厌氧菌的培养方法
厌氧培养方法
厌氧性细菌的分离培养法
厌氧菌需有较低的氧化—还原势能才能生长 (例如破伤风梭状芽孢杆菌需氧化—还原电势降低
至 0.11V 时才开始生长 )，在有氧的环境下，培养基的氧化—还原电势较高，不适于厌
氧菌的生长。为使培养基降低势，降低培养环境的氧压是十分必要的。现有的厌氧培养法甚多，主要有生物学，化学和物理学 3 种方法，可根据各实验室的具体情况而选用。
1．生物学方法
培养基中含有植物组织 (如马铃薯、燕麦、发芽谷物等 )或动物组织 (新鲜无菌的小片组织或
加热杀菌的肌肉、心、脑等 ) ，由于组织的呼吸作用或组织中的可氧化物质氧化而消耗氧
气(如肌肉或脑组织中不饱和脂肪酸的氧化能消耗氧气，碎肉培养基的应用，就是根据这
个原理 )，组织中所含的还原性化合物如谷胱甘肽也可以使氧化—还原电势下降。
另外，将厌氧菌与需氧菌共同培养在一个平皿内，利用需氧菌的生长将氧消耗后，使
厌氧菌能生长。其方法是将培养皿的一半接种吸收氧气能力强的需氧菌(如枯草杆菌 )，另一半接种厌氧菌，接种后将平皿倒扣在一块玻璃板上，并用石蜡密封，置37恒温箱中培养2~3d 后，即可观察到需氧菌和厌氧菌均先后生长。
2．化学方法
利用还原作用强的化学物质，将环境或培养基内的氧气吸收，或用还原氧化型物质，降低氧化—还原电势。
此法系用连二亚硫酸纳 (Sodium hydrosulphite) 和碳酸钠以吸收空气中的氧气，其反应式如
下：
Na2S204 十Na2C03十O2 一→ Na2SO4十Na2SO3 十C02
取一有盖的玻璃罐，罐底垫一薄层棉花，将接种好的平皿重叠正放于罐内 (如系液体培养基，则
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
一、引言
污水处理是保护环境和人类健康的重要措施之一。在污水处理过程中，菌种的使用起着至关重要的作用。本文将详细介绍污水处理中常用的菌种培养方法。二、菌种的选择
在污水处理中，常用的菌种包括厌氧菌、好氧菌和兼性厌氧菌。厌氧菌可在缺氧条件下生长，好氧菌需要氧气进行代谢，而兼性厌氧菌则可在缺氧和有氧条件下生长。根据不同的处理需求，选择合适的菌种进行培养。
三、菌种培养方法
1. 厌氧菌培养方法
（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、硫酸铵等溶解于蒸馏水中，加热煮沸后冷却，加入适量的硫酸镁、氯化钠等，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
（3）培养条件：将培养基置于恒温培养箱中，温度控制在35℃左右，保持缺氧状态。
（4）观察和收获：培养一段时间后，观察菌落的生长情况，根据需要收获菌种。
2. 好氧菌培养方法
（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、氯化钠等溶解于蒸馏水中，加热煮沸后冷却，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
（3）培养条件：将培养基置于恒温培养箱中，温度控制在25℃左右，保持有
氧状态。
（4）观察和收获：培养一段时间后，观察菌落的生长情况，根据需要收获菌种。
3. 兼性厌氧菌培养方法
（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、硫酸铵等溶解于蒸馏水中，加
热煮沸后冷却，加入适量的硫酸镁、氯化钠等，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
厌氧菌的采集送检培养分离鉴定及注意事项
厌氧菌的采集送检培养分离鉴定及注意事项厌氧菌是一类在缺氧或无氧条件下生长的微生物。由于其独特的代谢方式和生长环境的要求，厌氧菌的采集、送检、培养分离和鉴定需要特殊的注意事项。下面将详细介绍厌氧菌的采集、送检、培养分离和鉴定的方法及注意事项。
一、厌氧菌的采集方法：
1.采集样品时应尽量避免与空气接触，以防止厌氧菌暴露于氧气中而失活。
2.采集厌氧菌的样品应尽快送检，以确保其最佳生长环境。
常见的厌氧菌采集样品包括：创伤分泌物、组织切片、血液、体液、粪便等。
二、厌氧菌的送检和保存：
1.送检时应明确注明样品为厌氧菌的检测，以便实验室作出相应的处理。
2.采样后，尽量将样品封存，避免与氧气接触，以确保厌氧菌生长环境的完整性。
3.若无法封存样品，应尽快送检至实验室。
三、厌氧菌的培养方法：
1. 使用厌氧培养基来提供适宜的生长环境，如：血寒胁素琼脂培养基、Schaedler琼脂培养基等。
2.培养瓶或培养皿密封完好，以维持厌氧条件。
3.培养培养基时，应将其加热至48-50℃，以刺激厌氧菌的孢子萌发。
4.培养温度通常为35-37℃。
四、厌氧菌的分离方法：
1.采用分离培养基，在含有抗生素的培养基上分离厌氧菌。
2.厌氧菌通常会在培养基上产生特殊的形态特征，如：斑点、颜色变
化等。
3.通过剖析菌落形态特征，并进行细胞的染色观察来鉴定培养物中的
厌氧菌。
五、厌氧菌的鉴定方法：
1.根据厌氧菌的生物学特征进行初步鉴定，如：形态特征、生理特性等。
2.利用生化试验对厌氧菌进行进一步的鉴定，如：糖、氨基酸、营养
盐的利用能力等。
3.利用分子生物学方法，如PCR、16SrRNA测序等进行鉴定。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
污水处理是一项重要的环境保护工作，有效的污水处理可以减少对自然环境的污染，保护水资源。在污水处理过程中，菌种的选取和培养是关键的步骤之一。本文将介绍一种常用的污水处理培养菌种方法。
一、菌种选取
在污水处理中，常用的菌种有好氧菌、厌氧菌和硝化菌等。好氧菌主要用于有机物的降解，厌氧菌主要用于有机物的发酵和产气，硝化菌主要用于氨氮的氧化。根据不同的污水处理工艺和处理要求，选择适合的菌种非常重要。
二、菌种培养方法
1. 好氧菌的培养方法：
（1）制备培养基：将适量的葡萄糖、氮源和矿物盐等溶解在蒸馏水中，加热煮沸，然后冷却至室温。调节pH值为7.0左右。
（2）接种菌种：将选取的好氧菌接种到培养基中，接种量一般为原液的1%。
（3）培养条件：将接种好的培养基放入恒温摇床中，温度控制在30℃左右，转速控制在150 r/min左右。
（4）培养时间：培养时间一般为24小时，过程中要进行观察和记录。
2. 厌氧菌的培养方法：
（1）制备培养基：将适量的有机物、氮源和缺氧环境所需的添加剂等溶解在蒸馏水中，加热煮沸，然后冷却至室温。调节pH值为7.0左右。
（2）接种菌种：将选取的厌氧菌接种到培养基中，接种量一般为原液的1%。
（3）培养条件：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，温度控制在37℃左右，同时保持缺氧环境。
（4）培养时间：培养时间一般为48小时，过程中要进行观察和记录。
3. 硝化菌的培养方法：
（1）制备培养基：将适量的氨氮、磷酸盐和矿物盐等溶解在蒸馏水中，加热
煮沸，然后冷却至室温。调节pH值为7.0左右。
厌氧菌的培养方法
2.1 Gas-pak法
精品课件
原理
气体发生袋：
柠檬酸和碳酸氢钠 ＋H2O
CO2
硼氢化钠11111 ＋H2O
H2
触媒 ： H2O 厌氧罐中的O2
钯粒
厌精品氧课件 指示剂
厌氧指示剂
亚甲基兰 指示剂 卢卡斯固体厌氧指示剂 布鲁氏指示剂
精品课件
亚甲基兰 指示剂
6％葡萄糖水溶液 0.1N氢氧化钠水溶液 0.05％亚甲基兰水溶液
厌氧菌的培养方法
祁红兵
精品课件
物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空 气置换法、气体喷射法或转管法等
化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险 粉法等
生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽 法等
混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌 氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。
3 厌氧培养方法的选择
亨格特的预还原灭菌厌氧培养基的转管技 术、气体喷射培养法
厌氧手套箱培养法
用于要求严格的厌氧培养法的微生态学（正常菌群） 的研究工作
厌氧罐(袋)法结合其它厌氧培养方法
不适用于对氧极其敏感的厌氧菌。但是在临床细菌的检 验工作中，可以充分使用此法分离感染症中的厌氧病原菌。
精品课件
取5～6g钢丝绒/ L，于1～1.5升 酸性硫酸铜溶液浸泡30～60s，钢丝绒变成 红铜色，挤净液体置铝质或玻璃容器中， 放入厌氧罐内。随后将厌氧指示剂放入， 密封厌氧罐，1～4h后可达厌氧状态
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
污水处理是一项重要的环保工作，有效的污水处理可以减少对环境的污染，保
护生态系统的健康。在污水处理过程中，菌种的选择和培养是关键步骤之一。本文将详细介绍污水处理中常用的菌种培养方法。
一、菌种选择
在污水处理中，常用的菌种包括好氧菌、厌氧菌和硝化细菌等。好氧菌主要用
于有机物的降解和氧化，厌氧菌则可以在无氧环境中降解有机物，而硝化细菌则负责氨氮的氧化和硝化过程。根据不同的处理需求，可以选择相应的菌种进行培养。
二、菌种培养方法
1. 好氧菌培养方法
好氧菌主要通过空气中的氧气进行代谢，因此培养时需要提供足够的氧气。常
用的好氧菌培养方法包括液体培养和固体培养两种。
液体培养：将好氧菌接种于含有适宜营养物质的液体培养基中，如富含有机物
的培养基。培养基中的营养物质可以提供菌种所需的能量和营养物质，促进菌种的生长和繁殖。培养基中的氧气通过搅拌或通气的方式提供，保持培养液中的氧气浓度适宜。培养时间一般为24-48小时，菌液可以通过离心或过滤的方式获取。
固体培养：将好氧菌接种于含有适宜营养物质的固体培养基上，如琼脂培养基。培养基中的营养物质可以提供菌种所需的能量和营养物质，促进菌种的生长和繁殖。培养基表面需要保持湿润，以提供足够的水分和氧气。培养时间一般为48-72小时，菌落可以通过刮取或转接的方式获取。
2. 厌氧菌培养方法
厌氧菌主要在无氧或微氧环境中进行代谢，因此培养时需要提供相应的培养条件。常用的厌氧菌培养方法包括液体培养和固体培养两种。
液体培养：将厌氧菌接种于不含氧气的液体培养基中，如含有还原剂的培养基。培养基中的还原剂可以消耗氧气，创造无氧环境，提供菌种的生长条件。培养基中的其他营养物质可以提供菌种所需的能量和营养物质。培养时间一般为24-48小时，菌液可以通过离心或过滤的方式获取。
厌氧培养方法
厌氧性细菌的分离培养法
厌氧菌需有较低的氧化—还原势能才能生长(例如破伤风梭状芽孢杆菌需氧化—还原电势降低至时才开始生长)，在有氧的环境下，培养基的氧化—还原电势较高，不适于厌氧菌的生长。为使培养基降低势，降低培养环境的氧压是十分必要的。现有的厌氧培养法甚多，主要有生物学，化学和物理学3种方法，可根据各实验室的具体情况而选用。
1．生物学方法
培养基中含有植物组织(如马铃薯、燕麦、发芽谷物等)或动物组织(新鲜无菌的小片组织或加热杀菌的肌肉、心、脑等)，由于组织的呼吸作用或组织中的可氧化物质氧化而消耗氧气(如肌肉或脑组织中不饱和脂肪酸的氧化能消耗氧气，碎肉培养基的应用，就是根据这个原理)，组织中所含的还原性化合物如谷胱甘肽也可以使氧化—还原电势下降。
另外，将厌氧菌与需氧菌共同培养在一个平皿内，利用需氧菌的生长将氧消耗后，使厌氧菌能生长。其方法是将培养皿的一半接种吸收氧气能力强的需氧菌(如枯草杆菌)，另一半接种厌氧菌，接种后将平皿倒扣在一块玻璃板上，并用石蜡密封，置37恒温箱中培养2~3d 后，即可观察到需氧菌和厌氧菌均先后生长。
2．化学方法
利用还原作用强的化学物质，将环境或培养基内的氧气吸收，或用还原氧化型物质，降低氧化—还原电势。
（１）李伏夫(B．M．JIbbob)法
此法系用连二亚硫酸纳(Sodium hydrosulphite)和碳酸钠以吸收空气中的氧气，其反应式如下：
Na2S204十Na2C03十O2一→Na2SO4十Na2SO3十C02
取一有盖的玻璃罐，罐底垫一薄层棉花，将接种好的平皿重叠正放于罐内(如系液体培养基，则直立于罐内)，最上端保留可容纳1~2个平皿的空间(视玻罐的体积而定)，按玻罐的体积每1000cm3空间用连二亚硫酸纳及碳酸钠各30g，在纸上混匀后，盛于上面的空平皿中，加水少许使混合物潮湿，但不可过湿，以免罐内水分过多。若用无盖玻罐，则可将平皿重叠正放在浅底容器上，以无盖玻罐罩于皿上，罐口周围用胶泥或水银封闭(如图１－５)。（２）焦性没食子酸法
厌氧菌的培养方法
不适用于对氧极其敏感的厌氧菌。但是在临床细菌的检验 工作中，可以充分使用此法分离感染症中的厌氧病原菌。
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4 厌氧菌的保存
4.1继代保存： 以GAM半固体流动培养基和TEP半固
体培养基作传代培养保存。用毛细吸管吸 菌进行继代培养，使用白金接种环移菌接 种，可以避免有的菌在操作中接触空气或 氧化物而死亡。数周作一次继代培养。新 分离的的菌种，在几个月内，每3～4星期 传代一次。被保存的菌种，放室温下暗处。 最好是不同菌用不同培养基保存。
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1 液体培养基的厌氧培养法
培养基煮沸：驱气后置流水中急速冷却 添加还原剂：
0.03～0.05％L-盐酸半胱氨酸 0.01～0.02％硫乙醇钠 0.5～1％葡萄糖 0.1％抗坏血酸 其它还原剂 添加琼脂
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2 固体培养基的厌氧培养法
厌氧罐法 简易厌氧罐和厌氧袋法 钢丝绒法 焦性没食子酸法 抽气换气厌氧培养法 生物好氧厌氧培养法 转管技术和气体喷射培养法 厌氧手套箱法 （又称厌氧室法）
厌氧菌的培养方法
祁红兵
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物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空 气置换法、气体喷射法或转管法等
化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险 粉法等
生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽 法等
混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌 氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。
厌氧菌的培养方法
厌氧菌的培养方法
厌氧菌是一类不能在氧气存在下生长和繁殖的微生物。这些微生物在
许多领域都具有重要的应用价值，包括环境保护、生物能源生产等。因此，为了研究和应用这些厌氧菌，科学家们发展了多种厌氧菌的培养方法。本
文将详细介绍常用的三种厌氧菌的培养方法。
一、利用情境气氛培养厌氧菌
情境气氛培养是培养厌氧菌的一种常用方法，其原理是通过调节培养
基的气氛来控制氧气浓度。在培养厌氧菌时，一般会采用以下方法之一来
制备情境气氛。
1.预氧化法：将培养容器密封，置于28-37°C的恒温灭菌箱中。然
后通过注入一定比例的高纯度二氧化碳-氧气混合气体，使容器内的气氛
变为厌氧情境。这种方法适用于厌氧菌培养基中氧气浓度较低的情况。
2.双液低压法：将培养基分成两个相隔的容器，分别加入不同的培养液。然后将两个容器封口并贴膜，用胶带封好。经过一段时间后，在密封
的容器内会形成低压情境。这种方法适用于厌氧菌培养基中氧气浓度较高
的情况。
通过以上两种情境气氛培养方法，可以模拟出适合厌氧菌生长的条件。
二、利用厌氧培养器培养厌氧菌
厌氧培养器是一种专门用于培养厌氧菌的装置，其原理是通过封闭式
容器和气氛控制系统，实现在厌氧情境下的培养。常用的厌氧培养器有以
下两种类型：
1.商用厌氧培养器：通常有专门的培养室和压力控制系统，可以产生适合厌氧菌生长的气氛。在这种培养器中，可以根据菌株的特性进行相应的操作和调节。
2.自制厌氧培养器：由于商用的厌氧培养器设备较为昂贵，对于一些实验室来说并不实际。因此，一些实验室会开发自己的厌氧培养器。自制培养器的原理和商用培养器类似，只是在设计和制作上有所差异。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
一、引言
污水处理是一项重要的环保工作，有效的污水处理可以减少对环境的污染，保护水资源。在污水处理过程中，菌种的选择和培养是关键步骤之一。本文将介绍一种常用的污水处理培养菌种方法，以提供参考和指导。
二、菌种选择
在污水处理过程中，常用的菌种有好氧菌、厌氧菌和硝化菌等。好氧菌主要用于有机物的降解，厌氧菌主要用于有机物的发酵和产气，硝化菌主要用于氨氮的氧化。根据实际情况和处理要求，选择适当的菌种进行培养。
三、培养基配制
1. 好氧菌培养基配制：
- 水：1000ml
- 葡萄糖：10g
- 氯化铵：1g
- 硫酸镁：0.5g
- 磷酸二氢钾：0.5g
- pH值调节至7.0左右
2. 厌氧菌培养基配制：
- 水：1000ml
- 葡萄糖：10g
- 氯化钠：5g
- 硫酸镁：0.5g
- 磷酸二氢钾：0.5g
- pH值调节至7.2左右
3. 硝化菌培养基配制：
- 水：1000ml
- 葡萄糖：5g
- 硝酸铵：1g
- 硝酸钠：1g
- 硫酸镁：0.5g
- 磷酸二氢钾：0.5g
- pH值调节至7.5左右
四、菌种培养
1. 好氧菌培养：
a. 取一定量的好氧菌接种于含有好氧菌培养基的试管中；
b. 在适宜的温度下（一般为30℃），静置培养一段时间（一般为24小时）；
c. 观察培养基是否出现浑浊现象，测定菌液的浓度。
2. 厌氧菌培养：
a. 取一定量的厌氧菌接种于含有厌氧菌培养基的试管中；
b. 在适宜的温度下（一般为37℃），静置培养一段时间（一般为48小时）；
c. 观察培养基是否出现气泡和沉淀现象，测定菌液的浓度。
厌氧菌
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
厌氧菌的采集、送检、培养、分离鉴定及注意事项
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个
环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育（较为推荐）。
3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保
持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
一、引言
污水处理是保护环境和人类健康的重要任务之一。菌种的选择和培养是有效处理污水的关键步骤。本文将详细介绍污水处理中常用的菌种培养方法。
二、菌种选择
1. 好氧菌：好氧菌需要氧气进行生长，常用的好氧菌有硝化菌和硫化菌。硝化菌能将氨氮转化为硝酸盐，硫化菌能将硫化物转化为硫酸盐。
2. 厌氧菌：厌氧菌在无氧环境下生长，常用的厌氧菌有产甲烷菌和硝化菌。产甲烷菌能将有机物转化为甲烷气体，硝化菌能将亚硝酸盐转化为氮气。
三、菌种培养方法
1. 好氧菌培养方法：
a. 准备培养基：将适量的无机盐溶解在蒸馏水中，加入有机物质作为碳源，如葡萄糖或乳糖。
b. 菌种接种：将菌种接种到培养基中，培养基需预先灭菌。
c. 培养条件：在适宜的温度和pH下培养，通入适量的氧气。
d. 培养时间：根据菌种的生长速度，培养时间一般为24-48小时。
e. 菌种保存：将培养好的菌种保存在冷冻液氮中或制备菌种冻干粉。
2. 厌氧菌培养方法：
a. 准备培养基：将适量的无机盐溶解在蒸馏水中，加入有机物质作为碳源，如乙酸或丙酸。
b. 菌种接种：将菌种接种到培养基中，培养基需去除氧气，可以通过加入还原剂或用氮气气氛替换氧气。
c. 培养条件：在适宜的温度和pH下培养，保持无氧环境。
d. 培养时间：根据菌种的生长速度，培养时间一般为24-72小时。
e. 菌种保存：将培养好的菌种保存在无氧条件下，可以用液氮冷冻或制备菌种冻干粉。
四、菌种培养监测
1. 菌落计数：将培养好的菌种接种到琼脂平板上，经过一段时间后，用菌落计数器统计菌落数量，以评估菌种培养的效果。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法
一、引言
污水处理是保护环境和人类健康的重要工作。在污水处理过程中，菌种的选择
和培养是关键步骤之一。本文将介绍污水处理中常用的菌种培养方法，以及相应的操作步骤和注意事项。
二、菌种选择
在污水处理过程中，常用的菌种有好氧菌、厌氧菌和硝化菌等。好氧菌主要用
于有机物的降解和氧化，厌氧菌用于无氧条件下的有机物降解，而硝化菌则用于氨氮的氧化。根据实际情况，选择合适的菌种进行培养。
三、菌种培养方法
1. 好氧菌培养方法：
a. 准备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
c. 培养条件：将培养瓶放入恒温培养箱中，温度保持在30-35摄氏度，培养
时间为24-48小时。
d. 菌液收获：培养时间结束后，将培养瓶取出，用离心机离心，将上清液采
集到离心管中，即可得到好氧菌液。
2. 厌氧菌培养方法：
a. 准备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
c. 培养条件：将培养瓶密封，放入恒温培养箱中，温度保持在35-40摄氏度，培养时间为24-72小时。
d. 菌液收获：培养时间结束后，将培养瓶取出，用离心机离心，将上清液采
集到离心管中，即可得到厌氧菌液。
3. 硝化菌培养方法：
a. 准备培养基：将适量的硝酸盐、磷酸盐和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
厌氧微生物常用的培养方法
厌氧微生物常用的培养方法
厌氧菌的培养方法
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基Z酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。
厌氧菌的培养方法
厌氧菌的培养方法
厌氧菌是一类不能在氧气环境下生长的微生物，其培养方法与其他菌种有所不同。为了成功培养厌氧菌，我们需要采取特殊的培养条件和方法。下面我将详细介绍厌氧菌的培养方法。
一、厌氧培养条件的建立
1. 气氛控制：培养厌氧菌的关键是防止氧气的进入。常用的气氛控制方法包括密封法、气体置换法和用稀有气体混合气体置换法。其中，密封法是最常用的方法。我们可以将培养基置于密封的容器中，并注入一定量的气体，如氮气、氩气或二氧化碳等，从而构建无氧环境。
2. pH控制：厌氧菌对pH值较为敏感，一般要求pH值在6.8至7.4之间。所以，在培养厌氧菌时，我们需要对培养基的pH进行调节。
3. 温度控制：不同的厌氧菌对温度的要求各有不同，一般在25至37之间。在培养过程中，应根据具体菌株的要求进行控制。
4. 无氧条件维持：在培养过程中，需要保持无氧条件，避免氧气的进入。一般可以选择在无氧罐中进行培养，该罐内有还原剂（如碘化钠、甲酚等）与氧气发生反应，将氧气消耗掉。
二、厌氧菌的预培养方法
在真正进行厌氧培养之前，我们需要进行预培养，以提高成功培养的几率。
1. 培养基制备：根据具体菌株的不同要求配制培养基。
2. 保护性缓冲层：在培养基上覆盖一层液体密度较高的液体，如厌氧缓冲液、灌封液等。这层液体可以形成一个保护层，避免氧气的进入。
3. 器具处理：将要使用的器具（如培养瓶、移液管等）经过高温高压灭菌或用灭菌包装。
4. 预培养条件：在厌氧罐或无氧条件下，将培养基接种菌种。一般预培养时间较短，一般为12至24小时。
5. 初代接种：将预培养的菌种移植到新的含有适宜的培养基的无氧培养容器中。
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厌氧菌的培养方法
录入时间:2006/6/24 8:36:41 来源：海博生物技术部
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管，液面封凡士林，造成无氧环境。
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