌：链霉素、四环素、红霉素 真菌：青霉素、头孢
2、氨基酸生产 氨基酸发酵为代表的代谢控制发酵是发酵 工业的一个转折点。 代谢控制发酵：用人工诱变方法，有意识 的改变微生物代谢途径，最大限度地积累 产物。
氨基酸生产菌要求： 代谢途径清楚、简单。 谷氨酸发酵菌种：棒杆菌属，短杆菌属、 节杆菌属或小杆菌属的棒型细菌 其他氨基酸生产菌：常规菌种也可以由谷 氨酸生产菌选育而成；工程菌，大肠杆菌， 枯草芽孢杆菌
实例：碱性纤维素酶产生菌的筛选
文献：产生菌为中性芽孢杆菌、嗜碱芽孢 杆菌、放线菌及霉菌 采样（造纸厂）——80℃30min处理 0.0075%曲利本蓝+1%CMC(羧甲基纤维素)， pH10.5培养3-4d，选择有凹陷圈的菌落
工业微生物菌种开发的一般过程
1、工业微生物菌种开发的一般过程自然界含菌样品极其丰富，土壤、水、空气、枯枝烂叶、植物病株、烂水果等都含有众多微生物，种类数量十分可观。
土壤样品的含菌量最多。
菌株的分离和筛选一般可分为采样、富集、分离、产物鉴别几个步骤。
（1）采样注意事项1、采样时应尽可能保持相对无菌；2、所采集的样本必须具有某种代表性；3、采好的样必须完整地标上样本的种类及采集日期、地点以及采集地点的地理、生态参数等；4、应充分考虑采样的季节性和时间因素，因为真正的原地菌群的出现可能是短暂的；（2）富集培养目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，以利分离到所需要的菌株。
富集培养主要根据微生物的碳、氮源、pH、温度、需氧等生理因素加以控制。
例如控制培养基的营养成分的富集培养，如要分离水解酶产生菌，可在富集培养基中以相应底物为惟一碳源，加入含菌样品，给目的微生物以最佳的培养条件（pH、温度、营养、通气等）进行培养。
能分解利用该底物的菌类得以繁殖，而其他微生物则因得不到碳源无法生长，菌数逐渐减少。
（3）分离筛选经富集培养以后的样品，目的微生物得到增殖，占了优势，其他种类的微生物在数量上相对减少，但并未死亡。
富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起，即使占了优势的一类微生物中，也并非纯种。
因此，经过富集培养后的样品，也需要进一步通过分离纯化，把最需要的菌株直接从样品中分离出来。
例如划线分离法，用接种环取部分样品或菌体，在事先已准备好的培养基平板上划线，当单个菌落长出后，将菌落移入斜面培养基上，培养后备用。
该分离方法操作简便、快捷，效果较好。
（4）产物鉴别经典微生物分类鉴别现代的分子生物学分类鉴别2、分子生物学分类方法（微生物分类鉴定的经典和现代方法）DNA指纹技术，通常指那些以DNA为基础的分型方法，对微生物的种进行鉴别的技术。
微生物遗传育种名词解释(一)
1、工业微生物菌种：在大规模培养条件下，批量商业性获得微生物细胞或其代谢产物过程中所使用的微生物菌株；或利用微生物特定代谢过程，规模化加工或转化特定底物或环境物料的微生物菌株。
2、天然菌种：通过自然筛选和分离获得的工业菌种。
3、诱变菌种：通过物理、化学等诱变剂在实验室人工诱变自然筛选与分离的菌株，获得产量或/ 和性状改善的工业菌种。
4、重组菌种：通过遗传重组技术对菌种进行定向遗传改良获得的工业菌种。
3、染色体畸变：是指生物细胞中染色体在数目和结构上发生的变化。
包括缺失、重复、倒位和易位。
①缺失：指染色体片段的丢失。
②重复：指染色体片段的二次出现。
③倒位：指染色体的片段发生了180°的位置颠倒，造成染色体部分阶段的位置顺序颠倒，极性相反。
④易位：指一个染色体的一个片段连接到另一个非同源染色体上。
4、基因突变：指一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变，包括一对或少数几对核苷酸的缺少、插入或置换。
①碱基置换：DNA链上一个碱基对被另一碱基对所取代。
（注意转换和颠换的区别）②移码突变：在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失而使其后全部遗传密码的阅读框架发生移动，进而引起转录和翻译错误的突变。
5、错义突变：一对碱基的改变使某氨基酸的密码子变为另一氨基酸密码子的突变。
无义突变：一对碱基的改变使某氨基酸的密码子变为终止密码子的突变。
6、形态突变型：指细胞个体形态或菌落形态改变的突变型。
7、营养缺陷型：野生型菌株由于基因突变而丧失合成一种或几种生长因子能力的突变株。
8、抗性突变型：由于基因突变而产生的对某些化学药物、致死物理因子或噬菌体具有抗性的变异菌株叫抗性突变株。
9、致死性突变型：由于基因突变而导致个体死亡的突变型。
10、条件致死性突变型：在某种条件下可以正常繁殖并呈现其固有的表型，而在另一条件下却是致死的突变型叫条件致死突变型。
11、产量突变型：所产生的代谢产物的产量明显有别于原始菌株的突变株称产量突变型。
工业微生物菌种制备
四、菌种保藏
1. 菌种退化 2. 菌种复壮 3. 菌种保藏
1、菌种退化
• 表现：发酵力或繁殖力(如孢子 的产生)下降，发酵产品的得率 降低等。
退化的原因
I. 菌种保藏不当。
II. 菌种生长的要求没有得到满足， 或是遇到某些不利条件，或是 失去某些需要的条件。
III. 经诱变得来的新菌株发生回复 突变，从而丧失新的特性的情 况。
退化的原因
• 基因方面：突变、连续传代等 • 环境方面：温度、湿度、培养
条件等。
防止退化措施
① 控制传代次数 ② 选择合适的培养条件 ③ 利用不同类型细胞进行传代 ④ 选择合适的菌种保藏方法
2、菌种复壮
• 单细胞分离纯化。 • 通过诱变再筛选。 • 改变培养条件等。
3、菌种保藏
• 将菌种处于低温、干燥、无氧 和缺乏营养的条件下，可以使 菌种暂时处于休眠状态。
一、发酵工业菌种的要求
• (1)所需原料廉价。 • (2)培养条件易于控制。 • (3)生长快，发酵周期短。 • (4)满足代谢控制的要求。
一、发酵工业菌种的要求
• (5)抗噬菌体和杂菌能力强。 • (6)菌种遗传稳定，不易退化。 • (7)发酵中泡沫要少。 • (8)菌种安全。
三、菌种的选育
3、菌种保藏方法
• 斜面低温保藏法
• 液体石蜡保藏法 • 砂土管保藏法 • 冷冻干燥保藏法 • 超低温冷冻藏法
第二节 菌种的培养
• 种子条件： • 菌量适宜 • 性能稳定
菌龄适宜 无杂污染
菌种制备任务
第二节 菌种的培养
一．种子制备过程 二．发酵工业种子培养 三．影响种子的因素
一 种子制备过程
• （一）菌种的分离 • （二）菌种的选育