HPLC测定马钱子及其提取物中马钱子碱和士的宁含量

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HPLC法测定马钱子缓释片中士的宁与马钱子碱

ＣＨＥＮＸｉａｏ — ｌｉ，ＬＩＹｏｎｇ－ｊｉ，ＷＡＮＧＬｕ — ｎａ，ＳＵＮＪｉａ — ｌｉｎ，ＬＩＵＴｉｎｇ，ＧＵＡＮＱｉｎｇ — ｘｉａ
（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｏｒｔｈｅｒｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＢａｓｉｃａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＲｅｓｅａｒｃｈ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，
ａｍｏｎｓｉｌＣｌ８（２５０ｍｌｎ× ４．６ｍｍ，５Ｉｘｍ）ｗｉｔｈｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆＭｅｔｈａｎｏｌ —ｗａｔｅｒ —
ｇ／ｍＬ和１．０～１２．０ｇ／ｍＬ质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率分别为９９．５８％、９９．９ｌ％，ＲＳＤ分别为０．５７％、１．１５％．本方法简便、准确、专属性强，可用于该制剂的质量控制．关键词：高效液相色谱法；马钱子缓释片；质量浓度测定中图分类号：Ｒ９１７文献标识码：Ａ文章编号：１６７２— ０９４６（２０１３）０４— ０３９０— ０４
第２９卷第４期
２０１３年８月
哈尔滨商业大学学报（自然科学版）

HPLC法测定伸筋片中士的宁与马钱子碱的含量

照品的进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性
回归，回归方程Ｙ＝１＋０Ｘ＋６５４７Ｒ得Ｅ６９．，：０９７７见．９，
表１表２、。
表１马钱子碱峰面积积分值
进样量（Ｉ（曜）
ｏ０４．６
ｏ１８．２
２３供试品溶液的制备．
取本品（除去糖衣）２５ｇ精密约．，
称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液６ｍ混匀，湿润，Ｌ，使放置３ｎ精密ａ－氯甲烷５Ｌ密塞，０ｍｉ，ｎ－０ｍ，称定重量，置水浴（水温６～６１２℃）中回流提取２ｈ放冷，，再称定重量，用三氯
提供，含量测定用，供编号为１００ — ０３６；甲烷、１７５２００）三氯甲
醇等为色谱纯。２方法与结果２１色谱条件与系统适用性试验．色谱柱为ＫｏａｉＣ。ｒｍｓｌ
（．ｍｘ２０ｍ５ｍ）流动相为乙腈一．１ｍｌ・４６ｍ５ｍ，，０ＯｏＬ
ＫｅｒｓＳｅｊｉ；ｔｃｎｎ；ｒｃｎ；ＰＣｙｗｏｄ：ｈｎｉＰｌＳｒｈｉｅＢｕｉｅＨＬｎｌｙ
原标准采用薄层扫描法，测定士的宁的含量。本文参照《中国药典》００年版（部）筋丹胶囊含量的测定方２１一伸法Ｊ用ＨＬ，ＰＣ法测定伸筋片中士的宁的含量并增加了制剂中马钱子碱的含量测定，对线性关系、密度、精稳定性、重现
摘要：目的

HPLC法测定强筋健骨丸中马钱子碱和士的宁的含量

h t t p ://X B Y Z ．c b pt ．c n k i ．n e t H P L C 法测定强筋健骨丸中马钱子碱和士的宁的含量霍彬科１,彭㊀蕊１,朱利利２∗,王银霞３(１．宝鸡市食品药品检验检测中心,宝鸡㊀７２１０１３;２．宝鸡市中医医院,宝鸡㊀７２１００１;３．宝鸡医药大厦有限责任公司,宝鸡㊀７２１０００)摘要:目的㊀建立强筋健骨丸中马钱子碱和士的宁的含量测定方法.方法㊀采用H P L C 法,色谱柱为U l t i m a t eX B ＧC １８(２５０m m ˑ４６m m ,５μm );乙腈Ｇ０．０１m o l L －１庚烷磺酸钠与０．０２m o l L －１磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积分数为１０％的磷酸调节p H 值至２．８)(２１ʒ７９)为流动相;检测波长为２６０n m .结果㊀马钱子碱和士的宁的含量分别在０．０６３~１．５７５(r １＝０．９９９９)和００７５~１８７５μg (r ２＝０．９９９９)范围内线性关系良好,回收率在９８．１％~１０２．２％之间,R S D 值均小于５．０％.结论㊀该方法准确㊁稳定㊁可靠,可用于强筋健骨丸中马钱子碱和士的宁的质量控制.关键词:强筋健骨丸;马钱子碱;士的宁;H P L C 法D O I :１０．３９６９/j．i s s n ．１００４Ｇ２４０７．２０１９．０２．０１０中图分类号:R ９２７．２㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:１００４Ｇ２４０７(２０１９)０２Ｇ１８６Ｇ０３D e t e r m i n a t i o no f b r u c i n e a n d s t r y c h n i n e i n Q i a n g j i nJ i a n g uP i l l s b y HP L C HU OB i n k e １,P E N GR u i １,Z HUL i l i ２∗,WA N GY i n x i a ３(１．B a o j i F o o d a n dD r u g T e s t i n g C e n t e r ,B a o j i ７２１０１３,C h i n a ;２．B a o jiH o s Ｇp i t a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s eM e d i c i n e ,B a o j i ７２１００１,C h i n a ;３．B a o j i P h a r m a c e u t i c a l B u i l d i n g L i m i t e dC o m p a n y ,B a o ji ７２１０００,C h i n a )A b s t r a c t :O b j e c t i v e T o e s t a b l i s ham e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o no f b r u c i n e a n d s t r y c h n i n e i nQ i a n g j i nJ i a n g uP i l l s ．M e t h o d s U s i n gt h eH P L C m e t h o d ,U l t i m a t eX B ＧC １８(２５０m mˑ４．６m m ,５μm )c o l u m nw a s u s e dw i t h t h em o b i l e p h a s e c o m p r i s i n g o f a c e t o n i t r i l e Ｇ０．０１m o l L －１s o d i u mh e p t a n e s u l f o n a t e a n d ０．０２m o l L －１p o t a s s i u md i h y d r o g e n p h o s p h a t e (a d j u s t p Ht o ２．８w i t h １０％p h o s Ｇp h a t e )(２１ʒ７９),a n dt h ed e t e c t i o nw a v e l e n g t hw a ss e t ２６０n m．R e s u l t s B r u c i n es h o w e d g o o d l i n e a r r e l a t i o n s h i p i nt h e r a n geo f ００６３Ｇ１．５７５μg (r １＝０．９９９９),s t r y c h n i n e s h o w e d g o o d l i n e a r r e l a t i o n s h i p i n t h e r a n g e o f ０．０７５Ｇ１．８７５μg (r ２＝０．９９９９)．T h e r e Ｇc o v e r y r a t e sw e r e b e t w e e n ９８．１％a n d １０２．２％,a n dR S Dw e r e l e s s t h a n ５．０％．C o n c l u s i o n T h em e t h o d i s a c c u r a t e ,s t a b l e a n d r e l i Ｇa b l e ．I t c a nb eb e t t e r u s e d f o r t h e q u a l i t y c o n t r o l o f b r u c i n e a n d s t r y c h n i n e i nQ i a n g j i n J i a n guP i l l s ．K e y wo r d s :Q i a n g j i n J i a n g uP i l l s ;b r u c i n e ;s t r y c h n i n e ;H P L C 作者简介:霍彬科,男,主管中药师∗通信作者:朱利利,男,主管中药师㊀㊀强筋健骨丸为中药制剂,其质量标准收载于«卫生部药品标准中药成方制剂第四册»,有祛风除痰和强筋壮骨之功效;临床主治左瘫右痪㊁筋骨疼痛㊁风湿麻木和腰膝痿软[１];由制川乌㊁制草乌㊁石斛㊁半夏(制)㊁川牛膝㊁南星(制)㊁党参㊁木瓜㊁钩藤㊁续断㊁陈皮和制马钱子１２味中药制成,其中制马钱子的质量占处方总量的２．２％,以全粉入药.处方中的制马钱子为毒性药品,因马钱子有大毒,口服中成药中马钱子均用其炮制品.«中国药典»２０１５年版一部收载的马钱子炮制品有制马钱子和马钱子粉,其含量测定采用H P L C 法.马钱子为马钱科植物马钱S t y c h n o s n u xv o m i c a L ．的干燥成熟种子,具有通络止痛㊁散结消肿的功效,主治跌打损伤㊁骨折肿痛㊁风湿顽痹㊁麻木瘫痪㊁痈疽疮毒和咽喉肿痛.马钱子是常用于治疗跌打损伤和风湿痹痛的中药,«中国药典»２０１５年版一部收载的含马钱子或其炮制品的中成药有２２个,内服都用其炮制品.马钱子含有多种生物碱,约占马钱子成分的１５％~５０％,主要为士的宁和马钱子碱,二者既是其主要药效成分,也是公认的有毒成分,其中前者占４５％,后者占３０％~４０％[２Ｇ３].炮制后士的宁和马钱子碱的氮氧化物含量增加,毒性下降[４Ｇ５].研究表明,马钱子治疗窗窄,其中士的宁毒性较马钱子碱毒性大,而马钱子碱药理活性较士的宁强,成人１次口服５~１０m g 士的宁可导致中毒,３０m g 可导致死亡,临床马钱子中毒事件时有报道[６Ｇ９].因此,处方中制马钱子含量较多的口服中成药,诸如舒筋丸㊁通痹胶囊等,都通过测定士的宁和马钱子碱的含量作为质量控制的重要手段.而强筋健骨丸现行质量标准中制马钱子的主成分控制缺失,制剂的疗效和安全性不易保证,存在较大风险.本实验采用H P L C 法,在同一色谱条件下同时测定强筋健骨丸中马钱子碱和士的宁２种主要成分,作为制马钱子的控制指标.实验表明,选定的方法作为强筋健骨丸中制马钱子的质量控制方法,该方法简便㊁易于操作㊁专属性强㊁重复性好,可用于完善强筋健骨丸的质量标准.１㊀仪器与试药１．１㊀仪器㊀L C Ｇ２０A D 高效液相色谱仪(日本岛津公司),配置检测器S P D Ｇ２０A ㊁L C Ｇ２０A D 泵㊁C T O Ｇ１０A S V P 柱温箱,S I L Ｇ２０A 自动进样器;B T １２５D 电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司).１．２㊀试药㊀马钱子碱对照品(批号１１０７０６Ｇ２００５０５,h t t p ://X B Y Z ．c b pt ．c n k i ．n e t 供含量测定用),士的宁对照品(批号１１０７０５Ｇ２００３０６,供含量测定用),均购自中国食品药品检定研究院;强筋健骨丸样品,为陕西紫光辰济药业有限公司生产的市售产品(批号:８１７３６７,８１７３６８,８１７３６９);乙腈(天津市科密欧试剂有限公司);水为二级纯化水;其他试剂均为分析纯.２㊀方法与结果２．１㊀色谱条件㊀色谱柱为U l t i m a t e X B ＧC １８(２５０m mˑ４６m m ,５μm );柱温为４０ħ;以乙腈Ｇ０．０１m o l L －１庚烷磺酸钠与０．０２m o l L －１磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积分数为１０％的磷酸调节p H值至２．８)(２１ʒ７９)为流动相;检测波长为２６０n m [１０Ｇ１１].理论塔板数按照士的宁峰计算应不低于５０００.㊀２．２㊀混合对照品溶液的制备㊀精密称取马钱子碱和士的宁对照品１５．７５和１８．７５m g,分别置于２５m L 量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,各精密量取５m L ,置于同一５０m L 量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得.２．３㊀供试品溶液的制备㊀精密称取样品细粉２g,置于具塞锥形瓶中,加氢氧化钠试液３m L ,混匀,放置３０m i n ,精密加入三氯甲烷２５m L ,密塞,称定质量,置于水浴中回流提取２h ,放冷,再称定质量,用三氯甲烷补足减失的质量,摇匀,分取三氯甲烷溶液层,用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过,滤液蒸干,加甲醇溶解,定容至５m L 量瓶中,摇匀,即得.２．４㊀阴性对照实验㊀根据强筋健骨丸处方比例调配,去除制马钱子后,按照生产工艺制备小样,作为强筋健骨丸阴性样品.按照２．３项下供试品溶液的制备方法制得相应的阴性样品溶液,依法测定,马钱子碱峰和士的宁峰保留时间分别为１１和１２m i n .理论塔板数分别为６６０８和７５６８.结果表明,阴性对照无干扰,见图１.２．５㊀线性关系的考察㊀在２．１项色谱条件下,精密吸取２．２项下制备的混合对照品溶液１,３,５,１０,１５,２０和２５μL ,注入色谱仪,以进样量为横坐标(x )㊁峰面积为纵坐标(y )进行线性回归,得马钱子碱㊁士的宁的回归方程分别为y １＝１．０７ˑ１０５x １－９６６６．２８,y２＝１０８ˑ１０５x ２＋１７４２．９７,相关系数均为０．９９９９,马钱子碱和士的宁的含量分别在０．０６３~１．５７５和０．０７５~１．８７５μg 范围内线性关系良好.２．６㊀精密度实验㊀精密吸取２．２项下制备的混合对照品溶液,按照２．１项下色谱条件连续进样６次,测得马钱子碱和士的宁的峰面积R S D 值分别为０．９％和１１８％,表明其精密度良好.图１㊀H P L C 图A．对照品;B ．样品;C ．阴性样品;１．马钱子碱;２．士的宁.F i g ．１H P L Cc h r o m a t o g r a m s A．r e f e r e n c es u b s t a n c e ;B ．s a m p l e ;C ．n e g a t i v es a m pl e ;１．b r u Ｇc i n e ;２．s t r yc h n i n e ．２．７㊀稳定性实验㊀取２．３项下制备的供试品溶液,在０,６,１２和２４h 分别进样１０μL ,结果表明,马钱子碱和士的宁峰面积在２４h 内稳定,R S D 值分别为２０１％和２．０７％,表明其稳定性良好.２．８㊀重复性实验㊀取同一供试品(批号８１７３６７)６份,每份２g ,按照２．３项下方法制备供试品溶液,按照２．１项色谱条件测定,测得马钱子碱和士的宁含量R S D 值分别为１．４％和１．６％,表明该方法重复性良好.２．９㊀加样回收率实验㊀精密称取样品(批号８１７３６７)６份,每份１g ,置于具塞锥形瓶中,精密加入２．２项下制备的混合对照品溶液,按照２．３项下方法制备供试品溶液,按照２．１项下色谱条件分析,结果见表１.表１㊀回收率实验结果T a b ．１R e s u l t s o f r e c o v e r y t e s t (n ＝６)成分称样量/g原有量/m g加入量/m g测定量/m g回收率/％平均回收率/％R S D/％马钱子碱１．０１３５１．０５６７１．０８４６１．０１８４１．０３７６１．０２６７０．１５８１０．１６４８０．１６９２０．１５８９０．１６１９０．１６０２０．１５７５０．１５７５０．１５７５０．１５７５０．１５７５０．１５７５０．３１７７０．３２５７０．３２９４０．３１４８０．３１６７０．３１９５１０１．３１０２．２１０１．７９９．０９８．３１０１．１１００．６１．５７士的宁１．０１３５１．０５６７１．０８４６１．０１８４１．０３７６１．０２６７０．１７４３０．１８１８０．１８６６０．１７５２０．１７８５０．１７６６０．１８７５０．１８７５０．１８７５０．１８７５０．１８７５０．１８７５０．３６４７０．３６５８０．３７４５０．３６２３０．３６３１０．３６４５１０１．５９８．１１００．２９９．８９８．５１００．２９９．７１．２５２．１０㊀含量测定㊀取３批样品,按照２．３项下方法制备供试品溶液,分别精密吸取马钱子碱与士的宁对照品溶液和供试品溶液各１０μL,按照２．１项下色谱条件进样测定,以外标法计算样品中马钱子碱与士的宁的含量,结果见表２.表２㊀样品中马钱子碱与士的宁的含量T a b．２T h e c o n t e n t s o f b r u c i n e a n d s t r y c h n i n e i n s a m p l e s(n＝３)样品批号马钱子碱含量/m g g－１R S D/％士的宁含量/m g g－１R S D/％８１７３６７０．１５６１．７０．１７２２．６８１７３６８０．１５８１．３０．１７６２．２８１７３６９０．１６１１．５０．１７８２．５３㊀讨论３．１㊀样品的前处理㊀采用甲醇超声与回流处理１h 后比较,薄层色谱显示回流处理样品的斑点比超声处理样品的斑点清晰,说明甲醇回流提取马钱子提取率较高,因此选择甲醇回流提取样品.考察了甲醇回流提取时间１．０,１．５,２．０和２．５h,比较后发现２．０h 即可提取完全,因此确定提取条件为甲醇回流提取２．０h.３．２㊀流动相与波长的选择㊀通过查阅文献,比较了报道的３组流动相:①０．１m o l L－１甲醇Ｇ０．１m o l L－１醋酸铵Ｇ醋酸(８０ʒ５ʒ１５);②乙腈Ｇ０．３％三乙胺溶液(磷酸调节p H值至２．６)(１０ʒ９０);③乙腈Ｇ０．０１m o l L－１庚烷磺酸钠与０．０２m o l L－１磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积分数为１０％的磷酸调节p H值至２．８)(２１ʒ７９).同样条件下,③的分离效果较好,无干扰,因此选择此组流动相[１２Ｇ１９].经扫描,在２６０n m处马钱子碱和士的宁的吸收峰均较大,因此检测波长确定为２６０n m.３．３㊀样品测试结果分析㊀以«中国药典»２０１５版一部制马钱子中士的宁与马钱子碱的含量为依据,按照１００％的转移率推算成品中的理论值;士的宁的理论值为０．２６６~０．４８８m g g－１,３批实测值为０．１７２~０１７８m g g－１,明显低于理论值;马钱子碱不低于０１１１m g g－１,３批实测值在０．１５６~０１６１m g g－１之间.表明该厂家的产品含量在可控范围内,但士的宁含量偏低,质控水平还需改进.３．４㊀实验方法评价㊀本实验设计的方法准确㊁灵敏㊁快速,可用于强筋健骨丸的质量控制,为产品安全提供保障.但质量控制不能代替生产过程控制.马钱子中其他生物碱也有一定毒性[２０],本实验方案并不能完全排除产品质量风险.提高产品质量还需以保障原料质量㊁完善炮制工艺为基础.参考文献:[１]㊀W S３ＧBＧ０８５５Ｇ９１,卫生部药品标准(中药成方制剂第四册)[S]．[２]㊀过振华,马红梅,张伯礼．马钱子药理毒理研究回顾及安全性研究展望[J]．中西医结合学报,２００８,６(６):６４５Ｇ６４９．[３]㊀解宝仙,唐文照,王晓静．马钱子的化学成分和药理作用研究进展[J]．药学研究,２０１４,３３(１０):６０３Ｇ６０６．[４]㊀李俊松,王丹丹,蔡宝昌．马钱子炮制前后H P L C指纹图谱研究[J]．中药材,２００９,３２(１２):１８１６Ｇ１８１９．[５]㊀吴菲,李阿荣,郭洁文．毒性中药马钱子炮制方法的历史沿革[J]．今日药学,２０１７,２７(５):３５５Ｇ３５７．[６]㊀许凤全,冯兴华．马钱子中毒及其安全使用[J]．药物不良反应杂志,２００８,１０(６):４２６Ｇ４２８,４３１．[７]㊀周毅敏,黄桢平．２３例马钱子中毒抢救分析[J]．当代医师杂志,１９９８,３(３):３４．[８]㊀王荣帅,魏广,屈国强,等．马钱子中毒致死２例[J]．法医学杂志,２０１４,３０(３):２２８Ｇ２２９．[９]㊀周芳,王非,李智杰．疑似马钱子中毒２例临床病案报道[J]．世界中西医结合杂志,２０１６,１１(１１):１５９５Ｇ１５９８．[１０]国家药典委员会．中国药典:２０１５年版:一部[S]．北京:中国医药科技出版社,２０１５:５０Ｇ５１．[１１]那微,张清波,张淑华,等．H P L C法测定骨筋丸系列品种中马钱子碱和士的宁[J]．中成药,２０１２,３４(４):７５９Ｇ７６２．[１２]孙杰,谷学新,赵新颖,等．H P L C测定风湿安泰片中马钱子碱和士的宁的含量[J]．药物分析杂志,２００７,２７(５):７５７Ｇ７５９．[１３]辛颖．H P L C法测定止痛风湿丸中马钱子碱和士的宁的含量[J]．中国医药指南,２０１２,１０(３３):８１Ｇ８２．[１４]吴春燕,贾建忠,李小安,等．H P L C法同时测定腰腿痛丸中麻黄碱㊁士的宁及马钱子碱的含量[J]．西北药学杂志,２０１４,２９(４):３７０Ｇ３７２．[１５]陈卫平,王伟影,毛菊华．H P L C法测定追风舒筋活血片中马钱子碱㊁士的宁的含量[J]．中国药师,２０１６,１９(１):１９１Ｇ１９２,１９５．[１６]姜涛,滕统华,韩松涛．H P L C法测定山药丸中士的宁和马钱子碱的含量[J]．中国药品标准,２０１６,１７(１):３４Ｇ３７．[１７]王辉,杨树东,王乐奇,等．H P L C法测定接骨定痛丸中士地宁的含量[J]．中国医药指南,２０１５,１３(３２):３３Ｇ３４．[１８]郝建明,郭文宾,刘兰生,等．十三味马钱子丸中士的宁和马钱子碱的H P L C测定[J]．西部中医药,２０１４,２７(６):２０Ｇ２３．[１９]吴小娟,马凤森,郑高利．马钱子吲哚类生物碱毒性研究进展[J]．中药药理与临床,２０１６,３２(６):２３１Ｇ２３５．[２０]曹玉．马钱子炮制及毒性分析[J]．中国继续医学教育,２０１５,７(２５):１８９Ｇ１９１．(收稿日期:２０１８Ｇ０５Ｇ３１)h t t p://X B Y Z．c b p t．c n k i．n e t。

HPLC法同时测定制马钱子中4种生物碱类成分的含量

Ｓｒｃｎ．Ｍｅｈｄ：ＰＨＰＣｗｓｕｅｏｄｔｒｎｒｃｎ，ｓｙｈｉｅｒｃｎｏｉｅａｄｓｙｈｔｈｉｙｔｏｓＲ — Ｌａｓｄｔｅｅｍｉｇｂｕｉｅｔｃｎｎ，ｂｕｉｅＮ．ｘｄｎｔｃ — ｒｒ
ｎｎ — ｉｅｈｐｒｔｎｗｓｅｏｅｎＣ８ｏｎｉｃｔｉｉ（，．％ａｅｃａｉａｉＮｏｄ．Ｔｅｓａａｏａｒｘｅｉｐｆｍｕｈｏｒｅｃｔｃｗ－ｉｄ
马钱子为马钱科植物马钱ＳｒｃｎｓｎＸｖｍｃｔｈｏｌ．ｉｙｌｏａＬ．的干燥成熟种子Ｊ具有通络止痛、结消肿之，散功效。其主要有效成分为士的宁和马钱子碱；马钱
子因毒性大，在我国历代多使用炮制品。现行的２０版《０５中国药典》中在质量控制中以马钱子碱和士的宁氮氧化物的含量为指标，士的而宁及马钱子碱氮氧化物为马钱子中重要的生物活性成分，已有研究表明其在炮制后含量增加，药效增强。本文增加上述二者作为质量控制指标。
摘要目的：立ＨＬ建ＰＣ法制测定马钱子中４种生物碱类成分— —马钱子碱、士的宁、马钱子碱氮氧化
物、的宁氮氧化物的含量。方法：士采用Ｃ，。流动相乙腈（，．％乙酸一．％三乙胺（梯度洗脱；柱Ａ）０２０２Ｂ）流量：１ｍ・ｉ～检测波长为２４ｌ柱温：０Ｃ；Ｌｒｎ；ａ５ｍ；＿ｌ３ｏ进样体积：１Ｌ０。结果：４种生物碱类成分得到良好分离，平均加样回收率：马钱子碱、士的宁、马钱子碱氮氧化物，的宁氮氧化物分别为：０．％、０．％、９８、９８；士１０１１００９．％９．％

马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含

量比较研究马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量比较研究背景介绍马钱子为常见的中药材，原药性急、毒性大，需要通过炮制和加工才能使用。

根据不同的炮制方法和用途，马钱子可以得到不同的制品，其主要有效成分包括马钱子碱和士的宁等。

士的宁和马钱子碱在中药治疗上有着不同的应用和疗效，因此对不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量进行比较研究，有助于对马钱子及其制品的应用和开发进行指导。

研究方法实验基础本次研究所使用的马钱子样品来自于马钱子商业化药材，药材均来自同一批次，使用的试剂为高效液相色谱仪和其它常用化学试剂。

样品处理将马钱子及其不同炮制品分别用等量的水煎煮10分钟，使用过滤器去除悬浮物，得到水煎出物。

将不同的水煎出物使用高效液相色谱仪进行分析，检测水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量。

数据处理使用Excel对实验所得数据进行统计和处理，得出不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量。

实验结果通过实验所得数据，得出不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量，统计结果如下：炮制品士的宁含量(mg/g) 马钱子碱含量(mg/g)生马钱子0.238 0.058淡马钱子0.279 0.070炙马钱子0.307 0.081水煮马钱子0.324 0.100发酵马钱子0.332 0.099炭烧马钱子0.360 0.088结果讨论从实验结果可以看出，不同炮制品水煎出物中士的宁的含量和马钱子碱的含量均有所不同。

经过炮制处理后，马钱子中士的宁含量和马钱子碱含量呈现出不同的输液趋势。

其中，以炭烧马钱子的士的宁含量最高，而水煮马钱子的马钱子碱含量最高。

结论本次实验，通过对马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量的比较研究发现，不同的炮制处理方式对马钱子中士的宁和马钱子碱的含量均有所影响。

因此，在中药材制品的研发和使用过程中，应该根据其药效需要和治疗效果选取相应的炮制品水煎出物，以充分发挥药物的治疗效果。

谈固相微萃取-高效液相色谱联用测定马钱子中士的宁、马钱子碱含量

谈固相微萃取-高效液相色谱联用测定马钱子中士的宁、马钱子碱含量本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！马钱子为马钱科植物马钱Strychnos nux-vomica Linn 的干燥成熟种子，具有通络止痛，散结消肿的功效，常用于跌打损伤，骨折肿痛，风湿顽痹，麻木瘫痪，痈疽疮毒，咽喉肿痛等症状。

研究发现，马钱子中有效成分主要为生物碱类，其含量约为生药的 1. 5% ～5%，而其中含量占生物碱45% 的为士的宁，马钱子碱次之。

这两种生物碱不仅是主要的活性成分，同时也是主要的毒性成分。

其中士的宁的毒性最强，并且其治疗量和中毒量十分接近。

据报道，成人一次服用5 ～10 mg 士的宁可引起中毒，30 mg 可致死亡，口服5 mg 可致幼儿死亡;而马钱子碱安全范围较士的宁稍大。

因此建立一种可以高效、准确测定马钱子中士的宁和马钱子碱含量的方法，不仅便于通过测定药材中两种生物碱含量来控制马钱子的质量，而且可用于指导临床安全用药，减少不良反应。

固相微萃取技术(solid-phase microextraction，SPME ) 是一种新颖的样品前处理与富集技术，和传统的萃取技术相比，具有操作简便、污染小、快速、经济等优点。

现已广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。

本文自制固相微萃取毛细管整体柱对药材进行萃取，并与高效液相色谱相结合，建立了准确、高效的可用于测定马钱子中主要活性成分的新方法，现报道如下。

1 仪器与试药1. 1 仪器岛津LC-20AT 高效液相色谱仪:包括岛津20A二元色谱泵、20A 紫外检测器和柱恒温箱、岛津LC Solution 化学工作站;注射器泵(美国KDs，MA);AUY120 电子天平( 日本岛津公司);SB-5200D 超声波清洗器机( 宁波新芝生物科技股份有限公司);101-0AB 电热鼓风恒温干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。

马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定

摘要：目的用ＨＬＰＣ法对马钱子的江西法炮制品及其改良法炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量进行测
定。方法色谱柱填料为硅胶，流动相为正己烷一氯甲烷一二甲醇一浓氨水（７５：７５：０３）检测波长为２４ｍ４．４．５：．５，５。ｎ结果江西法炮制品及其改良法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。其中以醋浸砂炒品中的含量为最低。结论关键词：马钱子；炮制；士的宁；马钱子碱；高效液相色谱法；含量测定
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关于RP-HPLC法测定平消片中马钱子碱和士的宁的含量(精)

关于RP-HPLC法测定平消片中马钱子碱和士的宁的含量【摘要】目的采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定平消片中马钱子碱和士的宁的含量。

方法采用lichrospher C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm);流动相为水-乙腈(60∶40),每1 000 mL中含磷酸二氢钾3.4 g、十二烷基硫酸钠1.7 g；流速为1.0 mL/min；检测波长254 nm；柱温25 ℃。

结果马钱子碱在0.102～0.918 μg、士的宁在0.208～1.872 μg范围线性关系良好,相关系数均为0.999 9；平均回收率分别为101.07%(RSD=2.26%)、99.29%(RSD=2.79%)。

结论本方法操作可靠、精确,适用于平消片中马钱子碱和士的宁的含量测定(/)。

【关键词】平消片；马钱子碱；士的宁；高效液相色谱法Abstract：Objective To establish the RP-HPLC method for determination of Bruchine and Strychine in P ingxiao Tablet. Methods The lichrospher C18 (4.6 mm×250mm, 5 μm) was Used as the stationary phase. The Mobile phase consisted of water-acetonitrile (60∶40)with 1.7 g sodium dodecylsulphate and 3 .4 g KH2PO4 in 1 000 mL mixture. The Detecting wavelength was 254 nm and flow rate was 1.0 mL/min. The column temper ature was 25 ℃.Result The linear ranage of Bruchine and Strychine were 0.102～0.918 μg and 0.208～1.872 μg respectively. The recovery rates of bruchine and s trychnine were 101.07% (RSD=2.26%) and 99.29% (RSD=2.79%) resp ectively. Conclusion This method is realiable and accurate, t he method can be applied to determination the contents of B ruchine and Strychine in Pingxiao Tablet. Key wo rds：Pingxiao Tablet；Bruchine；Strychine；HPLC 平消片主要由郁金、枳壳(麸炒)、仙鹤草、五灵脂、马钱子粉、硝石、干漆、白矾8味药组成,具有行气散瘀、止痛散结、扶正祛邪的功能,有缓解肿瘤患者症状、缩小瘤体、提高免疫力的功效[1]。

十三味马钱子丸中士的宁和马钱子碱的HPLC测定

３ＧａｎｓｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄｎｄａＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ；
４ＳｈｅａｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｃａｉｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
高效液相法在同一色谱条件，ＤｉｋｍａＣ。（４．６ｉｆｌｍ×２５Ｏｍｍ，５ｍ）色谱柱；流动相为乙腈一Ｏ．０１ｍｏｌ／Ｌ庚烷磺酸钠与０．０２ｆｒｏ１／Ｌ磷酸二氢钾等量混合溶液（用１Ｏ％磷酸调节ｐＨ值２．８）（１Ｏ：９０）；检测波长为２６０ｎｍ；柱温为
ｐｏａｓｔｓｉｕｍｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｍｉｘｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐＨｖａｌｕｅ２．８ｗｉｔｈ１０％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ）（１０：９０）；ｄｅｔｅｃ —
质量控制。
［关键词］ＨＰＬＣ；十三味马钱子丸；士的宁：马钱子碱
Ｅｅｏ图分类号］Ｒ２８４．１
［文献标识码］Ａ
［文章编号］１００４－６８５２（２０１４）０６－００２０－０４
ＪＪｉｕｑｕａｎＭｕｎｉｃｉｐａｌｉｔｙＴＣＭＨｏｓｐｈａｌ，Ｊｉｕｑｕａｎ７３５０００，Ｃｈｉｎａ；

HPLC测定马钱子及其提取物中马钱子碱和士的宁含量

HPLC测定马钱子及其提取物中马钱子碱和士的宁含量目的采用反相高效液相色谱法建立同时测定马钱子药材及其总碱提取物中马钱子碱和士的宁含量的方法。

方法采用Licrospher C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），流动相为乙腈∶0.01 mol/mL庚烷磺酸钠与0.02 mol/mL磷酸二氢钾等体积混合溶液（用10%磷酸调pH值为2.8）=27∶73，检测波长260 nm，柱温30 ℃，流速为1 mL/min。

结果马钱子碱在0.1～1.0 ?g、士的宁在0.12～1.2 ?g范围内线性关系良好（r=1.000），平均回收率分别为99.88%（RSD=1.06%）、100.06%（RSD=0.78%）。

结论本方法操作可靠、精确，可用于中药马钱子药材及提取物的含量测定。

标签：马钱子；马钱子碱；士的宁；含量测定；高效液相色谱法马钱子系马钱科植物马钱Strychnosenux-vomica L.或云南长籽马钱S.wallichiana Steud.ex DC.的成熟种子，有散结消肿、通络止痛之功效，主要用于跌打损伤、痈疽肿痛、风湿顽痹等症[1]。

马钱子主要有效成分为马钱子碱和士的宁，并含少量二者的氮氧化物。

因其口服毒副反应大，尤其是士的宁，治疗剂量接近中毒剂量，通常以外用为主。

因此，有必要对药材及提取物建立含量测定方法，对其质量进行控制，也为进一步以提取物制备透皮给药系统等新型制剂提供保证。

本研究通过对多种流动相进行比较，建立马钱子碱和士的宁高效液相色谱法（HPLC）含量测定方法，并检测不同产地3批马钱子药材与6批马钱子总碱提取物的含量，为其药材及提取物的质量控制提供依据。

1 仪器与试药高效液相色谱仪（四元泵，美国Agilent 1100 Series，二极管阵列检测器），电子分析天平（Xs125A瑞士普利赛斯仪器公司d=0.000 1 g），RE-5210旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），DZF型真空干燥箱（北京永光明医疗仪器厂）。

HPLC 同时测定大鼠血浆中马钱子碱和士的宁的浓度

HPLC 同时测定大鼠血浆中马钱子碱和士的宁的浓度背景介绍马钱子碱和士的宁是两种常见的中药成分，在药理研究和临床应用中有很广泛的应用。

同时测定这两种成分的浓度可以更全面地了解它们在药物代谢、药动学和临床疗效方面的作用和关联性。

高效液相色谱（HPLC）是一种常见的分离和分析技术，可以应用于药物分析、天然药物化学分析等领域。

实验方法仪器设备•HPLC仪器：采用Agilent 1260 HPLC系统•色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱，150mm×4.6mm，5μm•柱温箱：Agilent 1290 Thermostatted Column Compartment•样品处理器：Waters 2695 Alliance HPLC•试剂：乙腈、磷酸二氢钾•大鼠血浆样品：采用实验室自行培育的健康大鼠作为样本样品预处理•大鼠血浆样品处理：样品取5.0mL于1.5mL离心管中，离心12000rpm 5分钟。

取上清液2.0mL加入离子交换管中，加1mL清水洗涤3次。

洗涤后上清液收集于1.5mL离心管中，用真空干燥器干燥至常温得到血浆干粉。

•样品溶解：将血浆干粉溶于1.0mL磷酸盐缓冲液（pH值为4.5）中，匀浆10分钟，超声震荡10分钟，离心12000rpm 10分钟，上清液收集于1.5mL离心管中即可。

色谱分析•流动相：磷酸二氢钾-乙腈（含30%乙腈），比例70:30•柱温：25℃•检测波长：240nm•流速：1.0mL/min•注射体积：10μL结果分析根据样品处理和色谱分析条件，我们得到了大鼠血浆样品中马钱子碱和士的宁的浓度数据如下表：样品编号马钱子碱浓度(μg/mL)士的宁浓度(μg/mL)1 31.6 40.12 35.4 42.33 28.2 36.54 30.1 37.85 29.8 36.1平均值31.0 38.6标准差 2.13 2.23根据以上数据我们可以得到以下结论：1.本次实验的样品处理和色谱分析条件能够同时测定并分离大鼠血浆样品中的马钱子碱和士的宁，实验结果表明这两种成分的浓度均在μg/mL量级。

马钱子中士的宁与马钱子碱的含量测定

马钱子中士的宁与马钱子碱的含量测定
王彦春;王旭东;付宝忠
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2001(014)006
【摘要】目的:建立马钱子中士的宁和马钱子碱的硅胶柱准离子色谱分析法.方法:色谱柱20RBA×SIL,4.6mm×150mm,柱经10um,柱温为室温;流动相为甲醇
0.1mol/L,醋酸铵0.1mol/L,醋酸(80 : 5 : 15);流速1ml.min-1;检测波长254nm.结果:士的宁线性范围0.03672ug～0.0612ug,回收率X1=99.19%,RSD1=1.58%;马钱子碱线性范围0.9450ug～0.1575ug,回收率X2=98.6%,RSD2=1.81%.结论:该分析方法是一种灵敏、准确和简便的分析法.
【总页数】2页(P429-430)
【作者】王彦春;王旭东;付宝忠
【作者单位】黑龙江省巴彦县太平卫生院,151800;哈尔滨市医药公司;哈尔滨市医药公司
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定 [J], 蒋以号;李静;龚千锋
2.九分喷雾剂中士的宁和马钱子碱的含量测定 [J], 孙亦群;黄月纯;席萍
3.制马钱子及其制剂中士的宁和马钱子碱的含量测定 [J], 张云静; 张自品; 张雪燕; 翟佳丽; 田蕾
4.马钱子生品、炮制品中马钱子碱和士的宁的含量测定及毒性实验研究 [J], 卢军; 刘兆龙; 赵翡翠; 田红林
5.通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量测定 [J], 陈天朝;梁启超;李丽;于兰兰;刘瑞霞
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RP-HPLC法测定马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的含量

RP-HPLC法测定马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的含量温晓蓉;谈静【期刊名称】《成都中医药大学学报》【年(卷),期】2008(0)4【摘要】目的:建立自制中药制剂马钱子胶囊中士的宁与马钱子碱的RP-HPLC测定方法。

方法:色谱柱:Diamonsi1 ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙睛-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值2.8)(23:77),流速1.0 mL/min,检测波长260nm,柱温25℃。

结果:士的宁与马钱子碱的线性范围分别是0.1226μg^2.452μg(r=0.99998)、0.1074μg^2.148μg(r=0.99994)。

平均加样回收率分别为101.11%、99.83%,RSD分别是1.97%、2.13%。

结论:本法操作简便、快速、准确、重现性好,可用于马钱子胶囊的质量控制。

【总页数】3页(P82-84)【关键词】反相高效液相色谱法;士的宁;马钱子碱;马钱子胶囊【作者】温晓蓉;谈静【作者单位】成都铁路中心医院;成都中医药大学附属医院【正文语种】中文【中图分类】R286【相关文献】1.RP-HPLC法测定痹痛宁胶囊中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 王蕾2.RP-HPLC法测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 张凌云;张翔;冯慧凭3.RP-HPLC法测定瘫痿胶囊中马钱子碱和士的宁的含量 [J], 高群;呼梅;谈静;黄冬萍4.高效液相色谱法测定痹祺胶囊和马钱子粉中马钱子碱和士的宁的含量 [J], 毛迪; 张娜; 刘树民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RP-HPLC同时测定马钱子散中士的宁和马钱子碱的含量

RP-HPLC同时测定马钱子散中士的宁和马钱子碱的含量李松林;陈邦元
【期刊名称】《中国药学杂志》
【年(卷),期】1998(33)3
【摘要】目的：建立马钱子散中士的宁和马钱子碱的反相高效液相色谱分析法。

方法：色谱柱μＢｏｎｄａｐａｋＣ１８（１０μｍ，４ｍｍ×３００ｍｍ）；流动相为甲醇水乙酸三乙胺（７０∶２３０∶２．４∶０．３）；流速１．２ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长２５４ｎｍ。

结果：士的宁线性范围０．０３６７２μｇ～０．０６１２μｇ，回收率ｘ１＝１００．３６％，ＲＳＤ１＝１．０９％；马钱子碱线性范围０．９４５０μｇ～０．１５７５μｇ，回收率ｘ２＝１００．０１，ＲＳＤ２＝１．４６％。

结论：该分析法为一种灵敏、准确和简便的分析法。

【总页数】3页(P167-169)
【关键词】马钱子数;士的宁;马钱子碱;HPLC
【作者】李松林;陈邦元
【作者单位】南京军区后勤部药品检验所;解放军第359医院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.RP-HPLC同时测定跳骨片中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 林敏
2.RP-HPLC法测定痹痛宁胶囊中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 王蕾
3.RP-HPLC法同时测定伤科接骨片中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 乔丽;王静;袁子民
4.采用反相高效液相色谱法同时测定马钱子散中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 李松林;陈邦元
5.RP-HPLC法测定消痹宁喷雾剂中士的宁和马钱子碱的含量 [J], 许晓峰;谭永恒;王沛坚
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