非灭活型病毒保存液介绍520
05生物制品的佐剂保护剂灭活剂

(二) 白油Span佐剂
用 轻 质 矿 物 油 ( 白 油 ) 作 油 相 , 用 Span-80( 去 水 山 梨 醇 单 油 酸 酯 ) 或 Span-85(去水山梨醇三油酸酯)及吐温-80(Tween-80)(聚氧乙烯脱水山梨 醇单油酸酯),作为乳化剂制成的油乳佐剂,是当前兽医生物制品中最常 用最有效的佐剂之一。白油佐剂的配制方法很多,比例互有差别,仅举一 例作为参考,即:
存
化十八烷基三甲铵。
型
胺及其类似物:癸胺、癸胍及其他。
核酸及类似物:DNA、RNA、低核苷酸、多聚核苷
酸、环磷酸腺苷等。
药物:左旋咪唑及蜂胶等
佐剂的作用机理
各种佐剂的作用机理不尽相同,但概括起来有如下方面
1.对抗原的作用
(1) 增加抗原分子的表面积 某些佐剂颗粒表面可以吸附许多抗原,使抗原表面积明显
这些细胞增殖发挥更大作用。有些佐剂,如短小棒状杆菌、百日咳杆菌和 葡聚糖等,主要作用于巨噬细胞,使之激活,大量增殖分化,释放白细胞 介素-1等细胞因子,再去活化T细胞和B细胞。被激活的T细胞进一步分泌 各种细胞因子,进而促进B细胞和巨噬细胞功能。 对T细胞的作用
一些佐剂的主要作用对象是T细胞,通过T细胞的介导,增强各种免 疫功能。胸腺素、分枝杆菌及其有关成分如卡介苗及MDP等、香菇多糖、 异丙肌昔、左旋咪吐、二乙胺基二硫代甲酸钠(DTC)等均为T细胞增强 剂。它们作用于胸腺细胞系统,诱导T细胞前体细胞的产生,T细胞大量增 殖分化,形成效应淋巴细胞,产生淋巴因子。
被分散的物质称为分散相,承受分散的液体称为连续相,这两相间的 界面活性物质称为乳化剂。当以水为分散相,以加有乳化剂的油为连续相
时,制成的乳剂为油包水型(W/O),反之为水包油型(O/W)。 油包水型油乳佐剂粘稠,在机体内不易分散,抗原从乳剂中缓慢释
带你了解更多病毒保存液的具体用途
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带你了解更多病毒保存液的具体用途
病毒保存液在生活中使用并不常见,很多人都没了解过,甚至从未听说过。
但是在医院的检测中心,它却是必不可少的一样检测利器。
在很多实验当中都会运用到病毒保存液采样管,它不仅使用起来方便、适用范围也很广泛。
除了现在流行的新冠病毒核酸检测,日常所见的流感病毒、手足口病毒、麻疹及风疹病毒的采集样本都可以通过病毒保存液来短期储存和运输。
病毒保存液的具体用途:
1、病毒保存液可用于核酸检测样本的提取及运输保存,后续病毒的分离所需保存液体积约为35m或5m;
2、用于将鼻咽拭子样本或特定部位的样本从采样点运送到检测实验室进行聚合酶链反应提取检测;
3、用于保存鼻咽拭子样本或安排在特定部位的样本,用于必要的细胞培养;
4、用于外部环境中禽流感病毒的采样和短期转运,所需液体两约为6ml;
5、用于家禽、猪等动物的日常检测采样,所需液体体积约为15m;
6、用于采集临床呼吸道病毒快速检测试剂盒;
7、用于采集支原体、衣原体和脲原体的临床样本。
病毒保存液和细胞保存液的区别
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病毒保存液和细胞保存液的区别一、病毒保存液病毒保存液适用于新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。
通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。
1、灭活型:添加有裂解盐的病毒保存液就是灭活型的病毒保存液,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。
核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。
病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测除了病毒。
病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。
为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。
2、非灭活型:除了灭活型的病毒保存液,此外还有非灭活型病毒保存液,不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。
灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势,目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank's液基础,在Hank's液基础之上,还添加了诸如庆大霉素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白第五组分)、生物缓冲剂HEPES、氨基酸、冷冻保护剂、甘油等多种组分:3、病毒样本采集方法:a .鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法釆集另一侧鼻孔。
上述两根拭子浸入同一含3成釆样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。
病毒核酸保存液的特点及使用方法
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病毒检测的过程可以简单总结为取样、留样、保存、核酸提取、检测等五个步骤,取样的过程是用咽拭子擦拭咽后壁及双侧扁桃体处各5-10次,还要不断旋转咽拭子。取样完成后要马上将拭子浸入细胞保存液中,并折断尾部立即旋紧试管盖。然后再将样本试管放入密封袋中送检,在这个过程中需要在2-8℃中保存。检测时先将病毒灭活后进行核酸提取,最后进行荧光PCR扩增反应和核酸检测。整个过程需要约6小时,如果第一次检测结果“阳性”,还需要再重复操作一次进行复核,所以一份阳性报告至少需要12小时。
核酸提取时先融化如果已经冻凝然后把拭子挤出液体弃拭子液体当成裂解液使用后续处理不需要再加裂解液只需要加上柱液即可上柱洗涤洗脱过程按核酸纯化试剂盒即可
病毒核酸保存液的特点及使用方法
病毒核酸保存液它用于流感病毒、手足口病毒、麻疹风疹病毒、冠状病毒等各种病毒。它可在快速灭活病毒和酶的活性,同时能保护病毒的核酸在常温下 4 天不降解,方便样品的运输。
4. 含有特殊的核酸保护和稳定试剂,可以保护释放出来的病毒DNA和病毒RNA在常温下4 天内无明显的降解。
5. 可用于各种拭子样品,包括口腔拭子、咽喉拭子、鼻腔拭子、阴道拭子等等。
6. 保存的样品可以在常温运输,尤其适用于远距离采样和运输。
7. 本试剂盒一次采样可以进行5次核酸提取(如果使用柱式病毒RNAout或柱式病毒 DNAout)。
3. 速将拭子放入本采样管中(含病毒运输液)。
4. 将采样拭子在折断处折断,旋紧管盖。
5. 新鲜采集的临床标本应在 4℃-常温下 96 小时内运送至实验室,未能 96 小时送至实验室的,应置于-70℃或以下保存。标本送至实验室后应尽快进行核酸提取, 24 小时内能进行核酸提取的可置于 4℃保存,如不能则应置于-70℃或以下保存。
防控非洲猪瘟常用消毒药物操作技术
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一、药品种类最有效的消毒药是10%苯及苯酚、去污剂、次氯酸、碱及戊二醛。
碱类(氢氧化钠、氢氧化钾等)、氯化物和酚化合物适用于建筑物、木质结构、水泥表面、车辆和相关设施设备消毒。
酒精和碘化物适用于人员消毒。
1、酚类包括苯酚(石炭酸)、煤酚(酚)、复合酚等。
(1)苯酚:俗称石炭酸、用于处理污物、用具和器械,通常用其2%~5%的水溶液消毒车辆、墙壁、运动场及畜禽圈含。
因本品有特殊臭味,故不适于肉、蛋的运输车辆及贮藏肉蛋的仓库消毒;(2)煤酚:主要用于畜舍、用具和排泄物的消毒。
同时也用于手术前洗手和皮肤的消毒。
2%水溶液用于手术前洗手及皮肤消毒、3%~5%水溶液用于器械、物品消毒、5%~10%水溶液用于畜禽舍、畜禽排泄物等的消毒;(3)复合酚复合酚主要用于畜禽圈含、栏、笼具、饲养场地、排泄物等的消毒,常用的喷酒浓度为0.35%~1%。
2、卤素类。
包括氯消毒剂和碘消毒剂,如漂白粉、次氯酸钠、次氯酸钙、二氯异氯尿酸钠、三氯异氯尿酸、二氧化氯、碘酊、复合碘溶液等。
(1)漂白粉:主要用于畜禽圈舍、畜栏、笼架、饲槽及车辆等的消毒;在食品厂、肉联厂常用它在操作前或日常消毒中消毒设备、工作台面等;次氯酸钠溶液常用作水源和食品加工厂的器皿消毒。
漂白粉可采用5%~10%混悬液喷酒,也可用粉末撒布。
5%溶液1h,可杀死芽孢。
饮水消毒每升水中加入0.3~1.5g漂白粉,可起杀菌除臭作用。
10%~20%乳剂可用于消毒被病畜禽污染的圈舍、高栏、粪池、排泄物、运输畜禽的车辆和被炭疽芽孢污染的场所。
干粉按1:5可用于糞便的消毒。
漂白粉必须现用现配,贮存久了有效氯的含量逐渐降低;不能用于有色棉织品和金属用具的消毒;不可与易燃、易爆物品放在一起,应密闭保存于阴凉干燥处;漂白粉有轻微毒性,使用浓溶液时应;(2)二氯异氧尿酸钠为白色结晶粉末,有氯吳,含有效氯60%,性能稳定,室内保存半年后有效氯含量仅降低1.6%、易溶于水,溶液呈弱酸性,水溶液稳定性较差。
两种病毒保存液的比较:灭活与非灭活
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两种病毒保存液的比较:灭活与非灭活简介:病毒保存液适用于新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。
通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸,两者有着各自不同的特点,有着不同的应用方向。
一、灭活型病毒保存液:核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。
病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测除了病毒。
病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。
为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作员二次感染,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA 等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否感染病毒。
灭活型保存液能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。
灭活型病毒保存液产品的特点:1.操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次感染风险,保障运输及检测人员安全;2.病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA/RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR、qPCR等,同时节省运输成本;3.内含核酸RNA酶抑制剂,最大化程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
非灭活型病毒保存液介绍520
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非灭活型病毒保存液介绍520非灭活型病毒保存液介绍一、病毒的特征:病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA或RNA)型来,必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物。
1. 含有单一知种核酸(DNA或RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞道结构,个体微小、结构简单。
2. 在感染细胞的同时或稍后释放其核酸,然后以核酸复制的方式增殖,而不是以二分裂方式增殖;3. 严格的细胞内寄生性。
病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统复制新的病毒。
二、非灭活型病毒保存液特点:1. 低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
2. 适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等3. 可以用于 H1N1 流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
4. 可以用柱式病毒 DNAout 或柱式病毒 RNAout 提取病毒核酸。
5. 采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染。
6. 采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率三、德晟非灭活型病毒保存液成分:1. 保存液成分为:Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V) ,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。
2. 多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。
3. 牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性。
4. Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。
5. 用于临床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送四、使用方法:注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。
咽、鼻拭子最好在发病的头3 天采集。
1. 在安全柜内本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5 mL 旋盖塑料管里(一级容器)。
B 型产品已经在旋盖离心管中,可以跳过此步。
2. 鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
RNAwait( 非冻型组织 RNA 保存液)
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RNAwait(非冻型组织RNA保存液)货号:SR0020规格:10ml/100ml保存:室温保存,有效期两年。
产品说明:RNAwait是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能使细胞内的RNA与RNA酶分离,可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。
组织获取后立即浸入RNAwait保存液中,在室温可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃标本可以长期保存,RNA稳定存在不降解,取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。
操作流程:1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。
RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2.将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;3.快速将较大的组织切成厚度<0.5cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。
组织的厚度一定要<0.5cm。
组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。
较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4.保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait 完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。
在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
注意事项:1.组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2.冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3.保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。
细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。
一种有效保存病毒样品的病毒保存液[发明专利]
![一种有效保存病毒样品的病毒保存液[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e4f8bb0511661ed9ad51f01dc281e53a5902515b.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010776891.5(22)申请日 2020.08.05(71)申请人 珠海市丽拓生物科技有限公司地址 519040 广东省珠海市金湾区红旗镇永安三路35号申请人 湖南省丽拓生物科技有限公司(72)发明人 雍学安 (74)专利代理机构 天津三元专利商标代理有限责任公司 12203代理人 胡畹华(51)Int.Cl.C12Q 1/24(2006.01)(54)发明名称一种有效保存病毒样品的病毒保存液(57)摘要本发明一种有效保存病毒样品的病毒保存液,属于医学生物技术领域;包括以下成分:解偶联剂0.5‑6M,氨基酸类表面活性剂0.01‑0.5%,β‑巯基乙醇0.001‑0.15M,两性离子缓冲液10‑30mM ,DTT 0‑10mM ,糖原10‑40μg/mL ,酚红0.004‑0.2g/L,PH为7‑8。
本发明对采集的病毒进行快速的灭活;强烈降解病毒的蛋白,高效保存病毒的核酸;免除检测前的灭活处理,提高检测效率;有助于提取低浓度病毒核酸,提高检测敏感性。
权利要求书1页 说明书5页 附图3页CN 111850090 A 2020.10.30C N 111850090A1.一种有效保存病毒样品的病毒保存液,其特征在于,所述病毒保存液由以下成分组成,且其具体摩尔浓度如下:解偶联剂0.5-6M,氨基酸类表面活性剂0.01-0.5%,β-巯基乙醇0.001-0.15M,两性离子缓冲液10-30mM,DTT 0-10mM,糖原10-40μg/mL,酚红0.004-0.2g/L,PH为7-8。
2.根据权利要求1所述的有效保存病毒样品的病毒保存液,其特征在于,所述解偶联剂0.79M,氨基酸类表面活性剂0.5%,β-巯基乙醇0.1M,两性离子缓冲液20mM,DTT 5mM,糖原20μg/mL,酚红0.0125g/L,PH为7-8。
一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用[发明专利]
![一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/62942d69bf23482fb4daa58da0116c175f0e1ed1.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010559917.0(22)申请日 2020.06.18(71)申请人 合肥铼科生物科技有限公司地址 230000 安徽省合肥市高新区明珠产业园3#厂房4层F区(72)发明人 黄服喜 刘松 李基君 陈香 (74)专利代理机构 广州独角熊知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 44580代理人 张小黎(51)Int.Cl.C12N 15/10(2006.01)C12Q 1/68(2018.01)C12Q 1/70(2006.01)(54)发明名称一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用(57)摘要本发明提供一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液及其制备方法与应用。
该保存液安全无毒,使用简单,无须冷链保存,可常温运输保存病毒样本核酸长达3天,无须进一步灭活处理,保存液配置有病毒裂解组分、核酸酶抑制组分以及缓冲体系组分,病毒裂解组分可使病毒灭活裂解释放出核酸,核酸酶抑制组分可抑制核酸酶活性,有效避免核酸降解,该核酸保存液无须进一步核酸提取纯化操作即可直接进行核酸检测,尤其适用于具有高度感染性的流行病毒的样本核酸采集。
权利要求书1页 说明书6页 附图4页CN 111676216 A 2020.09.18C N 111676216A1.一种免提取灭活型病毒样本核酸保存液,其特征在于,包括十二烷基硫酸锂、N -十二烷酰肌氨酸、Tween -20、牛血清白蛋白、三(2-羧乙基)膦盐酸盐、氧钒核糖核苷复合物、柠檬酸钠。
2.如权利要求1所述的免提取灭活型病毒样本核酸保存液,其特征在于,包括十二烷基硫酸锂1-150mM、N -十二烷酰肌氨酸1-150mM、Tween -205-15%(V/V)、牛血清白蛋白0.1-2mM、三(2-羧乙基)膦盐酸盐1-10mM、氧钒核糖核苷复合物1-10mM、柠檬酸钠5mM -200mM。
用于病毒核酸检测的样本释放剂、试剂盒及预处理方法[发明专利]
![用于病毒核酸检测的样本释放剂、试剂盒及预处理方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ba46f9ebcf2f0066f5335a8102d276a200296029.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011369711.8(22)申请日 2020.11.30(71)申请人 江苏默乐生物科技股份有限公司地址 225316 江苏省泰州市海陵区健康大道805号G116幢6F-7F东(72)发明人 尚慧捷 李杨霞 (74)专利代理机构 杭州中成专利事务所有限公司 33212代理人 周世骏(51)Int.Cl.C12Q 1/6806(2018.01)C12Q 1/6851(2018.01)(54)发明名称用于病毒核酸检测的样本释放剂、试剂盒及预处理方法(57)摘要本发明涉及病毒检测技术,旨在提供一种用于病毒核酸检测的样本释放剂、试剂盒及预处理方法。
该样本释放剂能够同时用作样本保存、蛋白裂解、核酸释放与保存用途,其所含组分及浓度关系为:KCl,40mM;非离子表面活性剂Triton X ‑100,质量百分比浓度为0.1%;防腐剂BND ‑10,质量百分比浓度为0.1%;余量为去离子水。
本发明既可作为已有样本的裂解液使用,又可直接作为样本采集使用的样本保存液。
可有效地对含有病原体的样本进行裂解,其成分不影响下游PCR 检测效果,且在4℃、室温、37℃等多种温度条件下都可稳定有效的检出核酸。
确保在不同条件下采集的样本,都可完成后续检验。
能够极大提高实验室工作效率,有效避免实验污染环节,减少医疗废弃物的产生。
权利要求书1页 说明书7页 附图1页CN 112391445 A 2021.02.23C N 112391445A1.一种用于病毒核酸检测的样本释放剂,其特征在于,其所含组分及浓度关系为:KCl,40mM;非离子表面活性剂Triton X -100,质量百分比浓度为0.1%;防腐剂BND -10,质量百分比浓度为0.1%;余量为去离子水。
2.一种试剂盒,其特征在于,包括能够同时用作样本保存、蛋白裂解、核酸释放与保存用途的样本释放剂;该样本释放剂的组分及浓度关系为:KCl,40mM;非离子表面活性剂Triton X -100,质量百分比浓度为0.1%;防腐剂BND -10,质量百分比浓度为0.1%;余量为去离子水。
非灭活型保存液工作原理
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非灭活型保存液工作原理
非灭活型保存液是一种用于保存活性物质的液体,其工作原理主要包括以下几个方面:
1. 抗菌作用:非灭活型保存液中通常含有抗菌剂,如抗生素、抗菌肽等,可以抑制或杀灭细菌、真菌和其他微生物的生长,从而防止微生物污染。
2. 缓冲作用:保存液中的缓冲剂能够稳定液体的pH值,防止
变化过大,从而保护活性物质的稳定性。
3. 渗透压调节作用:非灭活型保存液中含有渗透剂,如甘油、蔗糖等,可以调节液体的渗透浓度,防止细胞膜破裂和组织细胞的流失。
4. 抗氧化作用:保存液中通常添加有抗氧化剂,如维生素C、
E等,可以减少氧气对活性物质的氧化破坏,延长其保存时间。
5. 低温保存:非灭活型保存液常在低温条件下保存,这有助于降低酶活性、代谢反应的速率,从而延缓活性物质的降解过程。
通过以上多种作用的综合发挥,非灭活型保存液能够保持活性物质的稳定性和活性,在一定条件下延长其储存寿命。
非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)

非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)2011-08-22非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液,或者RNAlocker。
实际功能是相同的。
保存条件:15–25℃,保质期2年。
低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因RNAwait能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,RNAwait能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标37℃一天(保存三天的样品RNA有部分降解)18-25℃一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)2-8℃一个月-20℃和-80℃长期操作流程:1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。
RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。
一种能够长时间有效保存病毒等样本的病毒保存液[发明专利]
![一种能够长时间有效保存病毒等样本的病毒保存液[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/59f70fb682d049649b6648d7c1c708a1294a0a4b.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010805146.9(22)申请日 2020.08.12(71)申请人 泰州鑫联诚润生物技术有限公司地址 225300 江苏省泰州市姜高大道420号2幢(72)发明人 杨谢 (51)Int.Cl.C12N 7/00(2006.01)C12R 1/93(2006.01)(54)发明名称一种能够长时间有效保存病毒等样本的病毒保存液(57)摘要本发明涉及病毒样本保存技术领域,尤其为一种能够长时间有效保存病毒等样本的病毒保存液,包括以下组成成分:十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、氯化钠、氯化钾、六水氯化镁、氯化钙、双蒸水、葡萄糖、抗生素、碳酸氢钠、氢氧化钠、稳定剂、氨基酸、酚红、生物缓冲剂、冷冻保护剂和甘油,成分的质量组份分别为:十二水合磷酸氢二钠0.06~3.04g、磷酸二氢钾0.06~1.2g、七水硫酸镁0.20~2.0g、氯化钠150~160g、氯化钾0.70~8.0g、六水氯化镁0.30~2.0g、氯化钙0.14~2.8g、葡萄糖20.0g、抗生素0.50~5.5g、碳酸氢钠0.35~060g、氢氧化钠10ml、稳定剂0.10~1.0g、氨基酸0.30~3.0g、酚红0.30~0.40g,通过该保存液能够保护病毒蛋白质外壳不易分解,最大程度的保持了病毒样本的原始性,使病毒的保存完整性更好,检出率更高。
权利要求书1页 说明书4页CN 111808827 A 2020.10.23C N 111808827A1.一种能够长时间有效保存病毒等样本的病毒保存液,包括以下组成成分:十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、氯化钠、氯化钾、六水氯化镁、氯化钙、双蒸水、葡萄糖、抗生素、碳酸氢钠、氢氧化钠、稳定剂、氨基酸、酚红、生物缓冲剂、冷冻保护剂和甘油,成分的质量组份分别为:十二水合磷酸氢二钠0.06~3.04g、磷酸二氢钾0.06~1.2g、七水硫酸镁0.20~2.0g、氯化钠150~160g、氯化钾0.70~8.0g、六水氯化镁0.30~2.0g、氯化钙0.14~2.8g、葡萄糖20.0g、抗生素0.50~5.5g、碳酸氢钠0.35~060g、氢氧化钠10ml、稳定剂0.10~1.0g、氨基酸0.30~3.0g、酚红0.30~.040g。
一次性使用病毒采样管(DJF)
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套均可以提供产品备案证及生产备案证。保存管可提供4ml冻存 管、5ml冻存管、10ml冻存管、12ml冻存管、5ml采血管、10ml
管、5ml冻存管、10ml冻存管、12ml冻存管、5ml采血管、10ml 采血管。
采血管。
*3.可带有颜色指示剂,可指示保存液使用前是否合格
*4.保存液可装6ml,单只保存管可匹配10个咽拭子。
采样拭子:采样拭子为植绒采样头,对细胞、病毒无毒性作用,且不含RNA 酶,能极大程度的增加病毒样本的采集和释放量,确保PCR检测结果的准确性。 塑料杆为ABS材质,独特的可折断设计,折断过程中没无微小碎屑。 鼻用拭子 超柔性塑料杆符合人体工程学设计,优化收集的效率,提高患者提取样本的 舒适度。尼龙植绒能强有力的促进液体样品的吸收。样本吸附表面,可以更 容易、快速地洗脱,从而减少了样本的手工处理,适合于鼻咽及鼻部取样。 咽喉拭子 塑料杆符合人体工程学设计,优化收集的效率,提高患者提取样本的舒适度。 尼龙植绒能强有力的促进液体样品的吸收。样本吸附表面,可以更容易、快 速地洗脱,从而减少了样本的手工处理。适合于咽喉部取样,适合收集气管 样本、细胞或液体做DNA测试8实数据1、口腔上皮细胞采集
Abs26 0
Abs28 0
Abs230
A260/A230
2.025 2.819 2.164
2.6
1.097 1.566 1.167 1.434
1.244 1.765 1.273 1.613
1.63 1.6 1.7
1.61
2、采集物释放量数据
A260/A280 核酸浓度 单位
-
9
产品参数
一次性使用病毒采样管(非灭活保存液) 一次性使用病毒采样管(灭活保存液)
1.能维持病毒的形态,完成病毒样本的采集、保存和运输。
非冻型组织DNA保存液
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非冻型组织DNA保存液产品及特点本产品是我公司推出的在室温条件下长期保存DNA样品的保存液。
它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制DNase的活性而长期保证DNA分子的完整性。
1.保存时间长,可室温保存动植物组织长达两年,保护DNA不被降解。
2.安全可靠,本产品无毒无害,从DNA LOCKER保存的样品中提得的DNA可用于酶切和PCR等分子生物学实验。
3.使用简单,直接把新鲜的动植物样品浸在DNA LOCKER中即可。
4.可广泛用于各种动植物标本的野外采集。
规格及成分成份编号100 mL包装250mL包装本产品BTN3660 100 mL 250 mL使用手册3660sc 1份1份运输及保存室温运输及保存,有效期两年。
自备试剂无使用方法第一步: 准备工作1.估计完全浸没样品所需要Tissue DNA LOCKER的体积。
注:1g组织约需10 mL Tissue DNA LOCKER。
2.标记收集管并加入估计所需量的Tissue DNA LOCKER。
第二步: 样品的处理1.以最快速度将样品剪切成厚度小于0.5 cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
2.将组织碎块完全浸没于收集管的Tissue DNA LOCKER中。
第三步: 样品的存放将收集管存放于温度适当的地方,保存温度不要低于4℃。
第四步: 样品的使用1.从存放处取出样品,用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
2.立即开始DNA提取。
背景资料导致核酸降解的常见非酶因素原因机制溶液中残留重金属离子磷酸二脂键的断裂长期存放/光照产生的自由基磷酸二脂键的断裂UV 形成嘧叮二聚体DEPC 使RNA中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对双链核酸危害小高温和低pH 脱嘌啉反应(depurination)EB 导致可见光对DNA的光氧化(photooxidation)酚其氧化产物使磷酸二脂键断裂甲酰胺溶液酸化后(pH 5)引起RNA降解醚残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂醇残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂4℃短期保存的最佳温度-20℃如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂-70℃长期保存的最佳温度,但冷凝状态下自由基的破坏更活跃关联产品Blood DNA LOCKER、RNA LOCKER。
RNA(DNA)保存液
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RNA(DNA)保存液⽆液氮RNA/DNA样品储存液(RNA/DNA keeper)⽆液氮RNA/DNA样品储存液是⼀种在较⾼温度下保存RNA/DNA的溶液,它能迅速渗⼊细胞内,通过⾼效⼀直RNA/DNAse的活性尔保存RNA/DNA的完整性。
常温运输组织样品的最佳选择。
保护RNA/DNA不降解,37度⼀天,25度⼀周,4度⼀个⽉。
⼴泛⽤于邮寄,长途运输保存病毒、细菌、果蝇、植物组织、动物组织、培养细胞、悬浮细胞(⽩细胞、流式细胞仪收集的细胞)等。
●产品说明RNA/DNA样本保存液是⼀种⽆毒的可直接使⽤的样品保存液,其原理是抑制RNA/DNAse活性,保护新鲜组织样本⾥的RNA/DNA免受降解。
实验证明,即使对于脾脏等 RNA/DNAse丰富、很难提取到完整 RNA/DNA的组织,也能保证提取效果。
●组分RNA/DNA样本保存液 20 mlRNA/DNA样本保存液 100 ml●形态⽆⾊液体●制品保存室温保存●适⽤范围●RNA/DNAse含量丰富的组织;●需提采集多个样本,且采集时间、空间跨度较⼤;●不⽅便马上提取 RNA/DNA⽽⼜没有液氮或超低温冰箱保存样品;●室温下或只⽤冰的条件下长途运输样品。
使⽤⽅法组织样本:将组织块切成每边不超过 0.5 cm的⼩块(如样品为⾻头,需打碎成⼩块),在室温下浸没于 5-10倍体积的 RNA/DNA样本保存液中即可;菌体/培养细胞:离⼼收集菌体/培养细胞,室温下加⼊离⼼后体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可;⾎液样本:将⾎液样本⽤红细胞裂解液(N9331/N9332)处理后,离⼼收集⽩⾊或淡红⾊沉淀,室温下加⼊沉淀体积的 5-10倍 RNA/DNA样本保存液中即可。
§注意事项:●RNA/DNA样本保存液如出现沉淀,37℃加热振荡混匀。
●加⼊ RNA/DNA样本保存液后,样本不能⽴即置于-20℃或-80℃,要先 4℃置放过夜,待组织充分浸润后再置于低温保存。
新冠病毒核酸检测的唾液样本用什么保存液好?(1)
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新冠病毒核酸检测的唾液样本用什么保存液好?受新冠疫情的影响,病毒样本保存液的市场需求量突然剧增,市面上也相继出现了一批批病毒保存液。
但是这些保存液良莠不齐,有的不能室温保存,增加了保存和运输成本;有的没有灭活病毒作用,增加了检测人员的感染风险;有的甚至保存效果不佳,严重影响了后续检测灵敏度。
现阶段的样本采集大多还是采用拭子采样,但是这种侵入性的样本采集方法颇为“痛苦”,特别不适合儿童或者婴幼儿的采样。
因此国外最近开始大量使用唾液采样代替拭子采样来进行新冠病毒检测了,并且该方法已被证明与当前的拭子采样具有同等的敏感性和特异性。
前段时间就有客户询问能否用我们的RNA样本保存液保存唾液中的病毒样本。
但是考虑到RNA样本保存液通常用于组织样本,对于唾液样本的保存可能不太理想,因此我们专门研发了一款适用于液体样本中病毒RNA保存的新产品——病毒样本保存液。
下面让我们对比一下新研发的病毒样本保存液和RNA样本保存液在唾液样本中病毒RNA保存方面的效果差异。
实验目的:对比病毒样本保存液和RNA样本保存液对唾液样本中病毒RNA的保存效果差异。
实验材料:1.病毒样本保存液(Simgen Cat.No.4112100)2.RNA样本保存液(Simgen Cat.No.4007020)3.Carrier RNA(Simgen Cat.No.4003101)4.新鲜采集的唾液5.电热恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司,DNP-9082)6.旋涡震荡器(越新仪器,XH-C)7.台式离心机(eppendorf Centrifuge5415D)8.超微量分光光度计(Simgen Cat.No.sim100)9.电泳仪(北京六一仪器厂,DYY-6C型)实验方法:用添加了Carrier RNA的唾液与保存液按比例混合,放入37℃恒温箱中,每隔一周提取一次RNA,观察保存液的保存效果。
RNA样本保存液:唾液=3:1病毒样本保存液:唾液=2:11.将混合液上下翻转混合均匀,吸取100μl混合液到RNase-free的1.5ml离心管中,加入300µl裂解液,旋涡振荡数秒混合均匀,室温静置10分钟;2.加入320µl无水乙醇,温和地翻转离心管3~5次混合均匀;3.稍离,吸取液体到核酸纯化柱中,130001.将混合液上下翻转混合均匀,吸取300μl混合液到RNase-free的1.5ml离心管中,13000rpm离心2min;2.吸取上清到新的1.5ml离心管中,加入300µl70%乙醇,温和地翻转离心管3~5次混合均匀;3.稍离,吸取液体到核酸纯化柱中,13000rpm离心30秒,弃滤液;4.在核酸纯化柱中加入600µl Buffer WA,离心弃滤液;5.在核酸纯化柱中加入700µl BufferWBR,离心弃滤液;6.14000rpm离心1分钟去除残留液体;7.将核酸纯化柱置于一个RNase-free的1.5ml离心管中,加入50μl RNase FreeWater,室温静置1分钟,离心洗脱得到RNA。
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非灭活型病毒保存液介绍
一、病毒的特征:
病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA或RNA)型来,必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物。
1.含有单一知种核酸(DNA或RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞道结构,个体微小、
结构简单。
2.在感染细胞的同时或稍后释放其核酸,然后以核酸复制的方式增殖,而不是以二分裂方
式增殖;
3.严格的细胞内寄生性。
病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复
制系统复制新的病毒。
二、非灭活型病毒保存液特点:
1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
2.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等
3.可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
4.可以用柱式病毒DNAout或柱式病毒RNAout提取病毒核酸。
5.采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染。
6.采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率
三、德晟非灭活型病毒保存液成分:
1.保存液成分为:Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA(V),冷冻保护剂、生物缓冲
剂及氨基酸等。
2.多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。
3.牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使
其不易分解,保证病毒的完整性。
4.Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。
5.用于临床流感、禽流感(如H7N9)、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣
原体等标本的采集及运送
四、使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。
咽、鼻拭子最好在发病的头3天采集。
1.在安全柜内本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容
器)。
B型产品已经在旋盖离心管中,可以跳过此步。
2.鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。
以同一拭
子拭两侧鼻孔。
将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
3.咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装
有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
4.直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
5.将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。
同时也将标本有
关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
6.将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器内,拧紧盖,
在容器上标明有关信息。
同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。
二级容器要承受不少于95KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。
所有容器必须印有生物危险标注。
7.将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,
并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。
8.采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。
无-70℃条件的需
在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。
流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。