实验五 卵磷脂的分离与鉴定
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
卵磷脂的溶解性：取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙 醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实 验现象。
4）、卵磷脂的鉴定
4.1 三甲胺的检验
取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及 2～5mL 10%氢氧化钠溶液，放入水浴中加热 15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色 有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶液过滤， 滤液供下面检验。 取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入 1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察 有何现象产生。
三、实验原理、方法和手段
Baidu Nhomakorabea
原理一：蛋黄中卵磷脂含量较多 (10%左右)。卵
磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此
性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙
醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑
磷脂分离。
原理二：
卵磷脂为白色，其所含不饱和脂肪酸易被 空气氧化而呈黄褐色。 卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘 油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热， 可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在 酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷 钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成 无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。从而 完成对卵磷脂的鉴定。
五、实验条件
1、实验材料：1枚鲜鸡蛋/组 2、仪器与器皿：蛋清分离器、恒温水浴锅、 蒸发皿、漏斗、铁架台、磁力搅拌器、天平、 25mL量筒、100mL量筒、干燥试管、玻棒、 小烧杯大小各2个。 3、试剂：95％乙醇、乙醚、丙酮、ZnCl2、无 水乙醇、滤纸、10%氢氧化钠、3% 溴的四氯 化碳溶液、红色石蕊试纸、硫酸氢钾、钼酸 铵溶液
方法一、
蛋黄10g放入洁净的带塞三角瓶中，加入 95%乙醇40ml，搅拌15min后，静置15min； 然后加入10ml的乙醚，搅拌15 min后，静 置15min；过滤；滤渣进行二次提取，加入 乙醇与乙醚(体积比为3：1)的混合液30ml， 搅拌、静置一定时间；第二次过滤，合并 二次滤液，加热浓缩至少量，加入一定量 丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，即得到卵 磷脂粗品。
2）、卵磷脂的纯化
取一定量的卵磷脂粗品，用无水乙醇溶解，得到 约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵磷脂质量的 10% ZnCl2水溶液，室温搅拌0.5h；分离沉淀物， 加入适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h，再用丙 酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白 色腊状的精卵磷脂；干燥；称重。
3）、卵磷脂的溶解性试验
4.4 甘油的检验
作业
1) 卵磷酯的用途？ 2）医药工业中制备卵磷酯的方法？ 3）本实验有哪些步骤可以改进？ 4）文字与照片记录实验过程的重要性？ 5）通风橱的重要性？（可以不作答）
分离、提取、浓缩、纯化 （去杂）、鉴定、分析
4.2 不饱和性检验
4.3 磷酸的检验
取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴 95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂， 观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～ 10min，观察有何变化。 取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸 氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使 卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有 水蒸气放出时，嗅有何气味产生。
六、实验步骤
1）、卵磷脂的提取 方法二、称取10g 蛋黄于小烧杯中，加入温 热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷 却后过滤。如滤液仍然混浊，可再次过滤 至滤液透明。将滤液置于蒸发皿内，于水 浴锅中蒸干（或用加热套蒸干，温度可设 140℃左右），所得干物即为卵磷脂。 （为了减少或尽可能不用乙醚，实验采用 方法二。）
实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、 纯化与鉴定
一、实验目的
掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原
理。
卵磷脂鉴定的方法与原理。
加深了解磷脂类物质的结构和性质。
二、实验内容
磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂， 由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂（phosphoglyceride）；由 神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。 磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂） （PC），其主要作用是控制肝脂代谢，防止脂肪肝的形 成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液 凝结；（3）、磷脂酰丝氨酸（PS）；（4）、 磷脂酰肌 醇（PI）；（5）、 磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂 酰甘油（心磷脂）。 蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯 及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。卵磷脂是生 命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保 护。卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神 经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要 器官。卵磷脂也被誉为 “第三营养素”。
4）、卵磷脂的鉴定
4.1 三甲胺的检验
取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及 2～5mL 10%氢氧化钠溶液，放入水浴中加热 15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色 有无变化，并嗅其气味。将加热过的溶液过滤， 滤液供下面检验。 取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入 1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察 有何现象产生。
三、实验原理、方法和手段
Baidu Nhomakorabea
原理一：蛋黄中卵磷脂含量较多 (10%左右)。卵
磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此
性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙
醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑
磷脂分离。
原理二：
卵磷脂为白色，其所含不饱和脂肪酸易被 空气氧化而呈黄褐色。 卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘 油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热， 可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在 酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷 钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成 无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。从而 完成对卵磷脂的鉴定。
五、实验条件
1、实验材料：1枚鲜鸡蛋/组 2、仪器与器皿：蛋清分离器、恒温水浴锅、 蒸发皿、漏斗、铁架台、磁力搅拌器、天平、 25mL量筒、100mL量筒、干燥试管、玻棒、 小烧杯大小各2个。 3、试剂：95％乙醇、乙醚、丙酮、ZnCl2、无 水乙醇、滤纸、10%氢氧化钠、3% 溴的四氯 化碳溶液、红色石蕊试纸、硫酸氢钾、钼酸 铵溶液
方法一、
蛋黄10g放入洁净的带塞三角瓶中，加入 95%乙醇40ml，搅拌15min后，静置15min； 然后加入10ml的乙醚，搅拌15 min后，静 置15min；过滤；滤渣进行二次提取，加入 乙醇与乙醚(体积比为3：1)的混合液30ml， 搅拌、静置一定时间；第二次过滤，合并 二次滤液，加热浓缩至少量，加入一定量 丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，即得到卵 磷脂粗品。
2）、卵磷脂的纯化
取一定量的卵磷脂粗品，用无水乙醇溶解，得到 约10% 的乙醇粗提液，加入相当于卵磷脂质量的 10% ZnCl2水溶液，室温搅拌0.5h；分离沉淀物， 加入适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌1h，再用丙 酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白 色腊状的精卵磷脂；干燥；称重。
3）、卵磷脂的溶解性试验
4.4 甘油的检验
作业
1) 卵磷酯的用途？ 2）医药工业中制备卵磷酯的方法？ 3）本实验有哪些步骤可以改进？ 4）文字与照片记录实验过程的重要性？ 5）通风橱的重要性？（可以不作答）
分离、提取、浓缩、纯化 （去杂）、鉴定、分析
4.2 不饱和性检验
4.3 磷酸的检验
取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴 95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂， 观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～ 10min，观察有何变化。 取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸 氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使 卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有 水蒸气放出时，嗅有何气味产生。
六、实验步骤
1）、卵磷脂的提取 方法二、称取10g 蛋黄于小烧杯中，加入温 热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷 却后过滤。如滤液仍然混浊，可再次过滤 至滤液透明。将滤液置于蒸发皿内，于水 浴锅中蒸干（或用加热套蒸干，温度可设 140℃左右），所得干物即为卵磷脂。 （为了减少或尽可能不用乙醚，实验采用 方法二。）
实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、 纯化与鉴定
一、实验目的
掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原
理。
卵磷脂鉴定的方法与原理。
加深了解磷脂类物质的结构和性质。
二、实验内容
磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂， 由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂（phosphoglyceride）；由 神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。 磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂） （PC），其主要作用是控制肝脂代谢，防止脂肪肝的形 成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液 凝结；（3）、磷脂酰丝氨酸（PS）；（4）、 磷脂酰肌 醇（PI）；（5）、 磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂 酰甘油（心磷脂）。 蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯 及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。卵磷脂是生 命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保 护。卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神 经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要 器官。卵磷脂也被誉为 “第三营养素”。