超声生物显微镜对温经通络法干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜增生的研究

合集下载

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度

指数积分、血管内皮生长因子及滑膜新生血管数之间的关系。用直线相关分析法分析血管内皮生长因子表达与滑膜新生血管数之间的关系，用等级相关分析法分析关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达及滑膜新生
血管数之间的关系。结果与结论：随着实验性关节炎发病时间的延长，滑膜新生血管逐渐增多，滑膜增厚，关节炎指数积分逐渐增加，血管内皮生长因子表达水平和微血管数也随之升高；其关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达水平呈正相关关系（，＝：Ｏ．５３５、Ｐ＜０．０５），血管内皮生长因子表达水平与微血管计数呈显著正相关关系（Ｏ．８６０，Ｐ＜０．０１）。血管内皮生长因子参与了实验性关节炎大鼠滑膜血管翳的形成过程，血管内皮生长因子与微血管密度在类风湿关节炎的发病中具有重要意义。杨波．梁清华．吴丹．熊毅责皎曝诱导性关节炎大鼠滑骥血管内皮生长因子与微盘管密度桃中国组织Ｉ程
关键词：组织构建：血管内皮鲴跑：类风漫关节炎：缸管内皮生长因子：微血管密受｝滑摸：大鼠；国家自然科学基金
主题词：
扬波，女，１９７６年生，湖南省长沙市人，汉族，师，主要从事中西
研究．２０１４．１８（￣：１０５１－１０５６．
Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙｉｎｃｏｌｌａｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄａｒｔｈｒｉｔｉｓｒａｔｓ

Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定

Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定仇海文;李卉;刘振州;孙胜楠;马雪梅;刘梅【摘要】Fibroblast-like synoviocytes(FLS),which derived from rheumatoid arthritis(RA)patients,are the best cell source for the investigation of pathogenesis and treatment of RA.But it is difficult for some universities and institutions,to obtain human synovial tissue. So,it appears to be of essence to establish collagen-induced arthritis(CIA)rat model and there after obtain synovium for primary culture. The approach will be helpful to provide RA FLS efficiently,and lay the foundation for the follow-up experiment. Female Wistar rats were immunized intradermally with 1.5 mg native chicken collagen type II with an equal volume of Freund's complete adjuvant. Seven days later,the rats were then given a subcu-taneous booster injection of half the amount of CII emulsified in Freund's incomplete adjuvant. When CIA model was established,the knee synovial tissue was separated and digested with type II collagenase and trypsin without EDTA. When the cells were cultured to the third generation,VCAM-1 protein in the cells was determined by immunostaining to identify cell purity. We obtained a large number of spindle-shaped cells. More than 98% of these cells were VCAM-1 positive,suggesting that these cells were rat synovial fibroblast-like cells in high purity. The establishment of a simple and rapid method for obtaining a large number of synovial fibroblasts will provides sufficient experimental materials for the pathogenesis andtreatment of RA.%类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是研究RA发病机制和进行RA药物筛选的最理想的细胞来源.但是对于众多非医疗机构的高校和科研院所而言,由于RA病人滑膜组织不易获取而难以进行细胞水平的操作.因此,建立胶原诱导的关节炎大鼠(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,成功分离膝关节滑膜组织并进行滑膜成纤维细胞的原代培养和纯化,将有效解决RA FLS的来源问题,为后续实验奠定基础.本实验通过皮内和皮下两次注射鸡Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠罹患关节炎,通过关节炎指数评分和膝关节HE染色明确CIA模型的建立;分离膝关节滑膜组织,采用Ⅱ型胶原酶和无EDTA胰酶消化法分离细胞并进行传代培养,传至第三代时,细胞免疫荧光检测细胞中VCAM-1蛋白含量以鉴定细胞纯度.结果显示,滑膜组织经过消化和培养后得到大量大鼠滑膜成纤维细胞;在显微镜下观察所得细胞呈梭形树突状,具有成纤维样细胞特征;VCAM-1蛋白阳性细胞达98%以上,确证所分离细胞为滑膜成纤维样细胞,且纯度极高.本研究建立了较简便快捷地获得大量滑膜成纤维细胞的方法,为RA的发病机制研究和药物防治提供了丰富的实验材料.【期刊名称】《南京师大学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(040)003【总页数】5页(P128-132)【关键词】滑膜成纤维细胞;胶原诱导的关节炎大鼠模型;原代培养;类风湿关节炎【作者】仇海文;李卉;刘振州;孙胜楠;马雪梅;刘梅【作者单位】南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023;南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023;南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023;南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023;南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023;南京师范大学生命科学学院,江苏省分子医学生物技术重点实验室,江苏南京210023【正文语种】中文【中图分类】Q2-33类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节慢性炎症、滑膜组织增生和软骨、骨的侵蚀性破坏为主要表现的全身性疾病[1],其两年致残率为50%,三年致残率为70%,而且RA会使患者的平均寿命缩减3～10年[2]. 目前全球有0.5%～1%的成年人患有RA[1]. 在我国,RA的发病率也高达0.32%～0.36%. RA 的高发病率和高致残率,严重影响患者的身心健康,给家庭和社会带来严重的负担. 目前,RA的病因和发病机制尚未明确,但很多研究表明,滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)在炎性因子不断刺激下过度增殖,对其周边的关节软骨和软骨下骨造成侵袭,是RA发病过程中的最主要的效应细胞,因此滑膜成纤维细胞也成为RA发病机制研究和进行药物筛选的重要实验对象[3]. 目前,FLS最理想的来源为RA病人的滑膜组织,其供体大多数来自进行关节置换手术的RA晚期患者. 由于大部分RA病人以药物治疗为主,非不得已情况下才行外科手术治疗,因此RA患者滑膜组织不易获取,尤其对众多非医疗机构的高校和科研院所而言,其材料来源更是困难. 胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型是临床症状和关节病理学改变与人类RA最为相似,也是目前公认的研究RA的理想动物模型. 因此,本实验拟建立CIA大鼠模型,并分离和培养RA大鼠滑膜成纤维细胞,为后续RA机制研究和药物筛选提供RA FLS细胞来源.1.1 实验材料1.1.1 实验动物SPF级雌性Wistar大鼠,体重为160 g～180 g,购于北京维通利华动物研究中心;所有大鼠均饲养于南京师范大学实验动物中心的SPF级鼠笼系统,光照时间为12h,8:00～20:00,温度20 ℃～25 ℃,湿度40%～70%,动物照度:15 lx～20 lx,换气次数:10～20次/h,风速0.1 m/s～0.2 m/s,大鼠自由饮水和取食.1.1.2 实验试剂鸡Ⅱ型胶原,完全弗氏佐剂(CFA)和Ⅱ型胶原酶购于Sigma公司;高糖DMEM培养基、0.25%胰酶和胎牛血清均购于Gibco生物公司;VCAM-1抗体购于Abcam公司;FITC偶联羊抗兔二抗购买于CST公司;苏木素购于Slolarbio公司;伊红购于生兴公司.1.2 CIA大鼠模型制备Wistar大鼠随机分为两组,分别为对照组和模型组,每组5只. CIA模型组:大鼠用10%水合氯醛(3.0 mL/kg体重)麻醉后,取Ⅱ型胶原(3 mg/mL)和等体积的完全弗氏佐剂充分混匀,冰上乳化. 将乳化好的胶原分五点皮内注射至大鼠背部和尾根部,每只注射1 mL. 7 d后按照相同的方法配制Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂乳剂,五点皮下注射于大鼠背部和尾根部,每只注射0.5 mL. 正常对照组分别于皮内和皮下注射生理盐水.1.3 CIA大鼠模型鉴定1.3.1 CIA模型评分根据关节炎评分标准每天对大鼠后爪进行评分[4],病理学评分标准为:0分,足爪无肿胀和红斑;1分,有红斑或轻度肿胀;2分,关节部位中度肿胀;3分,严重肿胀;4分,严重肿胀且不能负重.1.3.2 大鼠膝关节H&E染色将正常大鼠和CIA大鼠膝关节分离并用4%多聚甲醛固定,经过12% EDTA脱钙后进行石蜡包埋和切片. 将切好的石蜡切片放置二甲苯中脱蜡,二甲苯Ⅰ:5 min、二甲苯Ⅱ:5 min. 通过梯度酒精进行复水,100%酒精:2 min;95%酒精:2 min;80%酒精:2 min;双蒸水:4 min. 用苏木素染色5 min,1%氨水溶液返蓝5 s,双蒸水冲洗3次,伊红染色5 min,无水乙醇脱水3次,中性树胶封片. 显微镜下观察.1.4 滑膜成纤维细胞分离和培养造模第3周,大鼠评分达到最大值,将CIA大鼠脱颈处死,仰面固定. 沿膝关节正中纵行切开皮肤直至暴露以膝关节为中心区域,打开韧带层,然后在体视镜下从关节腔中分离滑膜组织. 将滑膜组织浸泡在含有双抗的D-Hank’液中清洗4次. 使用显微镜将组织反复剪至1 mm3小块,加入配制好的含有0.4%Ⅱ型胶原酶培养基消化2 h. 将未贴壁的细胞转移至4 mL含0.25%无EDTA的胰蛋白酶中再次消化30 min,加入8 mL完全培养基消化,1 500 rpm离心10 min,弃上清,重新悬浮细胞,使用200目细胞筛过滤,加入完全培养基继续培养.1.5 滑膜成纤维细胞纯度鉴定取第3代滑膜成纤维细胞接种至24孔板上. 每孔1×105个细胞,待细胞长满,吸弃培养基,使用PBS洗2遍,使用甲醇在-20 ℃固定20 min. PBS洗3次,0.1% Triton-X透化细胞30 min,PBS洗3次,山羊血清封闭1 h,VCAM-1抗体4 ℃孵育过夜. PBS洗3次,荧光二抗室温孵育1 h,PBS洗2次. DAPI染色10 min,PBS洗5次. 荧光显微镜下观察拍照.2.1 CIA大鼠模型的建立2.1.1 大鼠足爪形态学观察CIA模型组大鼠发病率为80%. 从外观来看,正常大鼠足爪部细长(图1(a)),发病大鼠在造模12 d左右出现足爪部红肿,25 d左右足爪评分达到最高值,足爪明显肿胀、畸形、无法负重(图1(b)、1(c)).2.1.2 大鼠膝关节H&E染色将大鼠后肢膝关节固定脱钙后进行石蜡切片并行H&E染色,如图2(a)所示,正常大鼠膝关节没有炎性细胞产生,骨和关节软骨完整,关节腔明显,滑膜组织未增生;CIA组大鼠膝关节滑膜增生明显,关节周围有大量炎性细胞浸润,骨和关节软骨均遭到明显破坏(图2(b)).2.2 大鼠滑膜组织分离及滑膜成纤维细胞培养2.2.1 大鼠膝关节滑膜组织分离在建立CIA大鼠模型后,分离CIA大鼠红肿后肢,小心打开膝关节,暴露内层的滑膜组织. 结果发现,CIA组关节腔炎性细胞浸润,滑膜液较多,滑膜组织大量增生,出现明显的黄褐色滑膜组织,肉眼可见,分离较易(图3(b));与此相对,正常组大鼠膝关节打开后,关节腔内无明显肉眼可见的滑膜组织(图3(a)).2.2.2 滑膜成纤维细胞原代培养和形态观察用手术刀剥取CIA膝关节滑膜组织,剪碎并通过Ⅱ型胶原酶和胰酶消化(见材料与方法)后,收集细胞悬液并进行培养. 结果发现,滑膜成纤维细胞贴壁前为圆形,24 h后全部贴壁并伸出生长突,在显微镜下可以观察到细胞呈梭形树突状生长,细胞质突起细长或较短,具有成纤维样细胞特性(图4(a)). 经过72 h培养后,可见细胞呈簇聚(图4(b)). 经过120 h的培养后,显微镜下可以观察到细胞连接成一整片(图4(c)). 经过传代培养后,滑膜成纤维细胞呈对数生长,分裂增殖快,可见细胞集落呈极向分布. 2.3 滑膜成纤维细胞纯度鉴定VCAM-1蛋白是滑膜成纤维细胞标志性蛋白,其主要在细胞质中表达. 取第3代细胞进行VCAM-1免疫荧光检测,结果如图5(a)所示,98%以上的成纤维细胞中呈VCAM-1阳性,而且均分布于细胞质中,表明所培养细胞为CIA大鼠的滑膜成纤维细胞,且纯度极高,可满足后续实验需要.类风湿关节炎是一种严重危害人类健康的,全身性、多关节、慢性的自身免疫性疾病[1]. 有研究表明滑膜成纤维细胞是RA的关键效应细胞之一,滑膜成纤维细胞的过量增殖和侵袭在RA的发病过程中起重要作用[3,5-6]. 因此,滑膜成纤维细胞成为了研究RA发病机制以及治疗的重要靶细胞. 目前,RA病人滑膜成纤维细胞难以获得,选取简单易得的替代细胞变得尤为重要.在本实验中,采取Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型[7],通过关节炎指数评分判断发病严重程度,评分达到最高值处死大鼠[8],从其膝关节中分离滑膜组织. 通过双酶消化法获取大鼠成纤维滑膜细胞,所培养出的滑膜细胞形态典型,增殖能力强,一只大鼠成纤维滑膜细胞培养至第7代,可获得100盘左右10 cm培养皿的细胞. 将该细胞冻存后,复苏后其在增殖能力方面未发生明显改变. 因此,当细胞大量增殖后可通过超低温保存,为以后实验提供细胞来源.目前,RA滑膜成纤维细胞主要分离方法包括组织块贴壁法、单胶原酶消化法和单胰酶消化法[9]. 本研究选取双酶消化法,并摸索出了最佳的酶浓度和消化时间,成功培养出大鼠成纤维滑膜细胞. 这种方法与传统的组织块贴壁法相比,具有很多优点:(1)获取的原代细胞多,CIA模型大鼠膝关节滑膜组织大量增生,将滑膜分离消化可获得大量原代细胞;(2)操作简单,污染机会少,分离的滑膜组织经过缓冲液反复洗涤和两次消化过程,细菌污染几率大大降低. 和一般的单酶消化法相比,经双酶消化后,细胞分离更加充分,经过充分消化的原代滑膜成纤维细胞贴壁快,增殖快.据文献报道,滑膜成纤维细胞中VCAM-1蛋白大量表达,该蛋白可介导滑膜成纤维细胞之间以及其与骨质之间的黏附,是滑膜成纤维细胞的重要蛋白[10]. 在许多研究中,VCAM-1蛋白常被认为滑膜成纤维细胞的标志蛋白,该蛋白只在细胞质中表达用以鉴定FLS细胞纯度[11]. 本研究中VCAM-1免疫荧光染色结果表明,我们所提取的大鼠滑膜成纤维细胞纯度很高,可用来作为人滑膜成纤维细胞的替代,以进行后续RA发病机制和药物筛选研究.【相关文献】[1] FIRESTEIN G S. Evolving concepts of rheumatoid arthritis[J]. Nature,2003,423(6 937):356-361.[2] BRENOL C V,MONTICIELO O A,XAVIER R M,et al. Rheumatoid arthritis and atherosclerosis[J]. Revista da associacao medica brasileira,2007,53(5):465-470.[3] BARTOK B,FIRESTEIN G S. Fibroblast-like synoviocytes:key effector cells in rheumatoid arthritis[J]. Immunological reviews,2010,233(1):233-255.[4] DU F,LU L J,FU Q,et al. T-614,a novel immunomodulator,attenuates joint inflammation and articular damage in collagen-induced arthritis[J]. Arthritis Res Ther,2008,10(6):R136.[5] HUBER L C,DISTLER O,TARNER I,et al. Synovial fibroblasts:key players in rheumatoid arthritis[J]. Rheumatology,2006,45(6):669-675.[6] NOSS E H,BRENNER M B. The role and therapeutic implications of fibroblast-like synoviocytes in inflammation and cartilage erosion in rheumatoid arthritis[J]. Immunological reviews,2008,223:252-270.[7] GONZALEZ C,ABELLO P,CEPEDA R,et al. Inflammation,synovial angiogenesis and chondroid apoptosis in the evolution of type II collagen-induced arthritis[J]. European cytokine network,2007,18(3):127-135.[8] AMDEKAR S,SINGH V,KUMAR A,et al. Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus regulate inflammatory pathway and improve antioxidant status in collagen-induced arthritic rats[J]. Journal of interferon & cytokine research:the official journal of the international society for interferon and cytokine research,2013,33(1):1-8.[9] 马莎. 三种培养原代滑膜成纤维细胞方法的比较[J]. 昆明医科大学学报,2016,37(6):52-56.[10] LITTLER A J,BUCKLEY C D,WORDSWORTH P,et al. A distinct profile of six soluble adhesion molecules(ICAM-1,ICAM-3,VCAM-1,E-selectin,L-selectin and P-selectin)in rheumatoid arthritis[J]. British journal of rheumatology,1997,36(2):164-169.[11] LI R,CAI L,TANG W J,et al. Apoptotic effect of geniposide on fibroblast-like synoviocytes in rats with adjuvant-induced arthritis via inhibiting ERK signal pathway in vitro[J]. Inflammation,2016,39(1):30-38.。

缺氧诱导因子-1α在胶原诱导性关节炎大鼠滑膜中的表达和意义

ｒｅｍｔｄａｔｉｓ（Ａ．ｈｕａｉｒｒｉＲ）ＭＥＴＵＳＴｅｃｌｇｎ—ｉｄｃｄａｔｒｉＣＡ）ｍｏｅｗｓｓｔｕａｓｒａｓｏｈｔＨＯＩ：ｈｏｌｅａｎｕｅｒｉｓ（ＩｈｔｄｌａｅｐｉｍｌＷｉａｔ．ｎｅｔｒ
而参与ＲＡ发病。
［关键词］关节炎，类风湿；缺氧诱导因子一１；滑膜［中图分类号］Ｒ９．２５３２［文献标识码］Ａ
Ｅｘｒｓｉｎａｄｓｇｆｃｎｅｏｐｘａ－ｉｄｕｉｅｆｃｏ－ｏｙｖ・ｐｅｓｏｎｉｎｉｉａｃｆｈｙｏｉ・ｎｃｂｌａｔｒ・ｌａｎｓｎｏｉ－
戴辰程。戴冽，郑东辉。李海刚５海俊。，，，，１
（中山大学附属第二医院风湿免疫科，病理科，广东广州５０２）１１０［摘要］目的：探讨缺氧诱导因子一ｌｔＨＦ—ｌ）类风湿关节炎（Ａ发病中的作用。方法：采用雄性ｅＩ（ｔｅ在Ｒ）
Ｔｅａｔｒｉｃｉｉｎｅｅ．ｐｔｏｏｉａｈｎｅｄｅｐｅｓｎｏＦ一１ｏｙｏｉｍｔｉｅｅｔｔｅｅｏｓｒｅｈｒｉｓａｔｔｉｄｘｓａｌｇｃｃａｇｓａｘｒｓｉｆＨＩｈｔｖｙｈｌｎｏ仅ｎｓｎｖｕａｆｒｎｉｗｒｂｅｖｄｄｍｅ
Ｗｉａ大鼠建立 Ⅱ型胶原诱导性关节炎（Ｉ模型，ｓｒｔＣＡ）动态观察ＣＡ大鼠关节炎活动指标，Ｉ并于造模第２、８３１２、５ｄ取膝关节滑膜分别行ＨＥ染色及ＨＩｅ免疫组化染色，析ＨＦ—ｌ蛋白表达与ＣＡ大鼠关节炎活动指标、Ｆ—ｌｔ分ＩｔｅＩ滑膜病理学评分之间的关系。结果：ＩＣＡ大鼠膝关节滑膜衬里层和衬里下层细胞胞浆和胞核均表达ＨＦ一１且其表Ｉ仅，达随发病时间延长而逐渐增加；滑膜表达ＨＦ—ｌ与ＣＡ大鼠关节炎活动指标、ＩｅｔＩ滑膜病理学总评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关，与炎症浸润评分无明显相关。结论：ＩＨＦ一１仪可能通过促进滑膜增生及血管生成

胶原诱导Wistar和Lewis大鼠类风湿关节炎模型病理特点的比较

胶原诱导Wistar和Lewis大鼠类风湿关节炎模型病理特点的比较施佳君;陈方明;马全鑫;陈诚;陈姣姣;郁晨;陈民利【摘要】目的探讨牛II型胶原(CII)诱导Wistar和Lewis大鼠类风湿关节炎(RA)模型的病症表现与病理特点的差异性.方法采用尾根部皮内注射与CFA混合液进行首次免疫,14 d时注射牛2型胶原(CII)与弗氏完全佐剂(IFA)混合液加强免疫,建立Wistar和Lewis大鼠RA模型,观察Wistar-RA组和Lewis-RA组发病情况,测定足肿胀度和血清抗CII抗体效价水平,在第12周进行足趾形态和组织的病理学检查,测定踝关节滑膜VEGF、IL-6、IL-10和IL-17A的表达.结果胶原诱导后,Wistar与Lewis大鼠分别在第10天和14天出现后足肿胀,第21天和24天达到高峰,血清抗CII抗体效价第3周后显著升高(P< 0.01),关节炎指数(AI)明显升高(P<0.01);Wistar-RA组的成模率80%,第5周足肿胀消退并进入平缓期,Lewis-RA组的成模率100%,第7周足肿胀消退并进入平缓期;在12周时两模型组均发现关节严重软骨侵蚀、滑膜增生以及炎症细胞浸润,关节滑膜血管新生和血管翳形成,后肢股骨和胫骨骨密度明显降低(P< 0.01),关节滑膜中VEGF、IL-6、IL-17A表达显著增加(P< 0.05,P<0.01),IL-10表达明显下降(P< 0.01).与Wistar-RA组比较,Lewis-RA组足容积和足掌厚度增长持续时间较长, AI高于Wistar-RA组,滑膜血管新生和血管翳形成更明显,踝关节滑膜 VEGF表达显著高于 Wistar-RA 组(P <0.05),而IL-17A表达显著低于Wistar-RA组(P< 0.05).结论 Wistar-RA模型和Lewis-RA模型均出现关节肿胀、变形、活动减少等症状,关节炎指数升高,关节滑膜中VEGF、IL-6、IL-17A的表达增加,IL-10表达下降,与临床相符.但Wistar-RA模型肿胀持续时间短,而Lewis-RA模型肿胀持续时间长,关节损伤也更为严重,血管新生和血管翳形成更明显;Wistar-RA模型IL-17A表达高,而Lewis-RA模型则VEGF高表达,这可能与其病理特点有关.%Objective To study the differences of symptoms and pathological features of Wistar and Lewis rat models of collagen-induced rheumatoid arthritis. Methods Wistar and Lewis rats were injected with intermixt ure of bovine TypeⅡ collage and complete Freund's adjuvant(CFA)for first immunization, then strengthen it after 14 days and observed the incidence of Wistar-RA group and Lewis-RA group. The degree of paws swelling and the titer of serum anti CII antibody were determined. The pathological changes in toe and joint tissues were examined at 12 weeks, and the expressions of VEGF, IL-6, IL-10 and IL-17A in the synovial membrane of ankle joint were detected. Results After collagen induction,the Wistar and Lewis rats showed paw swelling after 10 d and 14 d,and peaked at 21 d and 24 d,the titer of serum anti CII antibody was significantly increased at third week(P< 0.01), and arthritisindex(AI)was also significantly increased(P< 0.01). In the Wistar-RA rat group, the rate of molding was 80%, and at fifth weeks, the swelling of the paws subsided and went into a flat level. The molding rate of the Lewis-RA group was 100%,at the seventh week,the swelling of paws subsided and went into a flat level. At 12 weeks,the two model groups showed severe articular cartilage erosion, synovial hyperplasia and inflammatory cell infiltration, neovascularization and pannus formation in the joint synovium,and the bone mineral density of the femur and tibia of the hind limbs was significantly decreased(P<0.01). The expression of VEGF,IL-6 and IL-17A in synovium was significantly increased(P< 0.05,P< 0.01). The expression of IL-10 was obviously decreased(P< 0.01). Compared with theWistar-RA group,the paw volume and paw thickness were increased for a longer time in the Lewis-RA group,AI was higher than that of the Wistar-RA group,synovial angiogenesis and pannus formation were more distinct, the expression of VEGF in synovium was significantly higher than that of Wistar-RA group(P< 0.05), while the expression of IL-17A was significantly lower than that in the Wistar-RA group(P< 0.05). Conclusions Both the Wistar-RA rat model and Lewis-RA rat model show jointswelling,deformation and decreased activity. AI is increased,the expression of VEGF,IL-6 and IL-17A increased,and the expression of IL-10 decreased,which are consistent with the clinical manifestation. The Wistar-RA rat model has a short duration of swelling, while the Lewis-RA rat model has a longer swelling duration and more severe joint damages. The neovascularization and pannus formation are more obvious. The expression of IL-17A in the Wistar-RA rat model is higher, while the Lewis-RA model has a highly expressed VEGF,which may be related to its pathological characteristics.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2018(028)004【总页数】9页(P19-26,37)【关键词】类风湿关节炎;牛II型胶原;Wistar大鼠;Lewis大鼠;病理特点【作者】施佳君;陈方明;马全鑫;陈诚;陈姣姣;郁晨;陈民利【作者单位】浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053;浙江中医药大学比较医学研究所动物实验研究中心,杭州 310053【正文语种】中文【中图分类】R-33类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性、炎症性、系统性的自身免疫性疾病，其主要的病理学特征为关节滑膜组织增生以及骨、软骨等结构进行性病变，最终导致关节畸形，功能丧失，严重影响人们的生活质量[1]。

Wistar大鼠胶原诱导的关节炎造模因素的分析

Wistar大鼠胶原诱导的关节炎造模因素的分析陈哲;胡永红;涂胜豪【摘要】目的通过比较不同的造模方法,分析影响胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型建立的因素.方法选用Wistar大鼠造模,通过改变性别、剂量、年龄、注射部位及免疫方式,来比较造模成功率.结果不同性别、剂量、年龄及免疫方式造模成功率不同.结论 4 ～ 5周龄Wistar雌性大鼠,初次免疫注射乳剂4点共0.20 mL,加强免疫在14 d之后3点共0.15 mL的造模成功率最高.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2010(020)005【总页数】3页(P29-31)【关键词】胶原诱导的关节炎;Wistar大鼠;模型【作者】陈哲;胡永红;涂胜豪【作者单位】华中科技大学附属同济医院中西医结合科,武汉,430030;华中科技大学附属同济医院中西医结合科,武汉,430030;华中科技大学附属同济医院中西医结合科,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R-332胶原诱导关节炎模型是Trentham于1977年创立的［1］。

随着研究的不断深入和实验的大量重复，该模型得到充分的发展和完善，已被公认为是研究人类类风湿关节炎的经典模型，国内对该模型的研究尚未完全开展起来。

造模过程中很多因素会影响到造模成功率，导致相关实验的不能顺利进行。

本研究在参考国内外经典文献的基础上，通过与本院风湿病实验室合作，三年来不断改进造模方法和剂量来分析影响成模率的因素，以建立更为稳定可靠CIA模型的方法。

1.1 动物及试剂1.1.1 动物:Wistar大鼠，由华中科技大学同济医学院动物中心提供［SCXK(鄂)2003～0005］。

1.1.2 试剂:牛Ⅱ型胶原(10 mg，5 mL/支装)、不完全弗氏佐剂(5 mL/支)均购于Chondrex公司。

1.2 方法1.2.1 不同性别对造模的影响:选用60只大鼠，4～5周龄，体重170±10 g，雌雄各半，分为二组，一组为雌鼠，另一组为雄鼠。

温经通络法对胶原性关节炎大鼠血管新生干预作用的研究

原性关节炎（ＣＩＡ）大鼠血清及滑膜组织中的表达变化，及芍药甘草附子汤的干预作用。方法建立
ＣＩＡ大鼠模型，分组干预后计算关节炎炎症指数（ＡＩ）。ＥＬＩＳＡ法检测血清ＶＥＧＦ、ｓＫＤＲ含量，免疫组
织化学法检测关节滑膜ＶＥＧＦ、ＫＤＲ表达。结果造模后第２８天各组大鼠炎症反应明显，用药４周
ｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ａｎｄｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｒｏｇｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ（ｓＫＤＲ）ｉｎｔｈｅｓｅｌｑ／ｍａｎｄｓｙｎｏｖｉｌａｔｉｓｓｕｅｏｆｔｈｅｒａｔｓ
ｗｉｔｈｃｏｌｌａｇｅｎｉｎｄｕｃｅｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＣＩＡ）。ａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｓｈａｏｙａｏｇａｎｃａｏｆｕｚｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．
及其受体表达有关。
芍药甘草附子汤对ＣＩＡ大鼠有明显的治疗作用，其机制可能与抑制ＶＥＧＦ
【关键词】温经通络法；胶原性关节炎；血管新生；血管内皮细胞生长因子【中图分类号】Ｒ２８５．５【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７３— ６６１３（２０１３）０５— ０５０２— ０５

胶原性关节炎大鼠滑膜基因表达谱研究!

［收稿 3’’U%&3%’-. 修回 3’’+%’N%’+ ］（编辑. 徐. 杰）
・征订启事・
《医用基因工程》
本书主编：杨吉成。北京化学工业出版社出版，于 3’’3 年被苏州大学评定为精品教材。现已用于博士研究生专业基础课和生物技术及生物制药专业本科生主干专业课程的教学。本书是作者在多年从事基因工程的教学和科研的基础上，通过不断总结、充实、修改后编写而成的。本书在全面论述基因和基因工程基本概念的基础上，系统地阐述了有关基因克隆分离、鉴定；基因重组的常用工具酶、载体以及重组技术。详细地介绍了重组子的筛选、分离及鉴定方法。着重论述了在原核和真核表达系统中的基因表达及调控，专题介绍了基因工程在基因制药、基因工程疫苗及抗体和基因治疗中的应用。本书内容全面、系统，即有新理论，又有新技术、新方法和新进展。可供医学和生物技术专业的教师及研究人员参考，尤其适用于医学、生物技术及生物制药专业的研究生、本科生。联系单位：苏州大学医学院细胞和分子生物教研室（苏州市人民路 5, 号）， 3&U’’- ；电话： ’U&3%+U&3U’N’. 杨吉成
!" 参考文献
&. 邓安梅，仲人前，陈孙孝 !" #$% 关节炎中 /-0 123, 4 1($"%5 共刺激途径的实验研究［ 6］ 7 中国免疫学杂志， 3’’’ ； &+ （,）： 5&3%5&57 3. 89:;< $ =， !><?@A:B C *， 1;:D:; 8 " !" #$% 1>??EF:@%A@GHB:G E;IJ;A%

滑膜炎的超声临床及基础研究

炎症活跃期：膝关节髌上囊滑膜明显强化
炎症活跃期：腱鞘炎滑膜强化明显
炎症消退期：掌指关节滑膜未见明显强化
炎症活跃期：腕关节造影，滑膜明显强化
炎症活跃期：腱鞘炎造影，腱鞘滑膜明显强化
炎症活跃期：髌上囊造影，滑膜明显强化
炎症活跃期：指间关节造影，滑膜明显强化
掌指关节造影时间-强度曲线
髌上囊造影时间-强度曲线及参数
超声造影发现，应用CEUS诊断滑膜炎的敏感度为88.9%，特异度为100%，CEUS与增强MRI对于诊断滑膜炎的Kappa值为0.86，具有较高的一致性，研究结果表明CEUS是判断滑膜炎的一个重要的方法。CEUS能提高滑膜微血管的显示，滑膜微血管的多少与滑膜炎活性相关。
在不同剂量鸡卵蛋白注射组，剂量越大，超声测量关节囊厚度及滑膜厚度越大，病理滑膜炎评分越高。我们用二维超声关节囊厚度与CEUS测量滑膜厚度分别与病理滑膜炎评分做相关分析发现在急性炎症期，两者均能较好的判定滑膜炎的程度，在慢性炎症期，CEUS较二维超声能更好的判定滑膜炎的程度。
滑膜炎的临床及基础研究
超声仪器条件
高性能彩色多普勒超声诊断仪
宽频线阵探头，最高频率>10 MHz
仪器调节
预设：“肌肉骨骼”条件深度（depth）：调节至所观察关节位于屏幕中心焦点（focus）：将焦点调节至感兴趣区。
彩色多普勒设置
取样框：包括关节两侧骨的边缘、关节腔及病变延伸的最大范围
超声造影与增强MRI对滑膜炎分级的Kappa值为 0.76，r值为0.92，对于滑膜厚度测量，两者的r值为0.82，说明两种方法具有较高的一致性和相关性。
不同组二维超声
声像图： (A),(B),(C)第1周右侧髌上囊纵断面；(D),(E),(F) 第4周右侧髌上囊纵断面； (G),(H),(I) 第1周右侧后关节囊横断面；(J),(K),(L) 第4周右侧后关节囊横断面。 (A),(D),(G),(J)为第1组， (B),(E),(H),(K)为第2组， (C),(F),(I),(L)为第3组

温经通络法对CIA大鼠关节滑膜组织VEGF及其受体基因表达的影响

ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ｍＲＮＡａｎｄｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒｓＶＥＧＦＲ一１ｍＲＮＡ，ＶＥＧＦＲ－２ｍＲＮＡ，ＶＥＧＦＲ一３ｍＲＮＡｉｎｊｏｉｎｔｓｙｎｏｖｉｌａｔｉｓｓｕｅｉｎＣＩＡ
・
２ｌ１・
・
实
验
研
究
・
温经通络法对ＣＩＡ大鼠关节滑膜组织ＶＥＧＦ及其受体基因表达的影响
靖卫霞侯秀娟孙文燕。马涛王新祥朱跃兰
（１．北京中医药大学第三附属医院，北京１０００２９；２．北京中医药大学东方医院，北京１０００７８；３．北京中医药大学药理教研室，北京１０００２９）
ｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｉｎｊｏｉｎｔｓｙｎｏｖｉａｌｔｉｓｓｕｅｉｎＣｒａｔｓ
ＪＩＮＧＷｅｉ－ｘｉａ，ＨＯＵＸｉｕ－ｊｕａｎ，ＳＵＮＷｅｎ－ｙａｎ，ＭＡＴａｏ，ＷＡＮＧＸｉｎ－ｘｉａｎｇ，ＺＨＵＹｕｅ — ｌａｎ
【关键词】温经通络法；血管内皮生长因子；类风湿关节炎；实验研究
Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｗａｒｍｉｎｇａｎｄａｃｉｖａｔｉｎｇｔｍｅｒｉｄｉａｎｍｅｔｈｏｄｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄ

超微血流成像技术在类风湿关节炎掌指关节滑膜病变中的应用

超微血流成像技术在类风湿关节炎掌指关节滑膜病变中的应用Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｕｐｅｒｂｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｉｍａｇｉｎｇｉｎｓｙｎｏｖｉａｌｌｅｓｉｏｎｓｏｆｔｈｅｍｅｔａｃａｒｐｏｐｈａｌａｎｇｅａｌｊｏｉｎｔｉｎｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒ￣ｔｈｒｉｔｉｓ李㊀斌ꎬ严春阳(浙江省宁波市第七医院超声科㊀浙江㊀宁波㊀３１５２０２)㊀㊀ʌ摘㊀要ɔ㊀目的㊀探讨超微血流成像(ＳＭＩ)技术评估类风湿性关节炎(ＲＡ)掌指关节增厚滑膜新生血管存在的应用价值ꎮ方法㊀对我院３０例确诊ＲＡ患者共４５个掌指关节增厚滑膜进行彩色多普勒(ＣＤＦＩ)㊁ＳＭＩ及超声造影(ＣＥＵＳ)检查ꎬ分析检测结果ꎮ结果㊀增厚滑膜回声特点以低回声为主ꎬ厚薄不均ꎮ３０例患者４５个掌指关节ＣＤＦＩ检测出新生血管的７个(１６％)ꎬ而ＳＭＩ检测出４０个(８９％)ꎬＣＥＵＳ检测出４３个(９６％)ꎬＳＭＩ与ＣＥＵＳ评价有无血流结果比较ꎬ差异无统计学意义(Ｐ>０.０５)ꎬ显示血管的分级与ＣＥＵＳ呈现良好的一致性(Ｋａｐｐａ＝０.８１９ꎬＰ<０.００１)ꎮ结论㊀ＳＭＩ技术可以敏感地显示ＲＡ患者掌指关节增厚滑膜的新生血管存在ꎮʌ关键词ɔ㊀类风湿关节炎ꎻ新生血管ꎻ超声检查ꎻ超微血流成像技术中图分类号:Ｒ５９３.２２ꎻＲ４４５.１㊀㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀㊀文章编号:１００６￣９０１１(２０１９)０２￣０３３５￣０３㊀㊀类风湿关节炎(ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓꎬＲＡ)是一种以关节软骨侵袭为主的自身免疫性疾病[１]ꎬ病变的早期和活动期病理改变主要是增生滑膜微血管形成ꎮ目前彩色多普勒血流(ｃｏｌｏｕｒＤｏｐｐｌｅｒｆｌｏｗｉｍａ￣ｇｉｎｇꎬＣＤＦＩ)成像技术ꎬ已广泛应用于ＲＡ滑膜病变的诊断ꎬ但其对微小血流并不敏感ꎮ而超声造影(ｃｏｎｔｒａｓｔ￣ｅｎｈａｎｃｅｄｕｌｔｒａｓｏｎｏｇｒａｐｈｙꎬＣＥＵＳ)对微小血流显影敏感ꎬ被认为超声显示微循环的金标准 [２]ꎬ但其价格昂贵ꎬ也属于一种有创检查方法ꎬ故在临床广泛应用受到了一定限制ꎮ超微血流成像(ｓｕ￣ｐｅｒｂｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｉｍａｇｉｎｇꎬＳＭＩ)技术是一种新的多普勒技术ꎬ利用新的算法ꎬ减少运动杂波的影响ꎬ提高低速血流信号的检出率ꎬ它可显示极低流速微小血管ꎬ类似造影的显示效果[３]ꎮ本文应用ＳＭＩ技术并结合ＣＥＵＳ技术ꎬ观察ＲＡ患者掌指关节病变ꎬ旨在探讨ＳＭＩ技术对ＲＡ患者掌指关节滑膜病变的新生血管存在的临床价值ꎮ１㊀资料与方法１.１㊀临床资料收集２０１５年５月~２０１７年１２月我院确诊ＲＡ患者共３０例ꎬ均符合２０１０年美国风湿病学会/欧洲抗风湿联盟的诊断标准[４]ꎬ其中男性７例ꎬ女性２３例ꎬ年龄２６~８４岁ꎬ平均年龄(５５ʃ６.５)岁ꎬ病程最作者简介:李斌(１９６９￣)ꎬ女ꎬ浙江宁波人ꎬ毕业于宁波大学医学院临床医学ꎬ本科学历ꎬ学士学位ꎬ主任医师ꎬ主要从事超声诊断工作通信作者:严春阳㊀主任医师㊀Ｅ￣ｍａｉｌ:ｌｉｂｉｎｇ.ｚｕｏｒｅ＠１６３.ｃｏｍ短６月ꎬ最长３２年ꎬ平均(８.１ʃ５.３)年ꎮ１.２㊀检查方法采用ＴｏｓｈｉｂａＡｐｌｉｏ５００超声诊断仪ꎬ线阵探头ꎬ探头频率５~１４ＭＨｚꎮ对３０例患者１~５个掌指关节共３００个关节进行高频彩色多普勒检查筛选ꎬ每例患者选取１~２个滑膜厚度较厚㊁图像清晰的关节ꎬ共４５个关节(滑膜增生厚度大于２ｍｍ)进行最后检测ꎮ患者取坐位ꎬ手掌伸直ꎬ平放于检查台上ꎬ常规二维超声检查ꎬ对双手掌指关节进行纵切和横切扫查ꎬ观察滑膜的分布及厚度㊁关节腔积液及关节骨质破坏等表现ꎮ记录滑膜增厚的位置及边界ꎬ选好显示滑膜最清晰的切面ꎬ用ＣＤＦＩ观察血流信号ꎬ然后切换到ＳＭＩ模式检测血流ꎬ对比并记录同一切面上的血流分布ꎬ最后切换至ＣＥＵＳ成像模式ꎮ造影前ꎬ经肘正中静脉穿刺注入微泡造影剂２.０ｍｌ(Ｂｒａｃｃｏ公司ＳｏｎｏＶｕｅꎬ主要成份为卵磷脂包裹的六氟化硫微泡)ꎬ随后注入５ｍｌ生理盐水ꎬ连续扫查２ｍｉｎꎬ以明确新生血管ꎬ储存并分析ＣＥＵＳ检查全过程的图像资料ꎮ１.３㊀评价方法滑膜内血流分级参照目前国内外通用的半定量评分系统(ｓｅｍｉ￣ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｓｃｏｒｉｎｇｓｙｓｔｅｍｓꎬＳＱＱＳＳ)[５]ꎬ分为四级:０级ꎬ滑膜内未探及血流信号ꎻⅠ级ꎬ探及１~２处点状血流信号ꎻⅡ级ꎬ探及３~４处短线状血流信号ꎬ且分布面积<１/２滑膜区域ꎻⅢ级ꎬ血流信号分布面积>１/２滑膜区域ꎮ１.４㊀统计学分析５３３医学影像学杂志２０１９年第２９卷第２期㊀ＪＭｅｄＩｍａｇｉｎｇＶｏｌ.２９Ｎｏ.２２０１９采用ＳＰＳＳ２２.０进行统计分析ꎬ计量资料以ｘʃｓ表示ꎬ进行ｔ检验ꎬ频数及构成比表示计数资料ꎬ计数资料的一致性采用配对卡方检验或计算Ｋａｐｐａ值ꎬ检验水准为０.０５ꎮ２㊀结果２.１㊀ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ及ＣＥＵＳ成像方式在掌指关节增厚滑膜内血流信号显示结果比较本组３０例患者共４５个掌指关节滑膜均显示不同程度增厚ꎬ厚度为２~６ｍｍꎬ表现为以低回声为主ꎬ厚薄不均ꎬ关节腔未见明显积液ꎬ其中两个见周围骨质破坏ꎮＣＤＦＩ探测到血流信号７个ꎬ显示率１６％ꎬＳＭＩ探测到血流信号４０个ꎬ显示率８９％ꎬＣＥＵＳ探测到血流信号４３个ꎬ显示率９６％ꎮＣＤＦＩ与ＣＥＵＳ评价有无血流结果比较ꎬ差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮＳＭＩ与ＣＥＵＳ评价有无血流结果比较ꎬ差异无统计学意义(Ｐ>０.０５)ꎬ见表１(图１~３)ꎮ表１㊀掌指关节增生滑膜内ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ㊀㊀及ＣＥＵＳ血流信号显示比较(个)检查方法ＣＥＵＳ无血流有血流ＣＥＵＳ无血流有血流ＣＤＦＩ无血流２３６ＳＭＩ无血流２３有血流０７有血流０４０Ｐ<０.００１０.２５０表２㊀掌指关节增厚滑膜内ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ及㊀㊀ＣＥＵＳ血流信号分级情况(个)检查方式血流分级０级Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级合计ＣＤＦＩ３８５２０４５ＳＭＩ５１０２５５４５ＣＥＵＳ２１２２５６４５表３㊀ＳＭＩ与ＣＥＵＳ对掌指关节增厚滑㊀㊀膜内新生血管血流分级比较ＳＭＩＣＥＵＳ０级Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级０级２３００Ⅰ级０９１０Ⅱ级００２４１Ⅲ级０００５２.２㊀掌指关节增厚滑膜内ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ及ＣＥＵＳ血流信号分级情况及比较３０例患者４５个掌指关节增厚滑膜分别用超声ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ及ＣＥＵＳ检查ꎬＣＤＦＩ检测出新生血管的有７个ꎬ而ＳＭＩ探测出４０个ꎬ超声造影４３个ꎬ分级情况见表２ꎮＳＭＩ与ＣＥＵＳ评价增厚滑膜内新生血管分级一致性比较好(Ｋａｐｐａ＝０.８１９ꎬＰ<０.００１)ꎬ见表３ꎮ图１~３㊀为同一ＲＡ患者ꎬ第一掌指关节纵切面ＣＤＦＩ㊁ＳＭＩ及ＣＥＵＳ的对比ꎮ图１ＣＤＦＩ增厚滑膜内未见明显血流显示ꎮ图２ＳＭＩ可见点线状血流信号ꎮ图３ＣＥＵＳ在同一位置也可见点线状血流信号３㊀讨论㊀㊀ＲＡ关节病变最常出现的部位为腕㊁掌指关节㊁近端指间关节ꎬ其基本病理改变首先发生在滑膜[６]ꎮ滑膜增生后所形成的由大量纤维组织㊁炎性细胞和新生血管组成了血管翳ꎬ逐渐侵袭软骨和骨组织ꎬ最终导致关节结构破坏ꎬ功能丧失[７￣８]ꎮ在ＲＡ的发病过程中ꎬ微血管增殖可在滑膜炎早期就出现ꎬ其被认为是形成和维持ＲＡ滑膜炎的一个重要原因ꎬ微血管增殖程度能直接反映受累关节滑膜的炎性活动度[９]ꎮ目前ＲＡ的治疗药物有了较大程度的进步ꎬ早期应用能够缓解甚至阻止关节炎症进一步发展ꎬ因此ꎬ临床需要ＲＡ的早期诊断及动态评价药物治疗效果ꎮ影像学检查中的Ｘ线平片只能间接反映滑膜炎症变化ꎬ继发的骨质改变一般晚于临床症状６~２４个月ꎬＭＲＩ可显示关节软组织早期病变ꎬ但因其价格昂贵㊁耗时㊁体内有金属异物者无法进行检查ꎬ目前不能普遍用于日常临床工作ꎮ高频超声可清晰显示关节及其周围组织的解剖结构及病理形态变化ꎬ是目前常用的ＲＡ检查手段ꎮ６３３医学影像学杂志２０１９年第２９卷第２期㊀ＪＭｅｄＩｍａｇｉｎｇＶｏｌ.２９Ｎｏ.２２０１９此外多普勒超声显示的异常血流信号提示病变活动性ꎬ在ＲＡ早期诊断和临床疗效评估中有良好的应用价值[１０]ꎮ然而ＣＤＦＩ技术受仪器灵敏度㊁多普勒设置调节㊁彩色增益等多种因素影响ꎬ较难显示ＲＡ患者掌指关节滑膜病变的新生血管存在ꎮ近年来ꎬＣＥＵＳ技术开始应用滑膜内新生血管的检测ꎬ造影剂微气泡的显示标志着血管的形成ꎬ可以比较直观反映病变部位的血流灌注情况ꎬ但ＣＥＵＳ受造影剂使用限制㊁价格昂贵及检查所需时间较长等影响ꎬ无法普遍应用ꎮＳＭＩ是一种基于彩色多普勒原理基础上发展起来的一种高灵敏度㊁高分辨率彩色血流显像新技术ꎬ它可更敏感的捕捉低速血流ꎬ能显示微细血流的动态情况[１１]ꎬ安全㊁无创㊁操作简便ꎮ本组病例中４５个掌指关节增厚滑膜ＣＤＦＩ检测出新生血管的有７个(１６％)ꎬ而ＳＭＩ探测出４０个(８９％)ꎬ超声造影４３个(９６％)ꎬＳＭＩ对新生血管的显示率㊁显示血管的分级与超声造影呈现良好的一致性(Ｋａｐｐａ＝０.８１９ꎬＰ<０.００１)ꎬ故ＳＭＩ观察增厚滑膜内新生血管的结果较为可靠ꎮ但本组病例样本量较少ꎬＳＭＩ只与ＣＤＦＩ及ＣＥＵＳ对照ꎬ缺少与滑膜组织穿刺后标本进行病理学对照ꎬ故还需要扩大样本量ꎬ进一步深入研究ꎮ超微血流成像技术可清晰㊁便捷显示增厚滑膜内血管翳血流灌注情况ꎬ不仅有助于提高早期诊断的准确性ꎬ而且有助于判别ＲＡ炎症时期对治疗的反应ꎬ从而更好的指导临床工作ꎬ最大限度地提高患者的生活质量ꎮ参考文献:[１]中华医学会风湿病学分会.类风湿性关节炎诊断及治疗指南[Ｊ].中华风湿病学杂志ꎬ２０１０ꎬ１４(４):２６５￣２７０. [２]陈洋ꎬ宗绍云.超声在类风湿关节炎的应用及进展[Ｊ].医学影像学杂志ꎬ２０１１ꎬ２１(５):７６７￣７７０.[３]ＭａｃｈａｄｏＰꎬＳｅｇａｌＳꎬＬｙｓｈｃｈｉｋＡꎬｅｔａｌ.Ａｎｏｖｅｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｆｌｏｗｔｅｃｈｎｉｑｕｅ:ｉｎｉｔｉａｌｒｅｓｕｌｔｓｉｎｔｈｙｒｏｉｄｓ[Ｊ].ＵｌｔｒａｓｏｕｎｄＱꎬ２０１６ꎬ３２(１):６７￣７４.[４]ＡｌｅｔａｈａＤꎬＮｅｏｇｉＴꎬＳｉｌｍａｎＡＪꎬｅｔａｌ.Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓｃｌａｓ￣ｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｃｒｉｔｅｒｉａ:ａｎａｍｅｒｉｃａｎｃｏｌｌｅｇｅｏｆｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ/ｅｕｒｏｐｅａｎｌｅａｇｕｅａｇａｉｎｓｔｒｈｅｕｍａｔｉｓｍｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ[Ｊ].ＡｒｔｈｒｉｔｓＲｈｅｕｍꎬ２０１０ꎬ６２(９):２５６９￣２５８１.[５]ＳｚｋｕｄｌａｒｅｋＭꎬＣｏｕｒｔ￣ＰａｙｅｎＭꎬＪａｃｏｂｓｅｎＳꎬｅｔａｌ.Ｉｎｔｅｒｏｂｓｅｒｖｅｒａｇｒｅｅｍｅｎｔｉｎｕｌｔｒａｓｏｎｏｇｒａｐｈｙｏｆｔｈｅｆｉｎｇｅｒａｎｄｔｏｅｊｏｉｎｔｓｉｎｒｈｅｕ￣ｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ[Ｊ].ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｈｅｕｍꎬ２００３ꎬ４８(４):９５５￣９６２. [６]ＢｏｕｔｒｙＮꎬＭｏｒｅｌＭꎬＦｌｉｐｏＲＭꎬｅｔａｌ.Ｅａｒｌｙｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ:ａｒｅｖｉｅｗｏｆＭＲＩａｎｄｓｏｎｏｇｒａｐｈｉｃｆｉｎｄｉｎｇｓ[Ｊ].ＡｍＪＲｏｅｎｔｇｅｎ￣ｏｌꎬ２００７ꎬ１８９(６):１５０２￣１５０９.[７]方静ꎬ朱家安.超声检查在类风湿性关节炎患者腕㊁手指关节中的应用进展[Ｊ].中华临床医师ꎻ电子版ꎬ２０１１ꎬ５(６):１６６１￣１６６３.[８]许华宁ꎬ殷立平.超声检测类风湿关节炎膝关节滑膜改变及其血流的临床应用价值[Ｊ].医学影像学杂志ꎬ２０１４ꎬ２４(１１):１９９８￣２００１.[９]ＤｅＺｏｒｄｏＴꎬＭｌｅｋｕｓｃｈＳＰꎬＦｅｕｃｈｔｎｅｒＧＭꎬｅｔａｌ.Ｖａｌｕｅｏｆｃｏｎ￣ｔｒａｓｔ￣ｅｎｈａｎｃｅｄｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｉｎｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ[Ｊ].ＥｕｒＪＲａ￣ｄｉｏｌꎬ２００７ꎬ６４(２):２２２￣２３０.[１０]朱瑾.张文云.房勤茂ꎬ等.腕关节滑膜厚度和动脉阻力指数评价类风湿性关节炎的活动期[Ｊ].中国医学影像技术ꎬ２０１０ꎬ２６(１):１２４￣１２６.[１１]勇强ꎬ张蕾ꎬ袁嘉ꎬ等.超微血流成像技术诊断颈动脉斑块新生血管的价值[Ｊ].中国超声医学杂志ꎬ２０１４ꎬ３０(１２):１０６０￣１０６３.(收稿日期:２０１８￣０４￣２６)(本文编辑:刘作勤)多层螺旋ＣＴ和高频超声检查对人工流产后子宫动静脉瘘的临床价值Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｆａｃｔｏｒｓａｆｆｅｃｔｉｎｇｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｌｉｆｅｏｆｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｃｈｉｌｄｒｅｎｗｉｔｈｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｄｅｆｅｃｔｓ黎㊀静(陕西省核工业二一五医院功能科㊀陕西㊀咸阳㊀７１２０００)㊀㊀ʌ摘㊀要ɔ㊀目的㊀对比分析多层螺旋ＣＴ和高频超声检测对人工流产后子宫动静脉瘘诊断的临床应用价值ꎮ方法㊀选取我院就诊的人工流产后子宫动静脉瘘患者１２８例ꎬ采用随机数据表法将上述患者随机分为两组ꎬ每组６４例ꎬ分别采用高频超声检测法和多层螺旋ＣＴ扫描法检测上述患者的发病率ꎬ对比分析两种不同检测方法的临床应用价值ꎮ结果㊀上述患者的一般资料无统计学差异(Ｐ>０.０５)ꎮ结果显示ꎬ高频超声检测的检出率为９３.７５％(６０例)ꎬ明显高于多层螺旋ＣＴ扫描的检出率８１.２５％(５２例)ꎬ差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮ结论㊀超声检测较多层螺旋ＣＴ扫描对人工流产后子宫动静脉瘘的检出诊断准确性较高ꎮ作者简介:黎静(１９７１￣)ꎬ女ꎬ陕西咸阳人ꎬ毕业于陕西中医药大学ꎬ大学本科ꎬ副主任医师ꎬ主要从事超声影像学诊断工作７３３医学影像学杂志２０１９年第２９卷第２期㊀ＪＭｅｄＩｍａｇｉｎｇＶｏｌ.２９Ｎｏ.２２０１９。

竹节参总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖抑制作用的研究

竹节参总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖抑制作用的研究【摘要】目的研究竹节参总皂苷（TSPJ）对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖的影响。

方法酶消化法进行胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的原代培养，MTT法检测TSPJ对滑膜细胞增殖的影响，流式细胞仪检测TSPJ对滑膜细胞凋亡率的影响。

结果TSPJ可明显抑制体外培养的CIA大鼠滑膜细胞的增殖，TSPJ可诱导滑膜细胞凋亡。

结论TSPJ可有效抑制体外培养的胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的增殖，这可能是其治疗类风湿关节炎的机制。

【关键词】竹节参总皂苷类风湿关节炎滑膜细胞细胞凋亡Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of total Saponins of Panax japonicus on the proliferation and apoptosis of synoviocytes incollagen-induced arthritis rats in vitro.MethodsPrimary synoviocytes were cultured by enzymatic digestion. Synoviocytes were incubated with various concentrations of total saponins of Panax japonicus for 48 hours. Synoviocytes proliferation was determined by MTT colorimetric assay. The apoptosis rate of synovial cells was examined by flowcytometer.ResultsTotal saponins of Panax japonicus had marked dose-dependent inhibitory effects on synovial cell proliferation. Apoptosis rate was inereased with the elevation of concentration of total saponins of Panax japonicus.ConclusionThe results of this study suggest that the total saponins of Panax japonicus has remarkable suppressive effects on proliferation of synoviocytes of CIA rats in vitro. This may be the mechanism of RA treatment.Key words:Total saponins of Panax japonicus（TSPJ）； Rheumatoid arthritis； Synoviocytes； Apoptosis类风湿关节炎(rheumatoid arthritis， RA)是一种以关节滑膜炎为主要特征的自身免疫性疾病，其关节滑膜细胞功能的改变直接影响病理进程。

类风湿关节炎大鼠滑膜细胞凋亡基因调控的实验研究

类风湿关节炎大鼠滑膜细胞凋亡基因调控的实验研究类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一种常见的自身免疫性疾病，其主要特征是侵犯关节滑膜，导致滑膜炎症和关节破坏。

滑膜细胞的异常增殖和凋亡是RA滑膜病理过程中的重要特征之一。

了解滑膜细胞凋亡的分子机制对于治疗RA具有重要意义。

近年来，许多研究表明，滑膜细胞凋亡的发生受到多种基因的调控。

本实验旨在探讨RA大鼠滑膜细胞凋亡的基因调控机制，为治疗RA提供新的靶点和理论基础。

我们选取实验动物——类风湿关节炎大鼠模型。

通过给予大鼠适当的诱导剂，使其出现类风湿关节炎的症状，包括关节炎炎症、滑膜增生和滑膜细胞凋亡等。

然后，我们从这些类风湿关节炎大鼠的滑膜中提取滑膜细胞，分别对照组和实验组进行细胞培养。

在实验组中，我们应用了一种基因编辑技术，靶向干扰了和滑膜细胞凋亡相关的关键基因。

通过比较对照组和实验组的细胞生长情况、凋亡率以及相关信号通路的变化，我们得出了一系列初步的实验结果。

实验结果显示，经过基因编辑的滑膜细胞在体外培养条件下，相较于对照组，其凋亡率显著降低。

在细胞外液培养液中，一些凋亡相关的蛋白质表达水平也发生了变化，如Bcl-2家族蛋白的表达增加，而Bax蛋白的表达下降。

这些结果表明，我们的基因编辑技术成功地干扰了滑膜细胞凋亡的相关基因，从而抑制了滑膜细胞的凋亡进程。

我们还对相关的信号通路进行了初步的检测。

研究发现，经过基因编辑的滑膜细胞中凋亡相关的信号通路，如p38MAPK和JNK等信号通路的激活程度显著低于对照组。

这表明，我们干预的基因与滑膜细胞凋亡信号通路之间存在一定的调控关系。

基于以上的实验结果，我们初步推测，类风湿关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的发生受到多种基因的调控，其中涉及到Bcl-2家族蛋白、p38MAPK和JNK等信号通路。

这为深入探讨滑膜细胞凋亡的调控机制提供了一定的实验依据。

需要指出的是，尽管我们的实验结果较为明确，但在深入探讨滑膜细胞凋亡的分子机制时，还有许多问题有待解决。

苗药四大血减轻大鼠的类风湿性关节炎：基于下调基质金属蛋白表达

The Miao medicine Sidaxue alleviates rheumatoid arthritis in rats possibly by downregulating matrix metalloproteinasesLI Yunfei,YANG Jingyi,ZHANG Ying,ZHANG Caixia,WEI Yuxiang,WANG Yiying,WU Ning,SUN Jianfei,WU Zunqiu Laboratory of Chemistry and Biochemistry,School of Basic Medical Sciences,Guizhou Medical University,Guiyang 561113,China摘要：目的探究贵州苗医验方“四大血”（SX ）对胶原诱导型关节炎（CIA ）大鼠关节骨、软骨破坏及滑膜血管新生的作用机制。

方法将42只SD 大鼠均分为空白组（Nor ）、模型组（Mod ）、雷公藤多苷片阳性对照组（GTW ，40g/kg ）和SX 高、中、低剂量组（SX 40、20、10g/kg ），7只/组。

通过皮下注射牛型II 胶原来建立CIA 大鼠模型，并且通过每天经口灌胃的方式给予治疗，持续3周。

采用AI 评分分别于造模前，灌胃前1周，灌胃后1周，灌胃2周，灌胃3周观察大鼠后足关节病变情况。

HE 染色法观察大鼠关节滑膜病理变化，ELISA 法检测TNF-α、IL-1β，Real-time PCR 检测滑膜组织中NF-κB p65、MMP1、MMP2、MMP9mRNA 表达水平，Western blot 检测滑膜组织中NF-κB p65、基质金属蛋白1（MMP1）、MMP2、MMP9蛋白表达水平。

网络药理学获取SX 外用途径治疗类风湿性关节炎（RA ）中的重要靶蛋白，经拓扑分析后筛选出核心靶蛋白。

结果GTW 组和SX 高、中、低剂量组足跖肿胀度及关节炎指数评分均小于Mod 组（P <0.05）。

《2024年超微血管成像技术对痛风性关节炎患者滑膜炎症改变检测价值的探讨》范文

《超微血管成像技术对痛风性关节炎患者滑膜炎症改变检测价值的探讨》篇一一、引言痛风性关节炎是一种因高尿酸血症引起的关节炎症性疾病，其病程中滑膜炎症的改变是疾病发展的重要环节。

随着医学技术的不断进步，超微血管成像技术作为一种新兴的医学影像技术，在临床诊断和治疗中发挥着越来越重要的作用。

本文旨在探讨超微血管成像技术对痛风性关节炎患者滑膜炎症改变的检测价值，为临床提供参考依据。

二、痛风性关节炎与滑膜炎症的关系痛风性关节炎的发生与发展与滑膜炎症的改变密切相关。

当尿酸盐在关节内沉积时，会引起滑膜组织的炎症反应，导致滑膜增厚、充血、水肿等一系列病理变化。

这些改变不仅会加重患者的疼痛和关节功能障碍，还会影响疾病的预后和转归。

因此，及时准确地检测滑膜炎症的改变对于痛风性关节炎的治疗和预后评估具有重要意义。

三、超微血管成像技术的原理及特点超微血管成像技术是一种基于光学原理的医学影像技术，通过无创的方式检测皮肤表面的微血管变化。

该技术利用光学相干断层扫描技术，能够清晰地显示微血管的结构和血流动力学变化。

其特点包括无创、无痛、无辐射，且能够实时动态地观察微血管的变化，为临床诊断和治疗提供了新的手段。

四、超微血管成像技术在痛风性关节炎中的应用超微血管成像技术能够有效地检测痛风性关节炎患者滑膜炎症的改变。

在痛风性关节炎患者中，滑膜炎症会导致微血管的扩张、充血和通透性增加，这些变化在超微血管成像技术下能够清晰显示。

通过观察微血管的变化，可以评估滑膜炎症的严重程度和治疗效果，为临床治疗提供依据。

五、超微血管成像技术的检测价值超微血管成像技术在痛风性关节炎患者滑膜炎症改变的检测中具有以下价值：1. 早期诊断：通过观察微血管的变化，可以在痛风性关节炎的早期发现滑膜炎症的改变，为早期治疗提供依据。

2. 病情评估：通过评估微血管的变化，可以了解滑膜炎症的严重程度和治疗效果，为调整治疗方案提供参考。

3. 预后判断：通过观察微血管的变化，可以预测疾病的预后和转归，为患者提供更好的治疗建议。

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度杨波;梁清华;吴丹;熊新贵【摘要】BACKGROUND:Vascular endothelial growth factor is found the strongest to promote angiogenesis, which show strong expression in synovial cells in rheumatoid arthritis. <br> OBJECTIVE:To evaluate the relation between the expression of vascular endothelial growth factor and microvessel density in rheumatoid arthritis. <br> METHODS:Col agen II and complete Freund’s adjuvant were used to induce experimental arthritis in Sprague-Dawley rats. Synovium expression of vascular endothelium growth factor and microvessel density were assayed at different time points using immunohistochemistry method, and changes in new vessels, vascular endothelial growth factor expression and arthritis index were observed along the time course. The correlations between vascular endothelial growth factor expression and number of new blood vessels as wel as between arthritis index and vascular endothelial growth factor expression were studied with linear correlation analysis and rank correlation analysis, respectively. <br> RESULTS AND CONCLUSION:With the time lasting, new blood vessels in the synovium proliferated, the synovium was thickened, and the arthritis index rose gradual y as wel as vascular endothelial growth factor expression and number of new microvessels were on the rise. Vascular endothelial growth factor expression was positively correlated with arthritis index (r=0.535,P<0.05) and significantly positively correlated with number of newmicrovessels (r=0.860, P<0.01). Vascular endothelial growth factor is involved in the course of synovium pannus response, and vascular endothelial growth factor and microvessel density may play an important role in rheumatoid arthritis pathogenesis.%背景：目前发现的促进血管增生活性最强的是血管内皮生长因子，其在类风湿关节炎滑膜细胞呈现强表达。

VEGF与endoglin在CIA大鼠滑膜组织中表达增高

VEGF与endoglin在CIA大鼠滑膜组织中表达增高王娅南;徐芳;李玉兰【摘要】Objective To investigate the expression and significance of VEGF and endoglin in rat synovial tissues induced by Ⅱ collagen. Methods The experimental arthritis model was established by subcutaneous injection of Ⅱ collagen. Morphological changes were found through observing the secondary paw swelling and histological morphological of synovial tissues in rats. The expression of VEGF and endoglin protein was detected by immunohistochemistry and RT-PCR techniques. Results Most arthritis took place in 2 ～ 3 weeks after collagen injection. The sympotom included: swelling of the paws and limited movement of joint. The expression of VEGF and endoglin was higher in the synovium of CIA than that of normal rats( P ＜0. 05 ). There was a significant positive relationship between VEGF and endoglin (r= 0. 481, P ＜ 0. 05 ). Conclusion VEGF and endoglin are involved in the pathogenesis of RA. VEGF and endoglin promoted mutually, affected mutually, was regulating the RA pathology process. They were the keys of many cytokines that mediate RA pathogenesis, development, invading, and joint deformation.%目的探讨胶原性关节炎大鼠滑膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及endoglin在蛋白水平和分子水平(mRNA)的表达与意义.方法皮下给Wistar大鼠多点注射牛Ⅱ型胶原建立胶原诱导关节炎模型.观察关节肿胀和滑膜的病理学改变,用免疫组化法和RT-PCR技术检测VEGF与endoglin的蛋白及分子水平的表达.结果大部分鼠在胶原致敏后两周左右发病,主要表现为关节红肿,活动受限.VEGF与endoglin在CIA大鼠滑膜组织中表达增高(P<0.05),且两者在CIA滑膜中的蛋白表达和分子表达呈正相关(r=0.481,P<0.05).结论 VEGF和en-doglin共同参与了类风湿性关节炎(RA)的病理过程,它们相互促进,相互影响,调控着RA的病理过程,它们是RA滑膜增生,浸润,关节破坏的关键因子.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2011(031)009【总页数】4页(P1011-1014)【关键词】胶原诱导关节炎;类风湿性关节炎;血管内皮生长因子;endoglin;滑膜【作者】王娅南;徐芳;李玉兰【作者单位】河北大学,附属医院,河北,保定,071000;河北大学,附属医院,河北,保定,071000;河北大学,附属医院,河北,保定,071000【正文语种】中文【中图分类】R593.22类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜炎性为主要病理表现的慢性、系统性的自身免疫性关节疾病，在世界各地均有发病［1］。

补肾活血通络胶囊干预SD大鼠骨性关节炎滑膜及软骨细胞miR-27a的变化

补肾活血通络胶囊干预SD大鼠骨性关节炎滑膜及软骨细胞miR-27a的变化孙志涛;赖居易;何升华;王业广;王建;冯华龙;黄飞强【摘要】BACKGROUND: Bushen Huoxue Tongluo Capsule, a well-known traditional prescription, exhibits remarkable treatment outcomes in knee osteoarthritis, but the underlying mechanism is not fully understood. OBJECTIVE: To explore the regulatory effect of Bushen Huoxue Tongluo Capsule on miR-27a of synovial cells in Sprague-Dawley rats with knee osteoarthritis. METHODS: The model of knee osteoarthritis was established in 120 Sprague-Dawley rats using Hulth method, and then these rat models were randomized into four groups, followed by given75 mg/kg normal saline (blank control group), 34 (low-dose group), 75 (medium-dose group) and 140 (high-dose group) mg/kg Bushen Huoxue Tongluo Capsule aqueous solvent via gavage according to body mass, respectively, twice daily, for consecutive 2 courses (15 days as a course) with 2 days in between. The synovium and cartilages were removed after each course, and the expression of miR-27a in the knee joint synovium and chondrocytes was determined by real-time quantitative PCR. RESULTS AND CONCLUSION: Gross observation found that the degeneration of synovium and cartilage in the Bushen Huoxue Tongluo Capsule groups was milder than that in the blank control group. Real-time PCR revealed that there was an increasing trend in the expression of miRNA-27a in the synovium and cartilage in each group, especially in the high-dose group,and there was a significant difference between groups (P < 0.05). Our findings show that Bushen Huoxue Tongluo Capsule can suppress the reduced expression of miRNA-27a in the synovium and chondrocytes in rats with knee osteoarthritis, further alleviating knee degeneration and protecting the knee from damage.%背景:补肾活血通络胶囊是多年的临床验方,在治疗膝关节骨性关节炎效果明显,但是其疗效机制一直未明确.目的:探讨补肾活血通络胶囊对SD大鼠膝关节骨性关节炎滑膜细胞miR-27a的调控作用.方法:将采用Hulth法成功建立膝关节骨性关节炎模型的120只SD大鼠随机分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组.空白组大鼠根据体质量予以75 mg/kg生理盐水灌胃,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠依据体质量予按34,75,140 mg/kg补肾活血通络胶囊水溶剂灌胃,2次/d,15 d为1疗程,连续灌胃2个疗程,每个疗程间间隔2 d.4组大鼠在灌胃1疗程、2个疗程后分批次取得大鼠膝关节滑膜及软骨,运用实时荧光定量PCR技术测定各组大鼠膝关节滑膜及软骨细胞miR-27a含量的表达.结果与结论:①大体观察可见补肾活血通络胶囊干预后的大鼠膝关节骨性关节炎模型的滑膜和软骨退变程度要轻于未经补肾活血通络胶囊干预的大鼠;②实时荧光定量PCR显示空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组滑膜及软骨miRNA-27a的表达量呈升高趋势,以高剂量最高,组间对比差异有显著性意义(P<0.05);③结果说明,补肾活血通络胶囊可抑制大鼠膝关节骨性关节炎模型滑膜及软骨细胞miRNA-27a 表达量的降低,进而减缓大鼠膝关节骨性关节炎的退变,起到保护膝关节的作用.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2017(021)016【总页数】5页(P2484-2488)【关键词】组织构建;软骨组织工程;骨性关节炎;膝关节;中药;动物实验【作者】孙志涛;赖居易;何升华;王业广;王建;冯华龙;黄飞强【作者单位】深圳市中医院骨三病区,广东省深圳市 518000;广州中医药大学,广东省广州市 510000;深圳市中医院骨三病区,广东省深圳市 518000;深圳市中医院骨三病区,广东省深圳市 518000;深圳市中医院骨三病区,广东省深圳市 518000;广州中医药大学,广东省广州市 510000;广州中医药大学,广东省广州市 510000【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言 Introduction骨性关节炎是引起膝关节疼痛、活动不适的主要原因之一[1]，膝关节骨性关节炎是一种进行性骨关节病，发病人群以中老年和下肢远动量较大者多见[2]。

低频超声促透通络止痛方对大鼠不同程度膝骨关节炎的影响

低频超声促透通络止痛方对大鼠不同程度膝骨关节炎的影响戚晴雪;马玉峰;吴忌;郑皓云;杨黎黎;赵军;王庆甫【摘要】目的探讨通络止痛方在低频超声促透下对大鼠不同程度膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型的行为学、软骨及滑膜组织形态学的影响,阐述该疗法的作用机制及其优势.方法采用切断前交叉韧带的经典方法制备KOA大鼠模型.SD大鼠随机分为3组:对照组、超声促透组和中药外敷组.所有大鼠左膝造模,对照组正常饲养,术后2、4、8周时各随机选取大鼠观察其行为学改变;处死后观察膝关节软骨大体改变,膝关节滑膜及股骨内侧髁软骨组织形态学改变,根据软骨改良Mankin's评分予以评价,并根据评分结果确定大鼠KOA的病变程度.超声促透组和中药外敷组在术后2、4、8周时各随机选取大鼠进行干预处理,超声促透组使用超声电导仪对术侧膝关节促透通络止痛方,中药外敷组仅使用中药外敷.1次/日,30min,连续治疗2周.2周后处死,记录数据同对照组.结果对照组造模后2、4、8周时大鼠行为学、软骨大体观察、软骨及滑膜组织形态学发生明显改变,软骨Mankin's 评分的增加与时间成正相关.超声促透组与对照组相比,大鼠行为学发生改变,LequesneMG评分在2、4、8周组时降低,有统计学差异(P＜0.05);软骨组织形态学发生改变,Mankin's评分2、4周组降低,2周时差异显著(P＜0.01),4周时存在统计学差异(P＜0.05);其作用显著优于中药外敷组,与中药外敷组相比,Lequesne MG评分在4周时下降明显,Mankin's评分2周时下降明显,两两相比有统计学差异(P＜0.05).超声促透组与对照组和中药外敷组相比,滑膜组织形态学2、4、8周组发生改变,滑膜炎症反应降低;与对照组相比,软骨大体观察在2、4周组发生改变,退变程度减轻;与中药外敷组相比无明显改变.结论低频超声促透通络止痛方可以有效改善不同程度KOA的症状,减缓疾病的进一步发展,其机制可能是通过减缓软骨退变、抑制滑膜炎症而发挥作用,但对重度KOA软骨退变的缓解作用并不明显,与传统的中药外敷法相比,具有起效快,疗效好等优点.【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2014(030)003【总页数】5页(P244-248)【关键词】膝骨性关节炎;低频超声;通络止痛方;行为学;组织形态学【作者】戚晴雪;马玉峰;吴忌;郑皓云;杨黎黎;赵军;王庆甫【作者单位】北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学第三附属医院,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学第三附属医院,北京100029【正文语种】中文【中图分类】R285.5膝骨关节炎(KOA)是老年人群常见的骨科疾病，严重影响患者生活质量。

二妙散水提物调控胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖、迁移和炎性因子的表达

二妙散水提物调控胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖、迁移和炎性因子的表达刘进;李振;郝慧琴;王泽;赵彩虹;芦文静【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2022(26)5【摘要】背景:NF-κB信号转导通路的激活失调与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的增殖及炎症密切相关,然而基于NF-κB信号转导通路的二妙散水提物干预胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(collagen induced arthritis rat fibroblast-like synoviocytes,CIA-FLS)的作用机制未见相关报道。

目的:探讨不同质量浓度二妙散水提物对CIA-FLS增殖、迁移和炎性因子表达的影响,并基于NF-κB信号通路探索其作用机制。

方法:复苏CIA-FLS,传代培养后加入不同质量浓度二妙散水提物(200,400,800,1 600,3 200 mg/L)干预,MTT法、Transwell小室检测CIA-FLS增殖和迁移能力,qRT-PCR和Western blot检测CIA-FLS中NF-κB信号通路相关分子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、NF-κBp65 mRNA和蛋白表达水平。

结果与结论:(1)不同质量浓度二妙散水提物作用48 h后,与空白对照组相比,二妙散水提物呈剂量依赖性抑制CIA-FLS增殖(P <0.05);(2)1 600 mg/L二妙散水提物极显著抑制CIA-FLS的增殖和迁移(P <0.01);同时,极显著抑制CIA-FLS中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、NF-κBp65m RNA和蛋白表达水平(P <0.01);(3)结果提示,二妙散水提物抑制CIA-FLS增殖、迁移和炎症因子表达的最佳质量浓度是1 600 mg/L。

二妙散水提物可能通过抑制NF-κB信号通路的活化及炎症因子的生成,进而减轻CIA-FLS的增殖和炎症水平,为后期进一步研究二妙散治疗类风湿关节炎的作用机制提供实验依据。

低频超声促透通络止痛中药对膝骨关节炎尿激酶型纤溶酶原激活物系统及炎性因子的影响

低频超声促透通络止痛中药对膝骨关节炎尿激酶型纤溶酶原激活物系统及炎性因子的影响张红;任东升;陶雅非【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2017(021)008【摘要】BACKGROUND: Low-frequency ultrasound combined with Tongluo Zhitong herbs can effectively relieve pain and improve joint function of patients with osteoarthritis, but the underlying mechanisms are still unclear.OBJECTIVE: To investigate the effects of low-frequency ultrasound combined with Tongluo Zhitong herbs on urokinase-type plasminogen activator (uPA) and inflammatory cytokines of osteoarthritis rabbits and the related mechanisms.METHODS: Forty rabbits were randomly divided into four groups: normal, model, control, and experimental groups. The normal group was treated with normal feeding, not for any processing. For the other three groups, papain was injected into the rabbit knee articular cavity to establish osteoarthritis models. One week later, the experimental group was treated with low frequency ultrasound combined with Tongluo Zhitong herbs for 3 weeks, the control group treated with the same volume of normal saline, and the model group received no intervention. The levels of inflammatory cytokines in the serum and synovial fluid were measured, the histological changes of synovial tissues and articular cartilage were evaluated using Mankin's score,and the expression levels of uPA and its receptor were determined by western blot assay.RESULTS AND CONCLUSION: The levels of inflammatory cytokines in the model group were significantly higher than those in the normal and experimental groups (P < 0.05). The Mankin's scores of synovial tissue in the experimental group were significantly lower than those in the model and control groups (P < 0.05), while Mankin's scores of the cartilage tissue had no significant difference between the experimental and model groups (P > 0.05). Compared with the model group, in the experimental group, the expression levels of uPA and its receptor were significantly downregulated,and the expression of uPA inhibitor was notably upregulated. These data show that low-frequency ultrasound combined with Tongluo Zhitong herbs attenuates inflammatory reaction in the synovial tissues, by inhibiting the formation of joint fluid and production of inflammatory cytokines, which is an effective treatment for knee osteoarthritis.%背景:低频超声促透中药复方治疗骨关节炎可有效减轻患者疼痛,改善关节功能,但其作用机制尚不清楚.目的:观察低频超声促透通络止痛中药对膝骨关节炎模型兔尿激酶型纤溶酶原激活物系统及炎性因子的影响,探讨低频超声促透通络止痛中药的作用机制.方法:40只新西兰大白兔随机分为4组:正常组、模型组、对照组和实验组.正常组正常饲养,不进行膝骨关节炎造模处理,其余3组均在兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶制作骨关节炎模型,实验组造模后1周给予低频超声促透通络止痛中药治疗,对照组造模后1周给予生理盐水,模型组造模后正常饲养,不进行其他干预.治疗3周后检测血清、关节液中炎性因子水平,对滑膜和关节软骨进行Mankin's评分,采用Western Blot方法检测关节滑膜中尿激酶型纤溶酶原及其受体蛋白的表达.结果与结论:①模型组血清、关节液中炎性因子水平与正常组比较明显升高(P<0.05),实验组血清、关节液内炎性因子水平与模型组比较显著降低(P<0.05);②实验组滑膜组织Mankin's评分低于模型组和对照组(P<0.05),而软骨组织评分与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05);③与模型组比较,实验组关节滑膜尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体表达明显降低,尿激酶型纤溶酶原激活物抑制剂表达升高;④结果表明,低频超声促透通络止痛中药可以抑制关节液和血清炎性因子的生成,减轻膝关节局部的炎症反应,进而有效治疗膝骨关节炎.【总页数】6页(P1149-1154)【作者】张红;任东升;陶雅非【作者单位】南阳市中心医院肾病风湿免疫科,河南省南阳市 473400;南阳市中心医院肾病风湿免疫科,河南省南阳市 473400;南阳市中心医院肾病风湿免疫科,河南省南阳市 473400【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.低频超声促透通络止痛中药对不同程度膝骨关节炎大鼠模型 CTX-Ⅱ、COMP 及MMP-3的影响 [J], 戚晴雪;马玉峰;吴忌;郑皓云;朗松;杨黎黎;赵军;张栋;王庆甫2.低频超声促透独活寄生汤治疗膝骨关节炎的临床研究＊ [J], 李志敏;李建强3.低频超声促透通络止痛方对大鼠不同程度膝骨关节炎的影响 [J], 戚晴雪;马玉峰;吴忌;郑皓云;杨黎黎;赵军;王庆甫4.低频超声促透通络止痛中药对膝骨关节炎尿激酶型纤溶酶原激活物系统及炎性因子的影响 [J], 张红;任东升;陶雅非;5.低频超声促透通络止痛方治疗不同程度膝骨关节炎 [J], 罗东斌;侯大标;张小海;汤永南;罗斯敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。