胶州大白菜核基因雄性不育系转育研究

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大白菜质核互作型雄性不育的转育与应用

同球叶颜色（橘红心、黄心、白心）不同结球类型（、合抱、叠抱、直筒）适合不同季节（、、）培的多种、春夏秋栽类型自交系进行杂交，后代经连续多代回交，成功选育了满足市场需求的稳定的质核互作型雄性不育系。制种试验表明，杂交种杂交率达１０，０％整齐度高，制种产量与利用不亲和系杂交制种相当。
（．山东春秋大白菜育种研究中心，１山东济南２００；．沈阳市农业科学院５１０２辽宁沈阳１０３；１０４
３山华兴种苗研究所，．微山东微山２７０４７６０；．平度市农业局种子管理站，山东平度摘
２６０）６７０
要：为了保证大白菜杂交种子的纯度，提高制种效率，利用大白菜质核互作型雄性不育系ＣＭＡ，与不
（ｅｆｉｃｓｄ￣ｄｄｅｆｖｒｐｅ，ｙｎｒａ）ａｄａａｔｉｏｄｆｒｔｒｉｇｓａｏｓ（ｐｎ，１ —ｔｌｅｌｅ，ｌａｏｅｌｐｄｃｌｄｃ１ｎｄｐａｏｔｉｅｅｏｎｅｓｎｓｒｇａｐｏａｉｉｔｎｆｎｇｗｉ
ｓｍｍｅａｄａｔｍ）ｆｒｍｌ —ｇｎｒｔｎｂｃｃｏｓｓａｄｓｌｃｏ，ｕｅｆｓｂｅｃｔｌｓｉｕｒｎｕｎ．Ａｔｕｔｅｅａｏａｋｒｓｅｎｅｔｎａｎｍｂｒｏａｌｙｐａｍｃ— ｕｅｉｉｅｉｔｏ
山东农业科学２１，：７～１０１６１９
ＳａｄｎｇｉｌｒｌｃｅｃｓｈｎｏｇＡｒｕｔａＳｉｅｃｕｎ

大白菜抗根肿病甲型雄性不育“两用系”的转育途径

抗根肿病的结球白菜。日本和韩国都是白菜的主要消费
（）２
公式（）中ｎ为样本容量，为目标基因发生概率。公１Ｐ
式（）２中为卡平方，』ａ分别为显性组和隐性组的实际４和观察次数，＝ｎＡ＋ａ即总次数，为理论分离比率。ｒ
１２２抗根肿病白菜甲型雄性不育“ ．．两用系 ” 的转育方法
以直筒型抗根肿病白菜甲型雄性不育 “ 用系 ” ＲＢ４两ＣＡ７２
（ＭｓＲ、Ｒ为母本，主栽品种 “ ｌ一１ ” 系ＭｓＲＭｓＭｓＲ）以９２选
江苏农业科学
徐硕，向群，沈吴
２１年第３第２期０１９卷
一２５一１
琼，等．白菜抗根肿病甲型雄性不育“ 用系 ” 转育途径［］两的Ｊ．江苏农业科学，０１３（）２５— １２１，９２：１２８
：
根肿病虽然可使用化学药剂进行防治，目前还没有特效农但药，且化学药剂防治不但成本高，严重污染环境，植抗并还种病品种是既经济又安全的一种方法。国外对抗根肿病育种的研究较早，日本科学家在芜菁上发现抗源，成功转育成并
１材料与方法
１１材料．
Ｍｓｓ７。通常把带有纯合型不育基因“ Ｍｓ的５％雄＞ｍ［］Ｍｓ ” ０性不育系称为甲型雄性不育 “ 用系 ” 而把具有１０保持两，０％能力的纯合基因型“ ｍ ” 为“ 时保持系 ” 。抗根肿病ｍｓｓ称临

大白菜_em_hau_em_胞质雄性不育系的鉴定及不育相关基因结构分析

园艺学报 2012，39（3）：469–476 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@大白菜hau胞质雄性不育系的鉴定及不育相关基因结构分析施展，万正杰*，徐跃进，李雪红，邹瑞昌（华中农业大学园艺林学学院，华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉 430070）摘要：采用染色体压片法和形态观察法，对大白菜hau胞质雄性不育材料6w-9605A的2个遗传世代（F1和BC6）的染色体数和花器官进行鉴定。

结果表明：F1染色体数为28条；BC6染色体数为20条，与白菜的染色体数相同。

6w-9605A的花药呈三角形，干瘪无花粉，败育彻底。

利用芸薹属作物雄性不育基因线粒体保守序列设计3对引物，在6w-9605A中扩增出867 bp的片段。

基因预测显示，在线粒体基因atp6的下游产生1个新的开放阅读框为orf288，与目前报道的芸薹属作物细胞质雄性不育相关基因orf224、orf138等均不相同，这种新的基因结构特点极有可能就是大白菜hau胞质不育系6w-9605A产生不育的原因。

关键词：大白菜；雄性不育；hau胞质；不育基因中图分类号：S 634.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2012）03-0469-08 Characterization of the Chinese Cabbage hau Cytoplasmic Male-sterile Line and Sequence Analysis of the Fertility-related GeneSHI Zhan，WAN Zheng-jie*，XU Yue-jin，LI Xue-hong，and ZOU Rui-chang（College of Horticulture and Forestry，Huazhong Agricultural University，Education Ministry Key Laboratory of Horticultural Plant Biology，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）Abstract：The male-sterility of the Chinese cabbage（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）line 6w-9605A，a cytoplasmic male-sterile line，was studied in this research. Chromosome squashing revealed that the chromosome numbers in the F1 and BC6 of 6w-9605A were 28 and 20，respectively，and morphologic observation in the BC6 of 6w-9605A showed that the anthers of this line were degenerated and completely abortive. Further，primers were designed based on the conserved sequence of known cytoplasmic male sterility genes in the Brassica species，and a new open reading frame（ORF）of 867 base pairs was amplified from 6w-9605A. Sequence analysis showed that this ORF located downstream from the mitochondrial gene apt6 and was predicted as orf288. Sequence alignment demonstrated that the ORF is different from the sterile genes of pol CMS and ogu CMS，and it may cause the sterility of 6w-9605A.Key words：Chinese cabbage；male-sterility；hau cytoplasm male-sterile line；infertility genes收稿日期：2011–12–19；修回日期：2012–02–21基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金项目（2009QC027）；湖北省自然科学基金项目（2010CBB01703）* 通信作者Author for correspondence（E-mail：wanzj@）致谢：本文得到华中农业大学植物科学学院李再云教授的修改，在此表示感谢。

大白菜新型细胞质雄性不育系6w-9605A的育性鉴定和花药败育的细胞学研究观察

大白菜新型细胞质雄性不育系6w-9605A的育性鉴定和花药败育的细胞学研究观察论文导读:：大白菜是典型的异花授粉作物。

获得遗传稳定的BC8大白菜细胞质雄性不育系6w-9605A。

发现其花药发育受阻于孢原时期。

随着花药的发育小孢子从四分体中分离出来。

论文关键词：大白菜，细胞质雄性不育系，花药发育，小孢子大白菜（Brassica campestris L. spp. pekinensis）为十字花科芸薹属白菜种大白菜亚种，-是我国重要蔬菜之一，栽培面积与产量均居首位。

大白菜是典型的异花授粉作物，品种或自交系间存在明显的杂种优势，国内外白菜的优良品种大部分为一代杂种。

自交不亲和系、雄性不育系是蔬菜杂种优势利用的主要途径，而细胞质雄性不育系的选育和利用是以营养器官为食用产品的大白菜等蔬菜杂种优势育种的理想途径[1]。

因此利用新型细胞质雄性不育种质资源，克服不育细胞质单一的脆弱性问题，是国内外育种工作者研究的重点。

关于十字花科芸薹属作物雄性不育的花药发育细胞学研究，前人在这方面做了很多工作。

按花药受阻的时期和方式可将雄性不育系分为无花粉囊型、花粉母细胞败育型和单核花粉败育型3类败育类型[2]。

梁燕等[3]对结球白菜波里马胞质不育系的花药发育进行细胞学研究，发现其花药发育受阻于孢原时期。

杨晓云等[4]研究不结球白菜波里马胞质雄性不育系花药发育，发现其受阻于孢原细胞分化期生物论文，没有孢原细胞分化，没有形成药室，属于无花粉囊型败育。

杨光圣[5]对甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育系宜3A花药发育进行显微结构观察，结果表明败育发生于花粉母细胞阶段，属于花粉母细胞败育型期刊网。

黄邦全等[6]研究紫菜薹oug细胞质雄性不育系花药发育特点，发现该不育系兼有无花粉囊型和单核败育型的特征。

田福发等[7]通过石蜡切片技术对红菜薹波里马胞质不育系和萝卜胞质雄性不育系进行了细胞学研究，结果发现pol CMS受阻于孢原细胞阶段，而ogu CMS 花药败育发生于小孢子母细胞时期或四分体时期。

白菜细胞核雄性不育基因向菜心品种早-49的转育研究

维普资讯
沈阳农业大学学报，０ — ４３（）１５— ６２６０，２：０７６１８
ＪｕａｏｈｎａｇＡｒｕｔａＵｉｒｔ，０６— ４３（）１５—１８ｏｒｌｆｅｙｎｇｉｌｒｌｎｖｓｙ２００，７２：６ｎＳｃｕｅｉ６
ｘｕＭｉｇ，ＷＥＩＹｕｔｎｎ－ａｇ
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在利用大白菜显性核雄性不育系生产杂种一代研究中，冯辉等提出了大白菜显性核基因雄性不育复等位基因遗传假说 … ，认为在一个控制雄蕊育性的位点由３个复等位基因控制。“ ｓ为“ ｓ的等位不育基因，Ｍ ” ｍ”
“
ｍ” Ｍ” ｓ为“ ｓ的等位隐性可育基因，Ｍｎ为 “ ｓ的等位显性恢复基因， “ ｓ’ Ｍ ” 三者之间的显隐关系为：ｓ＞Ｍ＞Ｍｓ
ｍ。将大白菜两用系分为两种类型，ｓ甲型“ 两用系” 不育株基因型为“ ｓｓ，ＭＭ ” 可育株为“ ｓｓ，Ｍ ” 不育株不育Ｍ性通过“ 两用系” 内不育株与可育株兄妹交保持（ｓｓｓｓ￣／ＭＭ，／Ｍｓ，ＭＭ ×Ｍ－ｌ２ｓｓ１２ｓ）两用系中可育株自交Ｍ－Ｍ为可育与不育株３１：分离。乙型“ 两用系” 不育株基因型为“ ｓｓ，Ｍｍ ” 可育株为“ ｓｓ。不育株的不育性也是ｍｍ” 通过“ 两用系” 内不育株与可育株兄妹交保持（ｓｓｍｍ－ｌ２ｓｓ１２ｓｓ，ＭＭ × ｓｓ￣Ｍｍ，／Ｍｍ）两用系可育株自交为全可－／育。用甲型“ 两用系” 不育株（ｓｓ与乙型“ ＭＭ）两用系” 可育株（临时保持系）ｍｍ ” “ ｓｓ交配可获得１０不育株０％率的雄性不育系。沈向群在利用８ｌ８一Ａ重复雄性不育转育时，通过遗传验证试验证明了复等位基因的存在，同时利用ＲＰＡＤ标记技术，证明控制育性的基因只有一个位点，说明复等位基因符合大白菜显性核基因雄性不育的遗传规律。育成的显性核基因雄性不育系，］其不育性对环境条件表现稳定，配合力好，制种产量高，生长势强。目前利用大白菜雄性不育复等位基因遗传假说，天津市蔬菜研究所成功将大白菜显性雄性不育基因转育到青麻叶结球白菜上＿。冯辉将大白菜雄性不育基因转入到白菜中＿，明等将大白菜核不育基因转育３］４许Ｊ到其他类型的大白菜品种和紫菜薹中，为细胞核雄性不育基因在育种实践应用提供了可行的依据。菜心（ｒｓａａａｈｅｓａｅ）Ｂａｉｒｃｉｎｓｉｙ杂种优势非常明显，ｓｃｐｎｉＢｌ现有推广的优良品种大部分为常规品种，利用核质互作雄性

白菜核雄性不育系可育和不育花药中Ca2 的分布

615植物生理与分子生物学学报, Journal of Plant Physiology and Molecular Biology 2005, 31 (6): 615-6242005-02-23收到，2005-07-14接受。

国家自然科学基金项目(No. 30570104)资助。

*通讯作者(E-mail: hqtian@; Tel: 0592-2186486)。

白菜核雄性不育系可育和不育花药中Ca 2+的分布谢潮添1,2，杨延红2，邱义兰2，葛丽丽2，田惠桥2*(1集美大学水产学院，厦门361021，2厦门大学生命科学学院，厦门 361005)摘要：研究了白菜(Brassica campestris L . ssp . chinensis Makino)细胞核雄性不育系花药中Ca 2+的分布特征。

在可育花药发育过程中，减数分裂后花药壁细胞中钙颗粒明显增加。

早期小孢子开始积累钙颗粒并特异性地附在小液泡膜上。

小孢子分裂后，大液泡消失过程中又伴随着许多钙颗粒附在小液泡膜上，显示出Ca 2+与花粉中液泡的形成和分解有关。

在不育花药中，最早出现的钙颗粒异常分布是在小孢子母细胞的胼胝质壁中积累了较多的钙颗粒。

然而，在小孢子细胞质中钙颗粒一直很少，也不形成大液泡，最后通过细胞质收缩的方式败育。

这是首次发现Ca 2+参与调控花药发育过程，其异常分布与花粉败育密切相关。

关键词：白菜；花药；雄性不育；Ca 2+中图分类号：Q945白菜(Brassica campestris L . ssp. chinensisMakino)细胞核雄性不育系在白菜杂种优势利用中具有很大的潜力，对其生理生化以及分子生物学方面已做了一些研究(缪颖等2000；曹家树等2001)。

我们对它的花药也做了光学显微镜观察，发现不育花药中花粉的败育发生在小孢子早期，同时绒毡层细胞不能合成油菜植物特有的油脂类物质(谢潮添等2004)。

进一步的超微结构观察发现不育花药在造孢细胞中核仁就有靠边定位的异常现象。

胶州大白菜核基因雄性不育系转育研究

胶州大白菜核基因雄性不育系转育研究
吕艳玲;陶承光;王鑫
【期刊名称】《沈阳农业大学学报》
【年(卷),期】2008(039)004
【摘要】以杂交种绿星58的不育株作不育源,转育新的核基因雄性不育系,以解决具有100%不育株率的大白菜核基因型雄性不育系转育难的问题.以大白菜核基因雄性不育复等位基因遗传假说为依据,采用常规有性杂交、回交和自交等方法实施转育.经两代回交,育成了含有待转育亲本胶白1号遗传基因的雄性不育系及其相应的甲型"两用系"和临时保持系.利用杂交种绿旱58的不育株作不育源,所获得的新核不育系的不育率和不育度均达100%,初步达到了定向转育效果,这将为一些育种单位转育新的核基因雄性不育系提供一条可行之路.
【总页数】4页(P400-403)
【作者】吕艳玲;陶承光;王鑫
【作者单位】沈阳农业大学,园艺学院,沈阳,110161;沈阳农业大学,园艺学院,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,沈阳,110161【正文语种】中文
【中图分类】S634.1
【相关文献】
1.‘四季油青’菜心核基因雄性不育系定向转育研究 [J], 王慧;周鹏;王玉刚;冯辉
2.大白菜核基因雄性不育系的合成转育研究 [J], 岳艳玲;冯辉;宋阿丽
3.利用杂交种转育大白菜核基因雄性不育系的研究 [J], 吕艳玲;陶承光;王鑫
4.大白菜核基因雄性不育转育研究进展 [J], 岳艳玲;王玉刚;冯辉
5.橘红心大白菜核基因雄性不育系转育方法研究 [J], 冯辉;姜楠;李承彧
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大白菜雄性不育系杂交种制种技术

大白菜雄性不育系杂交种制种技术摘要介绍了大白菜雄性不育系杂交种制种技术，主要包括育种方法、苗床准备、播种、苗床管理、空间隔离区、土地准备、定植、定植后田间管理以及收获等方面内容，以期促进该技术的进一步推广应用。

关键词大白菜；雄性不育系；制种技术大白菜是风媒和昆虫传粉的异花授粉作物，目前采用2个自交不亲和系配制1代杂交种。

而雄性不育系制种是目前国内外很少采用的方法，它要求雄性不育系具有100%不育株率的稳定系统，同时在空间上有一定的隔离区。

在有效的面积内父、母本有一定比例，花期相遇，通过风媒和昆虫传粉，最后从不育系上采收种子就是1代杂种。

1育种方法为了节约能源，一般采用塑料薄膜冷床育苗。

方法是在一定的温度和时间内使小苗通过低温春化，当小苗长到一定大小时，父、母本按要求定植到田间进行杂交制种。

2苗床准备2.1苗床选择选择背风向阳、地势平坦、便于管理、不会受到畜禽危害的地方做苗床地。

2.2制做苗床一般在地表结冻之前及早做好苗床，东西北面夹好风障。

苗床南北宽1.8～2m，东西长度根据地块和育苗数量而定。

一定要踩实，床底整平，撒上1层细沙或草炭灰等。

2.3床土配制将床土腐熟马粪、牛粪分别过筛，然后按2∶1混合后，1m3加入氮磷钾复合肥1kg，混合均匀，加水和泥，摊入床内，整平，厚度约6cm，然后切成6cm×6cm 的营养块。

一般1m2放置280块营养块再盖地膜，防止营养块受损。

将剩余的床土留做盖土，同时把床上拱架做好，防止冬季寒冷拱架插不进地里。

2.4盖膜和草苫子根据不同地区的气候特点，选择覆盖塑料盖膜和草苫子的时间，一般在做好苗床后就覆盖薄膜，播种前15d开始覆盖草苫子，白天揭，晚间盖。

3播种3.1播种时间一般在当地气温稳定在0℃以上、前55d开始播种，同时要注意不同杂交组合的父、母本花期不同，确定父、母本播种时间，使父、母本花期相遇。

3.2播种方法如果苗床土块干燥，一定要向苗床喷水，水渗透土块后即可播种。

大白菜抗根肿病雄性不育系转育效果的评价

大白菜抗根肿病雄性不育系转育效果的评价聂凯;沈向群;吴琼;孟星河;沈昳潇【摘要】以复等位基因遗传的抗根肿病大白菜甲型雄性不育两用系CRAB742为不育源和抗源,采用杂交、回交、测交和自交方法,向大白菜自交系B1转育抗根肿病基因和核雄性不育基因;并对不同回交世代数的植株进行植物学性状调查,确定最佳的回交代数.试验结果证明,在同类型的大白菜间,采用严格的经济性状选择和抗性、育性筛选,回交3代可以满足目标经济性状的要求.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2009(000)002【总页数】3页(P157-159)【关键词】大白菜;根肿病;雄性不育;回交转育;复等位基因;抗病育种【作者】聂凯;沈向群;吴琼;孟星河;沈昳潇【作者单位】沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳,110161;沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳,110161;沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳,110161;北京天诺泰隆科技发展有限公司,北京,100013;沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳,110161【正文语种】中文【中图分类】S634.103大白菜杂种优势明显，雄性不育又是生产大白菜一代杂种的理想途径。

20世纪70年代初在中国就开始了大白菜雄性不育系选育的研究。

在利用大白菜显性核雄性不育系生产杂种一代研究中，冯辉等提出了大白菜核基因雄性不育复等位基因遗传模式，认为在1个育性的位点上由3个复等位基因控制。

Ms为ms的等位不育基因，ms为Ms的等位隐性可育基因，Msf为Ms的等位显性恢复基因，三者之间的显隐关系为:Msf>Ms>ms[1]。

张书芳等提出显性上位核基因互作遗传模式，将大白菜雄性不育两用系分为两种类型，即甲型雄性不育两用系不育株基因型为SpSpmsms，可育株为SpSpMsms；乙型两用系不育株基因型为Spspmsms，可育株为spspmsms[2]。

沈向群在利用张书芳提供的大白菜核基因互作不育系88-1A进行雄性不育转育时，通过遗传试验证明了88-1A同样存在复等位基因，同时利用RAPD标记技术，证明控制育性的基因只有1个位点，说明复等位基因符合大白菜显性核基因雄性不育的遗传规律[3]。