ABO血型正反定型不一致
血型正反定型不符原因及对策
血型正反定型不符原因及对策正确鉴定 ABO 血型是输血前最重要的一项检测，血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。
目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱凝胶法，此法具有诸多优点，但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响，往往会出现正反定型不符，不能鉴定血型的情况。
常见的原因有如下几点：1. 血浆中抗体减弱或缺失：白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱，老年人抗体水平生理性下降，婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低，均影响反定型的鉴定。
可通过加大患者血浆用量（2 倍或 4 倍）的方法进行鉴定。
2. 红细胞抗原减弱：最常见的是白血病、恶性肿瘤等[1]，抗原减弱或消失，干扰正定型，凝集减弱或消失，可加大患者红细胞浓度[2]或进行吸收放散实验以确定抗原。
3. 不规则抗体：这一类抗体存在于患者血清中，可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集（而与 A 或 B 抗原无关），导致正反不一致。
抗体筛选试验阳性，应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。
4. 自身免疫性溶血性贫血：患者红细胞表面存在致敏自身抗体，DAT（直接抗人球蛋白试验）阳性，有时正定型会发生非特异性凝集。
同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。
可用37℃ 生理盐水洗涤患者红细胞，一般可排除干扰。
5. 冷凝集素：高效价冷凝集素在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应，可出现正反定型全凝集的现象。
用37℃ 生理盐水洗涤红细胞，去除红细胞表面附着的冷凝集素，可获得可靠地正定型结果。
37℃ 温浴患者标本，可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响[3]。
6. 亚型：由遗传因素导致，即红细胞 A 或 B 抗原弱化，正定型抗A 或抗B 有时不能检测出抗原而不出现凝集，造成定型困难。
进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB，反定型增加 O 细胞、A1 细胞、A2 细胞，还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等[4]。
7. 血浆成分异常：多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集，在血清中加入 1~3 滴生理盐水凝集可消失（真凝集不受影响）。
ABO血型鉴定正反不一致的原因及处理流程
ABO血型鉴定正反不一致的原因及处理流程摘要】目的探讨ABO血型鉴定正反不一致的原因及解决办法。
方法我院输血科2006年-2010年发现了63例ABO血型鉴定正反不一致的患者，对其正反定型不一致血液样本通过采用消除红细胞自凝、红细胞不规则抗体检查、A1抗原检测、直接抗人球蛋白试验、吸收放散试验、唾液血型物质的检测等方法找出原因,正确鉴定血型,最终总结原因及对策。
结果红细胞因素造成的ABO正反定型不符11例，抗体因素造成的9例，红细胞和抗体混合因素造成的43例。
结论对ABO血型正反定型不一致无法定型的血液样本,应根据血清学试验并结合临床资料以正确鉴定ABO血型,以保证输血安全。
【关键词】 ABO血型正反不一致原因解决方法ABO血型鉴定，即指ABH血型抗原的检测。
输血时若血型不符会使输入的红细胞发生凝集，引起血管阻塞和血管内大量溶血，造成严重后果。
所以在输血前必须作血型鉴定。
ABO血型正反定型一致是ABO血型鉴定关键所在，出现ABO血型正反定型结果不一致原因可能是检验技术错误或是被鉴定者自身ABO血型抗原或抗体存在问题[1]。
笔者将我院输血科2006年-2010年发现的63例ABO血型鉴定正反不一致的资料回顾分析如下。
1.资料与方法1.1一般资料我院输血科2006年-2010年发现了63例ABO血型鉴定正反不一致的患者，年龄1-76岁，男性36例，女性27例。
1.2试剂正定型: 抗-A、抗-B、抗-AB和抗-H 单克隆标准血清购买于上海生物技术有限公司，特异性、亲和力及效价均符合国家标准。
反定型: 3%-5%的标准红细胞悬液购买于长春博德生物技术有限公司。
1.3方法 ABO血型鉴定采用正反定型立刻离心试管法。
出现ABO血型鉴定正反不一致的时候，首选要排除检验人员操作技术的错误，如：血清与红细胞比例不当、离心速度或时间不当、试剂失效或收到细菌污染、实验器皿不干净，结果记录错误等；通过红细胞抗体的测定、直接抗球蛋白试验，红细胞吸收放散试验，唾液血型物质的测定等一系列的方法来确定干扰因素及处理方法，并最终确定血型。
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法第一篇：ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一．引起ABO正反定型不一致的原因分析 1.技术因素例如(1)试剂贮存不当(2)使用技术错误(3)使用错误的试剂(4)使用污染或失效的试剂(5)离心速度不当 2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。
3.抗原表达弱或缺失例如 a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。
5.混合视野：例如(1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样(2)骨髓移植后不久(3)Tn或A3型红细胞 6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1)新生儿血清(2)免疫缺陷、紊乱病人(3)老年人 7.前带现象当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。
8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。
9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。
4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如 1.年龄：新生儿及老人。
ABO正反定型不一致的原因
ABO正反定型不一致的原因
1.新生儿尚未形成ABO同种抗体，所以三个月以内的新生儿只要求做正定型确定ABO血型。
2.漏加试剂、试剂污染或失效、血标本和试剂弄错，均可以造成假阴性或假阳性结果。
3.器材不洁可造成假阳性结果。
4.分型血清效价太低，亲和力不强均可造成凝集试验的强度减低，容易误定血型。
5.红细胞悬液过浓或过淡，导致抗原抗体比例不当，出现前带或后带现象，易误判为假阴性。
6.受检者红细胞上的抗原位点过少（亚型）或抗原性减弱（白血病、恶性肿瘤）、类A或CisAB等，均可使凝集反应强度减弱。
7.受检者血清蛋白紊乱（巨球蛋白血症）、实验室温度过高，常引起细胞呈緍钱状排列。
8.受检者血清中缺乏应有的抗体（抗-A、抗B）、如丙种球蛋白缺乏症，均可引起正反定型不合。
9.各种原因引起的红细胞溶血，误判为不凝集；部分溶血时，可溶性物质中和了相应的抗体，或患者血清中血型物质过多，中和了相应的抗体，可导致假阴性结果。
10.有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。
11.近期曾输过异型血，使患者的血液标本成为不同血型的红细胞混合物，定型时出现“混合外观凝集”现象。
12.钳合体血型体内有两群红细胞，定型时显示“混合外观凝集”现象。
13.获得性类B，由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可获得“类B”的活性。
14.药物因素：药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂聚集而类似凝集。
15.血清有不规则抗体，如自身抗体抗-I，常干扰定型。
16.老年人血清中抗体水平大幅度下降，影响反定型结果。
ABO正反定型不符原因分析及对策
红细胞凝集强度判断标准【《输血免疫血液学实验技术》】ABO正反定型不符常见情况有：一、弱反应或缺失抗原。
二、多余的抗原反应。
三、混合视野反应。
患者正定型结果均为阴性，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强度的凝集，不属于抗体水平减弱的现象，依据反定型结（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A 缺乏凝集反应提示为A亚型。
（2）附加试验：吸收放散试验及唾液血型物质试验可以证明患者红细胞上具有A抗原。
患者正定型结果与抗A出现1+混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱。
依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗A、抗AB的弱（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A患者正定型结果与抗B出现混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与B细胞不反应，而与A1型红细胞出现正常反应强度的（1）患者正定型结果与正常抗B的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有B抗原，正定型患者红细胞与抗B、抗AB的弱患者正定型结果与抗A出现4+混合视野反应，与正常的4+反应强度出现减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型解决方法:1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是型物质的抑制；2.酶处理红细胞再次试验(检测是否疾病导致抗原水平减弱)；3.吸收放散确定是否是亚型；解决方案:在37℃定型,去除自身冷抗体(红细胞用DTT处理血浆用白身红细胞多凝集是在正定型试验中使用人血清来源的定型血清时出现,现在定型试剂使用鼠单克隆来源的定型血清不存在此问题。
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施目的对血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因和处理措施进行探讨。
方法抽取2014年1月～2016年12月间，拟输血患者中ABO血型正反定型不符者18例作为研究对象，对其进一步展开吸收放散试验、抗体筛查、唾液血型物质测定、亚型检测，经ABO疑难血型3步分析法对不符的原因进行分析及鉴定。
结果本次18例ABO血型正反定型不符者中，有2例为人为因素造成，另外16例的原因包括有生理因素、自身抗体因素、血浆蛋白异常、不规则抗体以及血液疾病等因素，其中不规则抗体因素所占比例最高（P＜0.05）。
结论造成ABO血型正反定型不符的原因较多，在临床血型鉴定中应引起重视，积极采取有针对性的确诊试验，展开鉴定分析，ABO血型鉴定时选择正确辅助手段，进而提高血型鉴定准确性，以保证输血的安全性、有效性。
[Abstract] Objective To explore reasons and measures of ABO typing discrepancy in blood grouping. Methods 18 patient with ABO typing discrepancy who were planning to receive blood transfusion from January 2014 to December 2016 were selected as research objects and they were further given absorption-elution test，antibody screening，saliva blood-group substance and subtype blood grouping.Reasons for discrepancy were analyzed and detected by 3-step analytical method of suspicious ABO blood group. Results In 18 patient with ABO typing discrepancy，2 cases were caused by human factors and 16 cases were caused by physiological factors，autoantibodies factors，plasma protein abnormality，irregular antibodies，hematologic diseases and other factors.Of which，proportion of irregular antibodies factors is the highest（P＜0.05）. Conclusion There were many reasons for ABO typing discrepancy which should be paid attention in clinical blood grouping and take targeted confirmatory tests and carry out identification and analysis.Proper supplementary means of ABO blood grouping can further improve accuracy of blood grouping to guarantee safety and effectiveness of blood transfusion.[Key words] Blood grouping；ABO typing discrepancy；Safety of blood transfusion；Suspicious blood group；Influencing factors在實际临床工作中，ABO血型属于输血、器官移植过程中所应用到的一种非常重要的血型系统，确定受血者与供血者之间的ABO血型正确，是有效保证临床输血安全的一个非常重要的前提，也是基本原则。
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨目的：利用ABO疑难血型3步分析法对正反定型不一致时导致的疑难血型进行鉴定和分析，探讨其原因与解决办法。
方法：用试管法和微柱凝胶卡法常规检测ABO血型，正反定型不符者进一步做吸收放散试验、唾液血型物质测定、抗体筛选、亚型检测等，并应用ABO疑难血型3步分析法进行分析、鉴定。
结果：共检测正反定型不符20例。
其中2例属于人为原因操作不规范导致正反定型结果不符，另外18例疑难血型鉴定分析原因主要为：生理因素、自身抗体、不规则抗体、血浆蛋白异常、血液病等影响因素。
结论：按照不同的确诊试验分别进行鉴定分析判断，选择正确的辅助方法检测ABO血型，提高血型鉴定的准确性与输血的安全有效性。
关键词ABO疑难血型3步分析法疑难血型鉴定输血安全ABO血型是人类最早发现也是对输血安全影响最大的血型系统。
ABO定型错误会导致溶血性输血反应，轻者可能导致无效输血，重者危及受血者的生命[1]。
当发现ABO正反定型不一致时如何查找原因并快速正确地鉴定患者血型就显得尤为重要。
我们在输血前试验中应用ABO疑难血型3步分析法[2]，对20例疑难血型进行鉴定分析及总结，报告如下。
1 材料与方法1.1 标本来源上海市中医药大学附属曙光医院2011年1月至2012年6月拟输血患者中ABO血型正反定型不符20例，年龄3个月～80岁。
1.2 试剂和仪器抗A、抗B和抗AB血型定型试剂（单克隆抗体），抗H、抗A1和RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体），人ABO血型反定型用红细胞试剂盒（其中包括：A1细胞、B细胞、O细胞）、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG，C3d多特异性）、抗体筛检红细胞试剂盒等由上海血液生物医药公司生产；抗人球蛋白检测卡、ABO 血型微柱凝胶卡、37 ℃专用孵育器、卡式离心机由强生医疗器材有限公司生产；2002-2型血清学专用离心机由台湾贝索公司生产。
1.3 方法根据ABO疑难血型3步分析法。
ABO血型正反定型不
3.混合视野凝集：肉眼观察时凝块小而少，显微镜观察有部分红细胞 凝集，部分不凝集。产生原因：非O型人近期输了O型血，病人接受了 与自己ABO血型不一致的骨髓移植，A亚型中A3红细胞与抗-A血清反应 时呈典型的混合视野凝集。
8.其它 如果以上方法都不能排除正反定型不符，应作ABO亚型
鉴定。
附注:（1）如是献血者的血型ABO正反定型不符，该血液不能 用于临床输注，查清原因后报废。（2）如是病人正反定型不符， 病人又急需输血时，该病人只能输Rh同型的O型悬浮红细胞或洗 涤红细胞，然后再查原因。
（二）弱抗原所致ABO正反定型不符的处理
的血清凝集，但不凝集本人的血清（本人血清中T抗体已被红细 胞吸收完了）。鉴定方法：取多个已知AB型人血清与被检红细胞
反应，如被检红细胞与所有AB型人红细胞发生了凝集，则该被检
红细胞表面含有活动的T抗原。
（四）正定型结果正确，反定型结果错误的分析和处
理
1.抗体太弱或消失，如新生儿、老年人、免疫抑制疾病、免疫低下的 病人。
ABO blood group system
The ABO system is the most important blood group system in human blood transfusion. The associated anti-A antibodies and anti-B antibodies are usually "Immunoglobulin M", abbreviated IgM, antibodies. ABO IgM antibodies are produced in the first years of life by sensitization to environmental substances such as food, bacteria and viruses. ABO血型系统是人类输血中最重要的血型系统，相关的抗体是抗A，抗B， 通常是IgM抗体。ABO IgM抗体主要是在人出生的第一年对环境物质如食
ABO血型鉴定正反不符及其原因
二、血液标本的问题
19
20
红细胞多凝集现象，遗传性或获得 性红细胞膜改变，隐蔽的自身抗原暴 露，也称T-激活红细胞，因为人血清 中都含有这些暴露的抗原的自然发生 的抗体，故ABO血型相容的血清和T激活红细胞发生凝集反应。单克隆抗 体血型试剂不发生这类反应。
血清标本中如果含有试剂红细胞保护 剂成份相应的抗体，则可能发生与ABO 血型抗原抗体反应无关的红细胞凝集反应。
02
正反定型不符的原因查找和处理
（1）基本程序
首先
，如果先前试验中红细胞悬浮在血清或血浆中，则改为洗涤
后的红细胞并悬浮在盐水中，进行重复试验。如果重复试验仍是正反定型不符，
则继续下列试验：
01
02
03
04
重新采集献血 员和受血者的 血液新鲜标本， 这样可能解决 标本采集或标 记的错误或原 标本受污染所 致的错误结果。
可能被误判为红细胞凝集。
2 3
出现混合视野凝集现象，病人血液中不只是一个 ABO血型的红细胞，如将O型红细胞，或O型造血细胞输 给A型人。病人接受了ABO血型不相容的骨髓细胞移植， 并产生了耐受。比如，A型病人接受了O型人的骨髓后， 血循环中有O型红细胞，但血清中只存在抗-B。病人近期 接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如非O型人 接受了O型红细胞，或骨髓移植病人血液循环中有多于一 个ABO型别的红细胞。
ABO血型正反定型不符及其原因
目录
CONTENTS
01ABO血型正反定型 结果不相符合的原因
03 正定型的意外反应 结果
02 正反定型不符的原 因查找和处理
04 反定型的意外反应 结果
除对新生儿只检测其红细胞抗原，即只进行正定型外，临床常规检测ABO血型，必 须正反定型，正定型是检测红细胞抗原，反定型是检测血清中抗体，判定ABO血型，结 果相符。病人或者献血者（待输血液）ABO正反定型结果不相符合，要详细记录实验， 不能确定ABO血型，记录该标本血型结果有疑问。如果是待输血的标本，该袋血就不能 发出使用，应换一袋正反定型相符的血液，或者在时间允许情况下，重新进行试验，如确 定是否试验操作错误等原因，即已经明确该袋血ABO正反定型相符，可以重新考虑使用 该袋血。除此之外，不管是什么原因，只要是ABO正反定型不符的血，都不能用于临床 输血。如受血者（病人）标本ABO正反定型不符，必须首先为该受血者准备RhD同型的 O型血，以应病人治疗急需。然后进行研究，查找该受血者ABO正反定型不符的原因。
血型鉴定正反定型不一致的原因
血型鉴定正反定型不一致常见的原因准确鉴定血型对于临床输血、疾病诊断和治疗等方面具有深远意义。
血型鉴定正反定型一致才能报告正确的血型，导致正反定型不一致常见的原因如下：1、技术因素在实验操作过程中，试剂的贮存条件不当、使用技术的错误、试剂选择的失误、试剂的污染或失效以及离心速度的不恰当等，都可能影响鉴定结果的准确性。
例如，若试剂未按照要求的温度和湿度条件储存，可能会使其活性降低或失效，从而无法准确识别红细胞表面的抗原和血清中的抗体。
2、存在IgM 性质的自身冷抗体在某些自身免疫性疾病或特定生理状态下，患者体内可能产生这种抗体。
当环境温度低于37°C 时，血细胞会自发凝集，干扰血型鉴定的正常流程。
对于此类情况，通常需要采用特殊的处理方法，如使用特定试剂处理细胞及血清，或者在37°C 的条件下进行血清的反定型，并以O型红细胞作为对照。
3、抗原表达弱或缺失在白血病、双胞胎以及某些基因变异的情况下，A、B 抗原的表达可能会被抑制，导致与相应抗体反应不明显。
此外，若A、B 抗原表达过于微弱，即使存在抗原，也可能无法与抗-A 或抗-B 试剂产生有效的反应，而血清中也可能检测不到相应的抗体。
4、血型亚型的存在例如A2型，其血清中可能存在抗-A1，从而在反应中呈现混合视野。
5、自身凝集现象红细胞表面存在致敏的自身抗体，直接抗人球蛋白试验阳性，这会导致正定型时出现非特异性凝集。
同时，血清中存在的自身抗体也会对反定型造成干扰。
6、获得性B 抗原的出现某些疾病或药物的影响可能导致红细胞表面获得性地表达B 抗原，从而使血型鉴定结果出现偏差。
综上所述，血型鉴定正反定型不一致的原因较为复杂，涉及技术操作、自身抗体、抗原表达、亚型等多个方面。
在日常工作中需要综合考虑各种可能的因素，通过进一步的检查和分析，如吸收放散试验、血型基因检测等，准确鉴定血型，确保输血安全有效。
对ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程的建立及探讨
对ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程的建立及探讨ABO血型鉴定是临床血型鉴定中必不可少的部分。
准确的ABO血型鉴定结果对于输血、器官移植等临床操作具有重要意义。
正反定型不符是指血型鉴定的阴、阳性反应不能直接对应，这种情况可能会对临床诊断和治疗带来风险。
因此，建立并完善ABO血型鉴定正反定型不符标准操作规程是非常重要的。
一、建立标准操作流程1.标本采集和保存：采集新鲜的全血标本，并使用抗凝剂稳定血细胞。
2.血型鉴定试剂准备：准备正、反血型鉴定试剂，确保试剂在保质期内并适当储存。
3.正定型操作：将待测血清与正血型鉴定试剂混合，在37摄氏度下孵育，根据试剂说明书进行判读，记录结果。
4.反定型操作：将待测红细胞与反血型鉴定试剂混合，在37摄氏度下孵育，根据试剂说明书进行判读，记录结果。
5.结果解读：根据正、反定型试剂的判读结果，确定待测血型。
二、探讨正反定型不符的原因1.血型抗体：正反定型不符可能是由于患者血液中存在一些非ABO抗体引起的。
这些抗体可能是自然存在的，也可能是由于输血或妊娠等因素而导致的。
2.检测方法：检测方法的不准确或不规范也可能导致正反定型不符。
例如，试剂配制不当、试剂储存不当、操作人员技术不熟练等情况都可能影响结果准确性。
3.标本问题：标本质量差、污染或保存不当也可能导致不符结果。
因此，在标本采集和保存上需要严格控制。
三、对正反定型不符的处理1.重新操作：如果正反定型不符，可以尝试重新操作，确保操作的准确性和标本的质量。
2.进一步检测：对于较为复杂的正反定型不符情况，可以进行进一步的检测，如使用更敏感的试剂或进行酶解试验、直接抗人球蛋白试验等。
3.抗体鉴定：如果正反定型不符，可以对患者的血清进行抗体鉴定，以寻找可能存在的异常抗体。
四、实施质量控制措施1.核对操作：在操作过程中，需要进行核对，确保正确操作。
2.质控样本：使用质控样本进行质量控制，确保试剂和操作的准确性。
3.参与外部质量控制：参与外部质量控制活动，与其他实验室比对结果，提高实验室水平。
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一．引起ABO正反定型不一致的原因分析1.技术因素例如(1) 试剂贮存不当(2) 使用技术错误(3) 使用错误的试剂(4) 使用污染或失效的试剂(5) 离心速度不当2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。
3.抗原表达弱或缺失例如a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。
5.混合视野：例如(1) 来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样(2) 骨髓移植后不久(3) Tn或A3型红细胞6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1) 新生儿血清(2) 免疫缺陷、紊乱病人(3) 老年人7.前带现象当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。
8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。
9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10. 血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。
4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10. 进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如1.年龄：新生儿及老人。
ABO血型鉴定正反定型不符的影响因素分析
■冏鍋範ABO血型鉴定正反定型不符的影响因素分析胡军彭焦武*（枝江市人民医院，湖北枝江443200）DOI：10.19435/j.1672-1721.2020.34.048ABO血型鉴定正反定型不符一直是影响输血安全的重要因素，ABO“疑难血型”的鉴定除了患者本身生理、病理因素外还受实验室人员能力、实验室设备、实验试剂、实验方法、实验环境等诸多因素影响。
各级医院输血科（血库）、各级血液中心、各级实验室对正反定型处理的能力参差不齐。
为进一步增强对血型鉴定中岀现正反定型不符结果的处理能力，保障输血安全，现就ABO正反定型不符的影响因素研究状况进行综述。
1常见正反定型不合的原因分类1.1人为因素对于基层实验室而言人为因素最为常见叫试验操作技术问题始终是应该首先排除的问题,出现此类问题一般只要进行复査即可解决。
最常见的原因是标本混淆、采样不规范、实验操作不规范叫1.2生理因素患者年龄、ABO亚型、冷凝集素等原因也可以导致ABO正反定型不符。
1.3病理因素各种病理因素会导致抗体效价升高或降低，抗原的抗原性增高或减弱甚至出现新的抗原物质。
造血干细胞移植、早产儿、恶性血液病、自身抗体a常引起ABO正反定型不符。
兰炯采等专家将正反定型结果不一致分为红细胞抗原减弱或丢失、红细胞额外反应、混合凝集、血清定型减弱或无反应、血清额外反应五类叫目前这种分类方式被广泛应用。
2正反定型不合的原因分析2.1技术错误检验前、检验中、检验后任何不规范操作均可能导致正反定型不符。
2.2红细胞表面抗原物质发生变化可引起正定型假阴性或假阳性。
2.2.1红细胞ABO抗原减弱或丢失输注异型红细胞、各种少见血型如A2.A2B等ABO亚型、白血病等恶性血液病、恶性实体肿瘤问、可溶性血型物质过高、急性大量失血、抗原发育不全或减弱、造血干细胞移植均可能导致红细胞抗原减弱或丢失而出现正定型假阴性。
2.2.2红细胞额外反应自身免疫性溶血性贫血、红细胞上黏附大量蛋白、各种髓系疾病、造血干细胞移植、获得性罕见表型、输注异型红细胞、双精子嵌合体网均可导致正定型假阳性。
如果发现ABO正反定型不一致应该怎么办
如果发现ＡＢＯ正反定型不一致应该怎么办？如果发现ＡＢＯ正反定型不一致应该怎么办？如发现ＡＢＯ正反定型不一致，首先要重复做试验一次。
严格执行操作规程，使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可以解决问题。
对一些疑难问题必须进一步研究。
初步的检查步骤包括：（1）另从受检者取1份新鲜血液标本，这样可以纠正因污染或搞错标本造成的不符合。
（2）将红细胞洗涤数次，配成的3％～5％盐水细胞悬液用抗Ａ、抗Ｂ、抗Ａ1、抗Ａ、Ｂ及抗Ｈ做试验可以得到其他有用的信息。
（3）对受检红细胞做直接抗球蛋白试验，结果呈阳性表明红细胞已被抗体致敏。
（4）用Ａ1、Ｂ、Ｏ型红细胞及自身红细胞检查受检血清，如果怀疑是抗Ｉ，用Ｏ型（或ＡＢＯ相和的）脐血红细胞检查。
（5）如果试验结果未见凝集，应将红细胞及血清试验在室温（18～22℃）或4℃放置30分钟用显微镜检查核实。
（6）如疑为Ａ抗原或Ｂ抗原减弱，则可将受检红细胞与抗Ａ或抗Ｂ血清做吸收及放散试验，以及受检者唾液做Ａ、Ｂ、Ｈ血型物质测定。
（7）如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水1滴混合，往往可使缗钱状消失。
（8）如受检者为Ａ型血而以为有类Ｂ抗原时，可用下列方法进行鉴别：①观察细胞与抗Ａ及抗Ｂ的凝集强度，与抗Ａ的反应要比与抗Ｂ的反应强，这种区别用玻片法试验更为明显。
②用受检者红细胞与自身血清做试验，血清中的抗Ｂ不凝集自身红细胞上的类Ｂ抗原。
③检查唾液中是否有Ａ、Ｂ物质，如果是分泌型,可检出Ａ物质而无Ｂ物质。
④核对病人的诊断，类Ｂ抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰氏阴性细菌感染有关。
（9）如发现多凝集现象，应考虑有遗传产生的Cad抗原活性：被细菌酶激活的Ｔ或ＴＫ受体或产生机制不大明了的Tn受体所引起。
多凝集红细胞具有以下特点：①能被人和家兔的许多血清凝集。
②能与大多数成年人血清凝集，不管有无相应的同种抗体。
③不被脐带血清凝集。
④通常不与自身血清凝集。
⑤如有条件可用外源凝集素加以鉴别。
ABO正反定不符5大类33种原因
ABO正反定不符5大类33种原因正反定不符的范围：正反定不符；正定型凝集强度＜3+，反定型凝集强度＜2+；正定型O型，反定型两孔凝集强度差别＞2+。
本文所总结正反定不符5大类33种原因，5大类可概括为，正定减弱、正定增强、反定减弱、反定增强和混合凝集。
一、正定型凝集减弱/缺失 7种1、年龄小于6个月或老年(临床提示)年幼和年长者ABO抗原由于自身原因，本身正定型较弱。
2、白血病(临床提示) 血液病红细胞异常，抗原弱。
3、异型血输注(临床提示输血史) 异型血输注形成混合血液标本，陈旧细胞可能表现为弱凝集。
4、造血干细胞移植(病史)造血干细胞移植形成混合红细胞，可能表现为凝集弱。
5、血型物质升高血型物质升高，中和试剂中抗体，降低效价，造成凝集减弱。
6、急性大失血(临床病史)急性失血后新产生红细胞未结合ABO血型抗原，凝集弱。
7、ABO亚型亚型抗原凝集弱。
二、正定型额外凝集 7种1、自身凝集素(临床提示AIAH)红细胞自身凝集，正定型假阳性，可通过正定型对照孔阳性发现。
2、红细胞粘附大量蛋白(红细胞未洗涤)红细胞黏附蛋白与抗体反应造成假阳性，可通过洗涤红细胞去除。
3、红细胞与血清试剂反应红细胞与血清试剂中非抗体成分反应，防腐剂、抗生素等。
4、造血干细胞移植(病史)移植干细胞生成红细胞与宿主不同，混合血液标本，额外凝集。
5、获得性B抗原(类B)(临床提示感染) 肠道菌干扰造成A、O型红细胞表面结合类B血型糖链物质，正定型表现为AB型或B型。
病情好转，“B”型消失。
6、B(A)、A(B)表型AB血型物质有相似，基因突变可导致表达的蛋白酶具有一定对方抗原转化活性，形成类似对方抗原物质，与部分单克隆抗体反应，与部分单克隆抗体不反应。
7、异型血输注(输血史) 混合血液标本表现为混合凝集，正定型有额外凝集。
三、反定型凝集减弱/缺失 6种1、年龄小于6个月或老年(临床提示)2、双胞胎嵌合体(家族史)例如A102O02/B102O02，两套基因，但抗原表达极弱，表现为AelBel，临床极有可能可能正定型判为O型，但无相应抗体。
ABO血型系统及定型正反不符
天然(tiānrán)抗体和免疫抗体
天然抗体 未经可觉察的抗原刺激而产生的抗体 O型血清(xuèqīng)中多为IgG抗A和抗B A/B型血清中大多为IgM抗体 免疫抗体 妊娠/输血等
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缗钱状凝集(níngjí)
球蛋白浓度增高:多发性骨髓瘤/原发性巨球蛋白 血症
纤维蛋白(xiān wéi dàn bái)原增高 血管扩张剂 霍奇金淋巴瘤 新生儿脐带血中的华尔道胶
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正反定型结果(jiē guǒ)相符时，才可以记录血型结果 。 (jiē guǒ)
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ABO正反不符(bùfú)时
受检红细胞是洗涤后悬浮于NS.吗? 是用最敏感的试管法吗? 受检者年龄<1或>60吗? 病人的丙种球蛋白减低吗? 病人血清与O型普检红细胞的反响与试剂红细胞一样吗? 病人是白血病、肠道阻塞、胃癌(wèi ái)、结肠或直肠癌吗？ 混合视野反响是输血后标本吗？
抗体吸附于红细胞外表，可显示(xiǎnshì)直抗 阳性
自身免疫性溶血性贫血 抗高血压药物 输血反响 新生儿溶血病 放散技术移去抗体
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减弱(jiǎnruò)或缺少抗体反响
年龄(niánlíng)<1或>70 丙球蛋白过低血症 丙球蛋白缺乏血症
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全部
常属IgG,与Ax,A3凝集
全部
常属IgM效价 32-2048
22-35% 1-8% 大多数
少数报告有输血反应
全部 部分
被H物质抑制
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其它来源
初乳 唾液泪液(IgA)
抗A在蜗牛鱼卵中 也可发现
用A2细胞吸收过的 抗A血清;双花扁豆 (Doliekos biflorus)
输血科ABO正反定型不符的处理操作规程
5、如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min,用显微镜检查核实。
6、如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗A或抗B 血浆做吸收放散试验，以及受检者唾液做A、B、H血型物质测定。
后者仅对80%分泌型的人有用。
7、如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水1滴混匀，往往可使缗钱装现象消失。
注意：不应先加生理盐水1滴于受检者血浆中，在加试剂红细胞做试验，以免使血浆中抗体被稀释。
8、如受检者为A型血而疑为有类B抗原存在时，可用下列方法进行鉴别。
①观察细胞与抗A及抗B的凝集强度，与抗A的反应要比抗B的反应强。
这种区别用玻片法更为明显。
②用受检者红细胞与自身血浆做试验，血浆中的抗B不凝集自身红细胞上的类B抗原。
①能被人和去多家兔的血清凝集。
②能与大多数成年人的血清凝集，不管有无相应同种抗体。
③不被脐带血清凝集。
④通常不与自身的血清凝集。
⑤如有条件可用外源凝集素加以鉴别。
【注意事项】
1、按照血型鉴定操作规程进行操作，确保操作规范。
2、保证试剂有效，标本合格。
【支持文件】
《血站技术操作规程》
32。
ABO血型正反定型不一致260例原因分析
红细胞 A 或 B 抗原的弱化是 ABO 正反血型鉴定不一致 的又一原因 。作者临床观察发现抗原弱化既可以是遗传基 因所决定的弱表现型 (即亚型) ,也可以是获得性的 ,如白血 病者血清中存在 IgM 型或 IgM 和 Ig G 混合性不规则抗体 (抗 M 、抗 N) ,这一类抗体可在反定型中与标准红细胞上的 相应抗原发生盐水凝集反应 (而与 A 或 B 抗原无关) ,必然 会导致 ABO 血型鉴定时正反定型不一致 。应用抗体筛选可 以发现不规则抗体 ,应用谱细胞可以鉴定出不规则抗体的种 类 ,并可用含有不规则抗体所针对的抗原的 O 型红细胞来 吸收待测血清 ,然后再进行反定型 ,方可正确鉴定出 ABO 血 型 。本组有 7 例 (见表 1) ,通过此种方法正确地鉴定了血 型。
2 Nishimoto T , Murakami S. Relation between diffuse anxonal injury and internal head structures on blunt impact . J Biomech Eng , 1998 , 120 (1) :140
7 Maxwell Wl , Whitfield PC , Suzen B , et al. The cerebrovascular re2 sponse to experimental lateral head acceleration. Acta Neuropat hol (Berl) ,1992 ,84 (3) :289 (2002205221 收稿 责任编辑王 曼)
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主要表现为：离心机操作不规范、试剂过期 或不纯净、检验工具被污染、数个标本或者 试剂混搭、试验中的重要反应未能准确判断、 结果判断失误等。
4
处理方法
检验者要严格按照操作规程进行操作： ♦在实验前应将血型卡离心，以使微柱内壁上端 沾有的凝胶离心下来，以免撕膜时各微柱内容 物交叉污染。 ♦撕开卡上部的锡纸膜时，注意避免各微柱间特 异性单克隆抗体的交叉污染。 ♦在使用加样枪或移液器时，应将红细胞悬液或 血清悬空加入各微柱上端，避免一切交叉污染。 ♦工作中养成良好的习惯，查看试剂批号、患者 标本采集日期等。
6
2、血清抗体变化 （1）血清抗体下降：年龄小于6个月或老年 、双胞胎嵌合体（家族史）、低丙种球蛋白血 症、造血干细胞移植、先天性ABO抗体缺失 、大量输液等。 （2）血清抗体额外反应：自身抗体、同种抗 体、对试剂反应的物质、血清蛋白异常（肝病 等）、输异性血浆、造血干细胞移植、输含血 型抗体的免疫球蛋白、ABO亚型。
当我们遇到正、反定型不符合时，首先要重复 试验，排除人为误差。如果重复试验仍然正反定 型不符，则要进行一系列严谨的方法来找原因。
10
谢谢！
11
ABO血型正反定型
不一致
ABO血型正反定型
▲正定型（细胞定型），即用标准的特异性抗体 试剂血清检查红细胞上的抗原； ▲反定型（血清定型），即用已知血型的试剂标 准的红细胞检查血清中的抗体。2常导致正反定型不一致的原因
▲人为误差 ▲患者原因 ♦红细胞抗原变化 ♦血清抗体变化 ♦混合凝集
3
人为误差
7
3、混合凝集 近期怀孕或输血、双胞胎嵌合体、骨髓干 细胞移植、白血病等。
8
处理方法
对于这些标本，红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍 ，再进行鉴定。 另外，有些老人及肿瘤患者，由于血型抗原减弱， 导致正反定型不符。 处理方法：可适当增加血细胞的浓度。对于抗体较 弱的标本，可适当增加血清的比例。
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5
患者原因
1、红细胞抗原变化 （1）红细胞抗原下降：年龄小于6个月或老年 人、白血病、异型血输注（临床提示有输血 史）、造血干细胞移植、血型物质升高（冷凝 集素等）、急性大失血、ABO亚型等。
（2）红细胞抗原额外反应：自身凝集素（临 床提示有自身免疫性疾病）、红细胞粘附大量 蛋白（红细胞未洗涤）、造血干细胞移植、获 得性B抗原、异型血输注等。