李斯特菌感染PPT课件
单核细胞增生李斯特菌检验PPT课件
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于35℃培养24h-48h,穿刺时尽量接近底 部,但不要触到底面,同时避免琼脂破裂 。 于明亮处观察洁净的血琼脂平板,单增 李斯特菌和斯氏李斯特菌在刺种点周围产 生狭小的透明溶血环,无害李斯特菌无溶 血环,伊氏利斯特菌产生大的透明溶血环 。注意:不要据此来区别李斯特氏各种菌 ,仅仅是一种溶血现象。用CAMP试验来 确证李斯特氏各种菌。
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表1 单核细胞增生李斯特菌在选择性平板 上的菌落特征
选择性琼脂平板单核细胞增生李斯特菌科 玛嘉显色培养基菌落为:蓝色,周围有白色 晕圈.
PALCAM琼脂菌落:为灰绿色,小的圆形菌 落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落有黑 色凹陷
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L.M在 Chromagar培养基生长特征
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L.M在OXA培养基生长特征
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初筛及纯培养 自选择性琼脂平板上分别挑取5个以上典
型或可疑菌落,分别接种在木糖、鼠李 糖发酵管,于37℃培养24h;同时在胰 酪胨大豆琼脂培养基(TSA-YE)平板上 划线纯化,于30℃培养24h-48h。木糖 阴性为蓝色,鼠李糖阳性为黄色,在 TSA-YE平板上可疑菌落为淡蓝色。
妊娠合并利斯特菌病健康宣教
胎儿发育异常:妊娠合并利斯特菌病可能导 致胎儿发育异常,增加胎儿出生缺陷的风险。
孕期预防措施
保持良好的卫生 习惯,勤洗手, 避免接触生肉和 未煮熟的食物。
避免食用未经巴 氏消毒的牛奶和 奶制品。
避免食用未煮 熟的蔬菜和肉 类。
避免接触感染 源,如宠物、 家禽等。
避免生食:避免食 用生肉、生蛋、生 鱼片等生食,避免 食用未煮熟的食物。
保持厨房卫生:厨 房要保持清洁,生 熟食物分开存放, 避免交叉污染。
避免接触宠物:避 免接触宠物的粪便, 接触后要及时洗手。
定期产检:定期到 医院进行产检,及 时发现和治疗妊娠 合并利斯特菌病。
饮食安全
避免食用生冷食物,如生鱼片、生肉等 避免食用过期、变质的食物 避免食用未煮熟的食物,如溏心蛋、半熟牛排等 避免饮用未煮沸的水,如自来水、井水等 避免食用未清洗干净的水果、蔬菜等 避免食用未煮熟的海鲜、贝类等 避免食用未煮熟的豆类、豆制品等 避免食用未煮熟的禽肉、畜肉等 避免食用未煮熟的米饭、面条等 避免食用未煮熟的汤、粥等
药物使用:按时按量使用 药物,避免漏服或过量使 用
药物监测:定期监测胎儿 发育情况,及时发现药物 对胎儿的影响
药物停药:根据医生建议, 及时停药,避免药物对胎 儿造成长期影响
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妊娠合并李斯特菌所致胎儿损害的健康宣教
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消化系统损害:李 斯特菌可导致胎儿 消化系统损害,影 响胎儿生长发育
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免疫系统损害:李 斯特菌可导致胎儿 免疫系统损害,影
响胎儿健康
预防李斯特菌的措施
01
保持良好的卫 生习惯,勤洗 手,保持厨房
和食物清洁Hale Waihona Puke Baidu
02
避免食用未煮 熟的食物,尤 其是肉类和海
鲜
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避免食用过期 或变质的食物
胎儿损害的诊断方法
超声检查:通过超声波检查胎儿的生长发育情况,观 察胎儿的形态、结构、功能等
胎心监护:通过监测胎儿的心率、胎动等指标,判断 胎儿的健康状况
羊水穿刺:通过抽取羊水进行化验,检测胎儿的染色 体、基因等,判断胎儿是否存在遗传性疾病
胎儿镜检查:通过胎儿镜直接观察胎儿的形态、结构、 功能等,判断胎儿是否存在畸形、发育异常等
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倾听:耐心倾听孕产妇的担忧和问题,给予关心和理解
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解释:向孕产妇解释妊娠合并李斯特菌所致胎儿损害的原因、症状和预防措施
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鼓励:鼓励孕产妇积极面对,保持乐观心态
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提供资源:提供相关医疗资源和心理支持服务,帮助孕产妇解决问题
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陪伴:陪伴孕产妇度过难关,给予关爱和支持
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引导:引导孕产妇进行自我调节,保持身心健康
单核细胞增生李斯特菌检验 ppt课件
协同溶血试验 (cAMP):
在血平板上平行接种金黄色葡萄球菌和马红球菌 (R.equi), 在它们中两者之间垂直接种可疑李斯特菌 , 但不要触及它们, 于30℃培养24h~48 h, 检查平板 中垂直接种点对溶血环的影响。靠近金黄色葡萄 球菌接种点的单核细胞增生李斯特菌的溶血增强, 斯氏李斯特菌(L.seeligeri)的溶血也增强, 而伊氏 李斯特菌(L.ivanovii)在马红球菌附近的溶血增 强。
L.M在PALCAM培养基生长特征
MMA抑制性强,菌落小、形态不典型,很 难与杂菌区分
进口PALCAM 、进口OXA菌落较典型,易与 杂菌区分
CHROMagar菌落较典型,易与杂菌区分, 对高污染食品中的杂菌抑制性较差
染色镜检
将上述可疑纯培养物做革兰氏染色并做湿片 检查; 利斯特菌为革兰氏阳性短杆菌, 大小为 0.4~0.5μm×0.5~2.0μm;用生理盐水制成 菌悬液, 在油镜或相差显微镜下观察, 该菌出 现轻微旋转或翻滚样的运动。
产等。它广泛存在于自然界中。肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等都可被污染。 该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。 其易感人群主要为孕妇、老人、新生儿和免疫缺陷人群。大多数发达国家人类李斯特菌病 发生率约为每一百万人2-15例,死亡率为13-34% 加拿大由单增李斯特氏菌污染肉制品引发李斯特菌病暴发,导致十几人死亡。很多国家都 已经采取措施来控制食品中的单增李斯特氏菌,并制定了相应的标准。
李斯特菌的检验ppt课件
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LM的毒力因子
• 李斯特菌溶解素(LLO):
系由hly基因编码的Hly蛋白,是一 种孔形成毒素,与破坏吞噬体,促 进菌体进入胞液有关,是主要的毒 力因子。
• ActA蛋白
• 磷脂酶C
• P60蛋白
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LM的毒力因子
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检测LM的hlyA、23SRNA 多重PCR体系(上海CDC提供)
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LM多重PCR(上海CDC提供)
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单一或多重PCR检测LM特异基因
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其它和LM相关分子检测技术
• 探针检测技术:特异性好。
• BAX-system:自动PCR检测分析, 2002年被英国农业食品和监测局 (FSIS)采纳用来检测鲑鱼中的LM。 有报道利用改良的快速增菌法结合 BAX可以在24h内检测样品的LM。
对于分离培养后的可疑菌落做生化 反应试验、溶血试验、CAMP协同溶 血试验、典型运动及动物试验等鉴 定,被确定为李斯特菌后进一步进 行血清分型;增菌和选择性增菌是 不可缺少的步骤,增菌主要有冷增 菌和快速增菌两种。
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李斯特菌 PPT课件
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发病机制
• 产单核细胞李斯特菌能产生 2 种磷脂酶C:磷脂酰肌磷 脂酶 C(PI-PLC)和宽范围的磷脂酶C(PC-P LC)
• PI-PLC毒性相对较小,对细菌在细胞间扩散作用 不 大,主 要 是 协 同 PC-PLC 发 挥 作 用。 而PC -PLC的功能则较复杂,它使细菌从吞噬泡中逃逸出来, 能破坏宿主细胞的信号通路,能调节细胞因子和化学因子 的合成,还能通过二酰基甘油、神经酰胺、肌醇磷酸盐等 调节细胞的生长、分化、凋亡等
李斯特菌
武汉大学人民医院新生儿科 方成志
2019/9/13
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李斯特菌
• 李斯特氏菌属(Listeria)早在20世纪初即被 发现,它共有7个菌种,革兰氏染色阳性。 其中单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李氏菌) ,是 唯一能引起人类疾病的,也是一种人畜共 患的病原菌。
李斯特菌
ห้องสมุดไป่ตู้
李斯特菌病爆发
自1981年至今 多次世界范围的大流行
命基111班 10111104 朱家民
培养基表面
细菌形态
分布广
肉类,瓜果蔬 菜,绝大多数 食品中都能找 到李斯特菌
摘自GB4789.30— 2010
预防与控制
• 单增李斯特氏菌在一般热加工处理中能存活,热处理已 杀灭了竞争性细菌群,使单增李斯特氏菌在没有竞争的 环境条件下易于存活,所以在食品加工中,中心温度必 须达到70℃持续2分钟以上。单增李斯特氏菌在自然界 中广泛存在,所以即使产品已经过热加工处理充分灭活 了单增李斯特氏菌,但有可能造成产品的二次污染,因 此蒸煮后防止二次污染是极为重要的。由于单增李斯特 氏菌在4℃下仍然能生长繁殖,所以未加热的冰箱食品 增加了食物中毒的危险。冰箱食品需加热后再食用,如 果是生鱼片之类的海鲜,专业酒店都会存放于零下40摄 氏度左右的大型冰柜,以确保杀灭寄生虫及防止病菌感 染。
李斯特菌的致病机理
2.李斯特氏菌属
单核细胞增生李斯特菌 LL..mmoonocy tooggeenneess
绵羊(伊氏)李斯特菌 LL..iivanovii
英诺克(无害)李斯特菌 LL..iinnocua
威尔斯李斯特菌 LL..wweellsshhiimmei
李斯特菌
西西尔尔李李斯斯特菌 LL..sseeeelligeri
1. 需氧和兼性厌氧 2. 生长范围为2-42℃ 3. 最适温度为35-37℃ 4. pH:中性至弱碱性(pH9.6) 5. 在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。 6. 在20-25℃培养有动力,穿刺培养2-5天可见倒立伞状生长,肉汤培养
物在显微镜下可见翻跟斗运动。 7. 在固体培养基上,菌落初始很小,透明,边缘整齐,呈露滴状,但随着
5、抵抗力
该菌对理化因素抵抗力较强,在土壤、粪 便、青储饲料和干草内能长期存活,对碱和盐抵抗 力强,60-70℃经5-20min可杀死,70%酒精 5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔 马林20min 可杀死此菌。
该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺 胺均敏感。
样品介绍
品名:雨润脆皮肠 规格:210g*20/袋 批号:20140515/Z 保质期: 90天 样品抽样地点:诚兴百货 标准编号:GB/T 10279 样品卫生标准:菌落总数每 1g不得过30000cfu,大肠 菌群每100g不得过 90MPN,且不得检出沙门 氏菌、金黄色葡萄球菌和志 贺氏菌。
李斯特氏菌
单增李斯特菌的调查报告
一、单增李斯特菌的概述
生活中李斯特菌到处存在,但其中只有一种为致病菌。李斯特菌可从各种食品样本中分离出来包括乳制品、肉类、蔬菜和海鲜,也可从食品加工过程中的环境中分离而来。
李斯特菌中毒严重的可引起血液和脑组织感染,很多国家都已经采取措施来控制食品中的李斯特菌,并制定了相应的标准。目前国际上公认的李斯特菌共有七个菌株:(1)单核细胞增生李斯特菌 (Listeria monocytogenes/L.mono)
(2)绵羊李斯特菌 (Listeria iuanuii)
(3)英诺克李斯特菌(Listeria innocua)
(4)威尔斯李斯特菌(Listeria welshimeri)
(5)西尔李斯特菌 (Listeria seeligeri)
(6)格氏李斯特菌 (Listeria grayi)
(7)默氏李斯特菌 (Listeria murrayi)
其中单增李斯特菌(Listeria monocytogenes/L.mono)是唯一能引起人类疾病的。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。它广泛存在于自然界中,食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险,该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。
在美国LM被列为7种主要的食源性致死病菌之一,已经被WHO食品安全工作计划列为重点检测的食源性病原菌之一。LM为需氧或兼性厌氧菌,生长温度为1~45℃,对不利环境具有较强的耐受能力,在4℃冰箱中也可生长繁殖,在pH 5.0~9.0的环境中, 1年后仍可检出,这使其危害性进一步增大。另外,LM病原体定居在细胞内,因此应用抗生素治疗效果不理想。由于LM引起的疾病及其食源性感染日益引起世界各国的重视,对该病建立快速、灵敏、准确的检测是有效防治本病、诊断病原菌和保证食品卫生安全的重要手段。
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治疗说明
• 多数抗菌药对李斯特菌具有抗菌作用, 其中氨苄西林与青霉素疗效最佳。红霉 素、利福平、复方SMZ-TMP、氟喹诺酮类、 克林霉素、万古霉素、氯霉四环素、头 孢噻吩等也有效,尚无耐药菌出现。治 疗延误及严重新生儿败血症或脑炎病人 常导致治疗失败。青霉素或氨苄西林联 合氨基糖苷类对本菌常呈协同作用,败 血症病人宜用药2周以上,脑膜脑炎疗程 3周以上,心内膜炎4~6周,脑脓肿的疗 程应超过6周。
• 李斯特菌属中,仅有单核细胞增多性 李斯特菌,可引起人类的脑膜炎、败 血症、流产及新生儿感染等疾病,如 果免疫缺陷者发生李斯特菌感染,其 病情严重,病死率高达33%。
病原介绍
• 单核细胞增多性李斯特菌为短小的革兰阳 性无芽胞杆菌,陈旧培养物有时变为革兰 阴性菌。在脑脊液中常成对排列,易误认 为肺炎球菌。染色过度脱色易误认为流感 杆菌。20~250C时具运动性,370C运动消 失。微需氧,营养条件要求不高,在普通 培养基上能生长,血清平板上生长良好, 菌落周围有狭窄的溶血环。根据菌体与鞭 毛抗原不同可分为若干型,90%的临床感染 由Ia、Ib及Ⅳb型引起。
• 人主要通过食入软奶酪、未充分加热 的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、 巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、 卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅 饼、冻猪舌等而感染,约占85-90%的 病例是由被污染的食品引起的。
• 2、该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进 入体内而造成感染,孕妇感染后通过 胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于 阴道、子宫颈的该菌也引起感染,性 接触也是本病传播的可能途径,且有 上升趋势。
流行病学
• 1、单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中, 不易被冻融,能耐受较高的渗透压,在 土壤、地表水、污水、废水、植物、青 储饲料、烂菜中均有该菌存在,所以动 物很容易食入该菌,并通过口腔-粪便的 途径进行传播。据报道,健康人粪便中 单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70%的 人可短期带菌,4-8%的水产品、5-10%的 奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以 上的家禽均被该菌污染。
防控措施
• 1、李斯特菌通常存在于潮湿区域和辅助 清洗设备中,例如:地面、排水沟、洗 涤池、天花板、冷凝水、拖把、海绵、 盐水冷冻设备及剥皮机。因此,控制李 斯特氏菌的数量对减少深加工过程中的 污染是很有必要的。
2、胎儿经胎盘感染此菌后,可出现流产、 胎死宫内或生后数日的新生儿发生严重 播散性利斯特氏菌病;新生儿室中的暴 发流行表现为播散性内脏肉芽肿和脓肿 形成。患儿表现发热、呕吐、腹泻、呼 吸窘迫、紫绀、呼吸不规则或暂停、抽 搐、肝脾肿大、出血性皮疹和化脓性结 膜炎等。
• 3、淋巴结感染者可突然发热、发冷、头 痛、咽痛、颈及全身淋巴结肿大、肝脾 肿大、白细胞增高,并有程度不一的单 核细胞增多。与传染性单核细胞增多症 的主要区别是:①利斯特氏菌感染者嗜 异性凝集试验阴性;②血或咽拭子培养 可分离到利斯特氏菌。
李斯特菌感染临 床观察
基本概述
• 李斯特菌(学名:Listeria monocytogenes),又名单核球增多性 李斯特菌、李氏菌,是一种兼性厌氧 细菌,为李斯特菌症的病原体。李斯 特菌是革兰氏阳性菌,属厚壁菌门, 取名自约瑟夫·李斯特。它主要以食 物为传染媒介,是最致命的食源性病 原体之一 。
• 5.带菌较高的食品有:牛奶和乳制品; 肉类(特别是牛肉);蔬菜;沙拉;海 产品;冰淇凌等。
发wk.baidu.com机制
• 李斯特菌属细胞内寄生菌,不产内毒素, 可产生一种溶血性的外毒素。T细胞在清除 本菌中起重要作用,细胞免疫功能低下和 使用免疫抑制剂者较易感染。
• 细菌可直接累及胎盘、羊水和宫腔或胎儿, 造成死胎、早产或新生儿感染,感染部位 常能分离到细菌,以婴儿的胃肠道和肺部 的细菌密度最高,提示感染由吸入羊水而 致,并非血源性。兽医与实验室人员直接 接触该菌可导致皮肤及眼感染。细菌可在 脑、脑膜及肺、肝、脾等脏器形成播散性 小脓肿或由巨噬细胞形成的粟粒样肉芽肿。
• 4、孕妇患李斯特氏菌病后可能表现为亚 临床型,亦可有急性发热而与流感相似, 有时又类似肾盂肾炎。病情多不严重,但 妊娠5个月后发病者,胎儿可能受严重影 响。
• 5、脑膜炎者多数同时有败血症存在,部 分病人可仅表现为败血症,其临床表现与 其他细菌引起者并无特殊之处。利斯特氏 菌还可引起心内膜炎、关节炎、骨髓炎、 腹膜炎及胆囊炎。接触病畜还可引起化脓 性皮肤感染或化脓性结膜炎。
• 3.溶血素,即李斯特杆菌溶血素O,可以从 培养物上清液中获得,为SH活化的细胞溶素, 有 α和β两种,为毒力因子。
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/11
临床表现
1、脑膜炎是本病最常见的表现形式。起病 可急可缓。新生儿可在通过产道时或产 后被感染,产后1~3周发病,主要表现 为拒食、多哭、易激惹、高热、恶心、 呕吐、嗜睡、惊厥、囟门突出及脑膜刺 激征。成人患者常表现高热、头痛、恶 心、呕吐、颈强直、昏迷,个别病人还 可出现抽搐、偏瘫、脑疝。白细胞增高 以粒细胞为主,偶见单核细胞增高。脑 脊液改变与其他化脓性脑膜炎相似。
特点
• 1、季节性特点:春季可发生,而发病 率在夏、秋季呈季节性增长。
• 2、分布广:存在于土壤、水域(地表 水、污水、废水)、昆虫、植物、蔬菜、 鱼、鸟、野生动物、家禽。
• 3、生存环境可塑性大:能在2-42℃下 生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰 箱冷藏室内较长时间生长繁殖。
• 4.适应范围大:酸性、碱性条件下都 适应。
潜伏期
• 在感染后3-70天出现症状,健康成人可出现 轻微类似流感症状,易感者突然发热,剧烈 头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、 孕妇出现流产。
• 单增李氏菌的抗原结构与毒力无关,它的致 病性与毒力机理如下:
• 1.寄生物介导的细胞内增生,使它附着及进 入肠细胞与巨噬细胞。
• 2.抗活化的巨噬细胞,单增李氏菌有细菌性 过氧化物歧化酶,使它能抗活化巨噬细胞内 的过氧物(为杀菌的毒性游离基团)分解。