瑞氏染色液
瑞氏吉姆萨染色法的原理
瑞氏吉姆萨染色法的原理
瑞氏吉姆萨染色法是一种常用的细胞核染色方法,其原理基于不同染色剂对细胞核的亲和性不同。
瑞氏吉姆萨染色法主要由三种染色液:甲醛液、吉姆萨液和洗涤液组成。
1. 甲醛液
甲醛液用于杀死和固定细胞;它可以凝固细胞质和细胞核,使它们不会破裂或丢失。
2. 吉姆萨液
吉姆萨液中含有三种染色剂:墨绿、甲基蓝和伊红。
这些染料具有亲和力,可以区别染色细胞核和细胞质的颜色,从而突出细胞核的结构。
甲基蓝能够染色DNA,使细胞核显现出蓝色;伊红则能够染色RNA,使胞质显现出红色;墨绿则可以同时显现出细胞核和细胞质的形态。
3. 洗涤液
洗涤液用于清除余下的染料和细胞残留物,使细胞刚刚染过的颜色更加鲜艳。
总之,瑞氏吉姆萨染色法是一种利用染色剂的亲和力不同来突出细胞核和细胞质结构颜色区别的染色方法,对于细胞学和组织学研究等领域具有重要意义。
瑞氏染液使用说明
瑞氏染液使用说明货号:G1040规格:50ml/100ml保存:室温避光保存,有效期至少2年。
产品说明:瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料伊红(Eostm Y)组成的复合染料,溶于甲醇。
伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。
美蓝通常为氯盐,有色部分为阳离子。
甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红,使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。
后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色;二是固定细胞形态,加速染色反应,增强染色效果。
使用方法:本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。
具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。
3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀,静置5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、细菌染成蓝色,组织细胞胞浆红色,细胞核蓝色。
注意事项:1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。
冲洗时间不能过久,以防脱色。
3、染色对pH十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚至错误。
4、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。
相关试剂:P210010×多聚赖氨酸G1010姬姆萨染色液G1100伊红染色液G1140苏木素染色液(常规染色)G1120H-E染色试剂盒。
瑞氏染液
新离解。 ○缓冲液须保持一定的 pH 使染色稳定,PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8, ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使
pH 定。 缓冲液配制
(pH6.4~6.8,弱酸性): 配方 1 : 配方 2: 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至 1000ml 置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废。 姬姆萨(Giemsa's stain;天青-伊红)染色 1.姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青(蓝)2 号合成的。 2.姬姆萨染料( Giemsa, 天青-伊红)染液配制: 姬姆萨染料(粉末) 0.5g 或 7.5g 甲醇(AR) 33ml 或 500ml 甘油(AR) 33ml 或 500ml ●先将姬姆萨染料放入乳钵中,逐渐倒甘油研磨溶于甘油中,置于 56℃水温箱内,90~120 分 钟,然后加入甲醇,摇匀后放置数天,过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处,时间越 长越好。 ●使用染液可临时配置):姬姆萨染液 1ml,加 DDH2O10ml 混匀。即可使用。 染色步骤 (1)先用甲醇固定 2~3 分钟。 (2)将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液 15~30 分钟。 (3)涂片用自来水冲洗,在室温中干燥待查。 染液鉴定 瑞氏或姬姆萨染色液鉴定:刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定: 1.取 1 滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。 2.取 1 滴染液加 1 滴缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。 3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况,pH 是 否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染液合格,可供使用。 混合染色 瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨(Giemsa's)混合染色: ●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识 别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 ●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗 粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 ●故采用以瑞氏染液为主,姬姆萨染液为辅的混合染色。 染色步骤: 1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖; 2. 稍等片刻再加姬姆萨染液 2-3 滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定); 3. 稍等 1-2 分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液 形成表面张力而终止染色液加入; 4. 染色 30-40 分钟; 5. 分色:用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上,待干,勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
瑞氏染液的原理
瑞氏染液的原理瑞氏染液是一种常用的组织学染色技术,其原理基于生物分子的亲和性差异。
瑞氏染液是由Hans and Edith Ruyš斯博士于1946年首次提出的,它是组织学染色中的一种综合性染色方法,可用于染色人类和动物的组织以及植物花瓣等。
瑞氏染液由靛蓝(hematoxylin)和伊红(eosin)两种染色剂组成,其中靛蓝染色剂是一种天然产物,源于橡树和栎树中的一种物质。
它具有强大的亲和力,可与部分细胞和组织结构中的酸性成分(如DNA、RNA、核蛋白等)结合,并使其呈现紫色或蓝色。
因此,靛蓝可用于染色细胞核、嗜酸性粒细胞、肾小球、胃黏膜、脑组织等。
另一种染色剂伊红,则是一种酸性染色剂,具有与碱性成分(如细胞质、胶原蛋白等)结合的亲和力。
伊红有着明亮的红色或橙色染色效果,可用于染色胶原纤维、细胞质、肌肉纤维等组织结构。
瑞氏染液的使用步骤通常包括以下几个步骤:1. 取一块活体组织固定在甲醛、乙醇等保存剂中。
2. 组织切片后,先将切片放入靛蓝染液中浸泡。
3. 将切片从靛蓝染液中取出,并用自来水将多余的染料流走。
4. 将切片放入95%乙醇中,再将其放入5%的醋酸中浸泡一定时间。
5. 将切片放入伊红染液中浸泡。
6. 将切片从伊红染液中取出,并用自来水将多余的染料流走。
7. 使用差显镜观察样品。
与其他染色法相比,瑞氏染液具有优点是不但染色强度高、染色时间短,而且还能同时染色细胞核和细胞质。
同时,瑞氏染液染色效果稳定,且长期保存不受到太多的影响。
使用瑞氏染液进行组织学染色是一项良好的科研技术,可以对各种组织就进行颜色标识,方便研究者观察和分析细胞或组织中的形态和结构特征,对于发现及解决医学问题有重要的帮助。
瑞氏染色操作流程
瑞氏染色操作流程一、瑞氏染色实验前准备1.1准备染色液和显影液针对瑞氏染色实验,首先要准备染色液和显影液,染色液由25mL的瑞氏染料,90mL的盐酸溶液(浓度为5%),以及1mL的激发剂混合而成。
而显影液则是在10mL的9N的硫酸、10mL的5%的NaOH溶液、10mL的1%的苯甲醇和10mL的1%的芳香族醇基乙醇混合而成。
1.2准备染色木质菌梗在预先准备瑞氏染色液和显影液后,接下来要准备染色用的木质菌梗才能开始瑞氏染色实验。
首先,用洗碗笠将要染色的木质菌梗洗淨,然后用医用刀在木质菌梗中切出厚约2mm的薄片,最后用蒸汽–水泼淋法将木质菌梗片浸湿,方可准备瑞氏染色实验。
二、瑞氏染色实验操作2.1放置染色片在准备好染色液和显影液,以及木质菌梗薄片后,此时要把准备的的木质菌梗薄片放置在染色槽内,以留出表面空间,方便染色液充分浸渍。
2.2加入染色液之后将准备的瑞氏染色液加入染色槽,在实验室内控制温度为37℃,放置20分钟后,可以观察菌梗表面是否呈染色,一般都可以看到浅色到深色之间的蓝色或紫色染色,这说明瑞氏染色已经取得成功。
2.3加入显影液如果瑞氏染色实验成功,那么接下来可以准备将木质菌梗片洗净后加入显影液了,而此时温度需要将控制在22℃,放置5-10分钟后,可以发现菌梗片变淡,并且半透明,证明显影液已经取得成功。
2.4用x网影像再接着,用X网影像观测染色后的木质菌梗,当观测到菌梗表面开始出现斑斑点点发亮时,这表明染色实验结束,在此基础上对木质菌梗进行另一个体系的判断,也就是对菌梗的形态和染色的准确性进行分类、认定和鉴定。
三、瑞氏染色实验结束完成上述瑞氏染色实验操作后,就可以对经过染色后的木质菌梗进行分析、鉴定,完成木质菌梗的离子吸收率、分子斑点和染色效果等等内容,通过瑞氏染色实验把细菌聚集在一起,以便进行实验分析,这正是瑞氏染色实验取得成功的原因。
瑞氏染液
新离解。 ○缓冲液须保持一定的 pH 使染色稳定,PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8, ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使
pH 恒定。 缓冲液配制
(pH6.4~6.8,弱酸性): 配方 1 : 配方 2: 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至 1000ml 置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废。 姬姆萨(Giemsa's stain;天青-伊红)染色 1.姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青(蓝)2 号合成的。 2.姬姆萨染料( Giemsa, 天青-伊红)染液配制: 姬姆萨染料(粉末) 0.5g 或 7.5g 甲醇(AR) 33ml 或 500ml 甘油(AR) 33ml 或 500ml ●先将姬姆萨染料放入乳钵中,逐渐倒甘油研磨溶于甘油中,置于 56℃水温箱内,90~120 分 钟,然后加入甲醇,摇匀后放置数天,过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处,时间越 长越好。 ●使用染液可临时配置):姬姆萨染液 1ml,加 DDH2O10ml 混匀。即可使用。 染色步骤 (1)先用甲醇固定 2~3 分钟。 (2)将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液 15~30 分钟。 (3)涂片用自来水冲洗,在室温中干燥待查。 染液鉴定 瑞氏或姬姆萨染色液鉴定:刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定: 1.取 1 滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。 2.取 1 滴染液加 1 滴缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。 3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况,pH 是 否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染液合格,可供使用。 混合染色 瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨(Giemsa's)混合染色: ●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识 别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 ●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗 粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 ●故采用以瑞氏染液为主,姬姆萨染液为辅的混合染色。 染色步骤: 1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖; 2. 稍等片刻再加姬姆萨染液 2-3 滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定); 3. 稍等 1-2 分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液 形成表面张力而终止染色液加入; 4. 染色 30-40 分钟; 5. 分色:用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上,待干,勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项南宁市二医院检验科马升俊1.瑞氏染色的原理:瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。
瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
各种细胞由于其所含化学成分不同,对染料的亲和力也不一样,因此,染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。
2.试剂的配制:2.1 瑞氏染液的配制:2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g,甲醇(AR)60ml。
将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中,先加少量甲醇,充分研磨使染料溶解,将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中,未溶解的再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解,甲醇全部用完为止。
染液配好后放于室温下,一周后即可使用。
新配制染液效果较差,放置时间延长,染色效果越好。
久置应密封,以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
染液中也可加中性甘油2~3ml,除可防止甲醇过早挥发外,也可使细胞着色清晰。
2.1.2 成品瑞氏染液:现巳有成品瑞氏染液,如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂(500ml/瓶)其只需室温密闭储存,可长期稳定,染色效果好。
2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾(无水)0.3 g,磷酸氢二钠(无水)0.2 g;加蒸馏水至1000 ml使其溶解。
配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值,其范围在PH6.4~6.8即可,后塞紧瓶口备用。
3. 瑞氏染色的使用方法:(以血涂片为例):3.1把制好的血涂片编好号,然后将血片平放在染色架上;3.2加瑞氏染液数滴,使其覆盖整个血膜,固定细胞约1分钟;3.3滴加等量或稍多的缓冲液(可按1:2滴加),使染液充分混匀,染色5~10分钟;3.4用流水冲洗去染液,待干后镜检。
4.染色结果判断:在正常情况下,血膜外观染成淡紫红色。
显微镜下,红细胞呈粉红色,在厚薄均匀处,略有碟状感。
白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩。
细胞核染紫红色,核染色质结构清楚。
5.注意事项:5.1 PH对细胞染色有影响。
瑞氏染液中甲醇的作用
瑞氏染液中甲醇的作用
瑞氏染液是一种常用的染色剂,其中含有甲醇成分。
甲醇在瑞氏染液
中具有多种作用,下面将从以下几个方面详细介绍。
一、甲醇的物理作用
1. 溶解性:甲醇是一种极性溶剂,可以溶解许多有机化合物和染料。
在瑞氏染液中,甲醇可以促进其他成分的溶解,使得染色效果更加均匀。
2. 揮發性:甲醇具有较高的挥发性,在制备瑞氏染液时可以快速挥发,加快制备速度。
3. 稀释性:由于甲醇具有较好的稀释性,可以调整瑞氏染液的浓度和
黏度。
这样就能够满足不同材质和要求的织物进行适当的调整。
二、甲醇的化学作用
1. 氧化还原反应:在瑞氏染液中,甲醇可以参与氧化还原反应。
例如,在铁离子存在下,甲醇会被氧化为甲醛和水。
这种反应可以促进染料
的还原和染色效果的提高。
2. 稳定性:甲醇可以增加瑞氏染液的稳定性。
当其他成分发生变化时,甲醇可以起到稳定作用,避免瑞氏染液发生不必要的变化。
三、甲醇的安全作用
1. 消毒杀菌:甲醇具有消毒杀菌作用,在制备瑞氏染液时可以起到杀
灭细菌和病毒的作用。
2. 防止污染:由于甲醇具有较好的挥发性,可以避免细菌、霉菌等微
生物在瑞氏染液中滋生和繁殖,从而保证了产品质量与安全性。
总结:
综上所述,甲醇在瑞氏染液中具有多种作用。
它既能够促进其他成分
的溶解和稳定性,又能够参与化学反应和消毒杀菌,同时还能够防止
污染。
因此,在制备瑞氏染液时需要注意合理使用甲醇,并且注意安
全使用。
瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液是一种常用的染料,主要用于织物的染色。
其主要成分包括色素、助剂和溶剂。
其中,色素是染液的主要成分,能够使织物呈现出不同的颜色。
助剂则能够提高染色的效果,例如增强色素的附着力和穿透力,以及调节染色的色深和亮度。
溶剂则是色素和助剂的载体,能够将它们溶解在一起,并且使它们更容易附着在织物上。
瑞氏染液的染色原理是通过色素分子与织物纤维之间的相互作
用来实现的。
当染液中的色素分子与织物纤维表面的化学键结合时,它们就能够稳定地附着在织物上,从而实现染色效果。
具体来说,染液中的色素分子能够与织物表面的氢键、范德华力和离子键等相互作用力产生作用,从而完成染色过程。
同时,助剂的存在可以增强色素分子与织物纤维之间的相互作用力,从而提高染色效果。
总之,瑞氏染液的主要成分和染色原理是基于色素分子与织物纤维之间的相互作用。
它们能够共同作用,使得染色效果更加鲜艳、均匀和持久。
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瑞士染色液是什么
瑞氏染色液说明书【产品名称】瑞氏染色液【包装规格】货号:DM0005单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇2、磷酸盐缓冲液磷酸盐【储存条件及有效期】5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
骨髓涂片瑞氏染色步骤
骨髓涂片瑞氏染色步骤
骨髓涂片瑞氏染色步骤如下:
1. 采集骨髓涂片:通常使用新鲜骨髓或骨髓提取物制备涂片。
在采集过程中,需要使用一次性手套和消毒工具,确保不会对样本造成污染。
2. 处理骨髓涂片:将骨髓涂片放入含有酒精的消毒溶液中浸泡,以去除表面的细胞和血小板。
然后,将涂片放入含有单克隆抗体的溶液中浸泡,以识别不同的细胞类型和生物标记。
3. 标记细胞:使用标记抗体将骨髓涂片上的细胞类型进行分类。
常用的标记包括CD3、CD4、CD8、CD10、CD19、CD30、CD45、CD133、B220等。
在采集骨髓涂片之前,需要使用标记抗体进行预处理,以确保涂片上有足够的细胞类型。
4. 染色:将骨髓涂片与瑞氏染色液混合,并轻轻地涂抹在涂片上。
染色后,涂片会被染成红色或深红色,以显示不同的细胞类型。
常用的瑞氏染色液包括瑞氏试剂盒和瑞氏试剂管。
5. 分析细胞类型:将染色后的骨髓涂片放入显微镜下观察,以确定细胞类型。
可以使用光学显微镜或电子显微镜进行观察和分析。
骨髓涂片是一种常用的细胞学检测方法,可以用于诊断多种血液疾病和其他疾病。
通过使用瑞氏染色步骤,可以识别不同的细胞类型,帮助医生确定病情和制定治疗方案。
瑞氏染色液(Wright Stain)使用说明书
仅供科研使用版本号:170303瑞氏染色液(Wright Stain)【产品组成】Component SBJ-0519S2×100mlSBJ-0519M2×500mlStore at试剂(A):Wright Stain 100ml 500ml 室温,避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml 500ml 室温【保存条件】室温,24个月【产品概述】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,对原生质的染色有很好的区别作用。
各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质。
原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
瑞氏染液为蓝色澄明液体,有甲醇特异香味,主要由美蓝、伊红、甲醇等组成,其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。
Wright Stain以进口瑞氏色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。
该染液的特点:由Wright Stain和磷酸盐缓冲液组成,直接使用,无需任何配制过程,染液中加微量中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。
经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。
细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
【使用方法】1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、滴加适量Wright Stain覆盖涂片,室温染色1~2min。
瑞氏染色原理及作用
瑞氏染色原理及作用本篇文章由专业生化试剂供应商岚兴生物为您提供。
瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇 ,后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
瑞氏染色法就是用瑞氏染色液对细菌进行染色。
那么瑞氏染色原理是什么?瑞氏染色原理:瑞氏染料是由碱性染料美蓝( Methvlem blue )和酸性染料黄色伊红( Eostm Y )合称伊红美蓝 染料即瑞氏 (美蓝-伊红Y)染料。
伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。
美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。
为了观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须进行染色。
瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。
细胞的各大种成分均由蛋白质构成,由于蛋白质是两性电解质,所带正电荷的数量随溶液pH而定。
对某一蛋白质而言,如环境pH<pI,(pI为蛋白质的等电点),则该蛋白质在酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;相反,当环境的pH>pI,即在碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合,染色偏蓝。
临床上常用缓冲液(pH6.4~6.8)来调节染色时的pH值,同时还应注意使用清洁、中性的玻片,优质的甲醇配制染液,以期达到满意的染色效果。
瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。
瑞氏染液染色鉴定瑞氏或姬姆萨染色液鉴定:刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定: 1.取1滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。
2.取1滴染液加1滴缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。
3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况,pH是否合适及染色合适时间。
瑞氏染液中甲醇的作用
瑞氏染液中甲醇的作用引言瑞氏染液中的甲醇是一种常见的溶剂,广泛应用于染料工艺中。
甲醇在瑞氏染液中起着重要的作用,它能够促进染料的分散和溶解,并改善染色效果。
本文将详细探讨瑞氏染液中甲醇的作用机制、影响因素以及对染色效果的影响。
作用机制瑞氏染液中的甲醇通过以下几种机制发挥作用:溶剂作用作为溶剂的甲醇能够有效地溶解染料,帮助将染料分散在染液中。
染料与纺织物接触时需要溶解在染液中,才能够更好地渗透进纤维中,实现染色的目的。
甲醇作为一种极性溶剂,能够与染料分子发生相互作用,促进染料的溶解和分散,从而提高染料在染液中的浓度和均匀度。
水与有机溶剂互溶瑞氏染液中既包含水溶性染料,又包含有机溶性染料。
甲醇作为一种有机溶剂,具有良好的水解性,能够与水发生互溶。
这使得瑞氏染液中的水溶性染料和有机溶性染料能够形成均匀的染液,提高染色的一致性和稳定性。
调节pH值甲醇还可以用作调节瑞氏染液的pH值。
染液的pH值对于染色过程中染料分子的电离状态、纤维表面电荷等都有重要影响。
甲醇的加入可以改变染液的酸碱度,进而影响染料分子的溶解性和纤维与染料之间的相互作用。
不同的染料对pH值的要求也不同,通过调节染液的pH值,可以使染料分子更好地与纤维相互作用,提高染色效果。
影响因素在瑞氏染液中,甲醇的作用受到多种因素的影响。
以下是主要的影响因素:甲醇浓度甲醇的浓度是影响其作用的重要因素。
较低的甲醇浓度可能无法有效溶解和分散染料,从而影响染料与纤维的接触和渗透。
而过高的甲醇浓度则可能导致染液浓度过高,降低染料的分散度。
染料种类不同种类的染料对甲醇的要求也不同。
有些染料对甲醇的溶解性没有特殊要求,而有些染料可能对甲醇的极性和溶解度有较高的要求。
因此,在选择染料时,需要考虑染料与甲醇的相容性,以确保染液中染料能够充分溶解。
温度温度对瑞氏染液中甲醇的作用有一定影响。
较高的温度可以增加甲醇的挥发速率,帮助染料迅速浸入纤维内部。
而较低的温度则可能降低甲醇的挥发速率,延缓染液中染料与纤维的接触和渗透。
瑞氏染色液
瑞氏染色液(Wright Stain)简介:瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。
各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质。
原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
瑞氏染液为蓝色澄明液体,有甲醇特异香味,主要由美蓝、伊红、甲醇等组成,其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。
Leagene Wright Stain 以进口瑞氏色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。
该染液的特点:由Wright Stain 和磷酸盐缓冲液组成,直接使用,无需任何配制过程,染液中加微量中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。
经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。
细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
组成:自备材料:1、 载玻片2、 蒸馏水3、 染色架4、 显微镜操作步骤(仅供参考):1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、 滴加适量Wright Stain 覆盖涂片,室温染色。
4、 涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与编号 名称DM0005 2×100ml DM0005 2×500ml Storage 试剂(A): Wright Stain 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): 磷酸盐缓冲液100ml500mlRTWright Stain混匀,室温静置3~10min。
瑞氏染色液使用说明-诺博莱德
北京诺博莱德科技有限公司
瑞氏染色液
组成规格(50ml)规格(500ml)瑞氏染色液50ml 500ml
磷酸缓冲液50ml 500ml
产品简介
瑞氏染色液(Wright’s Stain Solution)由碱性染料美蓝(Methylene Blue)和酸性染料伊红(Eosin Y)混合配制而成,也称伊红-美蓝染料。
其中伊红的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故习称伊红为酸性染料。
美蓝通常为氯盐是碱性的,呈色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红相反。
细胞成分因选择性吸附其中的有色物质而着色。
新配制的瑞氏染液染色效果较差,久置,其中的美蓝因被氧化,而含有天青,美蓝天青与伊红能使细胞核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,而多余的美蓝则可以使胞浆染成蓝色。
瑞氏染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。
使用说明
1.按常规方法制备血涂片,待血膜干后用蜡笔划好染色范围,以防滴加染液
时外溢。
2.滴加染液,使覆盖全部血膜,30秒至1分钟后滴加等量的磷酸缓冲液
(pH6.8),轻轻摇动载玻片,使蒸馏水和染液混合均匀,此时出现一层灿铜色浮膜(染色)。
3.染色3~5分钟后,用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直
接对血膜冲洗),凉干后镜检。
瑞氏染色液
瑞氏染色液【产品名称】瑞氏染色液【包装规格】货号:DM0005单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。
本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇2、磷酸盐缓冲液磷酸盐【储存条件及有效期】5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
瑞氏染色法的染色原理
瑞氏染色法的染色原理瑞氏染色法是一种常用的细胞染色技术,其染色原理是基于酸性染料在碱性环境下与细胞核酸发生化学反应的原理。
其主要过程包括固定、染色、脱色和封片四个步骤。
首先是固定步骤。
固定是为了使细胞或组织的结构固定,并保留其原有的形态和组织学结构。
对于瑞氏染色法,常用的固定剂是95%乙醇或甲醇。
这些有机溶剂通过蛋白质的沉淀和细胞质结构的改变,使组织细胞固定在玻璃片上。
接着是染色步骤。
瑞氏染色法的染色剂是瑞氏染色液,它通常由柠檬酸、盐酸、水和酸性甲酚溶液组成。
在碱性环境下,细胞核酸与染料发生作用,形成颜色沉积物。
染色剂的种类有许多,其中常用的有瑞氏紫(G),瑞氏蓝(B)、甲胺红等。
不同的染色剂可以染出不同的颜色。
然后是脱色步骤。
染色后,为了强化细胞核酸的染色效果,需要对细胞进行脱色处理。
脱色目的是使染色剂中的多余染料去除,只留下紧密结合在细胞核酸上的染料。
常用的脱色剂是酸性酒精或乙醇溶液。
脱色的时间要掌握得当,过久或过短都会影响染色效果。
最后是封片步骤。
染色完成后,需要将细胞制备成玻璃切片,以便于观察和保存。
在封片前,需要先将玻璃切片中的水分脱除,以防止切片变色和霉菌滋生。
脱水一般使用乙醇,然后使用透明质酸酯等有机溶剂,最后用透明剂制成封片。
总的来说,瑞氏染色法的染色原理是通过酸性染料与细胞核酸的化学反应,实现对细胞核酸的染色。
染色剂在碱性环境下与细胞核酸结合,形成颜色沉积物,从而使细胞核酸能够被观察到。
脱色的目的是去除多余的染料,使染色结果更加清晰。
最后,制备成封片以便于观察和保存。
瑞氏染色法广泛应用于细胞学、组织学和病理学等领域,对于研究和诊断细胞和组织的结构和功能具有重要意义。
瑞氏染液的成分
瑞氏染液的成分
瑞氏染液是一种常用的染发产品,其成分包括以下几种:
1. 氨基甲酸盐:是一种化学物质,有助于染料渗透到头发中。
2. 氧化剂:用于氧化染料,使其与头发中的色素结合。
3. 染料:瑞氏染液使用的染料可以是化学合成染料或天然植物提取物。
4. pH调节剂:用于调整染液的酸碱度,以确保染料能够均匀渗透到头发中。
5. 香料和防腐剂:用于增加产品的香味,并延长其保质期。
总的来说,瑞氏染液的成分比较复杂,需要通过科学的配方来确保其染发效果和安全性。
在使用时,建议遵循产品说明书上的指导,避免过度使用或误用。
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瑞氏染色液(Wright Stain)
简介:
瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。
各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质。
原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色。
Wright Stain 染液的特点:由Wright Stain 和磷酸盐缓冲液组成,直接使用,无需任何配制过程,染液中加微量中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。
经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、 滴加适量Wright Stain 覆盖涂片室温染色。
4、 涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与
Wright Stain 混匀室温静置。
5、 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。
(注: 也可先用磷酸盐缓冲液冲洗玻片,时间控
制在30s 左右。
)
6、 干燥。
7、 镜检: 先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。
染色结果:
细菌、细胞核
蓝色 嗜酸性颗粒
粉红或橘红色 淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质 紫蓝色或蓝色 编号 名称 DM0005 2×100ml DM0005 2×500ml Storage 试剂(A): Wright Stain 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): 磷酸盐缓冲液 100ml 500ml RT
完全成熟红细胞粉红色
注意事项:
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
2、涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
4、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染。
5、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
6、pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。