实验三.天然药物化学成分的定性鉴别
天然药化常见的鉴别反应
自然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一 \三苗类的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于乙酸酎中，加浓硫酸-乙酸酎(1 : 20 )数滴，可产生黄■＞红一紫一蓝等颜色变化,最终褪色。
2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化铀的氯仿溶液(或三氯化铺饱和的氯仿溶液)，干燥后60℃-70℃加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乏段乙醇溶液，加热至100℃,呈些，渐渐变为紫色。
4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。
5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。
(二卜留体类化合物的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酊(1 : 20 )数滴，可产生红→紫—蓝—绿一污绿等颜色变化,最终褪色。
也可将样品溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。
2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%至数维的氯仿溶液，干燥后60°C~70°C力口热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60℃ ,呈红色,渐渐变为紫色。
4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。
5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。
二、强心甘的颜色反应1.Cl7位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心昔在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。
中药材的化学成分如何分析鉴定
中药材的化学成分如何分析鉴定中药材是我国传统医学的重要组成部分，其药效的发挥往往依赖于其中所含的各种化学成分。
准确分析和鉴定中药材中的化学成分，对于保证中药材的质量、安全性和有效性，以及深入研究中医药理论和开发新药都具有至关重要的意义。
那么，中药材的化学成分究竟是如何分析鉴定的呢？首先，我们需要对中药材进行样品的采集和预处理。
采集的样品要具有代表性，能够反映出该药材的整体特性。
采集后，要对样品进行清洁、干燥、粉碎等预处理，以便后续的分析操作。
在分析鉴定方法中，色谱法是应用较为广泛的一种。
其中，高效液相色谱法（HPLC）能够有效地分离和检测中药材中的各种化学成分。
它通过将样品溶液注入色谱柱，不同的成分在柱子中的保留时间不同，从而实现分离。
然后，通过检测器检测出各成分的含量。
气相色谱法（GC）则适用于挥发性成分的分析，比如一些精油类成分。
质谱法（MS）在中药材化学成分分析中也发挥着重要作用。
它可以测定化合物的分子量和结构信息。
与色谱法联用，如气相色谱质谱联用（GCMS）和液相色谱质谱联用（LCMS），能够更准确地鉴定化学成分。
除了色谱和质谱法，光谱法也是常用的手段。
紫外可见分光光度法（UVVis）可用于检测具有特定吸收波长的成分。
红外光谱法（IR）能反映出分子的官能团信息，有助于化合物的结构鉴定。
在进行化学成分分析之前，往往需要进行提取和分离工作。
常用的提取方法包括溶剂提取法，如水提、醇提等。
提取后的溶液通常需要进一步分离纯化，以获得单一的化学成分。
分离方法有萃取法、沉淀法、结晶法等。
对于一些复杂的中药材，可能需要多种分析方法相结合，才能全面准确地鉴定其中的化学成分。
同时，还需要结合化学分析和生物活性测定。
例如，通过测定某种化学成分对特定细胞或生物体的作用，来验证其药理活性。
另外，现代的分析技术也在不断发展和创新。
比如，核磁共振法（NMR）能够提供化合物的详细结构信息；毛细管电泳法（CE）对于带电成分的分离具有独特优势。
天然药物分离实验报告
实验名称：天然药物化学成分的提取与分离实验日期：2023年10月15日实验地点：化学实验室实验目的：1. 学习并掌握天然药物化学成分的提取与分离方法。
2. 提高对天然药物化学成分理化性质的认识。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析和处理能力。
实验原理：天然药物化学成分提取与分离实验主要依据相似相溶原理和分子极性差异。
通过选择合适的溶剂和分离技术，将天然药物中的有效成分提取出来，并进一步纯化。
实验材料：1. 植物药材：丹参2. 溶剂：甲醇、水、氯仿、乙酸乙酯3. 分离工具：漏斗、滤纸、烧杯、锥形瓶、旋转蒸发仪、硅胶柱4. 其他：NaOH、Na2CO3、NaHCO3、氨水、硅胶薄层板、紫外灯实验步骤：1. 药材处理：将丹参药材粉碎，过筛，取适量药材置于烧杯中。
2. 溶剂提取：1. 将药材与甲醇以1:10的比例混合，超声提取30分钟。
2. 过滤，收集滤液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。
3. 将浓缩液依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，收集各萃取液。
3. 硅胶柱层析：1. 将硅胶柱预处理，依次加入氯仿、乙酸乙酯，调节流速。
2. 将萃取液上柱，待液面降至硅胶层表面时，用氯仿-乙酸乙酯梯度洗脱。
3. 收集各洗脱液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。
4. 薄层色谱鉴定：1. 将各浓缩液点样于硅胶薄层板上，用氯仿-乙酸乙酯为展开剂进行展开。
2. 显色后，紫外灯下观察斑点，记录Rf值。
5. 含量测定：1. 根据薄层色谱斑点Rf值，确定各成分的纯度。
2. 采用高效液相色谱法测定各成分含量。
实验结果：1. 通过溶剂提取，从丹参药材中成功提取出多种化学成分。
2. 通过硅胶柱层析，将提取的化学成分进一步分离。
3. 薄层色谱鉴定结果显示，分离得到的化学成分主要为丹参酮类化合物。
4. 高效液相色谱法测定结果显示，各成分含量较高，纯度较高。
实验结论：1. 该实验成功提取和分离了丹参中的有效成分，为天然药物的开发和应用提供了实验依据。
2. 通过实验，掌握了天然药物化学成分的提取与分离方法，提高了实验操作技能。
【精品课件】天然药物化学成分的提取分离与鉴定
鉴定
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2020/10/31
【精品课件】天然药物化学成分的提 取分离与鉴定
¡ 第一节 有效成分的提 取与分离 一、有效成分的提取 （一）溶剂提取法
•溶剂提取法
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•溶
•溶
•提
•解
•剂
•取
•规
•类
•方
•律
•型
•法
【精品课件】天然药物化学成分的提 取分离与鉴定
¡ 测定范围：波数200～400nm 之间 ¡ 作用： ¡ 提供基本骨架信息; ¡ 样品中杂质的测定 ¡ 定量分析 ¡ 特点：
¡ 液态样品才能测定； ¡ 常规紫外光谱仪价格低廉；
¡ 样品用量少（只需5-10 μg）
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【精品课件】天然药物化学成分的提 取分离与鉴定
•紫外光谱(Ultra-Violet, UV)
五、大孔吸附树脂法
•大孔吸附树脂法
•分离原理
•影响分离的因素 •洗脱剂的选择
•应用
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【精品课件】天然药物化学成分的提 取分离与鉴定
六、凝胶色谱法
1.分类 2.分离原理 3.应用
七、高效液相色谱法 八、气相色谱法
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•岛津GC2010
【精品课件】天然药物化学成分的提 取分离与鉴定
¡ 生色团 产生紫外吸收的不饱和基团，如C=C,
C=O, O=N=O等；
¡ 助色团：其本身是饱和基团（常含有杂原子），
它连到生色团上时，能使后者吸收波长变长或 吸收强度增加，如-OH, -NH2, -Cl等；
¡ 深色位移：由于基团取代或溶剂效应，最大吸
收波长变长，也叫红移（red shift）；
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法天然药物是指从动植物、矿物等自然产物中提取的具有药用价值的物质。
它们广泛存在于自然界中，具有活性成分丰富、毒性小、作用稳定等特点，因此受到了广泛的研究和应用。
在天然药物化学成分的提取、分离和鉴定过程中，色谱法是一种非常重要的方法。
色谱法运用了物质在固相（吸附、分配、离子交换）和液相（逆相、大小分、离子对）不同相上的分配行为，通过样品分子在固定相与移动相之间的差异与相互作用，实现目标物质的分离和鉴定。
常用的色谱法主要有层析色谱、气相色谱和液相色谱。
层析色谱是天然药物化学成分分离方法中最常用的一种。
它利用固体材料（如硅胶、氧化铝、活性炭等）作为分离介质，将样品分子按照一定的物理化学性质（如极性、分子量、酸碱性等）进行分离。
常用的层析色谱技术有薄层层析、柱层析和高效液相层析等。
气相色谱法（GC）是一种高效的物质分离和鉴定方法，常用于分析挥发性和蒸气压较高的物质。
在气相色谱中，样品被蒸发并转化为气相，然后通过固定相的柱子，利用挥发物在固定相和流动相间的分配行为进行分离和鉴定。
液相色谱法（LC）是一种常用的分离和鉴定方法，常用于分析溶解性较好的天然药物成分。
在液相色谱中，样品被溶解在流动相中，通过样品分子与固相的相互作用，实现各种化合物的分离和鉴定。
除了色谱法，还可以结合其他技术对天然药物成分进行分离和鉴定。
例如，质谱法结合色谱法可以对样品进行结构分析；核磁共振技术可以用于大分子的鉴定和结构分析；红外光谱和紫外光谱等光谱学方法可以进行成分的快速鉴定等。
总之，色谱法是天然药物化学成分提取、分离和鉴定的一种重要方法，通过对样品分子在不同相上的分离行为进行分析，实现对天然药物活性成分的鉴定和分离。
此外，还可以结合其他技术方法，如质谱法、核磁共振技术、光谱学等，对天然药物成分进行全面的分析和鉴定。
天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法
气相色谱-质谱联用法通过气相色谱将混合物中的各组分分离，然后将分离后的组分引入质谱仪中进行检测和鉴 定。该方法可用于分析挥发性成分、脂肪酸、酯类等复杂天然药物化学成分。
04 色谱法在天然药物化学成 分提取分离中的应用
柱色谱法
原理
利用不同物质在固定相和流动相 之间的分配系数差异进行分离。
应用
常用于分离和纯化天然药物中的 脂溶性成分，如生物碱、黄酮类
化合物等。
步骤
装柱、上样、洗脱、收集、检测。
薄层色谱法在天然药物化学成分分离中的应用
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间的吸附和分 配行为差异进行分离。
应用
常用于分离和鉴定天然药物中的水溶性成分，如 多糖、氨基酸等。
步骤
制备薄层板、点样、展开、显色、扫描和鉴定。
感谢您的观看
指纹图谱技术有助于评估天然药物的质量稳定性，发现可能 的掺杂物或假冒伪劣产品，提高产品的可追溯性和安全性。
多指标质量控制
多指标质量控制是指同时考虑多个指 标来评估天然药物的质量，包括化学 成分的含量、纯度、稳定性等。
通过多指标质量控制，可以更全面地 评估天然药物的质量，确保产品的质 量和疗效的稳定性。
详细描述
高效液相色谱法采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了快速、高效的分离和检测。 该方法可用于分离和鉴定各种类型的天然药物化学成分，如挥发油、黄酮类、生物碱类等。
气相色谱-质谱联用法
总结词
气相色谱-质谱联用法是一种将气相色谱的高分离效能与质谱的高鉴别能力相结合的方法，适用于复杂天然药物 化学成分的分离和鉴定。
原理
利用溶剂将天然药物中的有效成 分溶解出来，达到提取目的。
操作方法
化学分析之中草药成分一般鉴别方法
中草药主要来源于植物。
植物的化学成分较复杂，有些成分是植物所共有的，如纤维素、蛋⽩质、油脂、淀粉、糖类、⾊素等。
有些成分仅是某些植物所特有的，如⽣物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。
各类化学成分均具有⼀定的特性，⼀般可由药材的外观、⾊、嗅、味等作为初步检查判断的⼿段之⼀。
如药材样品折断后，断⾯不油点或挤压后有油迹者，多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有特殊⽓味者，⼤多含有挥发油、⾹⾖精、内酯；有甜奈者多含糖类；味若者⼤多含⽣物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等。
中草药所含化学成分均为多类的混合物，分析时常常互相⼲扰，不易得到正确结果。
因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，再⽤各类成分的鉴别反应加以鉴别。
（⼀）鉴别注意事项 1．根据各灰成分不同性质，选⽤适宜的溶剂提取，以保证等成分能被提取出来。
2．检品提取液的浓度应⾜以达到各该反应的灵敏度。
3．检品提取液的酸碱度（pH）值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。
相差甚⼤时应事先调节。
4．提取液较深时，常易影响观察鉴别反应的效果，此时可适当稀释，或进⼀步提纯。
5．鉴别反应时应注意防⽌多类成分的相互⼲扰，以免出现假阳性，或颜⾊不正等情况。
在化学鉴别的同时，做空⽩试验和对照试验（⽤已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照）。
6．在鉴别试验中，如果某⼀类成分的⼏个鉴别反应结果不⼀致时（即有的呈阳性反应，有的呈阴性）则应进⾏全⾯分析。
⾸先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专⼀反应，否则应检查其他类成分能否产⽣该反应，从多⽅⾯加以判断。
但也应注意，某些反应只能对某⼀类成分中的某个化学基团呈性反应，如检查黄酮类的盐酸――镁粉试验，它只对黄酮类中的羟基黄酮类（黄酮醇类）反应明显，其余类的黄酮类则不甚明显，但也不能轻易否定不是黄酮类，为了避免孤⽴和⽚⾯的下结论，⼀定要全⾯考虑综合分析。
天然药物化学与鉴定的实验报告总结
天然药物化学与鉴定的实验报告总结In this report, we will summarize the experimental findings and observations from the study on natural medicine chemistry and identification. This research aimed to explore the chemical properties and identify different compounds in natural medicines. The analysis involved a range of techniques such as chromatography, spectroscopy, and mass spectrometry.本报告旨在总结对天然药物化学和鉴定的实验结果和观察。
这项研究的目标是探索天然药物的化学性质，并确定其中不同的化合物。
分析工作涉及到一系列技术，如色谱法、光谱学和质谱。
The first step of the experiment was the extraction of natural compounds from plant samples. Various solvent systems were employed to ensure efficient extraction of nonpolar and polar compounds. These extracts were then subjected to further purification using column chromatography or liquid-liquid extraction techniques.实验的第一步是从植物样品中提取天然化合物。
采用了多种溶剂系统以确保非极性和极性化合物的高效提取。
天然药物化学成分提取分离鉴定方法和技术色谱法
21
常用旳硅胶吸附剂
粒径：200-300目 种类：硅胶G——硅胶+粘合剂煅石膏
硅胶GF254——具有荧光物质 硅胶H ——不含粘合剂煅石膏 硅胶HF254 ——具有荧光物质
检验
表面光滑平整，均匀，无杂质
25
操作技术—活化
涂布后旳薄层先在室温下阴干，至完全干透后，
在使用前置合适温度烘烤一定时间进行活化，然
后置干燥器中备用。
硅胶
105℃-110℃
30-60min
氧化铝 105℃-110℃
30min
裂开旳薄层板不能使用!
26
操作技术——点样
▪ 配制样品旳溶剂具高度挥发性和尽量非极性，不然易 使斑点扩展。
影响吸附强弱旳原因： 1、流动相：水＞甲醇或乙醇＞丙酮＞氯仿 ＞稀氨水＞甲酰胺; 2、分子构造：a、形成氢键数目多，吸附 能力强。b、形成份子内氢键，吸附力减弱。 C、芳香化合物中，共轭双键多，吸附牢。
16
课本第33页
形成氢键旳数目
化合物构造对 聚酰胺吸附作 用旳影响
成键基团位置
双键旳数目
分子内氢键
► 多数采用直线形上行展开，薄层板水平角度以75 为最佳。
展开剂要接触到吸附剂 下沿，但切勿接触到样 点（0.5cm左右高度）。
盖上盖子，展开。
观察展开情况。
取出薄层板 29
预饱和中
展开中
预防 边沿效应
30
操作技术——显色
观察措施：日光、荧光、显色。
❖ 本身带有颜色
中药化学和天然药物化学实验指导
中药化学和天然药物化学实验指导实验一：中药提取与分离目的：了解中药提取与分离的基本原理和方法，熟悉提取过程和分离技术。
实验步骤：1. 准备工作：-准备所需中药材和溶剂。
-研磨中药材为粉末或切碎。
-配置适当浓度的溶剂。
2. 提取操作：-将中药材加入溶剂中，并进行适当的浸泡时间。
-进行反复提取，可采用常规提取法、超声波辅助提取等。
-过滤提取液，获得提取物。
3. 分离操作：-使用适当的分离技术，如萃取、蒸馏、结晶等。
-监控分离过程中产物的纯度和质量。
4. 实验记录与结果分析：-记录实验过程中的观察现象和操作步骤。
-对提取物和分离产物进行性质描述和分析。
实验二：天然药物成分鉴定目的：学习天然药物成分的鉴定方法，掌握常用的色谱技术和光谱分析方法。
实验步骤：1. 准备工作：-准备待测天然药物样品。
-准备色谱柱和相关试剂。
2. 色谱分析：-选择适当的色谱技术，如薄层色谱、气相色谱或液相色谱等。
-进行样品的预处理和适当的萃取操作。
-运用色谱技术对样品进行分离和检测。
3. 光谱分析：-利用紫外可见光谱、红外光谱、质谱等技术进行结构鉴定。
-根据光谱数据和参考文献比对，确定天然药物中的化学成分。
4. 实验记录与结果分析：-记录实验过程中的观察现象和操作步骤。
-对分析结果进行解释和分析，判断样品中存在的化学成分。
注意事项：1. 在操作中要注意安全，避免有毒物质的接触和误食。
2. 注意实验仪器的正确使用和维护，以保证实验结果的准确性。
3. 实验前要详细阅读实验指导，了解实验步骤和注意事项。
4. 鉴于中药提取和天然药物分析的复杂性，建议在有经验的老师或指导下进行实验。
以上是中药化学和天然药物化学实验的简要指导。
具体的实验步骤和条件可根据教学需求和实验设备的可用性进行调整和完善。
探究天然药物化学成分
探究天然药物化学成分天然药物是指从植物、动物或矿物等自然界的材料中提取的具有药理活性的化合物。
它们通常具有较低的毒性和较少的副作用，因此受到了广泛的关注和研究。
天然药物的化学成分非常复杂，包括了多种类型的化合物，如碱性化合物、酚类、醇类、酮类、醛类等。
这些化合物在药物治疗中起着不同的作用和作用机制。
天然药物的化学成分可以通过多种方法进行分离和提取，如溶剂提取、蒸馏、萃取、结晶等。
其中最常用的方法是溶剂提取，即将药材经过研磨后通过某种溶剂提取其中的有效成分。
不同的溶剂对不同的化合物具有不同的溶解度，因此选择合适的溶剂是十分重要的。
天然药物的化学成分研究主要是通过色谱法和质谱法进行的。
色谱法可以将化合物分离并测定其相对含量，常用的色谱方法有薄层色谱、气相色谱和高效液相色谱等。
而质谱法可以确定化合物的分子量和结构，常用的质谱方法有质子核磁共振（NMR）、质谱（MS）等。
通过对天然药物的化学成分进行研究，可以了解其药理活性和作用机制。
青蒿素是一种从青蒿中提取的抗疟疾药物，经过分离和提取后可以发现它的主要化学成分是一种叫做青蒿素的萜类化合物。
青蒿素通过与疟原虫中的铁离子结合而发挥抗疟疾的作用。
通过研究天然药物的化学成分还可以探索新的药物开发途径。
曲安奈德（Cordycepin）是一种从虫草菌属真菌中分离出的生物碱化合物，具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节等多种药理活性。
近年来，曲安奈德被认为是一种潜在的抗癌药物，并吸引了很多研究人员的兴趣。
天然药物的化学成分研究对于深入了解其药理活性和开发新的药物具有重要的意义。
随着科学技术的发展，相信会有更多天然药物的化学成分被鉴定和利用，为人类健康做出更大的贡献。
实验三.天然药物化学成分的定性鉴别
实验三、天然药物化学成分的定性鉴别一、实验目的1.通过实验掌握常见几类化学成分的鉴别特征；2.熟悉各类化学成分定性鉴别的意义；3.了解各类化学成分定性鉴别的一般规律和方法；二、实验原理化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应，作为鉴定中药品种的手段。
优质中药的专属性成分，也可作为质量评价的特征之一。
在对中药进行化学定性分析时，可用其提取液、粉末或切片等来进行。
如将化学试剂直接加到中药表面、切片或粉末上，观察产生的结晶（用显微镜观察）以及特殊的颜色反应；取切片或粉末也可装置在玻片或滤纸上，滴加相应的试剂进行直接观察；取适量中药粉末于小试管中，加适当溶剂提取其化学成分，然后将溶液滴于玻片上、滤纸上或加入小试管中，再滴加一定的化学试剂并观察其现象；利用微量升华法，将中药中可升华的成分分出，加适当的试剂观察其化学反应现象等。
三、仪器、材料与试剂（略）四、实验步骤1.含生物碱类成分中药的鉴定（1）取附子粉末约0.1g置试管中，加乙醇5mL，在水浴上加热20min，时时振摇，滤过，滤液蒸干，加2%醋酸溶液2mL，搅拌，滤过，滤液中加碘化汞钾试液两滴，即发生黄色沉淀。
（2）取延胡索粉末2g置小烧杯中，加0.25mol/L硫酸溶液20mL，振摇片刻，滤过。
取滤液2mL，加1%铁氰化钾溶液0.4mL与1%三氯化铁溶液0.3mL的混合液，即显深绿色，渐变深蓝色，放置后底部有深蓝色沉淀。
另取延胡索粉末0.2g，加稀醋酸溶液5mL，在水浴上加热5min，滤过。
取滤液1mL，加碘化铋钾试液1-2滴，显红棕色；另取滤液1mL，加碘化汞钾试液1-2滴，显淡黄色沉淀。
（3）取黄连粉末置载玻片上，加乙醇1-2滴及30%硝酸一滴，加盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出，加热或放置，结晶消失并显红色。
（4）取槟榔粉末0.5g，加水3-4mL，加5%硫酸溶液一滴，微热数分钟，滤过，取滤液一滴于载玻片上，加碘化铋钾试液一滴，即显混浊，放置后，置显微镜下观察，有石榴红色的球晶或方晶产生。
实验三 中药制剂的理化定性鉴别
实验三中药制剂的理化定性鉴别一、目的要求1 .掌握TLC的鉴别方法。
2. 熟悉中成药分析的理化定性方法。
二、仪器与试药1.双槽层析缸、三用紫外分析仪、紫外分光光度计、分析天平（0.01mｇ）、超声波清洗仪、铺板器、薄层色谱仪、薄层喷雾泵、喷雾瓶与喷雾架、2μL、5μL定量点样毛细管2. 硅胶G、玻璃板10cm×20cm、分析玻璃柱、聚酰胺。
3 大黄对照药材（中国药品生物制品检定所）。
4.胆酸对照品、葛根素（中国药品生物制品检定所）。
5.复方丹参片、银黄口服液、板蓝根颗粒剂、银翘解毒片、一捻金、鼻炎胶囊（市售）。
6. 其他试剂均为分析纯。
三、实验内容（一）化学定性鉴别和紫外分光光度法定性鉴别1. 复方丹参片（1）取本品1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新制的1%香草醛硫酸溶液1~2滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。
[思考：（1）、（2）两法的化学定性原理各是什么？]2. 银黄口服液本品为金银花提取物、黄芩提取物经加工制成的口服液。
（1）取本品1mL，加5%硝酸钠溶液和10%硝酸铝溶液各0.3 mL，生成黄色沉淀，再加氢氧化钠试液使成碱性，沉淀即溶解，溶液显棕红色。
（2）取本品0.1mL，加水10mL摇匀，取溶液2mL，加5%二氯氧化锆1~2滴，溶液显黄色，再加盐酸溶液1~2滴，黄色不褪。
[思考：（1）、（2）两法的化学定性原理各是什么？]3. 板蓝根颗粒剂（1）取本品0.5ｇ，加5mL甲醇使溶解，静置，取上清液点于滤纸上，晾干，置紫外光灯（365nm）下观察，显蓝紫色。
（2）取本品0.5ｇ，加10mL甲醇使溶解，静置，滤过，取滤液1mL，加茚三酮试液0.5mL，置水浴中加热数分钟，显蓝紫色。
[思考：（1）、（2）两法鉴别原理各是什么？]（二）薄层色谱鉴别1. 牛黄解毒片（1）薄层板制备：参看《中国药典》附录。
（2）供试品溶液制备：取本品2片，粉碎，加乙醇10mL超声 30分钟，作为供试品溶液。
第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术
第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术天然药物是指直接从生物体中提取的药用物质，具有广泛的药理活性和较低的毒副作用。
天然药物化学成分的提取分离和鉴定是研究天然药物的重要环节，也是发展新药的基础和关键步骤。
本文将介绍天然药物化学成分提取分离和鉴定的一些常用方法与技术。
首先，天然药物化学成分的提取一般采用溶剂提取法。
常用的溶剂有乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯等。
提取方法可以选择加热回流法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。
此外，还可以采用固相微萃取、纤维素醚膜萃取等现代高效分离方法。
其次，天然药物化学成分的分离一般采用色谱技术。
其中，薄层色谱是常用的初步分离方法，其原理是将物质在吸附剂（如硅胶）上作上升或水平传质运动，通过物质在固定相和流动相中的相互作用而分离。
另外，高效液相色谱（HPLC）是分析与分离天然药物中成分的关键技术之一，其原理是利用高压在固定相上进行溶剂流动相与样品中分离物质的相互作用，以实现对成分的分离并进行检测与定量分析。
最后，天然药物化学成分的鉴定一般采用质谱技术和核磁共振技术。
质谱技术主要包括气相质谱（GC-MS）、液相质谱（LC-MS）等方法，通过对分离物质的质谱图谱进行分析，可以确定分子的质量，推测其结构和推测化学元素的相对丰度。
核磁共振技术可以进一步验证分离物质的结构和组成，通过分析核磁共振图谱，可以推断分离物质的分子式、功能基团及它们之间的关系。
除了以上的方法和技术，还可以结合化学方法、光谱方法、生物活性测试等进行天然药物化学成分的鉴定。
化学方法包括化学试剂反应、物质特色反应等，可以用于对特定官能团的定性定量分析。
光谱方法包括红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、荧光光谱等，可以用于分析物质的化学键和基团。
生物活性测试可以通过对天然药物样品进行一系列的生物学活性筛选与测试，以确定其药理活性和药用价值。
综上所述，天然药物化学成分提取分离和鉴定是一项复杂而重要的工作，涉及多个方法与技术的综合应用。
药学定性鉴别实验报告
实验名称：中药制剂的理化定性鉴别实验目的：1. 掌握中药制剂的理化定性鉴别方法。
2. 熟悉中成药分析的基本原理和操作步骤。
3. 学会运用分光光度法、升华法、显色反应等实验技术对中药制剂进行定性鉴别。
实验时间：2023年X月X日实验地点：药学实验室实验材料：1. 复方丹参片2. 八角茴香3. 牛黄解毒片4. 黄芩苷对照品5. 酚酞试液6. 香草醛硫酸溶液7. 镁粉8. 盐酸9. 氢氧化钠试液10. 过氧化氢溶液11. 乙醚12. 甲醇13. 乙酸乙酯14. 酚酞15. pH试纸16. BaCl2溶液实验步骤：一、复方丹参片1. 取复方丹参片1片，研细，分次加水少量，搅拌，使溶解。
2. 取上清液，用分光光度法测定其吸光度，与标准品进行比较，鉴定其成分。
二、八角茴香挥发油1. 取八角茴香果实，用压榨法提取挥发油。
2. 将提取的挥发油进行定性定量分析，鉴定其主要成分反式茴香脑、茴香醛等。
3. 利用水蒸气蒸馏法提取挥发油，计算挥发油含量。
三、牛黄解毒片1. 取牛黄解毒片1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物加新制的1%香草醛硫酸溶液1-2滴，液滴边缘渐显玫瑰红色，鉴定冰片。
2. 取牛黄解毒片6片，研细，加乙醇10ml，温热10分钟，滤过，取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸，加热，即显红色；另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30%过氧化氢溶液，红色不消失，加酸成酸性时，则红色变为黄色，鉴定黄芩和大黄。
3. 取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
取牛黄解毒片4片，研细，加乙醚30ml，超声处理15min，滤过，弃去乙醚，滤渣置水浴上挥尽乙醚，加甲醇30ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，滴加盐酸调节pH值为2-3，加乙酸乙酯30ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml，使溶解，作为供试品溶液。
吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以4%醋酸钠的比色板上，用紫外分光光度计测定吸光度，比较二者吸光度，鉴定黄芩苷。
天然药物化学实验
实验一天然产物化学成分系统预试验天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。
这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。
或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。
一、实验目的与要求掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。
二、基本原理利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。
由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。
三、实验内容：利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。
1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
*在试管进行，△在滤纸或硅胶CMC-Na薄层板上进行，下同。
糖鉴定（1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。
①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。
溶液II：硫酸。
取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。
（2）斐林试剂检查还原糖。
溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。
溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。
取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。
如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。
或者直接用高效液相色谱看色谱图。
酚类鉴定试剂（1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。
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实验三、天然药物化学成分的定性鉴别
一、实验目的
1.通过实验掌握常见几类化学成分的鉴别特征；
2.熟悉各类化学成分定性鉴别的意义；
3.了解各类化学成分定性鉴别的一般规律和方法；
二、实验原理
化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应，作为鉴定中药品种的手段。
优质中药的专属性成分，也可作为质量评价的特征之一。
在对中药进行化学定性分析时，可用其提取液、粉末或切片等来进行。
如将化学试剂直接加到中药表面、切片或粉末上，观察产生的结晶（用显微镜观察）以及特殊的颜色反应；取切片或粉末也可装置在玻片或滤纸上，滴加相应的试剂进行直接观察；取适量中药粉末于小试管中，加适当溶剂提取其化学成分，然后将溶液滴于玻片上、滤纸上或加入小试管中，再滴加一定的化学试剂并观察其现象；利用微量升华法，将中药中可升华的成分分出，加适当的试剂观察其化学反应现象等。
三、仪器、材料与试剂（略）
四、实验步骤
1.含生物碱类成分中药的鉴定
（1）取附子粉末约0.1g置试管中，加乙醇5mL，在水浴上加热20min，时时振摇，滤过，滤液蒸干，加2%醋酸溶液2mL，搅拌，滤过，滤液中加碘化汞钾试液两滴，即发生黄色沉淀。
（2）取延胡索粉末2g置小烧杯中，加0.25mol/L硫酸溶液20mL，振摇片刻，滤过。
取滤液2mL，加1%铁氰化钾溶液0.4mL与1%三氯化铁溶液0.3mL的混合液，即显深绿色，渐变深蓝色，放置后底部有深蓝色沉淀。
另取延胡索粉末0.2g，加稀醋酸溶液5mL，在水浴上加热5min，滤过。
取滤液1mL，加碘化铋钾试液1-2滴，显红棕色；另取滤液1mL，加碘化汞钾试液1-2滴，显淡黄色沉淀。
（3）取黄连粉末置载玻片上，加乙醇1-2滴及30%硝酸一滴，加盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出，加热或放置，结晶消失并显红色。
（4）取槟榔粉末0.5g，加水3-4mL，加5%硫酸溶液一滴，微热数分钟，滤过，取滤液一滴于载玻片上，加碘化铋钾试液一滴，即显混浊，放置后，置显微镜下观察，有石榴红色的球晶或方晶产生。
2.含酚为和鞣质类成分中药的鉴定
（1）取狗脊粉末2g，加水30mL，加热15min，滤过。
分取滤液2mL，加1%三氯化铁试液，呈淡绿色；加铁氰化钾-三氯化铁试液，呈蓝黑色沉淀；加明胶试液，产生混浊或沉淀。
（2）取金樱子粉末5g，，加水50mL，置60℃水浴上加热15min，立即滤过。
取滤液1mL，加碱性酒石酸铜试液4-5滴，在水浴中加热5min，产生红棕色沉淀；取滤液1mL，加1%三氯化铁溶液1-2滴，即显暗紫色。
（3）取诃子果肉粉末3g，加水30mL，50℃水浴温热3-5min，滤过。
取滤液2mL，加三氯化铁试液一滴，呈深蓝色和生成沉淀。
另取滤液2mL，加氯化钠明胶试液一滴，生成白色沉淀。
3.含黄酮类成分中药的鉴定
（1）取黄芩粉末2g，置100mL锥形瓶中，加乙醇溶液20mL，置水浴上回流15min，滤过。
取滤液1mL，加10%醋酸铅试液2-3滴，即发生橘黄色沉淀；另取滤液1mL，加镁粉少量与盐酸溶液3-4滴，显红色。
4.含蒽醌类成分中药的鉴定
（1）取决明子粉末0.5g，加稀硫酸溶液20mL与氯仿10mL，微沸回流15min，分取氯仿层，加入氢氧化钠试液10mL，振摇，放置，碱液层显红色；若显棕色，则分取碱液层加过氧化氢试液1-2滴，再置水浴中加热4min，即显红色。
（2）取番泻叶粉末0.1g，加50%硫酸溶液10mL，沸水浴上加热水解15min，放冷，用氯仿或乙醚萃取，分取氯仿层或乙醚层，加4%氢氧化钠溶液提取，碱液加3%过氧化氢溶液两滴，沸水浴上加热4min，出现明显的红色。
5.含皂苷类成分中药的鉴定
（1）取知母粉末2g，加乙醇5mL，振摇后放置20min，吸取上清液1mL，于水浴上蒸干，残渣加浓硫酸溶液两滴，初显黄色，继变红色、紫堇色，最后呈棕色。
（2）分别取人参和三七粉末少许，放于白瓷板上，然后滴加浓硫酸溶液1-2滴，人参呈棕褐色，三七呈血红色。
6.含木质素类成分中药的鉴定
（1）取厚朴粗粉3g，加氯仿30mL，回流30min，滤过。
取15mL氯仿提取液，蒸去氯仿，残渣加10mL乙醇溶液，取滤液各1mL，分别加5%三氯化铁的甲醇溶液（1:1）一滴显棕黑色或蓝黑色；加硝酸汞试剂一滴，产生棕色沉淀。
7.含内酯类成分中药的鉴定
（1）取白术粗粉2g，置100mL具塞锥形瓶中，加乙醚20mL，连续振摇10min，滤过。
取滤液少许，挥干后加醋酐和硫酸溶液呈蓝紫色至棕色；取滤液2mL，置蒸发皿中，待乙醇挥散后，加5%对二甲基苯甲醛的10%硫酸溶液1mL，显玫瑰红色，于100℃烘5min，变为紫色。
8.含挥发油类成分中药的鉴定
（1）取薄荷粉末少许，经微量升华得油状物，加硫酸溶液两滴及香草醛结晶少量，初显黄色至橙黄色，再加水一滴，即变紫红色。
（2）取丁香粉末1g，置小试管中，加氯仿3mL，浸渍5min，吸取氯仿浸液2-3滴于载玻片上，速加3%氢氧化钠饱和溶液一滴，加盖玻片，片刻即有簇状细针状丁香酚钠结晶产生。
9.含树脂类成分中药的鉴定
（1）取安息香约0.1g，加乙醇5mL，研磨，滤过，滤液加5%三氯化铁乙醇溶液0.5mL，即显亮绿色，后变为黄绿色。
（2）取乳香粗粉0.05g，置小蒸发皿中，加入苯酚-四氯化碳（1:5）溶液一滴，即显褐色或紫色。
取本品1g，研碎，加入甲醇10mL，振摇24h，滤过。
取滤液5mL，蒸干，残渣加稀硫酸溶液10mL后转移到分液漏斗中，用氯仿振摇提取2次，每次10mL，合并氯仿液，并浓缩至除尽氯仿，残渣加醋酸1mL溶解，再加醋酐-浓硫酸（19:1）试剂1mL，溶液很快变成紫色（检查乳香酸）。
（3）取没药粉末加硝酸，呈紫色。
取没药粉末0.1g，加细沙0.5g，研匀，置试管中，加乙醚振摇提取，将提取液置蒸发皿中，待乙醚挥发后，残留有一层薄膜，用溴或发烟硝酸蒸气接触皿底残渣，即显紫红色。
10.含氨基酸类成分中药的鉴定
（1）取全蝎粉末1g，加甲醇20mL，冷浸过夜，滤过，将渺滤液浓缩至5mL左右，作为供试品溶液。
将此液分别点于两张滤纸上，分别喷0.5%茚三酮溶液及0.2%吲哚醌溶液，置110℃红外灯下烘烤，前者出现紫色斑点，后者出现蓝黑色斑点。
（2）取鹿茸粉末0.1g，加水4mL，置水浴中加热15min，放冷，滤过。
取滤液1mL，加2%茚三酮溶液3滴，摇匀，加热煮沸数分钟，显蓝紫色。
另取滤液1mL，加10%氢氧化钠溶液两滴，摇匀，滴加0.5%硫酸铜溶液，显蓝紫色。
11.含强心苷类成分中药的鉴定
（1）取蟾酥粉末0.1g，加氯仿5mL，浸泡1h，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酐少量使溶解，滴加硫酸溶液，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。
（2）取蟾酥粉末0.1g，加甲醇5mL，浸泡1h，滤过，滤液中加对二甲氨基苯甲醛固体少许，滴加硫酸溶液数滴，即显蓝紫色。
12.含多糖类成分中药的鉴定
（1）取茯苓块片或粉末少许，加碘化钾试液数滴，显深红色。
取茯苓粉末0.1g于试管中，加水5mL，煮沸，加碘试液三滴，得黄色溶液，应不显蓝色或紫红色。
取茯苓粉末加α-萘酚及浓硫酸溶液，团块物即溶解，可显橙红色至深红色。
思考题：化学成分定性鉴别有何意义（作用）？。