PCR反向斑点杂交技术在乙型肝炎病毒基因分型检测中的应用
PCR-反向点杂交法检测 HBV 耐药变异与基因型的探讨
PCR-反向点杂交法检测 HBV 耐药变异与基因型的探讨张达衡;陈红玲;谭满胜;陈瑞林;杨春媚【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2014(000)013【摘要】目的:探讨 PCR-反向点杂交法检测 HBV 耐药变异与基因型的相关性及HBV 变异位点与肝功能指标、HBVDNA病毒载量的关系。
方法筛选符合条件的462例服用核苷类药物治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本,用 PCR-反向点杂交法检测 HBV 的耐药突变位点以及基因型,并对 HBV 耐药变异与基因型、肝功能检测指标、HBV DNA 病毒载量等指标进行相关性分析。
结果在462例服用核苷类药物治疗的慢性乙型肝炎患者血清中检测耐药变异株45例,变异率约为9.74%;其中180M 和204I/V 突变株16例,35.5%;204V 突变株6例,13.3%;204I 突变株13例,28.9%;180V 突变株3例,6.7%;181V 突变株3例,6.7%;207I 突变株1例,2.2%,236T 突变株3例,6.7%。
HBV 基因型中 B 基因型105例,C 基因型337例,B 基因型和 C 基因型联合感染4例,D基因型0例,其他基因型2例。
将检测结果与临床资料进行相关性分析:乙肝患者的耐药变异位点与基因型、肝功能指标 ALT 无相关性(P >0.05),与HBVDNA 病毒载量有一定相关性(P <0.05)。
结论1.茂名地区的 HBV 基因型可能与其他南方地区的基因型有差异,以 HBV-C 基因型为主;2.PCR-反向点杂交法是一种快速、准确发现核苷类药物治疗后耐药位点的检测方法;3.通过临床资料分析显示乙肝患者的耐药变异位点与肝功能指标 ALT 间差异无统计学意义(P >0.05),即无相关性,HBV-DNA 病毒载量间差异有统计学意义(P <0.05),即有一定相关性。
【总页数】2页(P1716-1717)【作者】张达衡;陈红玲;谭满胜;陈瑞林;杨春媚【作者单位】茂名市人民医院,广东茂名 525000;茂名市人民医院,广东茂名525000;茂名市妇幼保健院,广东茂名 525000;茂名市人民医院,广东茂名525000;茂名市人民医院,广东茂名 525000【正文语种】中文【相关文献】1.用PCR-反向点杂交法检测九江地区乙型肝炎病毒基因型 [J], 孔令和;史国香;张太松2.PCR-反向点杂交法检测乙型肝炎病毒的基因耐药变异与基因分型 [J], 刘伟;李代红;刘纯3.PCR-反向点杂交法检测凉山州乙型肝炎病毒基因型 [J], 沙涛;周建明4.PCR-反向点杂交法耐药基因检测和BD960结核菌药敏在耐药结核病检测中的应用价值 [J], 李晓琴;周敏;王霖;曾海燕;骆鹏举;林丽佳5.PCR-反向点杂交法耐药基因检测和BD960结核菌药敏在耐药结核病检测中的应用价值 [J], 李晓琴;周敏;王霖;曾海燕;骆鹏举;林丽佳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
乙型肝炎病毒基因分型检测标准操作规程(PCR-反向斑点杂交法)
乙型肝炎病毒基因分型检测标准操作规程(PCR-反向斑点杂交法)1.目的:乙型肝炎病毒基因分型检测标准操作规程,保证检测结果的准确性。
2.应用范围: PCR实验室。
3.职责:3.1 文件编写:实验室技术员。
3.2 文件审核:实验室主管。
3.3 文件审批:实验室主任。
3.4 执行:PCR实验室所有工作人员。
4. 参考文献:4.1《中山大学达安基因股份有限公司乙型肝炎病毒基因分型检测试剂盒说明书》4.2 中山大学达安基因股份有限公司核酸扩增荧光检测系统DA7600型使用说明书5. 内容:5.1 检测方法:PCR-反向斑点杂交法。
5.2 实验原理:选取人乙型肝炎病毒基因组中编码表面抗原的S基因的编码区为扩增区域,设计特异性引物及B,C,D型特异性探针,预先将特异性探针包被在尼龙膜上,再利用生物素标记的引物对靶片段进行PCR扩增,PCR产物和膜条上的特异性探针杂交,靶标中的型特异性片段会和特异性探针结合,未结合的PCR 产物通过洗膜去除,最后进行显色和结果分析,可检测HBV B、C、D三种基因型DNA.5.3 标本采集:由合作单位按照以下要求进行采集。
5.3.1 标本类型:血清。
5.3.2 标本采集:用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2ml,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22~25℃)放置30~60 min,全血标本可自发完全凝集析出血清,或直接使用水平离心机,1,500 rpm离心5min;吸取上层血清,转移至1.5ml灭菌离心管。
5.3.3 标本保存:标本采集后保存于2~8℃。
5.3.4 运送条件:标本运送采用冰壶。
5.3.5 标本拒收标准:污染、严重溶血、脂血类或肝素抗凝剂标本。
5.4 设备和试剂:5.4.1 设备: DA7600 PCR仪、低速水平离心机、生物安全柜、台式高速离心机、移液器、混匀器、恒温水浴箱/干式恒温器、冰箱(4℃、-20℃)、移动/固定紫外灯、冷冻离心机。
5.4.2 试剂:5.4.2.1 试剂品牌:中山大学达安基因股份有限公司乙型肝炎基因分型检测试剂盒5.5.2.2 试剂组成:DNA 浓缩液(2,000μL/管)1 管;DNA 提取液(500μL/管)1 管;HBV 基因分型突变反应管(未贴标签管)10 人份;HBV 基因分型阳性质控品(50μL/管)1管,HBV 基因分型突变阴性质控品(50μL/管)1管,杂交液Ⅰ浓缩液(50ml/瓶)1瓶,杂交液Ⅱ浓缩液(30ml/瓶)1瓶,溶液Ⅰ(100μL/管)1管,溶液Ⅱ浓缩液(25ml/瓶)1瓶,溶液Ⅲ(1ml/管)2管,溶液Ⅳ(100μL/管)1管,杂交膜条(10人份/袋)1袋。
PCR-反向点杂交法与DNA直接测序法检测HBV耐药变异与基因型的比较研究的开题报告
PCR-反向点杂交法与DNA直接测序法检测HBV耐药变异与基因型的比较研究的开题报告
一、选题背景
乙型肝炎病毒(HBV)感染对人类健康造成极大的危害。
由于该病
毒的高度变异性,对病毒耐药性的检测和流行病学调查变得至关重要。
PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法是目前常用的检测方法之一。
本研究旨在比较这两种方法在检测HBV耐药变异和基因型上的优劣势。
二、研究目的
1.比较PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法在检测HBV耐药变异
上的有效性和准确性;
2.分析PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法在检测HBV基因型上
的应用优势和局限性;
3.探索在临床实践中应用PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法检测HBV耐药变异和基因型的价值。
三、研究内容及方法
本研究计划从2019年1月至2021年12月,选取100名HBV患者,采用PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法分别检测其耐药变异和基因型,并对比这两种检测方法的结果。
数据统计分析采用SPSS19.0软件,对检测结果进行描述性分析、比较性分析及相关性分析。
四、预期成果
通过PCR-反向点杂交法和DNA直接测序法的比较,研究可以明确
两种方法在HBV耐药变异和基因型检测上的优势和劣势,为临床实践提
供有效的检测手段和科学依据。
研究结果有望在该领域产生重要的理论
与实践意义。
五、研究意义
该研究可以为HBV感染的临床治疗提供有效的检测手段和临床依据,有助于提高HBV感染治疗的准确性和个性化治疗水平,为HBV感染的流行病学调查提供科学依据,为研究HBV变异机制和病原学提供可靠的数
据支持。
PCR技术应用在乙型肝炎检验中的价值探析
PCR技术应用在乙型肝炎检验中的价值探析摘要目的分析在乙型肝炎检验中应用聚合酶链反应(PCR)技术的效果。
方法200例乙型肝炎患者,根据随机抽签法分为观察和对照组,各100例。
对照组通过化学发光法进行检验,观察组选择PCR技术进行检验,比较两种方法的诊断准确率。
结果观察组诊断准确率为96%,对照组诊断准确率为81%,两组比较差異有统计学意义(P<0.05)。
结论PCR技术对于乙型肝炎具有较高的诊断准确率,能够准确检出乙型肝炎病毒,值得广泛应用。
关键词乙型肝炎;聚合酶链反应技术;检验【Abstract】Objective To analyze the effect of polymerase chain reaction (PCR)technology applied in hepatitis B test. Methods A total of 200 hepatitis B test patients were divided by random lottery method into observation group and control group,with 100 cases in each group. The control group was tested by chemiluminescence method,and the observation group was tested by PCR technology. The diagnostic accuracy rates of the two methods were compared. Results The observation group had diagnostic accuracy rate as 96%,which was 81% in the control group,and the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion PCR technology provides higher diagnostic accuracy for hepatitis B,and can accurately detect hepatitis B virus. So it is worthy of wide application.【Key words】Hepatitis B;Polymerase chain reaction technology;Test乙型肝炎是一类传染病,具有非常强的传染性,在全世界范围内都属于影响健康的严重传染病,一些患者还因为慢性感染进展为肝硬化和肝癌[1,2]。
PCR-反向斑点杂交法检测HBV YMDD模序混合感染
PCR-反向斑点杂交法检测HBV YMDD模序混合感染袁耀钦;潘小划;何东华;欧志英【期刊名称】《热带医学杂志》【年(卷),期】2007(7)11【摘要】目的为HBV感染临床个体化治疗、指导临床用药寻找一种能更好地检测HBV YMDD模序混合感染的方法。
方法28份已知乙肝病人血清,其中10份为HBV YMDD模序感染,5份为HBV YIDD模序感染,5份为HBV YVDD模序感染,2份为HBV YMDD和YIDD模序混合感染,2份为HBV YMDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YIDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YMDD、YIDD和YVDD模序混合感染,都用PCR产物直接测序和PCR-流过式反向斑点杂交(Flowthrough-RDB)方法检测。
结果HBV YMDD模序单一感染标本用两种方法检测准确性都达到100%,对混合感染标本PCR-流过式反向斑点杂交方法检测准确性也可达100%,然而用PCR产物直接测序方法只能检测其中一种或两种型别。
结论PCR-流过式反向斑点杂交方法是一种敏感、特异和快速的检测HBV YMDD野生型及其突变型模序单一感染和混合感染的有效方法,比PCR产物直接测序更优越,更有利于实现临床个体化治疗和指导临床用药。
【总页数】4页(P1064-1067)【关键词】HBV;拉米夫定;PCR-流过式反向斑点杂交;测序【作者】袁耀钦;潘小划;何东华;欧志英【作者单位】广东省东莞市茶山医院;中山大学达安基因诊断中心;广州市儿童医院【正文语种】中文【中图分类】R512.62【相关文献】1.应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定常见医学真菌 [J], 郭梅;牟兆钦;谢湘峰;陈建魁;尹秀云2.PCR-反向点杂交法检测 HBV 耐药变异与基因型的探讨 [J], 张达衡;陈红玲;谭满胜;陈瑞林;杨春媚3.应用PCR-反向斑点杂交法快速检测和鉴定医学重要真菌 [J], 郭梅;牟兆钦;谢湘峰;陈建魁;尹秀云4.反向斑点杂交技术检测HBV YMDD基序变异的应用和评价 [J], 张太松;董瑞华;李建芳;林炳生;雍万军;胡守旺;李明;周新宇5.PCR荧光法和 PCR-反向斑点杂交法检测人乳头瘤病毒比较研究 [J], 王海宁;剌梅;李欣;杨小青;杨小艺因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
PCR技术在乙型肝炎检验中的应用效果观察
PCR技术在乙型肝炎检验中的应用效果观察摘要:目的:研究在乙型肝炎病毒临床检验中应用PCR技术的效果。
方法:此次研究开展起止时间在2021年11月到2022年11月,随机抽选该时段我院诊治的66例乙型肝炎患者作为观察对象,以计算机抽签法作为分组方法,将其分成研讨组(33例)和参考组(33例)。
在对乙肝病毒进行检测时,研讨组接受PCR技术检测,参考组接受酶联免疫吸附法检测,比较两组检测准确性、乙肝5项检测阳性率及不同浓度乙肝表面抗原检测重复率。
结果:研讨组检出率、HBeAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAg阳性率均较参考组明显更高,且研讨组对低、中浓度HBsAg检验的批内和批间重复率均高于参考组,组间对比P<0.05,有统计分析意义。
结论:PCR技术在乙型肝炎临床试验中的应用产生了显着的诊断效果,值得推广到乙型肝炎临床试验。
关键词:PCR技术;乙型肝炎;检验引言乙型肝炎是一种全世界公认的严重传染病,具有高度传染性,此外,少数患者可能会从慢性感染过渡到肝硬化和肝癌。
根据相关数据,我国约有1.4亿人患有乙型肝炎,占总数的10.90%,其中3000万人患有慢性乙型肝炎,对我国人民的生命和健康构成严重威胁。
迅速有效的诊断对于预防乙型肝炎传播和确保有效治疗至关重要。
目前,临床中最常见的检测方法是酶联免疫吸附(ELISA)方法,但由于敏感性较低,临床诊断效果并不显著。
PCR(聚合酶链法)技术随着分子学的不断发展逐步成为乙型肝炎的新的有效检测方式。
这项研究挑选了我院66名乙型肝炎病毒携带者进行一项研究,探讨将聚合酶链反应(PCR)技术应用于乙型肝炎临床试验的有效性。
1资料与方法1.1一般资料此次研究开展起止时间在2021年11月到2022年11月,随机抽选该时段我院诊治的66例乙型肝炎患者作为观察对象,以计算机抽签法作为分组方法,将其分成两组。
研讨组(33例)男性有19例,女性有14例;年龄24-56岁,均值(33.65±3.12)岁。
PCR-反向点杂交法检测乙型肝炎病毒的基因耐药变异与基因分型
出血临床 观察 [ J ] . 中国当代 医药, 2 0 1 0 , 1 7 ( 1 ) : 4 3 — 4 4 .
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华普外科手术学杂志 , 2 0 1 0, 4 ( 2) : 2 0 0 - 2 0 3 . [ 1 1 ]S i l v e v s t e i n ME, C h v a p i l M.E x p e r i me n t a l a n d c l i n i c a l e x p e i r e n c e s w i s h c o l l a g e n l f e e c e a s a h e mo s t a t i c a g e n t [ J ] .J T r a u m a , 1 9 8 1 , 2 1
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血绫是 由纯天然再 生纤维素经化学变性后而成 , 无 毒、 无害 , 不 含任何 药 物 , 遇 血后 与 手 术 创 面 贴 敷 严
密, 然后 逐渐 溶化膨 胀 成半 透 明凝胶 样 , 具 有很 好 的 物理 、 生理 、 化 学 止血 功 效 , 除用 于一 般 止 血 外 , 还用 于 创 面 广 泛 渗 血 和 体 内 某 些 特 殊 部 位 的 止 血 。本研 究 显示 , 治疗 组术 后 1 、 3 、 5 d出血 症状
反向斑点杂交技术及其在基因诊断中的应用
反向斑点杂交技术及其在基因诊断中的应用林炳生张太松510080 广州中山大学达安基因诊断中心【摘要】反向斑点杂交采用生物素标记的引物进行靶核酸的扩增,将产物同固定在尼龙膜上的探针进行杂交,一次杂交反应可以检测多种靶序列。
该方法具有快速、简便,高灵敏度和特异性的特点,广泛应用于病原体检测、基因突变检测、基因分型以及遗传多态性检测等多个方面,具有潜在的临床应用价值。
【关键词】反向斑点杂交;基因诊断Reverse dot blot method and its use in gene diagnosis LIN Bingsheng, ZHANG Taisong. Daan Gene Diagnostic Center of Sun Yat-sen University,Guangzhou , 510080 China,【Abstract】The reverse dot blot(RDB) method, by using biotine labeled primers, amplify the target nucleic acid and hybridize with the probes covalently bound to the nylon membrane. It can identify several kinds of target sequence in a single assay with reliability and specificity. RDB assay was widely applied to the pathogen identification, gene point mutation assay, genetic polymorphism detection, and provides a promising tool for clinical nucleic acid analysis.【Key words】reverse dot blot(RDB);gene diagnosis反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)是Saiki等[1]提出的一种斑点杂交技术,该技术采用固化了多种特异性探针的膜条与扩增靶序列杂交,使一次杂交即可同时筛查被检DNA中的多种突变。
PCR反向点杂交法检测凉山州乙型肝炎病毒基因
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是世界上感染人数最多的病毒之一,世界范围内大约有20亿人(占世界人口的1/3)有血清学证据在过去或持续感染HBV。
HBV属嗜肝性病毒,其病毒基因组是3.2kb的部分双链DNA,有4个开放读码框架(S、C、X、P)。
S读码框架可编码3种蛋白。
S基因编码主蛋白,前S2基因与S基因共同编码中蛋白,前S1和S2基因与S基因共同编码大蛋白。
众多研究表明,HBV变异与其血清学标志物表现形式、乙肝过程以及乙肝预防和治疗失败等可能有十分密切的关系。
人体感染HBV后可以表现为无症状乙型肝炎表面抗原携带(ASC1)、慢性乙型肝炎(CHB1)、肝纤维化(LC)、肝细胞癌(HCC)等各种不同的疾病谱。
根据HBV全基因序列异质性大于或等于8%,现已明确HBV分为A-H8个基因型[1]。
本文应用PCR-反向点杂交(poly-merase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)技术对住院和门诊患者进行了病毒基因分型,旨在了解凉山州HBV基因型的分布情况,并探讨在临床的应用价值。
1资料与方法1.1一般资料收集2009年3~7月门诊和住院乙型肝炎患者共44例,病毒载量大于或等于1.00×105IU/ml,男23例,女21例,年龄6~65岁,平均32.05岁;诊断符合2000年《病毒性肝炎防治方案》[2]。
另选6例健康人做对照。
1.2仪器美国应用生物技术公司生产的ABI7500fast RT荧光定量PCR仪,FYY-3型分子杂交仪,低温高速离心机SORVALL誖Riofuge PrimoR,河北白洋离心机B160A,日本SANYO MDF-382E 冰箱,漩涡混合器XH-B型,超净工作台。
1.3试剂HBV基因分型检测试剂盒(PCR-RDB)由中山大学达安基因股份有限公司提供。
1.4引物及探针设计选取HBV基因组中前S1基因的编码区为扩增靶区域,设计特异性引物及各型特异性探针,利用PCR及RDB技术,检测HBV3种(B、C、D)基因型DNA。
PCR技术在乙型肝炎检验中的应用效果
PCR 技术在乙型肝炎检验中的应用效果【摘要】目的:观察分析乙型肝炎应用PCR(聚合酶链式反应)技术的临床检验效果。
方法:于2021年6月-2021年12月本院100例乙型肝炎患者作为研究对象,入院后均应用PCR技术检验、ELISA(酶联免疫吸附)技术检验。
结果:PCR技术检出91例阳性患者,占比91.00%;ELISA技术检出83例阳性患者,占比83.00%,两种技术的阳性检出率差异显著(p<0.05)。
结论:PCR技术检验乙型肝炎的准确率更高,有助于临床早干预、早治疗。
【关键词】乙型肝炎;PCR;ELISA;阳性检出率乙型肝炎是常见的肝脏慢性传染病,由感染乙肝病毒所致,临床表现为全身疲乏无力、食欲减弱、上腹部不适、肝区疼痛,部分患者有黄疸、发热症状。
乙肝病毒感染是全球性的公共卫生问题,新发感染率呈下降趋势。
由于乙型肝炎具有传染性,且对肝脏的损伤大,严重影响患者的日常生活,危害身心健康。
为促进乙型肝炎患者早期得到有效治疗,寻找一种高效的检验方法对改善乙型肝炎患者预后有显著积极意义。
本研究纳入100例乙型肝炎患者,将其分组对比,分析了PCR技术与ELISA技术的阳性检出率,现做如下报道:1.一般资料与方法1.1一般资料本研究100例乙型肝炎患者纳入于2021年6月-2021年12月,包括58例男性和42例女性,年龄21-72岁,均龄(48.4±12.4)岁。
入组标准:与乙型肝炎诊断标准相符;知晓本研究目的前提下完整签署研究知情同意书;认知正常,无精神病史,能够积极主动配合、沟通。
排除标准:伴有其他严重器质性疾病;处于妊娠或哺乳等特殊时期的女性患者;意识障碍或聋哑而不能积极配合;器官功能严重障碍;患有恶性肿瘤。
1.2方法所有患者入院后均进行PCR技术检验、ELISA技术检验,安排经验丰富的操作人员检查,患者受检之前将禁止饮食饮水时间、注意事项告知患者,确保睡眠充分。
患者受检当日清晨采集其空腹静脉血4ml作为检验样本,然后离心处理10min,每分钟转速3000r,确保血样不溶血,留取血清,然后置入两支试管内,其中一支试管内血清实施PCR技术检验,另一支试管内血清实施ELISA技术检验[1]。
PCR技术在乙型肝炎中的检验中应用效果分析
PCR 技术在乙型肝炎中的检验中应用效果分析摘要目的分析PCR技术在乙型肝炎检验中的应用效果。
方法抽取2019年1月至2021年10月间我院收治的乙型肝炎患者40例作为本文的观察对象,并根据随机数字表法将其分成两组,即一组对照组,一组观察组,前者接受常规ELISA检验,后者接受PCR技术检验,对比两组的诊断准确率。
结果诊断准确率,观察组共计19名诊断正确者,诊断准确率为95.00%,对照组共计14名诊断正确者,诊断准确率为70.00%,可见观察组诊断准确率明显高于对照组,对比差异具有统计学意义(p<0.05)。
结论在乙型肝炎检验中运用PCR技术的价值较高,可推广。
关键词 PCR技术;乙型肝炎;检验价值乙型肝炎简称“乙肝”,是一种临床常见传染病,是因感染乙型肝炎病毒引起,主要以肝脏病变为主。
大多数乙肝患者没有明显症状,部分可存在全身乏力、食欲减退、恶心呕吐、尿黄以及上腹部不适等,当病情发展至严重阶段,患者会逐渐出现多个器官和系统的严重并发症,例如:肝硬化、上消化道出血、肝癌等,增加死亡率[1]。
目前临床常采用ELISA检验、PCR技术两种检验方式诊断患者的病情,为了探究二者的诊断准确性和差异性,本文进行如下研究。
1一般资料与方法1.1一般资料此次研究如需对象共计40例,均为2019年1月至2021年10月间我院收治的乙型肝炎患者,并将其按照随机数字表法分成各有20例的对照组与观察组。
纳入标准:(1)临床资料完整者;(2)符合乙型肝炎诊断标准者;(3)知情此次研究并签署同意书者。
排除标准:(1)存在沟通障碍、认知障碍者;(2)依从性差、配合度低者;(3)伴精神系统疾病者。
对照组:本组20例中女患者有8名,男性患者有12名,年龄最小者27岁,年龄最大者66岁,平均年龄为(48.37±2.31)岁。
观察组:本组20例中女患者有9名,男性患者有11名,年龄最小者26岁,年龄最大者65岁,平均年龄为(48.46±2.12)岁。
PCR技术在乙型肝炎检验中的应用价值分析
PCR技术在乙型肝炎检验中的应用价值分析摘要:目的分析聚合酶链式反应(PCR)技术在乙型肝炎检验中的应用价值。
方法94例乙型肝炎患者,随机分为参照组与分析组,每组47例。
参照组采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检验,分析组采用乙型肝炎病毒PCR技术检验。
比较两组患者乙型肝炎检出率及乙肝表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)阳性检出率。
结果参照组患者乙型肝炎检出率为61.70%(29/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性检出率分别为63.83%(30/47)、59.57%(28/47)、57.45%(27/47);分析组患者乙型肝炎检出率为97.87%(46/47),HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性检出率分别为95.74%(45/47)、93.62%(44/47)、91.49%(43/47)。
分析组患者乙型肝炎检出率及HBsAg、HBeAg、HBeAb阳性检出率均高于参照组,差异具有统计学意义(χ2=19.064、14.842、15.192、14.324,P<0.05)。
结论应用PCR技术检验乙型肝炎病毒诊断乙型肝炎的应用价值高,可作为乙型肝炎患者检验的首选方式进行推广。
关键词:PCR技术;乙型肝炎;检验;应用;价值引言乙型肝炎(hepatitisB)是临床常见病毒感染性肝炎,主要发病原因为乙型肝炎病毒感染。
随着病情发展,乙型肝炎患者肝脏组织不断纤维化,最终可发展成肝硬化,严重威胁患者生命安全,因此,临床早期诊断具有重要意义。
在乙型肝炎临床诊断中,酶联免疫法及化学发光法均为常见的乙型肝炎病毒血清学检验方式,其中酶联免疫法主要通过抗体与酶复合物结合后显色进行检测,化学发光法指在一定条件下,化学检测体系中待测物质浓度与体系化学发光强度呈线性定量关系的原理进行检测,两种检测方式均具良好检出效果,但何种检测方式更具优势仍有待考察。
PCR技术在医学检验乙型肝炎中的应用
PCR技术在医学检验乙型肝炎中的应用摘要:目的:结合研究需求,有针对性的探讨和分析PCR技术在医学检验乙肝过程中所呈现出的应用效果。
方法:选取2018年4月-2019年8月到我们医院进行诊治的120例乙肝病毒携带者作为研究对象,然后按照数字随机的方法对其进行分组,分为对照组和观察组,其中针对对照组患者所采取的是ELISA检验方法,针对观察组所采取的是PCR技术检验方法。
对两组患者进行相对应的检验之后,进一步分析和对比最终的诊断结果。
结果:通过具体的诊断结果能够充分看出,观察组患者的检测效果更加精准,有效检测率达到了98.33%,而对照组患者的检测率只有81.67%,可以看出,观察组要十分显著的优于对照组,两组患者的诊断准确率差异较为显著,具有统计学意义,即p<0.05。
结论:在针对乙肝患者进行检验的过程中,结合患者的实际情况,有针对性的采取PCR检验技术,这样能够呈现出更为良好的检测结果,检测率更高,因此这种技术值得在临床检验过程中进一步的推广和应用。
关键词:PCR技术;乙型肝炎;医学检验;应用效果从整体情况来看,当前我国的乙型肝炎病毒感染率呈现出逐年上升的趋势,而这也成为我国公共卫生领域十分重要的焦点问题。
从世界范围内来看,这种病毒的控制也迫在眉睫。
乙型肝炎病毒极有可能导致患者的多器官出现严重的受损情况,同时它也是一种比较典型的传染性疾病,因此必须高度关注,对其进行及时有效的检验,且在最大程度上提升检验合格率和精准性,这样才能为医师对患者进行科学合理的评估和及时的诊断提供重要参考。
在针对乙型肝炎进行检测的过程中,PCR技术可以呈现出更为良好的检验效果。
结合这样的情况,在本次研究中着重选取我院的120例乙型肝炎患者作为研究对象,探讨和分析该技术所呈现出的医学检验效果。
现针对具体内容总结分析如下。
1资料与方法1.1一般资料选取我们医院在2018年4月到2019年8月这个阶段内收治的120例乙型肝炎病毒携带者进行深入的分析和探究,然后按照数字随机的方法对其分为对照组和观察组两个组别,每一个组别各有60例患者。
PCR技术在乙型肝炎中检验的应用
PCR 技术在乙型肝炎中检验的应用【摘要】目的:研究PCR技术在乙型肝炎中检验的应用价值。
方法:选取70例乙型肝炎患者,将其分为观察组和对照组,两组患者同时进行肝功能生化检测,酶联免疫(ELISA)法检测,采用PCR技术进行检测。
对比两种检验方法的准确率和阳性率及两组患者在患病程度中是否需要进行治疗。
结果:观察组患者HBV-DNA病毒含量高的肝功能生化检测异常的明显高于对照组,两种之间比较差异具有统计学意义。
结论:对乙型肝炎的患者检测采用PCR技术能够有效判断患者的乙肝检查指标,效果较好,值得临床推广。
【关键词】PCR技术;乙型肝炎;临床检验乙肝是由于乙肝病毒感染引起的一种疾病,是临床常见的传染性疾病,它的潜伏期较长,在发病后对患者的影响较大[1-2]。
对于乙肝抗病毒是其治疗的关键。
而及早的诊断是乙型肝炎治疗的基础,本文就乙型肝炎采用PCR技术进行检测,观察其临床效果,具体内容如下。
1资料与方法1.1一般资料选取自2019年3月-2019年12月期间,在我院接受治疗的70例乙型肝炎患者,将其按平均分类法分为观察组和对照组,观察组患者35例,男性26例,女性9例,年龄为19-81岁,平均年龄(46.5±1.5)岁,病程为2-4年,平均病程(1.5±0.5)年。
对照组患者35例,男性23例,女性12例,年龄28-74岁,平均年龄(46.5±1.5)岁,病程1-7年,平均病程(3.5±0.5)年。
对比两组患者的性别、年龄和病程等发现,两组资料差异不明显,可以进行统计学比较。
1.2方法对所有的患者均采取空腹血,用专用的静脉采血针,使用5ml血液采集标本管采3ml静脉血。
然后使用型号为北京白洋低速医用600A型的低速离心机离心,将血液标本进行离心处理,将所得的血清放置-20 ℃冰箱保存备用。
两组肝功能生化检测采用日立7600全自动生化仪进行检测,乙肝五项采用酶联免疫吸附法 (ELISA)进行检查,使用的测试剂为由英科新创(厦门)科技有限公司提供的乙型肝炎病毒HBsAg、HBegAg、HBsAb、HBeAb和HBcAb及核心抗体检测试剂,在检测时严格遵循使用试剂盒的操作说明书进行,进行吸光度检测时使用芬兰雷勃MK-3酶标仪进行。
PCR技术在医学检验乙肝中的应用
PCR技术在医学检验乙肝中的应用【摘要】目的:研究PCR在医学检验乙肝中的应用。
方法:随机抽取2015 年9 月进入我院治疗的60例患者,均为乙肝携带者,需要进行采、化验等检验患者的病况。
将患者随机分为两组,实验组和对照组,各30例,实验组采用PCR技术对患者进行检测,对照组采取常规的方法对患者进行检测。
记录两组实乙肝患者检测出的病毒数量并探其性。
结果:观察组检测乙肝患者病毒的速度和准确性的效果明显高于传统检测方法,两者之间具有显著的统计学差异(P <0.05)。
结论:通过PCR术对乙肝患者的检测结果更快速准确,其检测方法明显优于传统检验方法。
【关键词】聚合酶链式反应;检验;乙肝目前,全世界乙型肝炎病毒HBV携带者约有3.8亿,而我国就将近有1.5亿人。
如此高患者中每年死于乙型肝炎相关性肝病约为50万人。
乙型肝炎病毒(HBV)是肝脏疾病的重要致病因子,是严重危害人类健康的病毒之一[1]。
乙型肝炎病毒(HBV)感染后临床表现呈多样性,可表现为无症状携带者、慢性肝炎、急性肝炎、重症肝炎,部分慢性肝炎可演变为肝硬化或肝癌。
因此对其快速准确的诊断成为一种必需,聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR[2],是一种分子生物学技术,用于放大扩增特定的DNA片段,已广泛地应用于病原学检测、基因组研究领域。
为比较PCR与传统检测方法的差异,本文通过与采用传统检测手段患者资料进行对照分析,结果如下。
1 资料与方法1.1一般资料经严格检验,随机抽取于2015年12月入我院进行乙肝治疗的60例患者,年龄在30-60 岁之间。
研究的60例患者均为乙肝患者,均无系统性疾病和药物过敏史。
将60例患者随机分两组,即实验组和对照组,实验组30例,男16例、女14例;对照组人数30人,男15例、女15例。
采用统计学分析,两组患者在年龄、性别及疾病原因等方面差异不显著,无统计学意义,具有可比性。
PCR反向膜杂交技术检测乙型肝炎病毒
PCR反向膜杂交技术检测乙型肝炎病毒
肖瑜;彭理年;林光;周晓兰
【期刊名称】《贵州医药》
【年(卷),期】2000(024)002
【摘要】目的探讨PCR反向膜杂交技术在乙型肝炎病毒(HBV DNA)检测中的应用.方法用PCR反向膜杂交技术定性检测100例血清标本中的HBV DNA,结果与常规PCR法和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法比较.结果 100例血清标本,本法阳性率为53.0%,常规PCR法为47.0%.HBsAg(+)和HBeAg(+)与HBV DNA有很好的相关性.结论该技术能快速、敏感和高度特异地对PCR产物进行鉴定,亦可检测HBV的真实感染和复制情况,有助于乙型肝炎的临床诊断.
【总页数】2页(P69-70)
【作者】肖瑜;彭理年;林光;周晓兰
【作者单位】遵义医学院附院检验中心,563003;遵义医学院附院检验中心,563003;遵义医学院附院检验中心,563003;遵义医学院附院检验中心,563003
【正文语种】中文
【中图分类】R511
【相关文献】
1.PCR反向点杂交技术与DNA测序法检测HPV的对比研究 [J], 许爱敏;张丽萍;周惠芳
2.PCR反向斑点杂交技术在乙型肝炎病毒基因分型检测中的应用 [J], 李明;刘琴;王
冠
3.PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌 [J], 肖瑜;彭理年;李淑琴
4.PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义 [J], 董德琼;杨渝浩;肖瑜;彭理年
5.反向线性探针杂交技术检测慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐药研究 [J], 赖国旗;张文露;胡源;唐红;张磊;谢素兰;潘玥;魏立雯;黄爱龙
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PCR技术应用在乙型肝炎检验中的效果分析
PCR技术应用在乙型肝炎检验中的效果分析摘要】目的:观察与分析将PCR技术应用在乙型肝炎检验中的效果。
方法:选取2015年4月-2016年8月笔者所在医院收治的120例乙型肝炎病毒携带者,将其作为本次研究对象,按照挂号顺序分为研究组与参照组,其中参照组患者接收ELISA检验,研究组则接收PCR技术检验,对两组患者的最终诊断结果进行对比分析。
结果:比较两组患者的诊断结果,研究组诊断例数高于参照组(参照组患者共60人,经常规ELISA方法检验,检测出49人,检测率为98.33%,而研究组患者共60人,经PCR检验,检测出59例,检测率为81.67%),经统计学比较分析两组患者的诊断准确率差异较为显著具有统计学意义,即p小于0.05。
结论:在本次研究中发现对临床乙型肝炎患者进行检验,应用PCR技术效果准确,值得临床应用。
【关键词】PCR技术;乙型肝炎检验;临床效果乙型肝炎病毒感染已经被称为公共卫生问题,目前在世界范围内该种病毒的控制十分关键,全世界共有3亿人患有乙型肝炎,乙型肝炎病毒最常引发的疾病就是乙型病毒性[1],它是一种以患者肝脏炎症性病变为反应,造成多器官严重受损的传染疾病,具有极其强烈的传染性,在我国患有该病毒的患者人数也在不断上升,经临床研究发现对于该种患者对其进行准确的检验对治疗有着积极的意义[2],也便于医师对患者治疗的评估,在笔者所在医院分别用两种方式进行检验,结果如下文所述:1资料与方法1.1一般资料选取2015年4月-2016年8月笔者所在医院收治的120例乙型肝炎病毒携带者,将其作为本次研究对象,按照挂号顺序分为研究组与参照组,每组60例,所有患者均在了解本次研究后签署知情同意书,且所有对象均符合诊断标准,排除标准:参与研究的患者无精神功能异常,无感觉功能障碍,无意识严重模糊,无免疫功能障碍患者,无癌症患者。
所有患者均在参与前接收1周的抗病毒干扰治疗。
研究组男性患者36例,女性患者24例,年龄介于21-61周岁之间,平均年龄为(35.4±2.5)岁,参照组男性患者35例,女性患者25例,年龄介于21-61周岁之间,平均年龄为(36.2±2.8)岁,两组患者的一般资料无明显差异,经统计学分析p大于0.05,可行比较分析。
丙型肝炎病毒反向斑点杂交基因分型检测
丙型肝炎病毒反向斑点杂交基因分型检测黄革玲;陈长荣;杨天赐;李基明【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2006(22)14【摘要】目的:分析厦门地区及肝病患者不同临床类型丙型肝炎病毒(HCV)感染株的基因型.方法:用反向点杂交技术(RDB)对109例HCV RNA阳性的血清进行基因分型.结果:109例HCV RNA阳性血清中,其中单一型感染者98例(89.91%),混合型感染11例(10.09%),单一型感染者中以1b型占绝对优势,共90例(82.57%),2a/2c 及6a型分别为2例和3例,另有3例1b+2a/2c和8例1b+6a混合型;HCV 1b 型在急、慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者中均占绝对优势,其余有少量2a/2c、6a及某些混合感染型.结论:厦门地区HCV感染者中,以HCV 1b基因型为主,其次为HCV 6a,另有少数2a/2c型.不同基因型在不同临床类型中的分布无明显差异.【总页数】3页(P1688-1690)【作者】黄革玲;陈长荣;杨天赐;李基明【作者单位】361000,福建省厦门市妇幼保健院分子生物实验室;360000,福建省厦门市中心血站;360000,厦门大学生命科学院生化和分子生物实验室;361000,福建省厦门市妇幼保健院分子生物实验室【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.PCR反向斑点杂交技术在乙型肝炎病毒基因分型检测中的应用 [J], 李明;刘琴;王冠2.丙型肝炎病毒基因分型检测策略 [J], 赵荣;彭劲松;黄汉菊3.丙型肝炎病毒基因分型的检测方法及临床意义 [J], 耿田4.焦磷酸测序法和Sanger测序法检测丙型肝炎病毒基因分型的方法学比较 [J], 渠滕;田文君;刘义庆;刘春梅;张庆;崔朝杰;邱旸5.美国FDA批准一种丙型肝炎病毒基因分型检测试剂 [J], 夏训明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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本文研究结果 可 以看 出, 尿 液 显 微 镜 计 数 法 虽 然 准 确 性
高, 但 是 从 尿 液显 微 镜 计 数 法 的 操 作 方 法 看 出 , 工 作 人 员 的 工 作量确实很大 ; 而尿液分析 仪检测法 虽然方 便 、 快捷、 经济 , 但
是 准 确 率 略 低 于 显 微 镜 计 数 法 。从 这 个 方 面 看 尿 液 检 测 仪 适
用 于 初 诊 患 者 或 者 适 用 于 各 单 位 及 机 关 的正 常 体 检 , 体 现 尿 液 检 测 仪 的优 越 性 , 但是 , 若患者 要复诊 , 和确 诊的情 况下 , 建 议 使用两种方法联合起来 , 通 过 两 种 办 法 的联 合 检 验 才 能 有 效 的 确 保 检 查 中不 会 出 现 漏 检 的 状 况 , 这 是对 前来 诊治 患者 的 负 责, 也 是 对 医 疗 工 作 者 自身 的 负 责 , 若 出 现 两 种 检 验 方 法 不 能
[ 8 ] 翁玉玲 , 李哲 . 尿 液潜 血 试 验 与 镜 检 红 细 胞 结 果 的对 比观 察 E J 3 .
中 国 医 药 指南 , 2 0 1 2 , 1 0 ( 2 9 ) : 5 2 5 3 .
红 细 胞 计 数 法 为 标 准 的情 况 下 , 尿 液 分 析 仪 的 检 测 结 果 出 现 了 1 0 . 0 的假阳性率 , 1 3 . 3 的假 阴性 率 。 同时 通 过 表 1 结 果 观 察 显 微 镜 红 细 胞 计 数 的 阳性 率 要 低 于 尿 液 分 析 仪 , 通 过 表 2发 现 尿 液 分 析 仪 的假 阳性 率 较 高 , 这种结果的出现通过分析是 由 以下 原 因导 致 的 : ( 1 ) 尿 液 分 析 仪 的 原 理 是 通 过 血 红 蛋 白 中 亚 铁 血 红 素 中 的过 氧 化 物 发 生 反 应 从 而 判 断 的 阳性 , 而 患 者 尿 液
出 阳性 。( 3 ) 尿 液 分 析 仪 对 于 那 些 尿 路 感 染 并 伴 有 其他 微 生 物
的 患 者 尿 液 样 本 检 测 出 阳性 造 成 结 果 误 差 。 。 。
总而言之 , 尿 液 分 析 仪 和 显 微 镜 红 细 胞 计 数 法 各 有 其 特 点, 临床 中根 据 不 同 的情 况 酌 情 的 使 用 检 测 方 法 , 必要 时可 以 二者联合检测 , 这 对 提 高 临 床 的 确诊 率 具 有 重 要 意 义 。
国际检验 医学杂志 2 0 1 3 年 9月第 3 4卷 第 1 7 期
I n t J L a b Me d , S e p t e m b e r 2 0 1 3 , V o 1 . 3 4 , N o . 1 7
表 2
以显 微 镜 红 细 胞 计 数 法 作 为 标 准 的检 测 情 况 ( )
问题 、 环 境 问题 , 这 些 问 题 的 出 现 会 影 响 检 测 结 果 。 因 此 在 尿
[ 6 ] 赵 小琳 . 尿 液潜 血 两 种 检 验 方 法 的 比较 [ J ] . 中 国实 用 医 药 , 2 0 1 o ,
( 1 7 ): 6 6 6 7 .
[ 7 ] 如 先古 力 卡德 , 阿里同彩次 克. 尿 液 分 析 仪 潜 血 检 验 与 显 微 镜 红 细 胞计 数 检验 方 法在 尿 液 潜 血 检 验 中 的 效 果 [ J 3 . 中外 医学 研 究 ,
2 O 1 2, 1 2 ( 3 3 ): 4 35 2 4 3 5 3 .
液潜 血检 验 中 要 以 尿 液 显 微 镜 红 细 胞 计 数 法 为 标 准 。 该 标 准 为 尿 液潜 血 检 验 中 的 最 有 效的 标 准 , 其 检 测 结 果 的 准确 性 是 尿
液分析仪无法做到的E 7 q。从 本 文 中可 以看 出在 以尿 液 显 微 镜
样 本 中很 有 可 能 出 现 红 细 胞 数 量 较 少 , 或 者 红 细胞 被 破 坏使 得
尿 液 分 析 仪 检测 出 阳 性 。 ( 2 ) 尿 液 分 析 仪 通 过 化 学 变 化 使 得 其 检测更加 细微 , 患 者 由于 自身 的一 些 其 他 疾 病 导致 分 析 仪 检 查
够 确 诊 的情 况 下 , 可 采 用 颗 粒 自动 计 数 、 化 学、 尿 理 学 等 方 面 的
E 4 3 黄 文娴 . 尿液潜血 的临床检 验结果分 析[ J ] . 中国保健 营养 : 下 旬
刊, 2 0 l 2 , 2 2 ( 1 0 ) : 8 3 — 8 4 .
[ 5 ] 周媛. 尿液 分 析 仪 与 显 微 镜 检 验 尿 液 潜 血 的 比 较 分 析 E J ] . 中 国 中
3 讨 论
参 考 文 献
[ 1 ] 翁玉玲 , 李哲. 尿液潜血试 验与镜检 红细胞 结果 的对 比观察E J 3 . 中 国医 药 指 南 , 2 O 1 2 , 1 0 ( 2 9 ) : 5 2 5 3 . E 2 ] 刘承秀 , 余光华 , 张迎 , 等. 尿 液 潜 血 检 验 的 比较 分 析 [ J ] . 西 南 民 族大学学报 : 自然 科 学 版 , 2 O l O , ( 6 ) : l O O 7 — 1 0 0 9 . [ 3 ] 赵恒丽. 尿液潜血 的临床检验结 果分析 [ J ] . 中 国保 健 营 养 : 下 旬
医 药 咨讯 , 2 0 1 2 , 4 ( 3 ) : 1 8 - 1 9 .
临床 实 际 , 通 过 全 面 的彻 底 的分 析 进 行 诊 断鉴 别 。 在临床检验中发现 , 尿 液分析 仪会 出现试条 因素 , 尿 标 本 因 素 等一 些 外 在 因 素 的 影 响 , 特 别 是 操 作 过 程 中一 出现 的操 作