糖分测定方法
检测葡萄糖的方法
检测葡萄糖的方法
检测葡萄糖的方法有以下几种:
1. 尿糖测试:通过测试尿液中的糖含量来检测血液中的葡萄糖水平。
2. 血糖测试:通过采集指尖或臂部的血液样本来测量血糖水平。
3. 口服葡萄糖耐量试验:在空腹状态下饮用含有葡萄糖的饮料,然后在一定时间内多次检测血糖水平。
4. 连续血糖监测:使用可植入皮肤的连续血糖监测仪器或手持式血糖测量仪器连续监测血糖水平。
需要注意的是,各种方法的结果都应当在临床医生的指导下进行解读和分析。
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有多种,以下列举其中几种常用的方法: 1. 酚硫酸法:将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物,通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法:样品经热水溶解后,乙醇沉淀,除去其他可溶性糖及杂质的干扰,用热水溶解沉淀物并稀释定容。此法操作简便,测定速度快,可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法:在一定条件下,刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物,而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外,还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
测定多糖含量测定方法
测定多糖含量测定方法
多糖含量的测定方法有多种,以下列举几种常用的方法:
1. 酚-硫酸法:将待测样品加入酚-硫酸混合液中,经强酸催化后,产生深棕色或褐色色素,根据其吸收波长测定其光密度,即可得到多糖含量。
2. 比色法:将待测样品加入反应液中,经过酸或碱催化后,与磷钨酸等试剂发生比色反应,测定吸收波长,计算多糖含量。
3. 全甘蔗多糖含量测定法:利用全甘蔗多糖的特性,在酸性条件下能与硫酸基团结合产生黄色化合物,根据其吸收波长测定光密度,计算多糖含量。
4. 中性多糖含量测定法:利用中性多糖的特性,在加酸或碱后,能够水解为单糖,利用安替比林反应或酶法,测定水解产物里的糖含量,根据比例关系计算多糖含量。
5. 光学活性低分子糖含量测定法:利用光学活性低分子糖所具有的旋光性质,通过测定样品的旋光度,计算出其中低分子糖的含量,进而计算多糖含量。
实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法有以下几种:
1. 红糖法:将待测样品与红糖溶液混合加热,利用糖类的还原性使红糖被还原变色,颜色的深浅与糖类含量成正比。
2. 蒸馏法:将待测样品加入蒸馏水中,用蒸馏器蒸馏,收集第一滴液滴入菲林试剂,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
3. 酚高法:将待测样品与酚及硫酸混合,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
4. 酶释法:在待测样品中加入糖类酶,使其分解为糖类,然后利用酚-硫酸法或蒸馏法测定糖类含量。
5. 还原终点滴定法:将碘液与待测样品反应,然后用硫代硫酸钠滴定溶液中的剩余碘,从而测定糖类含量。
以上就是实验检测糖类含量的几种方法,根据具体情况可以选择不同的方法进行实验。
糖分测定的注意事项是什么
糖分测定的注意事项是什么
糖分测定是食品分析中一项十分重要的指标,用于评估食品中的糖分含量。准确测定食品中的糖分含量对于食品生产和质量控制具有重要意义。以下是糖分测定的一些注意事项:
1. 样品制备:
在糖分测定之前,需要仔细制备样品。样品应根据不同的食品种类进行处理,以确保样品中的糖分能够被完全释放和提取。常见的样品预处理方法包括研磨、切碎、溶解和提取等。
2. 选择合适的测定方法:
根据食品样品的特点和所需的测定结果类型,选择合适的测定方法。常见的糖分测定方法包括显色法、酶法、高效液相色谱法、气相色谱法等。不同的方法具有不同的精度、灵敏度和特异性,要根据实际需要进行选择。
3. 校准仪器和设备:
在进行糖分测定之前,必须校准使用的仪器和设备。校准能够确保仪器和设备的准确性和精度,从而提高测定结果的可靠性。校准应该按照仪器和设备的使用说明进行,并定期进行。
4. 控制实验条件:
在进行糖分测定时,需要控制好实验条件。温度、湿度和光照等因素可能会影响
测定结果的准确性。因此,在测定过程中要保持实验室的恒温恒湿,并避免阳光直射样品。
5. 注意样品中的干扰物质:
一些食品样品中可能含有其他干扰物质,如脂肪、蛋白质、酒精等。这些物质可能会对糖分测定结果产生干扰。因此,在测定过程中要注意将样品中的干扰物质去除或者进行适当的修正。
6. 合理选择测定浓度范围:
在进行糖分测定时,要根据样品的特点和预期的糖分含量,合理选择测定的浓度范围。如果样品中的糖分含量较高,则需要适当稀释并重新测定;如果样品中的糖分含量较低,则需要选择更敏感的测定方法。
食品中糖含量的测定方法研究
食品中糖含量的测定方法研究
糖作为一种常见的食物成分,在食品中扮演着重要的角色。然而,过多的糖摄入对健康有害。因此,准确测定食品中糖的含量是非常重要的。本文就食品中糖含量的测定方法进行研究。
一、高效液相色谱法
高效液相色谱法是目前最常用的测定食品中糖含量的方法之一。该方法通过将样品中的糖分离并使用色谱柱进行定性和定量分析。高效液相色谱法有准确度高、分析速度快等优点,已经被广泛应用于食品质量检测。
二、酶法测定法
酶法测定法是一种通过酶促反应来测定糖含量的方法。该方法通过将样品与特定的酶底物反应生成可测定的产物来测定糖的含量。酶法测定法具有反应性强、准确性高等优点,但需要较长的分析时间。
三、红外光谱法
红外光谱法是一种基于糖分子对红外光的吸收和散射的特性来测定糖含量的方法。该方法具有快速、非破坏性等特点,可以对样品进行迅速的分析。然而,红外光谱法在某些食品样品中存在干扰物质的问题,因此需要进一步改进。
四、核磁共振法
核磁共振法是一种通过测定磁共振信号来确定糖含量的方法。该方法具有高分辨率、非破坏性等特点,可以对样品进行准确的定量分析。然而,核磁共振法的设备昂贵且复杂,不易在所有实验室中广泛应用。
五、电化学法
电化学法是一种基于糖分子在电化学反应中的电子转移特性来测定糖含量的方法。该方法具有高灵敏度、准确性高等优点,已经成为一种常用的食品中糖含量测定方法。然而,电化学法在某些食品样品中存在样品处理和电极选择的问题。
综上所述,食品中糖含量的测定方法有多种选择,每种方法都有其特点和局限性。在实际应用中,我们可以根据具体情况选择合适的测定方法。随着科学技术的不断进步,未来可能会出现更加准确和快速的测定方法,为食品质量检测提供更大的便利和贡献。
葡萄糖含量的测定方法
葡萄糖含量的测定方法
葡萄糖含量的测定方法有以下几种常用的方法:
1. 试纸法:使用葡萄糖试纸,将样品滴在试纸上,根据试纸变色的程度来判断葡萄糖含量的高低。
2. 酶法:使用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸,然后使用染色剂和催化剂形成有色产物,并通过光度计检测产物的吸光度来确定葡萄糖含量。
3. 高效液相色谱法:利用高效液相色谱技术分离和测定样品中的葡萄糖。通常需要配备专用的色谱柱、检测器和流动相等设备。
4. 球团光度法:基于葡萄糖在碱性条件下与邻苯二甲酸酐反应生成有色产物的原理,通过测定产物的吸光度来确定葡萄糖含量。
5. 环境传感器法:利用特定的生物传感器或化学传感器,将葡萄糖与传感器反应产生信号,并通过测量信号的强度来测定葡萄糖含量。
这些方法各有优缺点,适用于不同的实验需求和场景。在实际应用中,可以根据实验目的、设备和条件选择合适的方法进行测定。
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有很多种,以下是常用的几种方法:
1. 偏光法:利用在特定波长下,糖溶液对光的旋光性质进行测定来确定多糖含量。常用的仪器有偏光仪和旋光仪。
2. 毛细管电泳:将糖溶液置于细毛细管中,通过电场作用,使糖分子在毛细管中迁移,并测定迁移速度来确定多糖含量。
3. 酶解法:使用特定的酶对糖进行降解,然后测定产生的小分子糖或产生的酶活力来确定多糖含量。常用的酶有α-淀粉酶、葡萄糖氧化酶等。
4. 光谱法:利用红外光谱或核磁共振等技术,通过检测糖分子特征吸收峰或共振信号来确定多糖含量。
5. 硫酸-苯酚法:将多糖与硫酸混合,然后加入苯酚,生成可测定的色素化合物,通过比色法测定吸光度来确定多糖含量。
以上方法都是常用的多糖含量测定方法,选择适合的方法需要根据实验目的、样品性质和仪器设备的可用性等因素综合考虑。
蔗糖含量测定方法
蔗糖含量测定方法
蔗糖含量(也称为蔗糖浓度)是指在某一种样品中蔗糖的相对浓度或百分比。蔗糖含量测定是食品工业、制糖业、饮料业等领域中常见的分析方法之一。下面将介绍几种常用的蔗糖含量测定方法。
1. 折射法:
折射法是测定蔗糖含量的常用方法之一。这种方法是基于溶液折射率与溶液中溶质浓度之间的关系。蔗糖的折射率与其浓度成正比。测定时,首先使用密度计或折射仪测得溶液的折射率,然后利用标准曲线或相关方程将折射率转换成蔗糖浓度。
2. 比重法:
比重法也是一种常用的蔗糖含量测定方法。这种方法是基于蔗糖溶液的密度与其浓度之间的关系。测定时,首先用密度计或密度测定仪测得溶液的密度,然后使用标准曲线或相关方程将密度转换成蔗糖浓度。
3. 高效液相色谱法(HPLC):
HPLC是一种高效分离和测定的方法,可以用于测定蔗糖含量。在HPLC中,蔗糖通过液相色谱柱进行分离,并通过检测器进行测定。由于蔗糖在色谱柱上与其他化合物有不同的保留行为,因此可以通过测定蔗糖的保留时间和峰面积来计算蔗糖含量。
4. 还原糖法:
还原糖法是一种常用的蔗糖含量测定方法,其中最常用的是费林试验。在费林试验中,蔗糖被还原为葡萄糖和果糖,然后使用漆黑酸或其他可视指示剂进行滴定。通过测量滴定所需的试剂量,可以计算出蔗糖的含量。
5. 红外光谱法:
红外光谱法是一种常用的非破坏性蔗糖含量测定方法。在红外光谱法中,通过测量蔗糖溶液的红外光谱特征峰的强度或面积,可以计算出蔗糖的含量。这种方法无需样品预处理,操作简单快捷。
这些方法各有优缺点,选择合适的方法需要根据实际情况进行权衡。在实际应用中,可以根据需要和资源选择适合的蔗糖含量测定方法,并通过与标准方法的比较来确保测定结果的准确性和可靠性。
果汁中总糖的测定方法
果汁中总糖的测定方法
果汁是一种受欢迎的饮料,但其中的糖分含量可能会对健康产生负面影响。因此,准确测定果汁中的总糖含量对消费者和食品生产商来说都是非常重要的。本文将介绍几种常见的果汁中总糖的测定方法。
一、差减法
差减法是一种常用的测定果汁中总糖含量的方法。它利用不同的化学试剂或酶对果汁样品中的糖进行不同反应,从而确定总糖含量。常用的差减法包括:硫酸铜试剂法、费林试剂法和硫酸亚铁法。
1.硫酸铜试剂法
硫酸铜试剂法是一种常用的测定果汁中还原糖含量的方法。该方法基于还原糖与硫酸铜反应生成红色沉淀的原理。测定时,将果汁样品与硫酸铜试剂混合,待冷却后观察是否生成红色沉淀。沉淀颜色的深浅与总糖含量成正比。
2.费林试剂法
费林试剂法是一种测定果汁中葡萄糖、果糖和蔗糖含量的方法。该方法利用费林试剂与还原糖反应生成蓝色化合物的原理进行测定。费林试剂和果汁样品混合后,在酸性条件下反应产生蓝色化合物,其颜色的深浅与总糖含量成正比。
3.硫酸亚铁法
硫酸亚铁法是一种测定果汁中葡萄糖、果糖和蔗糖含量的方法。该方法利用硫酸亚铁试剂与还原糖反应生成深蓝色的亚铁蓝化合物进行测定。
在酸性条件下,果汁样品与硫酸亚铁试剂混合,待反应完成后,通过光度
计测定溶液的吸光度,根据标准曲线计算出总糖含量。
二、酶解法
酶解法是一种测定果汁中总糖含量的方法,常用的酶解剂有葡萄糖氧
化酶和过氧化氢酶。该方法基于果汁中的还原糖在酶作用下被氧化为底物
产生色素的原理进行测定。
1.葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法是一种测定果汁中葡萄糖含量的方法。该方法基于果
汁中的葡萄糖与葡萄糖氧化酶反应生成底物,在存在过氧化氢的条件下,
测定葡萄糖含量的方法
测定葡萄糖含量的方法
测定葡萄糖含量的方法有多种,下面将介绍几种常用的方法。
1. 离子色谱法:
离子色谱法是目前常用的测定葡萄糖含量的方法之一。该方法基于葡萄糖可被离子交换柱吸附,并通过洗脱来分离和测定样品中的葡萄糖。该方法具有灵敏、准确、稳定等优点。
2. 光度法:
光度法是一种简单、快速测定葡萄糖含量的方法。该方法基于葡萄糖溶液可与酚类试剂发生氧化反应,并具有比色反应。通过测定样品反应后的吸光度,并与标准曲线比对,可以确定样品中的葡萄糖含量。
3. 高效液相色谱法(HPLC):
HPLC法是一种测定葡萄糖含量的常用方法。该方法通过将样品中的葡萄糖分离,再通过检测器进行检测和定量。该方法具有高灵敏度、高准确性、高分辨率等优点,被广泛应用于食品、饮料、药品等行业。
4. 酶法:
酶法是一种常用的测定葡萄糖含量的方法。该方法利用特定的酶(例如葡萄糖氧化酶)催化样品中的葡萄糖与氧发生反应,生成过氧化氢。通过测定生成的过氧化氢数量,可以确定样品中的葡萄糖含量。该方法具有高特异性、高灵敏度等特
点。
5. 毛细管电泳法(CE):
毛细管电泳法是一种快速、准确的测定葡萄糖含量的方法。该方法利用毛细管电泳技术,将样品中的葡萄糖分离,并通过检测器进行检测和定量。该方法具有分离能力强、重复性好等优点。
同时需要注意的是,根据实际需要以及样品的性质,选择合适的测定方法进行葡萄糖含量的测定。为了提高测定的准确性和可靠性,需重复测量,并进行平均处理。此外,在实验过程中还需要注意样品的处理、实验条件的控制等因素,确保测定结果的准确性。
糖度检测方法标准
糖度检测方法标准
糖度是描述溶液中糖分浓度的一个重要指标,对于食品加工、农业种植、酿酒等行业来说,糖度的准确测量是非常关键的。本文将介绍几种常见的糖度检测方法及其标准,以及各种方法的优缺点和适用范围。
一、折光法
折光法是一种常用的糖度检测方法,通过测量溶液的折射率来确定糖度。根据不同的糖度测量范围,可以选择不同的仪器。常见的折光仪有手持式折光仪和台式折光仪。使用折光仪时,首先需要根据仪器的要求进行校准,然后将样品放入测量池中,仪器会自动显示糖度值。折光法测量糖度的优点是快速、准确,适用于各种类型的溶液。
二、密度法
密度法是通过测量溶液的密度来确定糖度,是一种简单实用的糖度检测方法。常见的密度计有玻璃密度计和数字密度计。使用密度计测量时,首先需要根据仪器的要求进行校准,然后将样品放入密度计中,仪器会自动显示糖度值。密度法测量糖度的优点是简便易行,适用于各种类型的溶液。
三、滴定法
滴定法是一种常见的定量分析方法,也可以用于测量糖度。滴定法的原理是将标准溶液滴定到待测溶液中,通过滴定液的消耗量来确定糖度。滴定法需要使用一定量的标准溶液和指示剂。测量时,先将待测溶液与指示剂混合,然后滴加标准溶液,直到指示剂的颜色发生变化。滴定法测量糖度的优点是准确可靠,适用于各种类型的溶液,但操作相对复杂。
四、红外光谱法
红外光谱法是一种非常准确的糖度检测方法,通过测量溶液中糖分特征吸收峰的强度来确定糖度。红外光谱仪是一种高精度的仪器,可以提供详细的红外光谱图。使用红外光谱法测量时,首先需要将样品制成固体或液体,然后放入红外光谱仪中进行测量。红外光谱法测量糖度的优点是准确性高,可以提供更多的理化信息,适用于各种类型的溶液。
含糖分的食物水分测定原理
含糖分的食物水分测定原理
含糖分的食物水分测定原理是通过测定食物中的水分和糖分含量来确定食物中的糖分含量。水分测定是鉴定食品中的水分含量,它是通过加热食品样品,使其中的水分蒸发,然后称量样品后的质量差来计算食品中的水分含量。而糖分测定是通过分析食物中的糖类化合物来确定食物中的糖分含量。
对于水分测定,常用的方法有称重法和滴定法。称重法是将食品样品放入加热器中加热,使样品中的水分蒸发,然后将样品冷却后称重,通过样品的质量差来计算水分含量。滴定法是将食品样品与溶液混合,然后使用一种指示剂,如溴酸橙或甲基红,来指示水分的含量。溶液的体积变化与样品中水分的含量成正比,通过滴定的体积来计算水分含量。
对于糖分测定,常用的方法有显色滴定法和亚硝酸盐法。显色滴定法是将食品样品与显色剂混合,然后根据显色剂的颜色的深浅来确定糖分的含量。常用的显色剂有费林试剂、浓硫酸、硫酸亚铁等。亚硝酸盐法是将食品样品与亚硝酸盐反应,通过测定产生的氮的量来计算糖分的含量。
除了上述方法外,还有一些其他的方法可以用于测定食物中的水分和糖分含量。例如,高效液相色谱法(HPLC)可以用于测定食物中的糖分含量。HPLC是一种高效、精确的分析方法,可以同时测定多种糖类化合物的含量。该方法利用色谱柱分离不同的糖类化合物,然后通过检测器来检测各个化合物的浓度,最后根据浓度计算出糖分的含量。
总的来说,含糖分的食物水分测定原理是通过测定食物中的水分和糖分含量来确定食物中的糖分含量。水分测定可以使用称重法和滴定法,而糖分测定可以使用显色滴定法和亚硝酸盐法。此外,还可以使用高效液相色谱法来测定食物中的糖分含量。这些方法都具有一定的准确性和可靠性,可以用于食品行业中对含糖食物进行质量控制和检测。
测血糖的方法有几种
测血糖的方法有几种
血糖测试方法有以下几种:
1. 血液测试:通过在手指上抽取一小滴血液,使用血糖仪器或试纸进行测试,快速测量血糖水平。
2. 呼气测试:通过测量呼出空气中的乙醛水平来间接估计血糖水平,这种方法适用于一些便携式血糖测试设备。
3. 连续血糖监测:使用一个小型传感器植入体内,测量组织液或血液中的葡萄糖水平,并将数据传输到一个外部监测仪器中,提供实时的血糖数据。
4. 尿液测试:通过测试尿液中的葡萄糖含量来估计血糖水平,这种方法已经较少使用,因为它不能提供准确的血糖测量结果。
需要注意的是,为了获得准确的血糖水平,最好在医生或专业医疗机构的指导下进行血糖测试,并选择合适的测试方法。
葡萄糖的含量测定方法
葡萄糖的含量测定方法
葡萄糖的含量测定方法有很多种,以下列举几种常用的方法:
1. 麦芽糖法:将待测样品经过酶解、酸化、有机溶剂萃取等处理后,使用酶促反应使麦芽糖水解为葡萄糖,再经过比色或滴定的方法测定葡萄糖的含量。
2. 高效液相色谱法(HPLC):将待测样品经过预处理后,采用高效液相色谱技术进行分离和定量分析,根据葡萄糖在色谱柱中的保留时间和峰面积来测定葡萄糖的含量。
3. 空间滴定法:将待测样品与一定浓度的溴酸溶液反应生成溴分子,并滴加碘化钾溶液进行滴定,直至出现持久的黄棕色终点,根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。
4. 加热滴定法:将待测样品与酚酸缓冲液和硝酸铜溶液混合,加热至70-80C,然后滴加碘化钠溶液进行滴定,根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。
这些方法的选择取决于实验条件、样品性质以及需要的精确度和灵敏度等因素。在实际应用中,可以根据需要选择适合的方法进行葡萄糖含量测定。
蔗糖含量测定方法
蔗糖含量测定方法
蔗糖是一种常见的糖类物质,在食品工业和医药工业中被广泛应用。蔗糖含量的测定对于食品的质量控制非常重要。本文将介绍几种常见的蔗糖含量测定方法。
1.折射法
折射法是一种常用的测定蔗糖含量的方法。这种方法基于溶液中溶质浓度和折射率之间的关系。通过使用折射仪测定样品溶液的折射指数,然后使用经验公式将折射指数转换为蔗糖含量。
2.重量法
重量法是一种直接测定蔗糖含量的方法。它通过测量样品中蔗糖的重量来确定其含量。具体操作是将样品溶解在适量的溶剂中,然后将其溶液适当稀释,最后将溶液中的蔗糖沉淀出来并称重,通过计算可得到蔗糖的含量。
3.比色法
比色法是一种常用的快速测定蔗糖含量的方法。它基于蔗糖溶液在一定浓度下对光的吸收作用。通过将样品溶液与适当浓度的标准溶液进行比色,根据样品与标准溶液的吸光度之差,可以确定样品中蔗糖的含量。
4.液相色谱法
液相色谱法是一种高效的测定蔗糖含量的方法。这种方法利用溶液中的蔗糖与色谱柱中的固定相进行相互作用,通过不同的保留时间来确定蔗糖的含量。液相色谱法具有高灵敏度、高分辨率和高重复性的优点,广泛应用于蔗糖含量的测定。
总结起来,测定蔗糖含量的方法有折射法、重量法、比色法和液相色
谱法等。根据具体情况,可以选择适合的方法进行测定。这些方法的选择
应该考虑到测定时间、精确度、仪器设备和操作条件等因素。同时,要保
证测定的准确性和可重复性,可以进行多重测定和与标准方法的对比验证。
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糖分测定
试剂
MeJA购自日本Wako Pure Chemical公司。组织培养过程中采用去离子水。
乙腈为色谱纯,流动相的水为Millipore pure级。葡萄糖、果糖、蔗糖(分析纯100度烘干)购自Sigma公司。
设备
Waters 600E高效液相色谱仪,Alltech 2000 ELSD (Evaporative Light Scattering Detector,蒸发光散射检测器),Waters μBondapak TM NH2色谱柱(3.9×300 mm)。数据采用Waters公司的Enpower软件进行分析。样品用Waters Sep-Park-C18固相萃取小柱过滤。
HPLC样品制备
样品提取方法按照Gerrits (2001)[184]和Laurel (2001)[185]的方法进行修改。
培养液样品的处理方法
1) 取-20ºC低温保存的培养液,室温下解冻,涡旋;
2) 取培养液0.5 ml,用去离子水稀释5倍;
3) C18柱过滤。
茎尖样品的处理方法
1) 0.5g 左右的样品,液氮研磨后加入3ml 80%乙醇,100ºC提取3min;
2) 12,000g,4ºC,离心10min;
3) 保留上清,在沉淀中加入1ml 80%乙醇,涡旋,70ºC提取5min;
4) 12,000g,4ºC,离心5min;
5) 保留上清,在沉淀中加入1ml 80%乙醇,涡旋,70ºC提取5min;
6) 12,000g,4ºC,离心5min;
7) 保留上清,在沉淀中加入1ml 去离子水,涡旋,70ºC提取5min;
8) 12,000g,4ºC,离心5min;
9) 保留上清,在沉淀中加入1ml 去离子水,涡旋,70ºC提取5min;
10) 12,000g,4ºC,离心5min;
11) 合并以上5步离心得到的上清,旋转蒸发后用水定容至25ml;
12) 取10 ml,冻干(找庄天明,再找杜红梅)(短期-20度,长期-80度);
13) 在冻干后的样品中加入1ml 去离子水,涡旋;
14) C18柱过滤(一个柱3-5次,用甲醇洗一次,再用水洗一次,5ml
枪)。
色谱条件
液动相为乙腈:水(v/v) = 75:25。上样前将C18柱过滤后的样品经0.45 µm 滤膜过滤。上样量为15 µl,每个样品重复上样2次。柱温25ºC,流速1 ml/min。
工作曲线的制备
称取100ºC烘至恒重的蔗糖、葡萄糖和果糖各5mg,溶解在1ml水中,分别配制成5 mg/ml的糖标准溶液和2.5 mg/ml的蔗糖、葡萄糖和果糖的混合溶液。过滤后每种寡糖溶液和糖混合溶液分别进样5、10、15、20、25µl,记录色谱图,以峰面积的对数和进样量的对数作图得到标准曲线。