拟康氏木霉胞外总多糖免疫活性研究

真菌多糖是 自然界 中存 在种类较 多 、生物活性较高 的
一
胃生理盐水 ， 三 个给药组 分别 按 ５ ０ 、 １ ０ ０ 、 ２ ０ ０ ｍｇ ／ （ ｋ ｇ ・ ｄ ） 剂量 灌 胃给药 ， 每日１ 次， 连续 ７天． １ ． ３ ． ２ 免疫低下动物模 型的建立
除空 白对 照组外 ，上述各组小 鼠均 于第 １ 、 ２ 、 ３天腹腔 注射新配制 的环磷酰胺 ７ ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ， 造成免疫低下动物模 型． １ ． ３ ． ３ 对非特异性免疫功能的影响—碳粒廓清法【 １ ｑ
上述五组 小鼠末 次给药后 ，立 即给予 ２ ０ ％的印度 墨汁 ０ ． １ ｍ Ｆ ｌ Ｏ ｇ 尾静脉注射 ， 并分别于第 ２ 分钟及第 １ ０分钟后 进 行眼眶取血 ２ ０ ｌ ， 将所取眼眶血加入到盛有 ２ ｍ ｌ 的０ ． １ ％碳
酸钠 溶液试管 中 ， 于６ ８ ０ ｎ ｍ 处测其 吸光 度值． 将小 鼠处 死 ， 取其肝脏 、 脾脏并称重 ， 根据以下公式计算脾脏 指数 和胸腺 指数．
致 敏． 末 次给药后 １ 小时 ， 对小 鼠进行 眼球取血 ， 并分离 血
疫功能 ， 黄涛涛圈 的研究则表明ｔ ｖ ｒ ｆ Ｐ ｅ ｐ ｓ 一 １ 体外能显著促进巨 噬细胞的吞噬活性 ， 抑制 白血病细胞 Ｋ ５ ６ ２的增殖．
上述文献说明拟康氏木霉胞外 多糖 的两个 单一组分特 别是 Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ 一 １ 体 内外具有多种生物学 活性 ，但 有关该总多
清． 将５ ０ ｌ 血清 以生理盐水稀释 ５ ０ ０ 倍． 取稀释后 的血清
Ｉ ｍ ｌ 、 ５ ％的绵阳红细胞 ０ ． ５ ｍ ｌ 及 １ ０ ％的豚 鼠血清 Ｉ ｍ ｌ 放入试 管混匀 ， 置于 ３ ７ ℃水浴 保温 １ ０分钟 ， 然后转移 至冰浴 中终 止反应． 以３ ０ ０ ０ 转 速离 心 ｌ ０分钟 ， 取上清 液 ｌ ｍｌ 加 入都 氏 试剂 ３ ｍｌ ， 混匀 后室温放 置 ｌ Ｏ分 钟 ， 于５ ４ ０ ｎ ｍ处测定 吸收 值．另外取试 验用的经过洗涤 的 ５ ％绵羊 红细胞 ０ ． ２ ５ ｍ ｌ ， 加 ３ ． ７ ５ ｍ ｌ 都 氏试剂 ， 混匀后室温放置 １ ０分钟 ， ５ ４ ０ ｎ ｍ处 比色 ，
类活性多糖 ， 是当今医药 和食 品工业共同关 注的焦点【 １ ＿ ． 此
类 多糖具有很强的生物活性 ，主要集 中在免疫调节 、抗肿
瘤、 抗 病毒 、 抗突变 、 抗衰 老 、 抗 氧化 等方 面 ， 在 国 际上被
称为“ 生物反应调节 剂 ． 拟康 氏木霉 （ Ｔ ｉ ｆ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｋ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ｉ ｉ ） 是从 玉米秸 秆 中分离 的一株木霉 ， 属于真菌类半 知菌亚 门 、 丝胞纲 、 木 霉属 ． 拟康 氏木 霉胞外 多糖 （ Ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｅ ｅ ｌ ｌ ｕ ｌ ａ ｒ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｉ ｆ ｄ ｅ ｓ ｏ ｆ
５ ０ 、 １ ０ ０ 、 ２ ０ ０ ａｇ ｒ ／ （ ｋ ｇ ・ ｄ ）剂量的拟康氏木霉胞外总 多糖 ， 分别采用碳粒廓 清法、 血 清溶血 素法和迟发 型变态反 应（ 耳肿胀 法 ） ，
检测该 多糖 对非特异性免疫、 体液免疫和 细胞免疫功能的影 响． 结果 ： 该 多糖 能提 高免疫低下小鼠的胸腺指数和脾指数 ， 提 升
糖实验或报道则甚少或空缺 ，为了探索拟康氏木霉胞外总
多是否具有 良好的免疫活性 ，我们 开展了本文 中的实验
研究．
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料 与 试 剂
拟 康 氏木霉 胞外 总多糖（ Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ ） ： 实验 室 自制 ； 注射用
ｔ ｉ ｆ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｋ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ｉ ｉ ， Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ ） 是 采用液 体发酵 法 ， 从 拟 康氏木霉 中得到一类结构新颖 的多糖． 魏广金目 从该多糖 中
分离得到两个组分 Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ 一 １ 和Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ 一 ２ ， 并和郭敏等通过实
第２ ９卷 第 ４期（ 上）
２ ０ １ ３年 ４月
赤 峰 学 院 学 报 （自 然 科 学 版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｆ ｅ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
血清溶血素水平和迟发型变态反应． 结论 ： 拟康 氏木霉胞外总多糖具有显著的免 疫活性．
关键 词：拟康 氏木霉 ； 胞外 多糖 ； 免疫低 下 ； 免疫活性 中图分类号 ： Ｒ ２ ８ ５ ． ５ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ３ — ２ ６ ０ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ — ０ ０ ２ ２ － ０ ２
Ｖ ｏ ｌ ｜ ２ ９Ｎｏ ． ４
Ａｐ ｒ ． ２ ０ １ ３
拟康 氏木霉胞外 总多糖 免疫 活性研究
李丽华 ， 喻丽珍 ， 赵志 刚， 王 国栋
（ 皖 南 医学院 药 学系 ，安徽
摘
芜湖
２ ４ １ ０ ０ ２ ）
要 ：目的 ： 考察拟康 氏木霉胞外总多糖的免疫活性． 方法 ： 腹腔注射环磷酰胺 ７ ０ ｍｇ ／ ｋ ｇ ， 造成免疫低下动物模型 ， 灌胃
验证明 ， 这两个组分可提高番茄和黄瓜叶片水杨酸含量 ， 激
活植物 的活性氧爆发使之产 生诱 导抗性及 系统 抗性 ，起 到 预先免疫 的作用 ． 孑 Ｌ 梦丽１ ７ ］ 发现 Ｔ Ｐ ｅ ｐ ｓ 一 １ 能增强小 鼠的免
脏器指数 ＝脏器重量（ ａ ｒ ｇ ） ／ 小 鼠体重（ ｇ ） １ ． ３ ． ４ 对体液免疫功能 的影 响一血清溶血素法Ｌ ｌ 】 】 给予 五组小 鼠每 日腹腔注射 Ｏ ． ２ ｍ ｌ 的２ ０ ％绵羊 红细胞