鸭脾脏转移因子的提取与活性鉴定
一种从猪脾脏中提取转移因子的方法
一种从猪脾脏中提取转移因子的方法猪脾脏是一个重要的免疫器官，其中含有丰富的免疫细胞和免疫因子，其中包括转移因子。
转移因子是一种重要的免疫调节因子，能够调节和增强机体的免疫功能。
研究人员一直对从猪脾脏中提取转移因子的方法进行研究，以便更好地利用其免疫调节作用。
以下是一种从猪脾脏中提取转移因子的方法：1.脾脏获取：选取健康的猪，进行禽流感和猪瘟等传染病的排除，并在无菌条件下进行手术操作，获得新鲜的猪脾脏。
2.细胞分离：将脾脏从动物体内取出后，立即进行细胞分离。
将脾脏切成小块，用注射器注入适量的胰蛋白酶和DNA酶，利用轻微的机械压力进行分散，并放入含有胎牛血清的消化液中。
加入少量的胎牛血清，离心，去除上清，重复此步骤数次，直到细胞完全分离。
3.细胞培养：将分离的细胞进行培养。
将分离的细胞转移到含有含有培养基的培养皿中，并置于恒温箱中，以37°C恒温培养。
补充适量的培养基，保持细胞的生长和繁殖。
4.细胞激活：为了增强细胞的免疫应答，可以将细胞进行激活处理。
可以使用一些刺激剂，如PHA（植物血凝素-A）等，将其添加到培养基中，刺激细胞的增殖。
根据实际需要，在不同时间点进行刺激。
5.细胞收获：当细胞活跃度最高时，一般在培养的第3-4天，进行细胞收获。
将培养皿中的细胞一分为二，一部分用于细胞计数，一部分用于转移因子的提取。
6.转移因子提取：可以使用几种方法提取转移因子，其中最常用的是酸、碱、加热和超滤法。
- 酸法：将细胞悬液用生理盐水洗涤后，用适量的盐酸溶液进行提取。
将细胞悬液与盐酸溶液按1:1的体积比混合，在室温下静置1小时，然后进行离心。
离心后，将上清液传递到另一个离心管中，离心3000-5000rpm，10分钟，得到含有转移因子的上清液。
- 碱法：将细胞悬液用生理盐水洗涤后，用适量的氢氧化钠溶液进行提取。
将细胞悬液与氢氧化钠溶液按1:1的体积比混合，在室温下静置1小时，然后进行离心。
离心后，将上清液传递到另一个离心管中，离心3000-5000rpm，10分钟，得到含有转移因子的上清液。
转移因子对鸡脾脏淋巴细胞增殖影响的实验观察
转移因子在预防和控制动物性传染病 ， 增 强机体免疫
ｗ ｗｗ ｓ ｙ ｓ ｃ ｚ ｎ ． ｃ ｏ ｍ
血清 ＲＰ ＭＩ １ ６ ４ ０培养液做 ２倍配比稀释 ，共稀释十管 ， 第 十管稀释 为 ２ 倍 。 将 转移因子加入 已加好淋 巴细胞的 ９ ６孔板中 。第一 列 加转 移因子原液 ， 第二到十－ － Ｎ分别加稀释好 的转移 因
１ １． ０ ５１ ± Ｏ ． Ｏ４ ２
歹Ｉ ｊ数
Ａ４５０ 值
主 要 仪 器
鸡群精神活泼 ， 羽毛有光泽 。 江青艳等在试验中发现 ， 注射 脾脏转移 因子对粤黄鸡体重增加有明显的效果。
ＣＯ： 培养箱 ； 酶联免疫检测仪 ； ９ ６ 孔细胞培养板 ， 普天
公 司生产 。
鸡脾 脏 淋 巴细 胞 增 殖 试 验
转移 因子还具有 良 好 的抗免疫抑制功能。 它可以有效 地提高抗原递 呈细胞活性 ， 能够 将供体特 异性 、 非特异性
装． 一 ２ ０ ￣ Ｃ 保存 ；
细胞 中的可透 析的小分 子物 质 ， 可 以将供体所具有 的细胞
免疫 功能转移到受 体 ， 以提高受体的免疫功能 。转移 因子 属于多肽类物质 ， 含有多种氨基酸 ， 分子量一般在 ３ ０ ０ ０ ～ １ ５ ０ ０ ０道尔顿 ， 无热原 、 无抗原性 、 无毒副作用 、 没有种属差 异， 是 目前应 用广泛 的一种免疫增强剂 。 转移 因子对 中性粒细胞和 巨噬细胞 具有较 强的趋 化 活性 ，能促进胸腺 细胞 分化和调节淋 巴细胞 ｍＲＮＡ的合 成， 增 加外周血淋 巴细胞 ， 脾细胞 总量 ， 促 进体液免疫 ， 促 进 Ｂ细胞活化 ， 提高抗体效价 ， 促进机体的生长和发育。 王 建文等报道雏鸡 口服 ０ ． ５～１ ． ０ ｍＬ Ｔ Ｆ粗 制品 ， ７天后 与不
几种转移因子的制备及特性鉴定
几种转移因子的制备及特性鉴定
乔代蓉;高荣
【期刊名称】《四川草原》
【年(卷),期】1998(000)002
【摘要】本文用透析法制备猪脾转移因子（ＰＴＦ）、猪囊虫特异性转移因子（ＰＳＴＦ）及免脾转移因子（ＲＴＦ）和兔脾猪囊虫特异性转子因子（ＲＳＴＦ），旨在探讨它们的理化特性及组成上异同，结果表明，四种转移因子在核糖，多肽及氨基酸组成上存在很大差异，即同一来源的转移因子ＲＴＦ与ＲＳＴＦ、ＰＴＦ与ＰＳＴＦ及ＲＩＦ与ＲＳＴＦ与ＰＳＴＦ之间组成不同。
【总页数】4页(P40-43)
【作者】乔代蓉;高荣
【作者单位】四川联合大学草原生防工程国家专业实验室;四川联合大学草原生防工程国家专业实验室
【正文语种】中文
【中图分类】Q511
【相关文献】
1.猪脾转移因子的制备及活性鉴定 [J], 乔宏兴;宁豫昌
2.甲胎蛋白特异性转移因子的制备和鉴定 [J], 朱曼华;朱海红;周林福
3.鸡卵黄乙型肝炎特异性转移因子口服液的制备及其免疫活性鉴定 [J], 徐燕萍;张清;湛学军;谢大泽;戴革;杨慧
4.猪瘟特异性转移因子的制备及免疫活性鉴定 [J], 元永平;张佩君;陈德坤
5.鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子的制备及鉴定 [J], 徐燕萍;湛学军;杨淑华;谢大泽;彭赛亮
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转移因子在动物医学上的研究进展
转移因子在动物医学上的研究进展作者：阿迪拉·玛哈沙提来源：《西部论丛》2019年第27期摘要：转移因子是白细胞中一类具有免疫活性的T淋巴细胞释放的小分子多肽和核苷酸复合物，这种物质并不具有毒性，也不会引起过敏反应，并且可以促进机体调节免疫能力，增强免疫应答能力，激发免疫细胞的活性，进而达到对疾病的预防效果。
本文针对转移因子在动物医学上的研究进展进行阐述。
关键词：转移因子;动物医学;研究进展一、前言目前转移因子因为其优秀的疾病防治能力而被运用到人体和动物的疾病防治上，并且已经获得了非常好的研究成果。
在1979年之后，我国已经开展了针对于动物疾病的防治工作，并充分利用转移因子的功效，使其能够在动物疾病的防治中取得更好的作用。
本文围绕转移因子在近十年来针对各种动物的疾病防治研究来展开。
二、转移因子概述2.1转移因子的种类。
转移因子的缩写为TF，一般分为特异性转移因子和非特异性转移因子。
特异性转移因子是指某种具有特定病原体或者在免疫人、动物机体后提取的含有抗原特异活性的转移因子。
而非特异性转移因子则是指在健康的人或动物体内的白细胞中提取出来的具有相应免疫活性的转移因子，专门用来提高机体免疫能力[1]。
2.2转移因子的作用。
首先，转移因子可以有效地提高受体的T淋巴细胞的比值，也就相应的增强了血液中T淋巴细胞的转化率，由此促进了T淋巴细胞的增值，而T淋巴细胞具有较强的调节作用，能够增强机体细胞的免疫能力，诱导多种免疫活动的进行或者免疫物质的产生。
其次转移因子能够提高机体的体液免疫能力，缩短免疫应答期，并且产生高滴度的抗体。
在通过一定的理化特性试验、免疫活性实验等测试后，即可以广泛的运用于动物的疾病防治上。
三、转移因子在家畜疾病防治中的应用3.1转移因子在猪疾病防治中的作用。
由于在动物的转移因子中含有多肽和核苷酸，所以能够治疗比如病毒性疾病、免疫缺陷性疾病等，并且其疗效较好。
通过相关实验可以得到猪转移因子和特异性猪转移因子可以较明显的增加T淋巴细胞，并且可以有效地提高相关受体的抗体水平，这说明猪转移因子将可以提高猪受体细胞的免疫力以及体液免疫力。
冻融法提取脾脏转移因子影响因素的试验
图２
反复 冻 融 ６ 时 ， 次 透析 液 中多肽 的浓 度最 高 ， 冻 融次 数超 过 ８次 ， 析 液 中多 肽 浓 度 反 而有 降低 的 透
基 金 项 目： 岛市 “ ｓ ＮＡ 抗 病 毒 新 兽 药 关 键 技 术 与 工 艺 ” ０一 青 ｄＲ （９
浆 介质 破碎 细胞 的效果 较好 。 透 析液 中核 酸 的变化 趋势 与多肽 浓度 的变 化基
程 中对 细 胞 膜 的 破 坏 更 有 助 于 核 酸 的 释 放 。
２ ２ 透析 时间对 转 移 因子 提 取 率 的影 响 通 过 对 ．
本 一致 （ ２ 。以去 离 子 水 为匀 浆 介 质 ， 复 冻 融 图 ） 反 ４６８ｌ 、 、 、 Ｏ次 和 １ ２次 时 ， 析 出 的核 酸浓 度 比生 理 透 盐水更 高 ， 明去离 子 水 为 匀 浆介 质 在 反 复 冻融 过 说
卜 ３ １ ０ ｎ ｈ —０ ｓ ）
作 者 简 介 ： 尧 （ ９ ４） 男 ， 士 ， 事 动 物 免 疫 生 理 学 方 向 研 刘 １８一， 硕 从
究 ， — ｉ： ｕ ａ ｌ ＠ １ ３ ｃ ｒ Ｅ ｍａｌｌ ｙ ｏ ６ ６ ． ｏ ｉ ｎ
趋 势 。原 因可 能在 于冻 融次 数过 多使 细胞 内溶 酶体 水 解酶 释放 较 多 ， 而使 多 肽 等 活 性成 分 降 解 的 比 从 例增 加 。不 同冻 融次 数下 以 去离子水 为 匀浆介 质 的 多肽 收率 均 略高 于 生理 盐 水 ， 明 以去 离 子水 为匀 说
中 图分 类 号 ： ８ ９ ７ ７ ￥５．９
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章 编 号 ： ５ ９６ ０ （ ０ ２ ０ —０ ７ ０ ０ ２ —０ ５ ２ １ ） １０ ６ — ２
抗鸭肝炎病毒转移因子的体外制备方法[发明专利]
![抗鸭肝炎病毒转移因子的体外制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a664f53b5022aaea988f0fbe.png)
专利名称：抗鸭肝炎病毒转移因子的体外制备方法专利类型：发明专利
发明人：陈庆忠,安同伟,高华义
申请号：CN201410539988.9
申请日：20141014
公开号：CN105561287A
公开日：
20160511
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种抗鸭肝炎病毒特异性转移因子的体外制备方法。
本发明将鸭肝炎病毒接种于9-11日龄鸡胚或鸭胚的尿囊液制备病毒抗原，提取鸭肝炎病毒抗原；然后以鸡脾脏或外周血为原料，制成淋巴细胞单层，然后用植物血凝素和鸭肝炎病毒诱导培养淋巴细胞，体外生产抗鸭肝炎病毒特异性转移因子。
本发明所制备的特异性转移因子可以用于预防和治疗鸭肝炎病，同时可以提高鸭的免疫力。
本发明具有特异性强、成本低、产出率高、效果好等优点，是一种较为理想的鸭肝炎病毒转移因子制备方法。
申请人：天津嘉瑞生物科技有限公司
地址：301702 天津市武清区地毯产业园宏旺道8号
国籍：CN
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全球首个脾转移因子隆重上市
信必妥 的上市为新城疫等病毒病的控制带来 了福音 ， 将在动物病毒病控制方面发挥重要 作用 ， 有力 的促 进 我 国养 殖 业健 康 快 速 发 展 。
１ ３
３１ 主动参加 学习 ， ． 增加信 息获取 畜禽养殖业 是 一项 需 要 较 高 技 术 的行 业 ， 民参 加 养 鸭业 ， 农 一
定 要 养 成 “ 动学 习 、 断 学 习 ” 意 识 ， 用 一 切 主 不 的 利 可 能机 会 ， 极 参 加 经 验 交 流 、 术 讲 座 、 场 参 积 技 现 观 等 活 动 ， 取 获得 先 进 的养 殖 理 念 、 够 的管 理 争 足 知 识 和 丰 富 的 市 场信 息 ， 以提 高 养 殖 水 平 ， 御 疾 抵 病 和 市 场竞 争 带来 的 风 险 ， 得更 高 的养 殖 效 益 。 获 ３２ 严 格 场 址 选 择 ， 学设 计 鸭 舍 ． 科 农 民在 新 建 鸭 场 时 ， 须 充 分 了解 当地 的 自然 与 社 会 条件 ， 必 从 水 质 、 壤 、 向 、 向 、 势 等方面合理 选择 ， 土 朝 风 地 鸭 场 与交 通 干 线 、 矿 企业 、 禽 养 殖 场 保 持 足 够 的 工 畜 距 离 ， 舍 的 高 度 、 度 、 度 和 间 距 符 合 标 准 要 鸭 跨 长 求 ， 筑 布局 和功 能 分 区满 足 防疫 需 要 ， 终 为 鸭 建 最 病 的 综合 防制 创 造 有 利条 件 。
标 准 剂量 和规 定 程 序 用 药 ，不 随 意 增 加 药 量 或 缩 短疗程 ， 合并 用 药 要 咨 询兽 医 以 防药 物 间 的拮 抗 。
脾脏转移因子提取影响因素的研究脾脏转移因子提取影响因素的研究脾脏转移因子提取影响因素的研究
Ｋｅ ｏｒ ｓ Ｔ ａ ｓｅ ａ ｔｒ ｄ ａｙ ｉ； ｅ ｚ － ｈ ｗ ｙＷ ｄ ： ｒ ｎ ｆ ｒ ｃ ｏ ； ｉ ｌｓｓ ｆ ｅ ｅ ｔ ａ Ｆ ｒ
转 移 因子 （ｒｎｆ ｃｏ ， Ｆ是 免 疫 活 性 淋 巴 Ｔａｓ ｒａｔ Ｔ ） ｅｆ ｒ 细 胞所 释放 的参 与 机体 免 疫 功 能 的 多肽 与 寡 聚 核 苷 酸 的混合 物 ， 以将供 体 的免疫 特 性转 移 给受 体 可 的淋 巴细胞 ， 而提 高 机体 免 疫 功能 。兽 医 临床 常 从
研究 了冻融 次 数 、 透析 时 间及 匀浆 介 质对 猪脾 脏 转
移 因子 中多肽 及 核 酸 含 量 的影 响 ，以期 为 猪 脾 脏
提 高机 体免 疫力 的作用 无 种属 特异 性 ， 以在不 同 可 种属 的 动物 之 问相互 转移 免疫 信 息 。 着我 国畜 禽 随
养殖 中免疫 抑 制 性疾 病 的多 发ｌ Ｔ Ｆ相 关 制剂 的应 ３ ｌ ，
Ｔ Ｆ制 备工 艺 的优化 提供 借 鉴 。
１材料 与 方法
用 愈发具 有重 要 的 临床 意义 。目前 ， 备 Ｔ 制 Ｆ的原 料 较 多应 用 的是 猪 、 肉鸡 等 动 物 的脾 脏 ， 备 工 艺 制
－
商 品猪 新 鲜 脾 脏 （ 自于金 锣 集 团屠 宰 场 ） 购 ； Ｕ 一 ４ １ Ｃ型紫 外 分 光 光 度 计 （ Ｖ ２０ Ｐ 日本 岛津 ） 透 析 ；
浓度 达 到 高峰 。
关键 词 ： 转移 因子 ； 析 ； 融 透 冻
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｏ ｎ ｕ ｎ ｅｆ ｃｏ ｆ ｐ ｅ ｎ ｓ ａ ｃ ｎ Ｉ ｆ ｅ ｃ ａ ｔ ｒｏ ｌ ｅ ｌ Ｓ
Ｔｒ ｎ ｆ ｒＦａ ｔ ｒＥｘ ｒ ｃｉ ｎ ａ ｅ ｃ ｏ ｔａ ｔｏ ｓ
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不仅采食牧草 ，与畜争食 ，更为严重的是通过挖掘洞穴 ，推土造 侵 蚀 到这 里 ，它们 又会 大量 繁殖 ，继续 毁坏 草 原 。建议 ：对灭 鼠
丘 ，形 成 大面 积 “ 黑 土滩 ”和 “ 鼠荒 地 ” ，严重 破 坏 了草 原生 态 工 作 不 能 有 丝 毫 松 懈 ，应 由相 关 部 门继 续 下 达 专 项 资 金 ，持 续
（ ２ ）解决 草原 退化 问题是 一个 系统 工程 ，捕 杀害 鼠也 只是其 中的
一
从２ ０ ０ ９ 年 开始 ，夏河 县开 始 在 鼠害严 重 区组 织 实施 “ 生态 保 要 投 入一 定 的人 力 、财 力 、物力 继 续进 行 ，努 力做 到 除 鼠必 尽 。
治 、生 态 调 控 等 综 合 方 法 防 治 草 原 鼠 害 ，截 止 目前 ， 已累 计 投 个 主要 方 面 ，其 他 的措施 都应 该 配套 进 行 。超 载 、过度 放 牧是 资１ ０ ０ ２ ． ５ 万 元 ，在 项 目实施 区桑科 乡 、牙 利吉 办事 处 、科 才 乡累 引起 的草 原 退化 的 另一 个原 因 ，有 关数 据 显示 ，夏河 县 近几 年超 计 完成 综 合 防治 草 原 鼠害 １ ３ ． ７ ７ 万ｈ ｍ 。通 过 大 面积 综合 防 治 ，使 载 达 ９ ４ 万 个 羊 单 位 以上 ，因此 ，应 该 采 取 禁 牧休 牧或 部 分 畜群 项 目区 鼠害得 到 有效 控制 ，害 鼠密度 迅 速 降低 ，生 态 环境 得 到 了 舍 饲 圈养 ，实施 “ 以草 定畜 ”按 各 牧户 承 包 的草 场核 定 饲养 量 和 有 效 改善 ，项 目区草 原植 被 覆 盖度 由项 目实 施 前 的４ ５ ％ ～７ ０ ％， 存栏 数 ，超 过 的 ，应加 大 出栏 ，对 超 载 而又 不愿 出栏 ，应征 收超
个 羊单 位 ，牧 草 按０ ． ４ 元， ｋ ｇ 计 算 ，已累计 挽 回经济 损 失６ １ １ ７ ． ４ ８ 万 ３ —４ 年 ，一 定会 收 到 明显 效果 。外 省 区一 些 地方 在这 方 面 已经 取 元 ，经 济效 益十 分显 著 。 得 了 明显效 益 ，如 宁夏 回族 自治 区的 盐池 县原 来 全是 荒 漠草 原 ，
牧 业 论 坛
中 国畜 牧 兽 医文 摘
２ ０ １ ４ 年
３ Ｏ 卷
第４ 期
加强鼠害防治 确保 草原畜牧 业可持续发展
刘 占龙
（ 甘肃省夏河县动物疫病预 防控制 中心 ，甘肃甘南 １ 草原 鼠害对草原 的危害 ７ ４ ７ １ ０ ０ ）
谁 投资 ” 的指 导思 想 ，充 分发 动 群众 ，以投 资投 劳 等方 式参 加 鼠 ３ ） 采 取综 合治 理措 施 ，切 草 原生 态 的好 坏 、产 草 量 的高低 ，直接 决 定着 草 原畜 牧业 的 害治 理工 作 ，加强 了鼠害治 理力度 ； （ 兴 衰 和可 持续 发 展 。近 些年 ，夏河 草原 也 在不 同 程度 的退 化 ，其 实 提高 防治 实 效 。在 进行 大 面积 灭治 鼠害 的同时 ，将 鼠害 防治 与 中 ，一个 最 主要 原 因是 草原 鼠害泛 滥 。据 ２ ０ ０ ９ 年 统计 ，夏河 县草 围栏 封 育 、补 播 改 良 、禁 牧休 牧 、施 肥 灌溉 、设 置 鹰架 、招 引和
原 鼠害 发 生 面积 达 ３ ０ 万ｈ ｍ ，占全 县 草原 总 面 积 的５ ９ ％以 上 ，主 保 护 鼠类天 敌 等措 施 结合 起来 ，用综 合 措施 促进 草 地植 被恢 复 ，
要 害 鼠为 高 原 鼢 鼠和高 原 鼠兔 ，其 中 ，高 原 鼢 鼠发生 面 积达 ２ ０ 万 提 高植 被覆 盖度 ，改善 了草 地生态 环 境 。 ｈｍ。 高 原 鼠兔 发生 面 积达 １ ５ ０ 万 亩 。在 鼠害 区 ，平 均牧 草损 失 达 ３ 存在 的问题及对策措施 ３ ０ ％以上 ，在 严 重危 害 区 ，牧 草 损失 达 到６ ０ ％以上 ，全县 每 年 仅 （ １ ）由于资 金有 限 ，实施 防治 鼠害 的草原 面积有 限 ，另 外 ， 因草 原害 鼠采食 损失 的牧草 可供 ｌ ０ 万个 羊单 位放 牧 １ 年 。草 原 鼠类 虽 然 扑杀 当 时效果 不 错 ，但 不久 后 ，周 边未 捕 杀 的区域 的 鼠害又
提高到８ Ｏ ％以上 ，生物种类增多 ，优质牧草 比例和产草量明显提 载 费 ，政府 机构 对 养殖 户在 休 牧期 或 圈养 舍饲 期 的生 产 和生 活尽 高 。５ 年 来 ，已累计 挽 回牧 草 损失 １ ５ ２ ９ ３ ． ７ 万ｋ ｇ ，可 增加 约 １ ０ ． ５ 万 量安 排 妥 当 ，在 牲 畜饲 草料 供 应方 面 给予 保证 和 照颐 ，这样 坚持
集 中捕灭 的草场 ，有 计 划地 连 片进 行 ，另
一
２ 工 作 成 效
护 与建设 规划 草 原 鼠害综 合 防治 项 目” ，采 取 人工 捕 捉 、生物 防
方 面 ，对 已经 进行 过 的草 场 ，加 强监 测 ，凡 捕杀 不 彻底 的 ，仍
任制 。极 大 的调 动 了广 大农 牧 民群 众 建设 草 原与 保护 草 原 的积极 各 级政 府进 一 步加 大 防治 鼠害 ，保护 草 原生 态 的 同时 ，实 时进 行 性； （ ２ ）大力 宣传 和贯 彻执 行草场 “ 谁 使用 、谁 管理 、谁 受益 、
夏 河 县在 防治 鼠 害 的 同 时 ，积极 采 取 保 护 草原 生 态 环 境 的 经 过几 年 的休 牧 ，那里 的荒漠 草 原 已彻底 改 变 了面貌 ，其牧 草 长 措施 ： （ １ ）加 快 牧 区改 革 步伐 ，全 面 贯彻 落 实 草 场 承包 经 营 责 势 及植 被覆 盖 度均 优 于现 在 的桑科 草 原 ，所 以 ，只要 县 乡 （ 镇）