蛋白质溶液的浓缩方法
蛋白质考题及答案解析
蛋白质结构与功能试题一、问答题：1.影响蛋白质二级结构改变的因素有哪些？参考答案：温度；pH；邻近氨基酸残基的二级结构倾向；肽链中远程肽段的影响；肽段是处于分子表面还是被包埋在分子内部2.如下图所示。
多聚谷氨酸poly (Glu) 是由多个L-Glu聚合形成的多肽链，在pH为3的溶液中能形成a-螺旋构象，当pH升高到7时，则由a-螺旋变为无规卷曲，旋光率陡然下降。
同样，多聚赖氨酸poly (Lys) 在pH为10的溶液中具有a-螺旋结构，当pH降低至7时，旋光率也发生陡然下降，由a-螺旋结构变为无规卷曲。
请解释pH对poly (Glu) 和poly (Lys) 构象变化的影响。
答案要点：pH=3接近Glu g-COOH的p K R (4.07)，侧链基团为质子化不带电荷状态，可形成a-螺旋结构。
其余情况按此思路分析。
Lys e-NH2 p K R 为10.54。
3.胶原蛋白的结构特点（原胶原分子的一级结构和高级结构）1)在体内，胶原蛋白以胶原纤维的形式存在，胶原纤维的基本结构单位是原胶原分子2)每个原胶原分子由三条左手螺旋的a链（a-肽链）组成右手超螺旋结构，每条a链约含1000个氨基酸残基3)a链间靠H-键和范得华力维系，胶原纤维可以通过分子内和分子间的进一步交联增强稳定性4)a链一级结构序列96%遵守(Gly-X-Y)n。
x多为脯氨酸Pro；y多为羟基脯氨酸Hyp或羟基赖氨酸Hly5)胶原蛋白是糖蛋白，少量糖与5-羟赖氨酸(Hyl)残基的碳羟基共价连接6)具有较好的弹性和抗张强度4.形成结构域的意义是什么？参考答案：1)各结构域分别折叠，其动力学上更有利2)结构域自身紧密装配，结构域之间的柔性连接使每个结构域间可以作较大幅度的相对运动3)多个结构域形成的间隙部位往往是蛋白质的功能部位，结构域的相互作用有利于蛋白质分子产生别构效应5.简述三种浓缩蛋白质溶液的方法及原理1)超滤法：将蛋白质样品装入适当的超滤管中，经一定时间离心，溶剂穿过超滤管滤膜流出而使蛋白质溶液得以浓缩2)硫酸铵沉淀法：通过盐析作用使蛋白质在高浓度中性盐中析出而浓缩。
蛋白质浓缩的方法
蛋白质浓缩的方法
蛋白质的浓缩方法有多种，以下是一些常用的方法：
1. 枯燥法（Lyophilization）：通过冻结和真空干燥的方式将蛋白质溶液中的水分去除，从而实现蛋白质的浓缩。
2. 超滤法（Ultrafiltration）：使用超滤膜，根据蛋白质的分子量大小和筛选系数，将蛋白质从溶液中剔除，从而实现浓缩。
3. 水合剂法（Hydrate Method）：在添加水合剂的条件下，通过沉淀或离心的方法将蛋白质沉淀，然后去除上清液，最后将沉淀重悬于适量的缓冲液中。
4. 稀释浓缩法（Dilution-Concentration Method）：将蛋白质溶液用无菌的缓冲液稀释，然后通过凝胶过滤等方法去除杂质和无菌物质，最后将蛋白质溶液使用有限体积的无菌缓冲液重悬，从而实现浓缩。
5. 有机溶剂沉淀法（Organic Solvent Precipitation Method）：在蛋白质溶液中加入适量的有机溶剂，如乙醇、异丙醇等，使蛋白质发生沉淀，然后去除无机溶剂和上清液，最后将蛋白质沉淀重悬于缓冲液中，从而实现浓缩。
请注意，在进行蛋白质浓缩时，应根据具体的实验要求和蛋白质的特性选择合适的浓缩方法，并注意操作的条件和步骤，以保证浓缩效果和蛋白质的稳定性。
蛋白纯化步骤
蛋白纯化步骤引言：蛋白质是生物体内重要的生物大分子，其结构和功能对于维持生命活动至关重要。
为了研究蛋白质的性质和功能，科学家们需要将蛋白质从复杂的混合物中纯化出来。
蛋白纯化是一项复杂而重要的实验步骤，本文将介绍常用的蛋白纯化步骤。
一、细胞裂解和收集蛋白纯化的第一步是将含有目标蛋白质的细胞裂解，并将目标蛋白质收集起来。
常用的细胞裂解方法包括机械破碎、超声波破碎和渗透破碎等。
裂解后，通过离心等方法将蛋白质从其他细胞组分中分离出来。
二、沉淀和上清液分离细胞裂解后蛋白质溶液中可能存在大量杂质，需要通过沉淀与上清液分离的方法去除。
常用的方法包括盐析法、有机溶剂沉淀法和凝胶渗析法等。
这些方法可以根据蛋白质的特性选择合适的杂质去除方法。
三、蛋白质分子量筛选蛋白质纯化过程中，通常需要对蛋白质进行分子量筛选。
这样可以去除低分子量的杂质和蛋白质降解产物。
常用的方法包括凝胶过滤法、凝胶电泳法和离子交换色谱法等。
四、亲和纯化亲和纯化是一种常用的蛋白纯化方法，该方法利用蛋白质与亲和基质之间的特异性相互作用进行纯化。
亲和基质可以是抗体、金属离子、亲和标签等。
通过将亲和基质与目标蛋白质结合，再通过洗脱等步骤将目标蛋白质从杂质中分离出来。
五、离子交换层析离子交换层析是一种基于蛋白质与离子交换基质之间的静电作用力进行纯化的方法。
根据蛋白质的电荷性质，可以选择合适的离子交换基质和缓冲液条件，使目标蛋白质与基质发生相互作用。
通过调整离子浓度和pH值，可以实现目标蛋白质与基质的分离。
六、凝胶过滤层析凝胶过滤层析是一种根据蛋白质的分子量进行纯化的方法。
通过选择合适的凝胶基质和孔径，可以使目标蛋白质从较大分子量的杂质中分离出来。
这种方法适用于蛋白质的富集和浓缩。
七、逆流层析逆流层析是一种根据蛋白质的亲和性进行纯化的方法。
该方法利用逆流层析柱中填充的亲和基质与目标蛋白质之间的特异性相互作用进行纯化。
通过调整流动相的条件，可以实现蛋白质的吸附和洗脱，从而分离目标蛋白质。
蛋白浓缩超滤管使用方法
蛋白浓缩超滤管是一种常用的蛋白质富集和纯化的工具，下面是其使用方法的一般步骤：
准备样品：将待富集或纯化的蛋白质溶液加入超滤管中。
如果样品浓度过低，可以先进行前处理，如沉淀、浓缩等。
运行超滤管：将超滤管放入离心管中，然后进行离心。
离心过程中，样品中的蛋白质会通过滤膜的孔隙逐渐富集和浓缩。
丢弃滤液：将超滤管倒置，将滤液从底部的出口排出。
加入洗涤缓冲液：加入适量的洗涤缓冲液（如PBS、Tris-HCl等）到超滤管中，再进行离心。
丢弃洗涤液：将超滤管倒置，将洗涤液从底部的出口排出。
重复操作：根据需要，可以进行多次富集和洗涤操作，以获得更高的蛋白质富集和纯化效果。
提取蛋白质：将超滤管倒置，使用洗涤缓冲液等提取蛋白质。
蛋白质的工业纯化原理
蛋白质的工业纯化原理
蛋白质的工业纯化原理包括以下几个步骤：
1. 细胞破碎：首先需要将含有目标蛋白质的生物物质（例如细胞、组织等）破碎开，以释放目标蛋白质。
2. 去除杂质：通过一系列的物理和化学方法，去除生物物质中的杂质，如核酸、多肽、小分子化合物等。
3. 分离：利用一些分离技术，例如差速离心、膜过滤、层析等，将目标蛋白质与其他成分分离开来。
4. 纯化：通过多个步骤的纯化操作，如凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析等，进一步提高蛋白质的纯度。
5. 浓缩：利用浓缩技术，将纯化后的蛋白质溶液浓缩到一定的体积，以便后续的处理和利用。
6. 产品检测：对纯化后的蛋白质进行质量检测，包括蛋白质含量、纯度、活性等指标的测定。
7. 产品储存：纯化后的蛋白质通常需要进行冻干或冷冻保存，以保持其稳定性
和长期保存的能力。
总的来说，蛋白质的工业纯化原理是通过多个步骤的处理和分离操作，去除杂质并提高蛋白质的纯度，以获得高质量的蛋白质产品。
盐析蛋白的工艺
盐析蛋白的工艺
盐析蛋白是一种从蛋白质溶液中分离纯化蛋白质的工艺。
它通常包括以下步骤：
1. 提取蛋白质：从原料中提取蛋白质，如鸡蛋、奶制品或植物蛋白。
2. 去除杂质：将提取的蛋白质溶液进行初步处理，去除杂质和不溶性物质。
3. 加盐：向蛋白质溶液中加入盐类，如氯化钠或硫酸铵。
盐的加入可以改变蛋白质的溶解度，促使蛋白质沉淀析出。
4. 沉淀蛋白质：随着盐浓度的增加，蛋白质开始逐渐沉淀。
这时可以通过离心或过滤等方法将沉淀的蛋白质分离出来。
5. 洗涤：对沉淀的蛋白质进行洗涤，去除残留的盐和杂质。
6. 干燥或浓缩：将洗涤后的蛋白质进行干燥或浓缩，得到最终的盐析蛋白产品。
盐析蛋白的工艺可以根据不同的需要进行调整，以获得特定酸碱度、溶解度和纯度的蛋白质产品。
这种工艺适用于食品、医药、生物工程等领域的蛋白质分离和纯化。
浓缩蛋白质溶液（5篇）
浓缩蛋白质溶液(5篇)以下是网友分享的关于浓缩蛋白质溶液的资料5篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。
篇一：浓缩蛋白质溶液丙酮浓缩蛋白溶液步骤操作步骤：1）2）3）4）5）步骤2;1，cold acetone（-20℃）2，1体积样品+4体积冷丙酮；混匀，-20℃过夜3，12000g 离心10分钟4，小心吸去上清5，放在桌上风干，大约20来分钟（自己看着半，剩余的丙酮量不一样，各地方条件也不一样）6，加1乘的sds sample buffer（量自己根据实验目的定），仔细洗离心管远离转轴侧面的管壁（特别对于微量蛋白）。
votex ，煮，冷，上样sds-page 。
加1mL 冷丙酮（-20℃）至200μL 样品溶液，混匀。
-20℃放置2 h。
-4℃离心15 min。
弃去上清液，用丙酮清洗沉淀2-3次。
使沉淀风干，于1-2倍沉淀体积的缓冲液中再悬浮沉淀。
我的步骤：Protocol ：1. 将蛋白样品沸水煮3min ，混匀后离心，取250μL ，加入-20℃预冷的丙酮1mL ，-20℃冰箱静置3h 。
2.-4℃离心（12000r/min）20min ，弃上清（直接倒掉）。
3.200μL 丙酮洗涤沉淀2次。
4. 室温静置风干25min 。
5. 加入裂解buffer 20μL ，votex ，室温静置2min ，加入5μL loading buffer ，沸水煮3min 。
6.12000r/min离心1min ，上样，电泳，考染。
篇二：浓缩蛋白质溶液Protein Desalting/Buffer Exchange ProtocolAll Solulink protein modification protocols require that proteins first be desalted prior to modification. Desalting removes small, interfering amine contaminants from the sample while exchanging the proteins into specially optimized reaction buffers. Solulink recommends the use of Zeba™ Desalt Spin Columns (Pierce Chemical Inc.) for this purpose. Zeba column are available in 2 sizes. The 0.5 ml spin columns are capable of desalting volumes up to 130 ul. The 2 ml size can process sample volumes up to 700 ul (see Figure 1 below). Choose the size column for the appropriate sample volume.NOTE -Zeba™ is a registered trademark of Pierce ChemicalI MPORTANT -Always use 1X Modification buffer pH 7.4to desalt proteins prior to modification and 1X Modification buffer pH 6.0 to desalt proteins after modification. A slightly basic solution (pH 7.4) is required for optimal modification of proteins and a slightly acidic solution (pH 6.0) is required for optimal conjugation of modified proteins.NOTE - larger 2 ml ZebaTM Spin Column do not fit into high-speed microcentrifuges that holds standard 1.5 ml tubes. The larger ZebaTM spin column requires a tabletop or floor-based centrifuge capable of spinning 15 ml conical tubes.0.2 ml 0.5 ml0.4ml 2 mlFigure 1. Zeba TM Desalt Spin Columns (0.5 and 2 ml) used to desalt proteins before and after biotinylation.Materials requiredZeba Desalt Spin Columns (0.5 ml (Cat # 89882) or 2 ml (Cat. # 89889) available from Pierce ChemicalMicrocentrifuge (holds 1.5 ml tubes)T able T op Centrifuge (holds 15 ml conical tubes)P-100 and 1000 pipettesZeba™ Desalt/Buffer Exchange Protocol0.5 ml ZebaTM Spin ColumnColumn Preparation (130 ul max. sample processing volume)1. Remove spin column’s bottom closure and loosen the top cap (do not remove cap).2. Place spin column in a 1.5 ml microcentrifuge collection tube.3. Centrifuge at 1500xg for 1 minute to remove storage solution.4. Place a mark on the side of the column where the compacted resin is slanted upward. Place column in the microfuge with the mark facing outward in all subsequentcentrifugation steps.5. Add 300 ul of 1x Modification buffer (pH 7.4) to the top of the resin bed and centrifuge at 1500xg for 1 minute, discard flow-through from collection tube.6. Repeat step 4 and 5 two additional times, discarding buffer from the collection tube each time.7. Column is now ready for sample loading.Protein Sample Loading1. Place the equilibrated spin column into a new 1.5 ml collection tube, remove cap and slowly apply up to a 130 µl sample volume to the center of the compact resin bed.NOTE- for sample volumes less than 70 µl apply a 15 ul buffer (stacker) to the top of the resin bed after the sample has fully absorbed to ensure maximal protein recovery. Avoid contact with the sides of the column when loading.2. Centrifuge at 1500xg for 2 minutes to collect desalted sample.3. Discard column after use.4. Protein sample is now desalted/buffer exchanged and ready for use.2 ml ZebaTM Spin ColumnColumn Preparation (700 ul max. sample processing volume)1. Twist off the column’s bottom closure and loosen the top cap. Place column in a 15 ml conical collection tube.2. Centrifuge column at 1000xg for 2 minute to remove storage solution.3. Place a mark on the side of the column where the compacted resin is slanted upward. Place column in the centrifuge with the mark facing outward in all subsequent centrifugation steps.4. Add 1ml of 1x Modification buffer (pH 7.4) to the top ofthe resin bed.5. Centrifuge at 1000xg for 2 minute to remove buffer.6. Repeat step 4 and 5 two or three additional times, discarding buffer from the collection tube each time.7. Column is now ready for sample loading.Protein Sample Loading1. Place spin column into a new 15 ml conical collection tube, remove cap and slowly and apply a sample volume (240-700 ul) to the center of the compact resin bed.NOTE- for sample volumes less than 350 µl apply additional buffer (stacker) to the top of the resin bed (i.e. 40 ul) after the sample has fully absorbed to ensure maximal protein recovery. Avoid contact with the sides of the column when loading.2. Centrifuge at 1000xg for 2 minutes to collect desalted sample.3. Discard column after use and retain the desalted protein in the 15 ml conical tube.4. Protein sample is now desalted/buffer exchanged and ready for further use.篇三：浓缩蛋白质溶液TCA-DOC沉淀的蛋白质含量非常低1)一个卷的蛋白质溶液,添加2%的1/100 vol. DOC(Na脱氧胆酸盐、洗涤剂)。
透析相关流程
用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。
将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（视使用的透析袋孔径而定，常用0.45um）聚合物如聚乙二醇（6 000－12 000碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。
也可将吸水剂配成30％－40％浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。
吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。
/experiment/14-1367-5.html一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。
常用的浓缩方法的：1、减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。
2、空气流动蒸发浓缩空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液，表面不断通过空气流；或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室，用电扇对准吹风，使透过膜外的溶剂不沁蒸发，而达到浓缩目的，此法浓缩速度慢，不适于大量溶液的浓缩。
3、冰冻法生物大分子在低温结成冰，盐类及生物大分子不进入冰内而留在液相中，操作时先将待浓缩的溶液冷却使之变成固体，然后缓慢地融解，利用溶剂与溶质融点介点的差别而达到除去大部分溶剂的目的。
如蛋白质和酶的盐溶液用此法浓缩时，不含蛋白质和酶的纯冰结晶浮于液面，蛋白质和酶则集中于下层溶液中，移去上层冰块，可得蛋白质和酶的浓缩液。
4、吸收法通过吸收剂直接收除去溶液中溶液分子使之浓缩。
所用的吸收剂必需与溶液不起化学反应，对生物大分子不吸附，易与溶液分开。
常用的吸收剂有聚乙二醇，聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝胶等，使用聚乙二醇吸收剂时，先将生物大分子溶液装入半透膜的袋里，外加聚乙二醇复盖置于4度下，袋内溶剂渗出即被聚乙二醇迅速吸去，聚乙二醇被水饱和后要更换新的直至达到所需要的体积。
5、超滤法超滤法是使用一种特别的薄膜对溶液中各种溶质分子进行选择性过滤的方法，不液体在一定压力下（氮气压或真空泵压）通过膜时，溶剂和小分子透过，大分子受阻保留，这是近年来发展起来的新方法，最适于生物大分子尤其是蛋白质和酶的浓缩或脱盐，并具有成本低，操作方便，条件温和，能较好地保持生物大分子的活性，回收率高等优点。
13种蛋白质的浓缩方法及应用过程
13种蛋白质的浓缩方法及应用过程浓缩蛋白质是生物化学和生物工程领域中的常见实验操作，它可以分离和浓缩蛋白质的目标分子，提高下游实验的灵敏度和检测效果。
下面将介绍13种常见的蛋白质浓缩方法及其应用过程。
1.直接加浓缩液法：这种方法是将蛋白质溶液直接加入浓缩液中，在高浓度的浓缩液中使蛋白质沉淀，然后通过离心将上清液倒掉，留下蛋白质沉淀。
该方法适用于蛋白质浓度较低、浓缩液和蛋白质之间无明显相互作用的情况。
2.乙醇沉淀法：将蛋白质溶液中加入适量的冷乙醇，使蛋白质沉淀，然后通过离心将上清液倒掉，留下蛋白质沉淀。
该方法适用于大多数蛋白质的浓缩，但对于糖蛋白等极性蛋白质效果较差。
3.磷酸铵沉淀法：将蛋白质溶液中加入磷酸铵，并通过逐渐增加磷酸铵浓度的方式使蛋白质沉淀。
然后通过离心将上清液倒掉，留下蛋白质沉淀。
该方法适用于对蛋白质溶液中的杂质进行除去和蛋白质浓缩。
4.透析法：将蛋白质溶液置于透析袋或膜中，溶液中的小分子物质可以通过透析膜，而蛋白质则被滞留在透析袋或膜中。
通过不断更换新的缓冲液，透析蛋白质的杂质，达到蛋白质的浓缩效果。
5.正交两步纯化法：通过两步纯化的方法，即先使用亲和层析等手段分离目标蛋白质，再使用乙醇沉淀等方法进行浓缩。
该方法可获得高纯度和高浓度的目标蛋白质。
6.冰醋酸沉淀法：将蛋白质溶液中加入适量的冰醋酸，使蛋白质沉淀，然后通过离心将上清液倒掉，留下蛋白质沉淀。
该方法适用于大多数蛋白质的浓缩，但对于糖蛋白等极性蛋白质效果较差。
7.膜超滤法：利用膜的过滤作用，将蛋白质溶液在压力作用下通过膜，小分子物质通过膜孔，而蛋白质则被滞留在膜上，从而实现蛋白质的浓缩。
8.离心滤膜浓缩法：将蛋白质溶液加入装有滤膜的离心管中，通过离心作用剥离溶液中的液相，使蛋白质滞留在滤膜上。
最后通过逆离心将蛋白质从滤膜上洗脱下来，达到浓缩的目的。
9.聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩法：将蛋白质溶液经过聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后将蛋白质从凝胶上切割下来，再使用电泳缓冲液洗脱蛋白质。
冷冻浓缩在生物制药上的应用
冷冻浓缩在生物制药上的应用
冷冻浓缩在生物制药上具有广泛的应用，包括：
1. 储存蛋白质药物：冷冻浓缩可以将蛋白质溶液中的水分去除，使其浓缩，并冷冻保存，以延长药物的稳定性和保存期限。
2. 制备疫苗：冷冻浓缩可以用于制备各种类型的疫苗，包括灭活疫苗、亚单位疫苗和重组蛋白疫苗等。
其中，冷冻浓缩可以去除疫苗产生过程中产生的杂质，提高疫苗的纯度和效力。
3. 生产抗体：冷冻浓缩可以用于生产单克隆抗体和多克隆抗体等抗体制剂。
冷冻浓缩可以提高抗体的浓度，从而提高抗体的效力。
4. 提纯蛋白质：冷冻浓缩可以作为蛋白质提纯的一种方法。
通过冷冻浓缩，可以去除溶液中的杂质，纯化目标蛋白质。
总之，冷冻浓缩在生物制药上的应用非常广泛，可以提高药物的稳定性、纯度和效力，同时也方便了药物的储存和运输。
蛋白质的浓缩方法
蛋白质的浓缩方法目前蛋白浓缩方法基本主要有以下几种：1. 透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。
将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。
也可将吸水剂配成30％－40％浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。
吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。
主要用于更换蛋白质的缓冲液，有透析袋即可，不需要特殊的仪器。
2. 冷冻干燥浓缩法这是浓缩蛋白质的一种较好的办法，它既使蛋白质不易变性，又保持蛋白质中固有的成分。
它是在冰冻状态下直接升华去除水分。
具体做法是将蛋白液在低温下冰冻，然后移置干燥器内（干燥器内装有干燥剂，如NaOH、CaCl2和硅胶等）。
密闭，迅速抽空，并维持在抽空状态。
数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉末。
干燥后的蛋白质保存方便，应用时可配成任意浓度使用。
也可采用冻干机进行冷冻干燥。
在冷冻状态下让扬品种的液体升华3. 吹干浓缩法将蛋白溶液装入透析袋内，放在电风扇下吹。
此法简单，但速度慢，且温度不能过高，最好不要超过15℃。
4. 超滤膜浓缩法此法是利用微孔纤维素膜通过高压将水分滤出，而蛋白质存留于膜上达到浓缩目的。
有两种方法进行浓缩：一种是用醋酸纤维素膜装入高压过滤器内，在不断搅拌之下过滤；另一种是将蛋白液装入透析袋内置于真空干燥器的通风口上，负压抽气，而使袋内液体渗出。
主要针对小体积蛋白质溶液（几ml）此法更不易引起变性，不过得有浓缩器，不是哪个实验室都有的。
5. 凝胶浓缩法选用孔径较小的凝胶，如SephadexG25或G50，将凝胶直接加入蛋白溶液中。
根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。
放入冰箱内，凝胶粒子吸水后，通过离心除去。
6. 浓缩胶浓缩法浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物，具有很强的吸水性能。
每克干胶可吸水120ml～150ml。
蛋白质浓缩问题——超滤浓缩管的使用及保存
二、离心超滤管浓缩样品
2.1 浓缩样品
1、要浓缩的样品含盐量必须0.3M以上，含盐量低的样品须补加到0.3MNaCl。
2、在内管（附有3KD膜）中加入500µl样品，将内管套入外管。
3、对称放置离心管，14520rpm(即14000g)离心。
（离心5min约浓缩2倍，10min约4倍，15min约6倍，20min约8倍，30min约10倍）。
4、离心结束后，将内管倒置套在另一个干净的离心管呢，3880rpm离心min收集浓缩后的样品。
或者用移液器直接吸出内管中的样品。
2.2 浓缩管使用后的处理和保存
1、使用完的浓缩管，立即加入500µl含1MNaCl的缓冲液（此缓冲液与浓缩样品的缓冲液一致），8000rpm离心20min。
2、甩净内管中的盐溶液，将内管放入超纯水中浸泡1h。
3、内管加入超纯水500µl，8000rpm离心5min。
4、甩净内管中的水，加入500µl0.2MNaOH，8000rpm离心20min。
5、甩净内管中的NaOH溶液，用超纯水再8000rpm离心5min。
6、甩净内管中的水，放入含0.2-0.5‰NaN3的生理盐水中。
7、外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。
蛋白质溶液的浓缩方法
蛋白质溶液的浓缩方法1.渗透浓缩法：渗透浓缩法是一种常见的浓缩蛋白质溶液的方法。
这种方法基于溶液和溶剂浓度差异的渗透力，利用半透膜将小分子溶质（如盐、小分子蛋白质）透过，同时阻止大分子溶质（如蛋白质）的通过。
常见的膜材料有聚乙烯醇（PVA）、聚丙烯酰胺（PAM）等。
渗透浓缩法的步骤如下：（1）选择合适的膜材料，将膜组装在浓缩装置上。
（2）将蛋白质溶液加入装置中，通过渗透作用，溶液中的小分子溶质会透过膜，而蛋白质则被滞留在浓缩装置中。
（3）持续向装置中加入纯水或缓冲液，以保持浓缩装置内的水分量，促进蛋白质的浓缩。
（4）根据需要，可以多次重复以上步骤，加速蛋白质的浓缩过程。
2.覆膜浓缩法：覆膜浓缩法是通过将蛋白质溶液覆盖在薄膜上，然后通过薄膜的渗透作用，使溶剂透过薄膜，蛋白质被浓缩的方法。
这种方法适用于小规模的浓缩操作，例如实验室规模的研究。
覆膜浓缩法的步骤如下：（1）选择合适的薄膜材料，如高密度聚乙烯（HDPE）膜。
（2）将膜材料放在容器内，然后将蛋白质溶液倒入容器，覆盖在膜上。
（3）通过薄膜的渗透作用，溶剂会透过膜，蛋白质被滞留在薄膜上。
（4）可以将浓缩后的蛋白质从薄膜上刮取或者用缓冲液冲洗。
3.超滤法：超滤法是一种常见且有效的蛋白质溶液浓缩方法。
这种方法利用超滤膜的孔径选择性，将大分子溶质（如蛋白质）从溶液中滤出，从而实现浓缩。
超滤法的步骤如下：（1）选择合适的超滤膜，根据蛋白质的大小选择孔径大小。
（2）将膜组装在超滤设备上，确保完好无损。
（3）将蛋白质溶液加入设备中，通过压力或重力作用，使溶液通过超滤膜。
（4）大分子溶质（如蛋白质）会被滞留在超滤膜上，形成浓缩液，滤出物则为小分子溶质。
总结：以上所述是几种常见的蛋白质溶液浓缩方法。
这些方法各有特点，在具体操作中可以根据蛋白质的性质、浓缩效果和设备条件等因素选取合适的方法。
同时，为了保证蛋白质的活性和稳定性，在浓缩过程中也应注意蛋白质的处理温度、pH值和离子浓度等因素，以避免对其产生不良影响。
蛋白浓缩
用聚乙二醇（PEG）涂于装有蛋白质溶液的透析袋上，置于4℃下，干的PEG粉末吸收水和盐类，使大分子溶液很快的浓缩，为了防止PEG进入蛋白质，最好使用分子量大的PEG如PEG20000。不过试剂比较昂贵，可调节其PH＝PI＝6.5，使PEG的浓度更低。
使用PEG时只在个别情况下才会使蛋白质稍有变性。PEG溶解是散热低，形成沉淀的平衡时间短，通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀！
聚乙二醇8000透析浓缩蛋白
聚乙二醇8000透析浓缩蛋白一、介绍在生物科学研究中，透析浓缩蛋白是一项常见的实验技术。
本文将介绍使用聚乙二醇8000（PEG-8000）进行透析浓缩蛋白的方法和原理。
二、聚乙二醇8000的特性1.聚乙二醇8000是一种高分子化合物，具有较高的相对分子质量。
2.聚乙二醇8000在水中可溶解，形成透明的溶液。
3.聚乙二醇8000具有较低的毒性，对生物大分子的结构和功能影响较小。
三、透析浓缩蛋白的原理透析浓缩蛋白是利用溶质在溶液中的扩散作用，通过选择性透膜将小分子溶质从大分子溶质中分离出来的过程。
在透析浓缩蛋白中，聚乙二醇8000被用作透析液。
四、透析浓缩蛋白的步骤透析浓缩蛋白的步骤如下：1. 准备透析袋1.将透析袋浸泡在去离子水中，去除残留的溶质。
2.将透析袋加入含有聚乙二醇8000透析液的容器中，使透析袋充分吸收透析液。
2. 加入蛋白溶液1.将待透析浓缩的蛋白溶液加入透析袋中。
2.将透析袋封闭，确保蛋白溶液不会外泄。
3. 透析过程1.将装有蛋白溶液的透析袋放入含有透析液的容器中。
2.透析液中的小分子溶质会通过透析袋与蛋白溶液中的大分子溶质发生扩散作用，从而实现分离。
3.透析过程需要一定的时间，根据蛋白溶液的浓度和透析液的浓度来确定透析时间。
4. 浓缩蛋白1.将透析袋取出，收集透析液中的小分子溶质。
2.透析袋中的蛋白溶液浓缩，达到所需浓度。
五、优点和注意事项透析浓缩蛋白使用聚乙二醇8000具有以下优点： - 聚乙二醇8000在水中可溶解，方便操作。
- 聚乙二醇8000对大分子溶质的结构和功能影响较小。
注意事项： 1. 选择适当的透析袋和透析液，以确保透析效果和蛋白溶液的稳定性。
2. 控制透析时间，避免过度透析导致蛋白损失。
3. 透析过程中需注意卫生和操作规范，以避免污染和损坏。
六、总结通过使用聚乙二醇8000进行透析浓缩蛋白，可以实现对蛋白溶液中小分子溶质的分离和浓缩。
该方法简单易行，且对蛋白的结构和功能影响较小。
蛋白浓缩方法详解
利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6000－12000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%－40%浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。
主要针对小体积蛋白质溶液（几ml）此法更不易引起变性，不过得有浓缩器，不是哪个实验室都有的。
5，凝胶浓缩法
选用孔径较小的凝胶，如SephadexG25或G50，将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内，凝胶粒子吸水后，通过离心除去。
6，浓缩胶浓缩法
强调低温（0-4度以下）是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性，可用乙醇，丙酮等。注意：Mg2++离子，pH值。
11，聚乙二醇（PEG）沉淀法：
PEG是一个水溶性非离子多聚体，使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性！他溶解是散热低，形成沉淀的平衡时间短，通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀。
浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物，具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml～150ml。它能吸收低分子量的物质，如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等，适宜浓缩10000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后，蛋白质的回收率可达80%～90%。比凝胶应用方便，直接加入被浓缩的溶液中即可。必须注意，浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点，否则在浓缩胶表面产生阳离子交换，影响浓缩物质的回收率。
7，丙酮沉淀法：
试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。
8，免疫沉淀法：
通过免疫沉淀法，用蛋白质特异性能够定量能够分离目的蛋白。有三个步骤组成：首先将特异性抗体加入细胞提取物，第二步加入经化学固定的金黄色葡萄球菌，以确保形成大量沉淀。这些细菌通过蛋白质A和抗体形成复合物，蛋白质A与免疫球蛋白的Fc部分有高度的亲和性。或者说，纯化的蛋白A结合Sephrarose树脂，为从细胞提取物中分离出抗原抗体复合物，提供一个固体基质。最后通过洗脱，除去尚未沉淀的杂质。
蛋白质溶液的浓缩方法
蛋白质溶液的浓缩方法蛋白质是生物体内最重要的有机物之一，是生物体的重要组成部分，具有关键的功能作用。
为了进行相关实验和研究，往往需要浓缩蛋白质溶液以提高浓度和减少体积。
下面将介绍几种常用的蛋白质溶液浓缩方法。
1.超滤浓缩法：超滤是一种利用膜的选择性渗透性来进行溶质分离的方法。
超滤膜的孔径通常在1至100纳米之间，可以通过选择不同孔径的膜来实现对蛋白质的浓缩。
超滤浓缩法操作简单、快速，可以在常温下进行。
首先，将待浓缩的蛋白质溶液用搅拌均匀，再将其放置在超滤膜的上部，然后用压力或离心力将蛋白质溶液通过膜孔径进行过滤。
超滤膜上的蛋白质颗粒被滞留在膜表面，而小分子物质则通过孔径被排除。
通过多次过滤，可以实现蛋白质的浓缩。
2.醋酸盐沉淀法：醋酸盐沉淀法是利用醋酸盐的作用使蛋白质从溶液中沉淀，进而实现蛋白质的浓缩。
首先，在蛋白质溶液中加入一定浓度的醋酸盐溶液，调整溶液的pH值和离子强度，使蛋白质发生变性并沉淀。
随后，将沉淀后的蛋白质离心沉淀下来并去除上清液，再用适量的溶液重新悬浮沉淀物，搅拌后通过离心分离上清液，最后反复洗涤和离心，可以得到较浓缩的蛋白质溶液。
3.非变性洗涤法：非变性洗涤法常用于浓缩敏感性较高的蛋白质，避免在浓缩过程中对蛋白质造成变性损伤。
该方法主要利用表面活性剂类似于SDS（十二烷基硫酸钠）或Triton X-100等来改变蛋白质表面电荷，增加亲水性从而减少溶液界面张力，从而帮助蛋白质从溶液中浓缩。
同时，非变性洗涤剂也能够稳定蛋白质的空间结构。
具体操作时，将蛋白质溶液与相应的洗涤剂混合，搅拌均匀后使用超滤膜或有机溶剂进行蛋白质浓缩。
4.枯萎滤纸法：枯萎滤纸法是一种简便、快速的蛋白质浓缩方法。
首先，将待浓缩的蛋白质溶液与适量的滤纸混合，搅拌均匀。
滤纸的枯萎性能可以减少水分量并吸附溶剂，从而帮助蛋白质浓缩。
随后，使用离心力将溶液离心，上清液即为浓缩后的蛋白质溶液。
枯萎滤纸法操作简便、经济，适用于小规模的实验。
提取浓缩操作流程
提取浓缩操作流程
浓缩操作流程是在化学实验室中常见的一种实验操作，用于将溶液中的溶质浓
缩至较小体积中。
下面是浓缩操作的一般流程：
1. 准备实验室设备和试剂：在进行浓缩操作前，确保实验室中配备了所需的设备，如热板、烧瓶、蒸发皿等，并准备好相应的试剂，如溶液。
2. 设置实验条件：根据实验的要求，设定适当的实验条件，例如温度、压力等。
这些条件对于浓缩操作的结果至关重要。
3. 倒入溶液：将待浓缩的溶液倒入烧瓶或其他合适的容器中。
确保容器的尺寸
足够大以容纳溶液的体积减少。
4. 加热溶液：将烧瓶或容器置于加热装置上，通过加热使溶液中的溶剂迅速蒸发。
注意控制加热的温度，避免过高的温度导致溶质的分解或其他副反应发生。
5. 降低压力：使用适当的方法降低容器的压力，例如通过连接真空泵或其他减
压设备。
降低压力有助于更快地去除溶剂，实现更快的浓缩效果。
6. 监测浓缩进程：定期检查溶液的浓度变化。
可以使用相关仪器或化学试剂来
测定溶液中溶质的浓度。
7. 停止浓缩操作：当达到所需的浓度或浓缩度时，停止加热和降低压力。
注意
避免溶剂过度蒸发和溶液干燥，从而导致溶质的浓度过高。
8. 清洁设备：在完成浓缩操作后，及时清洁使用的容器和设备，以防止残留物
的积累和影响下一次实验的结果。
以上是浓缩操作的一般流程，实际操作中可能会根据具体的实验目的和条件进
行适当的调整。
在进行浓缩操作时，务必注意安全，遵循实验室的操作规范，并严格遵循化学品的安全操作手册。
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但值得注意的是，重金属、某些有机酸与无机酸和蛋 白质形成复合盐后，常使蛋白质发生不可逆的沉淀，应用 时必5 选择变性沉淀法
• 原理：利用蛋白质对某些物理或化学因素的敏感性不同， 有选择地使之变性沉淀，以达到分离提纯的目的。
• 方法： （1）利用表面活性剂（三氯乙酸）或有机溶剂； （2）利用生物大分子的热不稳定性，加热破坏某些组分 ，而保存另一些组分； （3）酸碱变性沉淀。很多蛋白质在pH5.0或以下被沉淀， 只有少数蛋白质在中性或碱性条件下形成沉淀，且可以通 过调节pH来去除杂蛋白。
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1.1 盐析法
e.g 硫酸铵盐析法浓缩蛋白质溶液 硫酸铵因其价格便宜、溶解度高且对温度的敏感性低
而被常用于沉淀蛋白质。
操作方法：（1）加入固体硫酸铵，适用于要求饱和度较 高而不增大溶液体积的情况； （2）加入饱和硫酸铵溶液，适用于要求饱和度不高而原 来溶液体积不大的情况； （3）透析平衡法（多用于结晶），先将盐析的样品装于 透析袋中，然后浸入饱和硫酸铵中进行透析，透析袋内硫 酸铵饱和度逐渐提高，达到设定浓度后目的蛋白析出。
优点：该方法简单高效，操作过程中可以保持蛋白质不变 性，吸附剂可回收利用。
缺点：蛋白质可能吸附在透析膜上，导致回收率低。操作 过程需要低温。
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2.2 凝胶吸附法
• 定义：凝胶是一种惰性多孔聚合物，孔径较小的凝胶具有 很强的吸水性，适宜浓缩分子量在10000以上的蛋白质。 常用的凝胶有Sephadex G系列以及Bio-GelP系列凝胶。
吸附法
• 定义：通过吸附剂直接去除溶液中的水分子以达到浓缩蛋 白质溶液的目的。 吸附法是最简单快速的浓缩蛋白质溶液的方法，所需 仪器简单，特别适用于稳定性较差的蛋白质。
• 吸附剂的选择： （1）吸附剂不能与溶液发生化学反应； （2）吸附剂对蛋白质不吸附； （3）吸附剂易于溶液分开。 常用的吸附剂：PEG、聚乙烯吡咯酮、蔗糖、凝胶等。 常用的吸附方法：透析袋法和凝胶浓缩法。
（2）选用一种水溶性非离子多聚物，使蛋白质在 同一液相中，由于分子相互排斥而凝聚导致蛋白析出。该 方法操作时先离心除去大悬浮颗粒，调整溶液PH值和温 度至适度，然后加入中性盐和多聚物至一定浓度，冷贮一 段时间，即形成沉淀。
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2. 吸附法
2.1 透析袋吸附法 2.2 凝胶吸附法
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4.1 原理
• 超滤（Ultrafiltration）技术是一种膜滤法，也有错流过 滤（Cross Filtration）之称。其基本原理是在常温下以一 定压力和流量，利用不对称微孔结构和半透膜介质，依靠 膜两侧的压力差作为推动力，以错流方式进行过滤，使溶 剂及小分子物质通过，大分子物质和微粒子如蛋白质、水 溶性高聚物、细菌等被滤膜阻留，从而达到分离、分级、 纯化、浓缩目的的一种新型膜分离技术。
• 常用的浓缩方法： »沉淀法（蛋白质的沉淀性质） »吸附法（吸水剂） »冻干法（真空低温脱水） »超滤法（分子量）
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1. 沉淀法
1.1 盐析法 1.2 低温有机溶剂沉淀法 1.3 等电点沉淀法 1.4 生成盐复合物沉淀法 1.5 选择变性沉淀法 1.6 非离子多聚物沉淀法
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1. 沉淀法
• 两性解离和等电点 – 蛋白质同氨基酸一样也是两性电解质，在一定的pH条 件下，能解离为带电基团从而使蛋白质带电。
• 蛋白质的变性
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蛋白质溶液的浓缩方法
• 蛋白质溶液的浓缩连接了蛋白质的提取和蛋白质的分离纯 化，是获取高浓度或高活性蛋白质的重要步骤。
• 浓缩目的：提高蛋白质浓度；减少样品体积； 便于进一步纯化。
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2.1 透析袋吸附法
• 具体操作： 将蛋白质溶液加入到透析袋中（无透析袋可以用玻璃
纸代替），结扎好后将PEG、蔗糖等吸附剂撒在透析袋外 ；或者把吸水剂配成30%-40%的溶液，将装有蛋白质溶液 的透析袋放入吸附剂溶液中。吸水剂用过后，可放入温箱 中烘干或自然干燥后重复利用。
• 优缺点：
蛋白质溶液的浓缩方法
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目录
1 蛋白质种类和特性 2 蛋白质浓缩 3 常用浓缩方法 4 小结与展望
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蛋白质的种类
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蛋白质的性质
• 胶体性质 – 蛋白质的分子量在1万-100万之间，直径在1-100nm 之间，属于胶体粒子。蛋白质的水溶液是一种比较稳 定的亲水胶体，这是因为在蛋白质颗粒表面带有很多 极性基团，如NH3、COO-、OH-、SH、CONH2 等和水有高度亲和性，当蛋白质与水相遇时，就很容 易在蛋白质颗粒外面形成—层水膜。
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1.3 等电点沉淀法
• 原理：两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低。
• 适用范围：只适用于水化程度不大、在等电点时溶解度很 低的蛋白质，如酪蛋白。对于亲水性很强的蛋白质，在等 电点附近仍然有很大的溶解度，用等电点法沉淀不完全。
等电点法常与盐析法、有机溶剂沉淀法或其他沉淀方法联 合使用，以提高其沉淀能力。
或生理盐水制成悬浮液， 即可恢复原状态。
终产品的 式吸附在产
质量。慢 品上。
速冷冻，
快速冷冻。
避光贮存
二次干燥
蛋白
初级干燥
冻干粉
冷冻
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3.2 操作过程
油面一定不能低于 油镜的中线。严禁 无油或低油位开启 真空泵。
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4. 超滤法
4.1 原理 4.2 超滤装置及类型 4.3 超滤膜的选择 4.4 注意事项
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1.2 低温有机溶剂沉淀法
• 原理： （1）甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂加入水中使溶剂
介电常数降低，增加了相反电荷的吸引力； （2）上述有机溶剂是强亲水试剂，破坏蛋白质胶体
分子表面的水化层而使分子聚集沉淀。
• 有机溶剂的选择： 有机溶剂首选能与水混容的，常用乙醇、甲醇、丙酮
等。大多数蛋白质通过加入等体积的丙酮或四倍体积的乙 醇就可以沉淀下来，但也造成的了蛋白质溶液的稀释，所 以蛋白质溶液的浓度一般要在1mg/ml以上。
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1.2 低温有机溶剂沉淀法
• 影响因素： （1）温度：低温可保持生物大分子活性，同时降低其溶 解度，提高提取效率；
（2）样品浓度和pH： 与盐析法中的作用基本相同； （3）金属离子：一些多价阳离子如Zn2+和Ca2+在一定pH 下能与呈阴离子状态的蛋白质形成复合物，这种复合物在 水中或有机溶剂中的溶解度都大大下降，而且不影响蛋白 质的生物活性。
• 实验室常用超滤管和冷冻离心机，实现蛋白质溶液的超滤 浓缩。
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4.2 装置及类型
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4.2 装置及类型
超滤装置
无搅拌式超滤
搅拌式超滤
中空纤维超滤
浓差极化严重，只适于 浓度较稀的少量超滤。
装置较简单，只是在密 闭的容器中施加一定压 力，使小分子和溶剂分 子挤压出膜外。无搅拌 装置
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1.6 非离子多聚物沉淀法
• 背景：非离子多聚物是六十年代发展起来的一类重要沉淀 剂，最早用于提纯免疫球蛋白、沉淀一些细菌和病毒，近 年来逐渐广泛应用于核酸和酶的分离提纯。
包括不同分子量的PEG（常用PEG-6000）、NPEO、 葡聚糖、右旋糖酐硫酸钠等。
• 方法：（1）基于不同蛋白质的表面结构不同，分配系数 不同，可选用两种水溶性非离子多聚物组成液/液两相体 系，不等量分配而分离沉淀。
• 原理：高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水 分子，使溶液中自由水分子数减小，从而破坏蛋白质表面 的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。
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1.1 盐析法
• 盐类的选择：价格低； 溶解度好； 溶解过程中产热少； 盐溶液密度与沉淀的密度有明显差别。
一般来说：高价阴离子：PO43- > SO42- > Ac-和NO3-， 单价阳离子：NH4+ > K+和Na+， 高价阴离子的沉淀效果优于单价阳离子。
（4）离子强度：盐浓度太高或太低都对分离有不利影响 ，对蛋白质和多糖而言，盐浓度不超过5%比较合适，使 用的乙醇量不宜超过二倍体积。
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1.2 低温有机溶剂沉淀法
• 优缺点： 优点：（1）分辨力高于盐析法，即蛋白质只在一个比较 窄的有机溶剂浓度下沉淀； （2）沉淀不用脱盐，过滤更为容易。
缺点：容易使蛋白质变性失活，操作要求在低温下进行。 如利用丙酮沉淀蛋白质时，必须在0~4℃低温下进行。蛋 白质被丙酮沉淀后，应立即分离，否则蛋白质会变性。
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4.3 超滤膜的选择
超滤膜
相对流速(ml/min/cm2)
• 优缺点： 优点：很多蛋白质的等电点在偏酸性范围内，调节pH时所 需要的无机酸价格低，操作也比较方便。
缺点：对低pH敏感的蛋白应避免使用此法。
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1.4 生成盐复合物沉淀法
蛋白质可生成盐类复合物沉淀，主要方法： （l）与酸性功能团作用的金属复合盐法（如铜盐、银盐 、锌盐、铅盐、锂盐、钙盐等），沉淀可通以H2S使金属 变成硫化物而除去； （2）与碱性功能团作用的有机复合盐法（如苦味酸盐、 苦酮酸盐、丹宁酸盐等），沉淀加入无机酸并用乙酸萃取 ，或用离子交换法除去。 （3）无机复合盐法（如磷钨酸盐、磷钼酸盐等）。
浓度极化较弱，超滤速 度略有提高。
超滤装置位于电磁搅拌 器之上。向容器内施加 压力的同时开动磁力搅 拌器，大分子向滤膜表 面堆积时，被电磁搅拌 器分散到溶液中。
极大地提高了超滤速度。
在一支空心柱内装有许 多中空纤维毛细管，两 端相通，管的内径一般 在0.2mm左右，有效面积 可以达到1平方厘米。