胃癌侧群细胞检测分选及其增殖能力的初步分析
人胃癌细胞株MGC-803侧群细胞的分选与生物学特征
的存 在 。王 宁等 对 胃癌 M N 2 K -8肿 瘤 细 胞 系 S P 用FC A S检 测 到 胃癌 细胞 亚群 初步 分析 发现 , 该细 胞系 s 胞 占细胞 总 P细 数 的 0 2 % 。提示 不 同肿瘤 细 胞 系 中 S .5 P细胞 亚群 的比例存 在差 异 。 肿瘤 干细 胞是 肿瘤研 究 的热点 。干 细胞 和肿瘤 细胞 有很 多共 同点 ¨ , 究 推 测 胃癌 也 可 能 属 于 干 J研 细胞 疾病 。本 研 究 表 明 , P细 胞 和 非 s S P细胞 在 形 态学 上无 明显 差异 , 只能从 功 能学 角度鉴 定 S P细胞
1 材 料 与方法
11 材料 .
人 胃癌 细胞 系 MG 一0 C 8 3由中 国协和 医
科 大学 细胞 中 心提 供 。3~ 4周 龄 N D S I O / C D小 鼠 3 2只 , 自中 国 医学 科 学 院 动 物 所 。胎 牛 血 清 、 购 胰 蛋 白酶 、 c et3 4 、 I D M 培 养 液 购 自美 国 Hoh s 3 2 P 、 ME 3
FC A S流 式细胞 仪 、 倒置 显微 镜 。
1 2 方 法 .
月 , 们通 过分 离 胃癌 S 我 P细 胞 , 其 生 物 学 特 征进 对 行 初步 研究 。现报 告如 下 。
基 金 项 目: 家 自然 科 学 基 金 资 助项 目( 17 9 9 。 国 80 2 6 )
12 1 细胞 培养 与分 选 . .
摘要: 目的
从人 胃癌细胞株 MG 一0 C83中分离侧群 ( P 细胞 , s) 研究其生物学特 征。方法
利 用流式 细胞 分选
术 ( A S 从 MG 一 3细胞株 中分选 出 s F C) C8 0 P细胞 和非 s 细胞亚 群进行培 养 , 用克 隆形 成实验 比较两组亚群 细胞 P 采 的体外 增殖能力 , O / CD鼠成 瘤实验检测 两组亚 群细胞 体 内成瘤能 力。结果 N DSI FC A S结果 显示 , 胞株 MG 一 细 C 8 3中 s 0 P细胞亚群 占总细胞 的 0 3 ~12 ;P细胞体 外克 隆形 成率 为( .6 0 0 0 % , s .% .% S 0 82± . 5 ) 非 P细胞体外 克隆 形 成率为( .2 0 27 % , 0 35± .0 ) 两者 比较 P< .5 S 0 0 ;P细胞最低 成瘤数量是 1×1 只 , s 0/ 非 P细 胞为 5×1 只 。结 0/ 论 人 胃癌细胞株 MG . 3中存在 s C8 0 P细胞 , 其生物学特性与干细胞基本符合 。 关键 词 : 胃肿瘤 ; 干细胞 ; 分离 ; 侧群细胞 中图分 类号 : 7 52 R 3 . 文献标 志码 : A 文章编 号 :0 22 6 2 1 ) - 0 -3 10 — X(0 2 叭 0 40 6 0
人胃癌细胞株MGC_803侧群细胞的分选与生物学特征
人胃癌细胞株MGC-803侧群细胞的分选与生物学特征俞薇1,吴婷1,司今2,姜伟2,李锦毅2*(1辽宁医学院武警总医院研究生培养基地,北京100039;2武警总医院)摘要:目的从人胃癌细胞株MGC-803中分离侧群(SP)细胞,研究其生物学特征。
方法利用流式细胞分选术(FACS)从MGC-803细胞株中分选出SP细胞和非SP细胞亚群进行培养,采用克隆形成实验比较两组亚群细胞的体外增殖能力,NOD/SCID鼠成瘤实验检测两组亚群细胞体内成瘤能力。
结果FACS结果显示,细胞株MGC-803中SP细胞亚群占总细胞的0.3% 1.2%;SP细胞体外克隆形成率为(0.862ʃ0.050)%,非SP细胞体外克隆形成率为(0.325ʃ0.207)%,两者比较P<0.05;SP细胞最低成瘤数量是1ˑ103/只,非SP细胞为5ˑ103/只。
结论人胃癌细胞株MGC-803中存在SP细胞,其生物学特性与干细胞基本符合。
关键词:胃肿瘤;干细胞;分离;侧群细胞中图分类号:R735.2文献标志码:A文章编号:1002-266X(2012)01-0004-03Isolation and biologic characteristics of the side population in human gastric cancer celllines MGC-803YU Wei1,WU Ting,SI Jin,JIANG Wei,LI Jin-yi(1Graduate Education Center of Liaoning Medical University in General Hospital of ChinesePeople’s Armed Police Forces,Beijing100039,P.R.China)Abstract:Objective To investigate isolation and biologic characteristics of the side population(SP)in human gas-tric cancer cell lines MGC-803.Methods Fluoresence activated cell sorting was used to sort SP and NSP cells from MGC-803s.Tumorigenicity of the two subpopulations was observed by sphere forming assay.Proliferation was determined by sub-cutaneous tumor formation in NOD/SCID mice.Results The percent of SP cells was0.3%-1.2%.Clone formation effi-ciency of SP cells and NSP cells was(0.862ʃ0.050)%and(0.325ʃ0.207)%respectively,there were significant differ-ences(P<0.05).In vivo,the tumorigenic ability of SP cells was higher than that of NSP cells.Tumor formed only by1ˑ103SP cells in nude mice,but5ˑ103NSP cells.Conclusion Human gastric cancer cell lines MGC-803contained some SP cells with stem cell properties.Key words:stomach neoplasms;stem cells;isolation;side population cells随着医学水平的进步,胃癌的生存率有所提高,但仍有相当一部分胃癌患者治疗后出现远处转移最终死亡。
胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察
、 αSMA Vimentin 阳性表达,CK18 阴性表达,胃NFs 细胞存在Vimentin 阳性表达,αSMA、CK18 阴性表达。培养3 ~
6 天,各来源胃CAFs 细胞OD 值均高于胃NFs(P 均< 0. 05)。结论 成功分离胃CAFs、胃NFs。胃CAFs、胃NFs
均存在Vimentin 表达。胃CAFs 增殖能力优于胃NFs。
法 3 例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法
分离胃癌组织中的胃CAFs 及胃正常黏膜组织中的胃NFs。原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化
细胞,差速贴壁20 min。倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs 细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α平滑
sues and normal gastric mucosa were preserved during operation. The tissue adhension method and collagenase digestion
were used to isolate the gastric CAFs in gastric cancer tissues and gastric NFs in the normal gastric mucosa. Primary cul
肌肌动蛋白(αSMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin)。取3 个来源分离的胃Cห้องสมุดไป่ตู้Fs、胃NFs,分别于细胞贴
壁24 、h 2 、d 3 、d 4 、d 5 、d 6 d 采用MTT 法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线。结果 胃癌CAFs 细胞大
小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs 细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则。胃CAFs 细胞存在
胃癌侧群细胞的耐药性及致瘤性的初步研究
i 0 0 9, hn r g 1 0 3 C ia n
C r so dn uh r L i—iE m i: in i1 .ia cr or p n iga to : I ny , — al li .i e J jy @ s .o n n 【 bt c】 0 jcv T be e h r st c d u o g iaiyos e ou tn es S l) h h e A s at r bete o s v e u r ia e n m r e c b i d pli l (Pc l w i r i o r t d g e s n a t i n l f i p ao c l t es cw e
临床 肿瘤学杂志 2 1 0 2年 8月第 1 7卷第 8 期
C i s l i l n o g , u 02, o.7 N . hn eCi c cl yA g 1 V 11 , o8 e n aO o 2
・
63・ 7
・
论
著 ・
胃癌 侧 群 细 胞 的 耐 药 性 及 致瘤 性 的初 步 研 究
o P cl n o —P c l r au e ymeh b n tiz rn ( fS el a d n n S el weeme s rd b ta e z a uo MTF sa .T eF M se ly d t v siaeteihbtr s s h )asy h C wa mpo e oi et t n ii y n g h o
B C8 3细胞增殖 抑制作用 以及 s G 一2 P细胞 比例 、 细胞 周期情 况 ; 通过在 N D S I O / C D鼠体 内种植 不 同数量 的 s P细胞和非 s P细 胞, 比较两者的致瘤能力 。结 果 流式细胞仪检测 胃癌 B C8 3细胞 中存在 09 ~ . % 的 s G 一 2 .% 2 1 P细胞 , T M T法显示 s P细胞有
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告体外检测肿瘤细胞增殖实验是一种常用的肿瘤研究手段,通过对肿瘤细胞的生长增殖情况进行实验观察,可以更好地了解肿瘤的生长和扩散特点,为肿瘤治疗和预防提供重要参考。
本报告将综述体外检测肿瘤细胞增殖实验的基本原理、方法和应用,希望能对相关领域的研究工作有所帮助。
一、基本原理体外检测肿瘤细胞增殖实验主要是通过对肿瘤细胞在体外培养条件下的增殖情况进行监测和研究。
肿瘤细胞增殖实验的基本原理是利用细胞生物学和生物化学的方法,通过培养肿瘤细胞、给予适当的生长因子和营养物质以及药物处理等,观察细胞的生长状态,从而研究肿瘤细胞的增殖特点和对不同药物的反应。
在实验中,通常会选取一定数量的肿瘤细胞,通过特定的培养基和条件,使其在体外迅速生长和增殖。
在增殖过程中,可以通过显微镜观察细胞的形态和数量变化,也可以通过细胞增殖试剂盒、MTT法、CCK-8法等方法对细胞进行定量检测,从而获取肿瘤细胞增殖的相关数据。
二、实验方法1. 细胞培养首先需要进行肿瘤细胞的培养工作,一般使用无菌条件下的组织细胞培养技术,选用适当的培养基和生长条件,如含有生长因子的培养基、37℃恒温培养箱等,使肿瘤细胞在体外迅速生长和增殖。
2. 细胞处理在培养好的肿瘤细胞上,可以通过加入不同浓度的药物、蛋白质、小分子化合物等,来研究这些因素对肿瘤细胞增殖的影响。
也可以针对个体差异进行分析,以期获得更精准的实验结果。
三、实验应用1. 药物筛选体外检测肿瘤细胞增殖实验可以用于筛选和评价抗肿瘤药物的疗效和毒性,通过观察肿瘤细胞对不同药物的反应情况,来评估药物的有效性和安全性。
2. 肿瘤研究在肿瘤生物学研究中,体外检测肿瘤细胞增殖实验可以帮助科研人员更好地了解肿瘤细胞的增殖特点和影响因素,为肿瘤的预防、治疗和基础研究提供重要的实验数据。
3. 临床诊断体外检测肿瘤细胞增殖实验还可以作为临床诊断的辅助手段,通过对患者体外培养的肿瘤细胞进行增殖实验,可以评估肿瘤的增殖速率和对药物的敏感性,为临床治疗方案的制定提供参考。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告肿瘤细胞增殖实验是当前癌症研究中的重要内容之一。
通过体外检测肿瘤细胞的增殖情况,可以评估肿瘤的生长速度、细胞增殖能力以及对药物治疗的敏感性等,为研究肿瘤的发生机制和药物疗效提供重要依据。
本综述报告将对目前常见的体外检测肿瘤细胞增殖的实验方法进行总结和评述。
一、MTT试验MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)试验是一种常用的体外细胞增殖检测方法。
MTT试验基于细胞对某种化合物还原能力的检测,该化合物在活细胞中通过线粒体膜将其还原为具有蓝色沉淀的可溶性紫色盐类。
通过溶解形成的盐类,可以由酒精等溶剂溶解并用分光光度计测定其吸光度,从而反映细胞的活力和增殖情况。
二、CCK-8试验CCK-8试验是一种测量细胞代谢活性的方法。
CCK-8试剂在细胞内通过线粒体酶的作用可被还原为橙黄色溶液,其吸光度与细胞数量成正比。
在CCK-8试验中,将该试剂加入细胞培养液中,经过一定时间后,通过酶促反应的作用反映细胞代谢活性和增殖程度。
三、细胞计数法细胞计数法是一种直接检测细胞数量的方法。
在该实验中,通过显微镜观察和人工计数的方式,统计细胞的数量,从而得出增殖情况。
该方法简单直观,但在大规模实验中耗时且易发生误差。
四、Clonogenic Assay试验Clonogenic Assay试验是一种经典的体外细胞增殖检测方法。
该方法通过将单个细胞在富含营养的培养基中培养,并观察和计数其形成的克隆,从而评价细胞的增殖能力。
Clonogenic Assay试验对于评估细胞的增殖潜能和肿瘤干细胞的存在及活性具有重要意义。
五、APTT试验APTT(activated partial thromboplastin time)试验是一种常用的血液凝血功能检测方法,在某些肿瘤细胞增殖实验中也被应用。
肿瘤细胞的增殖状态与凝血功能存在一定关系,通过APTT试验可以间接反映肿瘤细胞的增殖情况。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告肿瘤细胞增殖实验是一种体外检测肿瘤细胞活力和增殖能力的方法。
该实验可以在不同的细胞类型中应用,并通过不同的技术来评估细胞的增殖情况。
本文将重点介绍常用的体外细胞增殖实验技术及其应用。
1. MTT法MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基三唑)法是一种衡量细胞活力和增殖能力的颜色法。
它主要是将MTT添加到培养细胞中,MTT会被细胞内活的脱氢酶还原为形成深紫色的质子化形式。
质子化的MTT这反应物可以被去电子的溶液还原为不带电的呈暗蓝色的可溶性盐。
测量细胞产生的暗蓝色的MTT总量就可以对细胞增殖情况进行评估。
使用MTT法需要注意的是,细胞形态的变化或者特殊的氧气浓度可能会使得MTT试剂的反应受到干扰。
2. 体外存活性检测这种方法的原理是通过染料或染料释放物质的特性,来测量细胞存活能力的变化。
细胞可以与含有细胞生长荧光素的乙酸(CFDA-SE)结合,在细胞膜上生成荧光分子,通过检测荧光变化来判断细胞的存活情况。
还有其他一些检测方法,如药物释放特定的染料等。
3. 流式细胞术流式细胞术(FACS)用于精确测量细胞增殖和存活情况,可以对单个细胞进行非常细节的分析。
实验方法是使用荧光素然后染色细胞,评估后使它们单个被检测通过流式细胞术检测器。
流式细胞术常常用来区别增殖的存活的细胞群组和不增殖的细胞群组。
4. 其他方法还有一些其他方法也被用于肿瘤细胞增殖的体外检测。
例如线粒体功能和多项式体积测定。
线粒体是细胞内负责细胞氧化作用的主要组织,而多极小流动细胞术可以精确测量细胞的体积并捕获细胞的运动轨迹。
总之,肿瘤细胞增殖实验在研究癌症生物学及药物筛选方面是一个重要的体外分析工具。
无论是MTT法、流式细胞术或其他实验方法,都具有高效、快捷、高通量、可重复等优点,为癌症治疗和肿瘤生物学的研究提供了重要的帮助。
胃癌的病理分型及临床意义
胃癌的病理分型及临床意义胃癌是一种恶性肿瘤,临床上常见的消化系统肿瘤之一。
病理分型对于胃癌的治疗和预后评估起着至关重要的作用。
本文将介绍常见的胃癌病理分型及其临床意义。
一、组织学分型胃癌的组织学分类是根据肿瘤间质组织和细胞形态学特征进行划分的。
目前最常用的组织学分型系统是WHO分型。
根据肿瘤细胞的形态学特征,将胃癌分为以下几种类型:1.腺癌(adenocarcinoma)腺癌是最常见的胃癌类型,占胃癌总病例数的90%以上。
腺癌可进一步分为乳头状腺癌、黏液型腺癌、浸润型腺癌等亚型。
乳头状腺癌细胞形态酷似正常胃腺体细胞,常见于早期胃癌。
黏液型腺癌细胞富含黏液,浸润型腺癌则具有较强的浸润能力。
2.浆液癌(mucinous carcinoma)浆液癌又称黏液癌,是一种特殊类型的腺癌。
浆液癌的特点是肿瘤细胞产生大量的黏液,使得肿瘤组织呈现明显的黏液样变性。
浆液癌的侵袭性较强,长期发展可能导致淋巴结转移。
3.滑膜下癌(submucosal carcinoma)滑膜下癌是指肿瘤细胞从胃黏膜滑膜下方向浆膜浸润生长,多见于早期胃癌。
滑膜下癌的预后较好,术后5年生存率一般高于90%。
4.神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma)神经内分泌癌是一种罕见的胃癌类型,源于胃颗粒细胞和神经内分泌细胞。
这种癌症往往具有高度的侵袭性和转移能力。
二、病理分期胃癌的病理分期是根据肿瘤的大小、深度浸润程度及淋巴结转移情况划分的。
常用的病理分期系统包括国际TNM分期系统和日本病理学会分期系统。
其中,国际TNM分期系统将胃癌分为0期至IV期,依次表示肿瘤的发展程度和转移情况。
病理分期对于确定胃癌的治疗方案和预后评估非常重要。
早期胃癌(I期和II期)的治疗效果较好,手术切除常可根治。
而晚期胃癌(III 期和IV期)的治疗主要以辅助化疗和姑息治疗为主。
三、临床意义胃癌的病理分型及分期结果对于临床治疗和预后评估至关重要。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告【摘要】体外检测肿瘤细胞增殖实验是肿瘤学研究中的重要内容。
本文通过介绍研究背景、目的和意义,概述了体外检测肿瘤细胞增殖的方法及原理,并详细讨论了常用的技术、实验设计和数据分析,以及影响实验结果的因素。
结论部分探讨了该实验的应用前景、未来研究方向,并对整个研究进行了总结。
通过本文的综述,读者能够全面了解体外检测肿瘤细胞增殖实验的相关内容,为肿瘤学研究提供重要参考。
【关键词】体外检测、肿瘤细胞、增殖、实验、综述、研究背景、研究目的、研究意义、方法概述、原理、技术、实验设计、数据分析、影响因素、应用前景、未来研究方向、结论、细胞增殖。
1. 引言1.1 研究背景肿瘤细胞增殖的研究在肿瘤生物学和临床领域中具有重要意义。
肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病,而肿瘤细胞的增殖是肿瘤发生和发展的重要过程。
通过体外检测肿瘤细胞增殖,可以帮助探究肿瘤细胞增殖的机制,寻找新的治疗靶点,评价药物的疗效,预测肿瘤的转移和预后等。
随着对肿瘤细胞增殖机制的认识不断加深,体外检测肿瘤细胞增殖的方法和技术也得到了不断改进和完善。
深入研究体外检测肿瘤细胞增殖的原理和技术,对于促进肿瘤研究和临床治疗具有重要意义。
本综述将对体外检测肿瘤细胞增殖实验进行综合分析和总结,以期为相关研究提供参考和借鉴。
1.2 研究目的体外检测肿瘤细胞增殖实验的研究目的是为了深入了解肿瘤细胞的增殖过程及相关机制,从而为肿瘤治疗和预防提供有效的依据。
通过对肿瘤细胞增殖的实验研究,可以了解肿瘤细胞生长的调控机制,探索潜在的治疗靶点,并寻找新的抗肿瘤药物。
研究肿瘤细胞增殖还可以帮助我们更好地了解肿瘤的发生、发展和转移过程,为个性化治疗和精准医学提供理论依据。
研究体外检测肿瘤细胞增殖实验的目的在于提升对肿瘤细胞行为的认识,为进一步研究和临床应用奠定基础。
1.3 研究意义体外检测肿瘤细胞增殖实验在肿瘤学研究中具有重要意义。
通过体外实验可以模拟肿瘤细胞在人体内的增殖过程,有助于了解肿瘤细胞的生长规律以及对治疗药物的敏感性。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告肿瘤细胞增殖实验是一种常用的体外研究肿瘤细胞生长和增殖的方法。
通过该实验,可以评估不同因素对肿瘤细胞增殖的影响,发现潜在的抑制因子或促进因子,并进一步研究其作用机制。
本文将综述体外检测肿瘤细胞增殖实验的原理、方法和应用。
一、实验原理:肿瘤细胞增殖实验主要基于细胞生长曲线和增殖指标的测定。
细胞生长曲线反映了一定时间范围内细胞数量的动态变化,通过测定不同时间点的细胞数量,可以获得细胞生长曲线。
增殖指标一般包括细胞增殖率、细胞周期和细胞凋亡率等,通过测定这些指标,可以客观评估细胞增殖状态。
二、实验方法:1. 细胞培养:选取合适的培养基和补充物,将肿瘤细胞以一定的密度接种于培养皿中,并在恒温恒湿的培养箱中培养。
2. 细胞数量测定:采用细胞计数器、细胞色素染色或荧光标记等方法,测定不同时间点的细胞数量。
3. 细胞增殖率测定:根据细胞生长曲线计算细胞增殖速率或细胞倍增时间,评估细胞增殖能力。
4. 细胞周期检测:采用细胞凋亡检测、流式细胞术或细胞核染色等方法,测定不同细胞周期阶段的细胞比例,评估细胞周期变化。
5. 细胞凋亡率测定:采用细胞凋亡检测试剂盒、DNA断裂检测或细胞膜渗透性染料等方法,测定细胞凋亡率。
三、实验应用:1. 药物筛选:通过实验评估药物对肿瘤细胞增殖的影响,筛选具有抑制肿瘤细胞增殖作用的药物。
2. 基因功能研究:通过实验评估基因过表达或沉默对肿瘤细胞增殖的影响,研究基因在肿瘤细胞生长和增殖过程中的作用机制。
3. 细胞相互作用研究:通过实验模拟肿瘤微环境,评估细胞因子、细胞外基质和间质细胞等对肿瘤细胞增殖的影响,研究肿瘤微环境对肿瘤生长的调控机制。
4. 其他应用:体外检测肿瘤细胞增殖实验还可用于研究肿瘤细胞迁移、侵袭和转移等特性,以及评估抗肿瘤药物的效果。
体外检测肿瘤细胞增殖实验是一种有效的研究肿瘤生长和增殖的方法,可用于药物筛选、基因功能研究和肿瘤微环境调控机制的研究等领域。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告体外检测肿瘤细胞增殖实验是肿瘤研究中的重要内容之一,通过这种实验可以评估药物对肿瘤细胞增殖的影响,为药物筛选提供重要依据。
本文将综述体外检测肿瘤细胞增殖实验的研究进展,探讨其在肿瘤研究中的应用现状和未来发展趋势。
一、体外检测肿瘤细胞增殖实验的原理和方法体外检测肿瘤细胞增殖实验的目的是评估药物对肿瘤细胞增殖的影响,通常采用细胞增殖试剂盒或者放射性标记的核酸前体等方法。
常用的细胞增殖试剂盒包括MTT、CCK-8、Cell Counting Kit-8等,这些试剂可以通过颜色反应或者荧光信号的测定来评估细胞存活率和增殖情况。
而放射性标记的核酸前体,则可以通过测定放射性衰减来评估细胞增殖情况。
还可以采用细胞实时监测技术,如xCELLigence系统,实时监测肿瘤细胞的增殖情况。
体外检测肿瘤细胞增殖实验在药物筛选、药物作用机制研究和个体化治疗方面具有重要的应用价值。
在药物筛选方面,体外检测肿瘤细胞增殖实验可以快速、有效地评估药物的抗肿瘤活性,为临床药物的筛选提供重要依据。
在药物作用机制研究方面,体外检测肿瘤细胞增殖实验可以评估药物对细胞周期、凋亡和自噬等生物学过程的影响,从而揭示药物的作用机制。
在个体化治疗方面,体外检测肿瘤细胞增殖实验可以根据患者的肿瘤细胞对特定药物的敏感性,为临床治疗方案的选择提供重要依据。
未来,体外检测肿瘤细胞增殖实验将会向更加高通量、自动化的方向发展。
随着细胞实时监测技术的不断进步,体外检测肿瘤细胞增殖实验将可以实现对数以千计的样品进行高通量筛选,从而加快药物筛选的速度。
结合细胞单细胞测序技术,体外检测肿瘤细胞增殖实验将可以实现对肿瘤细胞异质性的评估,为个体化治疗方案的制定提供更加精准的依据。
体外检测肿瘤细胞增殖实验是肿瘤研究中的重要工具,具有重要的应用价值和发展前景。
随着技术的不断进步,相信体外检测肿瘤细胞增殖实验将会在肿瘤研究和临床应用中发挥越来越重要的作用。
人胃癌细胞株MGC_803侧群细胞的分选与生物学特征
人胃癌细胞株MGC_803侧群细胞的分选与生物学特征2019521人胃癌细胞株MGC -803侧群细胞的分选与生物学特征吴婷,司今,姜伟,李锦毅俞薇,(1辽宁医学院武警总医院研究生培养基地,北京100039;2武警总医院)11222*摘要:目的803中分离侧群(SP )细胞,从人胃癌细胞株MGC-研究其生物学特征。
方法利用流式细胞分选803细胞株中分选出SP 细胞和非SP 细胞亚群进行培养,术(FACS )从MGC-采用克隆形成实验比较两组亚群细胞NOD /SCID鼠成瘤实验检测两组亚群细胞体内成瘤能力。
结果的体外增殖能力,FACS 结果显示,细胞株MGC-803中SP 细胞亚群占总细胞的0.3% 1.2%;SP 细胞体外克隆形成率为(0.862ʃ 0.050)%,非SP 细胞体外克隆33形成率为(0.325ʃ 0.207)%,两者比较P <0.05;SP 细胞最低成瘤数量是1ˑ10/只,非SP 细胞为5ˑ 10/只。
结论803中存在SP 细胞,人胃癌细胞株MGC-其生物学特性与干细胞基本符合。
关键词:胃肿瘤;干细胞;分离;侧群细胞中图分类号:R735.2文献标志码:A266X (2019)01-0004-03文章编号:1002-Isolation and biologic characteristics of the side population in human gastric cancer cell lines MGC-803YU Wei 1,WU Ting ,SI Jin ,JIANG Wei ,LI Jin-yi(1Graduate Education Center of Liaoning Medical University in General Hospital of Chinese People ’s Armed Police Forces ,Beijing 100039,P.R.China )Abstract :ObjectiveTo investigate isolation and biologic characteristics of the side population (SP )in human gas-Fluoresence activated cell sorting was used to sort SP and NSP cells from MGC-The percent of SP cells was 0.3%-1.2%.Clone formation effi-tric cancer cell lines MGC-803.Methods803s.Tumorigenicity of the two subpopulations was observed by sphere forming assay.Proliferation was determined by sub-cutaneous tumor formation in NOD /SCIDmice.Resultsciency of SP cells and NSP cells was (0.862ʃ 0.050)%and (0.325ʃ0.207)%respectively ,there were significant differ-ences (P <0.05).In vivo ,the tumorigenic ability of SP cells was higher than that of NSP cells.Tumor formed only by 1ˑ 103SP cells in nude mice ,but 5ˑ 103NSP cells.Conclusion SP cells with stem cell properties.Key words :stomach neoplasms ;stem cells ;isolation ;side population cellsHuman gastric cancer cell lines MGC-803contained some随着医学水平的进步,胃癌的生存率有所提高,但仍有相当一部分胃癌患者治疗后出现远处转移最终死亡。
肺癌细胞株侧群细胞的分选及干细胞特性的鉴定
肺癌细胞株侧群细胞的分选及干细胞特性的鉴定度蔚;陈昭颖【摘要】目的探讨分选肺癌细胞株侧群细胞(SP细胞)及鉴定干细胞特性.方法选择肺癌细胞株SK-MES-1和NCI-H460,通过流式细胞仪对SP与非SP(NSP)细胞进行分选,然后进行培养并且传代,选择的培养基分别为正常情况及干细胞培养基当中,对细胞分化能力与表型进行观察;通过电镜对细胞进行观察,了解其超微结构;利用免疫荧光对干细胞标志物CD44的表达进行检测;利用CCK-8法对细胞增殖能力进行检测,采用平板克隆、裸鼠成瘤实验及Transwell侵袭实验对细胞进行了解,明确其恶性程度.结果初次分选NCI-H460和SK-MES-1细胞株NSP和SP细胞百分比,以及再纯化NSP和SP细胞百分比的比较,差异无统计学意义(P>0.05).在干细胞培养基中,NSP和SP细胞都无法形成干细胞球,但具有较快的增殖速度.NSP细胞表现出的是接触抑制的单层生长,SP细胞表现出的是集聚生长.当培养到第5代时,SP 细胞与NSP细胞分别表现出的是不显著的变化及混杂表型.电镜下SP细胞核质比较高,NSP细胞核质比低.NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞能够对CD44高表达,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).对比NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞与NSP细的细胞增殖活力,在第2、5和7天时的数据情况,前者明显比后者高,差异有统计学意义(P<0.05).NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞克隆形成率和平均克隆数明显比NSP细胞高;在侵袭过膜方面,平均细胞数有所提高,成瘤裸鼠的数量也有所增加,差异均有统计学意义(P<0.05),都没有转移灶,瘤体HE与免疫组织化学染色都得到了证实,均属于典型肺癌细胞.结论肺癌细胞株SP细胞具有干细胞特性,在肿瘤的侵袭、增殖及分化等方面都有参与.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2018(015)023【总页数】4页(P3521-3524)【关键词】肺癌细胞;侧群细胞;肿瘤干细胞【作者】度蔚;陈昭颖【作者单位】武汉市精神卫生中心检验科 430012;武汉市精神卫生中心检验科430012【正文语种】中文【中图分类】R447肺癌的发病率和病死率居我国恶性肿瘤首位,有80%的患者为非小细胞肺癌(NSCLC),在诊断时,70%的NSCLC患者都已经达到晚期,5年生存率较低[1]。
人肝癌侧群细胞的分选及鉴定的开题报告
人肝癌侧群细胞的分选及鉴定的开题报告I. 研究背景和意义肝癌是一种常见的恶性肿瘤,且其发病率呈逐年增长的趋势。
临床上肝癌的治疗方式主要包括手术切除、放疗和化疗等,但治疗效果并不理想。
因此,对肝癌的研究成为当前的热点方向之一。
肝癌的细胞来源有很多种,其中肝癌侧群细胞被认为是一种具有高度恶性特征的细胞。
肝癌侧群细胞通过其突出的干细胞特性,能够自我更新、修复和分化,从而在肝癌细胞中发挥重要作用。
因此,对肝癌侧群细胞的研究有助于深入了解肝癌的发生机制,为肝癌的治疗提供新的思路和方法。
II. 研究目的该研究旨在对人肝癌侧群细胞进行分选并进行鉴定,为进一步的研究奠定基础。
III. 研究内容1. 收集人肝癌侧群细胞从手术切除的肝癌组织中分离肝癌侧群细胞,采用贴壁法进行原代细胞培养。
2. 细胞特性分析采用流式细胞术检测肝癌侧群细胞的特性,包括CD133和CD44阳性表达率、免疫荧光染色等。
3. 克隆形成能力检测采用克隆形成实验测定肝癌侧群细胞的克隆形成能力。
IV. 研究方法1. 细胞培养:采用含10%胎牛血清的DMEM培养肝癌侧群细胞。
2. 流式细胞术:采用荧光标记法检测CD133和CD44表达。
3. 克隆形成实验:采用无血清DMEM流式细胞术。
V. 预期结果本研究将分别从形态特征、细胞特性和克隆形成能力三个方面分析人肝癌侧群细胞,预期可以成功分离人肝癌侧群细胞并鉴定其特性,为后续的肝癌治疗和研究提供基础数据和实验依据。
VI. 研究意义该研究将有助于深入了解肝癌侧群细胞的生物学特性,为肝癌的治疗和预防提供新的思路和方法。
此外,该研究将有助于推进肝癌研究的理论深入和实践应用。
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告
肿瘤细胞增殖是肿瘤发展过程中的重要特征,对于研究肿瘤的生物学特性以及寻找抑制肿瘤细胞增殖的治疗方法具有重要意义。
体外检测肿瘤细胞增殖的实验方法有多种,本文对其中的几种常见方法进行综述和分析。
一、MTT法
MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)法是一种常用的测定细胞活力和细胞增殖的方法。
该方法通过将MTT重链亚甲蓝溶液添加到培养皿中,MTT会被活细胞内还原为紫色的甲蓝晶体。
晶体可被有机溶剂溶解,测定溶液的吸光度即可得到细胞的增殖情况。
二、细胞计数
细胞计数是一种直接测量细胞数目的方法,可以通过显微镜计数室或细胞计数仪来进行。
方法简单、直观,但由于需要高倍显微镜观察和手工计数,准确性较差,且操作繁琐。
三、焦磷酸酶检测
焦磷酸酶检测通过检测细胞中的磷酸化焦磷酸酶来间接估计细胞增殖情况。
细胞中的焦磷酸酶水平与细胞增殖密切相关,因此可以作为评价细胞增殖的指标。
四、流式细胞术
流式细胞术是一种高通量、高灵敏度的细胞分析技术,可以测定细胞免疫表型、细胞周期以及检测细胞增殖。
通过细胞标记物(如细胞融合素、DNA染料等)与流式仪相结合,可以对细胞增殖情况进行定量分析。
选择合适的体外检测肿瘤细胞增殖的方法需要综合考虑实验的目的、所需灵敏度、成本以及实验室的设备和技术水平。
不同的方法可以互补使用,以提高结果的准确性和可靠性。
未来,随着技术的不断进步和发展,体外检测肿瘤细胞增殖的方法将会更加完善、快速和准确。
侧群细胞及其在肿瘤干细胞研究中的进展
侧群细胞及其在肿瘤干细胞研究中的进展
郑丹薇;廖珊;朱广超;周艳宏;李桂源
【期刊名称】《中南大学学报(医学版)》
【年(卷),期】2014(039)005
【摘要】肿瘤干细胞研究已成为国内外研究热点.肿瘤干细胞学说认为肿瘤组织中存在一小部分具有自我更新及多向分化潜能的细胞,在肿瘤耐药和复发中起着关键的作用,这一部分细胞被称为肿瘤干细胞.目前肿瘤干细胞的分离、富集方法主要有:侧群细胞分选技术、细胞表面特异性分子标记筛选技术、肿瘤微球培养技术、细胞滞留标记技术、ALDEFLUOR分析技术等.侧群细胞是一小群能够将核酸染料Hoechst 33342排出,经过流式细胞检测呈Hoechst 33342低染的细胞.侧群细胞中富含肿瘤干细胞,其分选技术已作为简单有效的富集肿瘤干细胞的方法应用在肿瘤干细胞研究中.
【总页数】7页(P525-531)
【作者】郑丹薇;廖珊;朱广超;周艳宏;李桂源
【作者单位】中南大学肿瘤研究所,长沙410078;中南大学肿瘤研究所,长沙410078;中南大学肿瘤研究所,长沙410078;中南大学肿瘤研究所,长沙410078;中南大学肿瘤研究所,长沙410078
【正文语种】中文
【相关文献】
1.侧群细胞分析法在脑肿瘤干细胞研究中的应用及其局限性 [J], 高宝成;万锋;陈坚;雷霆
2.宫颈癌侧群细胞与肿瘤干细胞的研究进展 [J], 陈建琼;蒋艳;毛熙光
3.实体瘤中肿瘤干细胞研究进展 [J], 宋尔卫
4.侧群细胞与消化系恶性肿瘤干细胞研究 [J], 巩超捷;夏璐
5.侧群细胞与肿瘤干细胞研究进展 [J], 钟永;张叔人
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胃腺癌实验报告总结
一、实验背景胃腺癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在我国居高不下。
近年来,随着分子生物学、基因工程和生物技术在医学领域的广泛应用,对胃腺癌的研究取得了显著的进展。
本实验旨在通过细胞培养、分子生物学技术等方法,探讨胃腺癌的发生、发展和治疗策略。
二、实验目的1. 通过细胞培养,观察胃腺癌细胞的生长特性;2. 利用分子生物学技术,检测胃腺癌相关基因的表达情况;3. 探讨胃腺癌的分子机制和治疗策略。
三、实验材料与方法1. 实验材料(1)胃腺癌细胞系:SGC-7901、BGC-823等;(2)培养基:DMEM培养基、胎牛血清等;(3)试剂:RT试剂盒、PCR试剂盒、引物等;(4)仪器:细胞培养箱、PCR仪、凝胶成像系统等。
2. 实验方法(1)细胞培养:将胃腺癌细胞系接种于培养瓶中,置于细胞培养箱中培养,待细胞生长至对数生长期时,收集细胞用于后续实验。
(2)细胞生长曲线:分别于接种后24小时、48小时、72小时、96小时、120小时收集细胞,利用细胞计数试剂盒测定细胞数量,绘制细胞生长曲线。
(3)RT-PCR检测:提取细胞总RNA,利用RT试剂盒进行逆转录,以cDNA为模板进行PCR扩增,检测胃腺癌相关基因的表达情况。
(4)Western blot检测:提取细胞蛋白,利用SDS-PAGE电泳分离蛋白,转膜后加入一抗和二抗,检测胃腺癌相关蛋白的表达情况。
四、实验结果1. 细胞生长曲线:实验结果显示,胃腺癌细胞系在培养过程中呈现典型的生长曲线,细胞生长速度较快。
2. RT-PCR检测:实验结果显示,与正常细胞相比,胃腺癌细胞系中某些癌基因(如c-myc、Bcl-2等)和抑癌基因(如p53、p16等)的表达水平显著升高。
3. Western blot检测:实验结果显示,与正常细胞相比,胃腺癌细胞系中某些癌蛋白(如c-myc、Bcl-2等)和抑癌蛋白(如p53、p16等)的表达水平显著升高。
五、实验讨论1. 胃腺癌细胞系在培养过程中呈现典型的生长曲线,生长速度较快,表明其具有高增殖能力。
胃癌细胞凋亡与增殖的观察
胃癌细胞凋亡与增殖的观察李其云;牛凤霞;李文雁;翟金萍;赵焕芬;霍俊爱【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2001(017)003【摘要】目的:探讨胃癌细胞凋亡与增殖的临床病理意义。
方法:采用切口末端标记法(TUNEL)、电镜观察显示凋亡细胞,免疫组化S-P法显示PCNA及p53蛋白表达,利用图像系统分析癌细胞DNA倍体。
结果:观察60例胃癌细胞凋亡的TUNEL染色及超微结构形态;发现高分化型癌凋亡指数(ApoptosisIndex,AI)、AI/PI(PCNAIndel,PI)均高于低分化型癌(P<0.05),而PI值、DNA>5C值则相反,高分化型低于低分化型癌(P<0.05);癌侵及黏膜层、肌层、浆膜层时AI、AI/PI值逐层递减,而PI值、DNA>5C值则逐层递增(P<0.05),肿瘤直径<3cm、3~5cm、>5cm3组AI、AI/PI值随肿瘤增大而递减(P<0.01),其PI值、DNA>5C值则随肿瘤增大而递增(P<0.05)、淋巴结阳性组PI值较阴性组高(P<0.05),p53阴性组较p53阳性组AI值高(P<0.05)。
结论:(1)分化高、体积小的早期及早期胃癌其AI值较高,分化低、体积大的晚期胃癌AI值较低,PI值增高;AI与PI呈负相关;PI值与淋巴结转移有关。
显示癌瘤进展以细胞增殖为主而凋亡受抑。
(2)p53基因突变可显著降低癌细胞凋亡。
【总页数】4页(P205-208)【作者】李其云;牛凤霞;李文雁;翟金萍;赵焕芬;霍俊爱【作者单位】河北省人民医院病理科,;河北省人民医院病理科,;河北省人民医院病理科,;河北省人民医院病理科,;河北省人民医院病理科,;河北省人民医院病理科,【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.胃癌及癌前病变组织中细胞凋亡和增殖的原位观察 [J], 张忠;吴凡;袁媛;高华;祁源2.miR-193a-5p靶向VASP干扰PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制研究 [J], 殷玉敬;高辉;岳林;杨文涛;薛丽英3.miR-198靶向抑制FGFR1表达抑制胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡 [J], 莎比亚·沙吾提;雷云霞;热娜古丽·艾则孜4.胃癌组织中细胞凋亡及细胞增殖的原位观察 [J], 章宜芬;黄志勇;吴鸿雁5.INPP4B调控Akt信号通路抑制胃癌HGC-27细胞增殖并诱导细胞凋亡 [J], 商倩;陈鑫;王邦茂;杨波;朱兰平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
细胞增殖的检测及临床意义
细胞增殖的检测及临床意义
刘迂;何泽生;吴金生
【期刊名称】《临床荟萃》
【年(卷),期】2000(015)019
【摘要】@@ 细胞动力学是研究细胞群体内各部分细胞运动规律的学科.肿瘤的细胞增殖研究早期工作由于受方法学的制约主要限于实验肿瘤,随着分子生物学的飞跃发展和免疫组织化学技术的改进,多种与细胞增殖有关的生物标志物得以发现并逐渐有了深入地认识,检测方法不断更新.现已发现许多肿瘤的细胞增殖状态与生物学行为及预后有密切关系[1],内窥镜及针吸活检技术的普及使在治疗前了解肿瘤的增殖状态成为可能,近年来已有许多关于肿瘤细胞增殖与临床病理关系的研究.【总页数】2页(P904-905)
【作者】刘迂;何泽生;吴金生
【作者单位】300381,解放军第四六四医院;第四军医大学唐都医院;第四军医大学唐都医院
【正文语种】中文
【中图分类】R4
【相关文献】
1.胃癌及癌前病变DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义 [J], 任本;朱晓玉;徐令鸽;付胜军;张槟
2.miR-579在肾癌中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖的影响 [J], 程支利;陈智
彬;郭鹏;李小荣
3.lncRNA LINC01410在子痫前期临床意义与对滋养细胞增殖侵袭影响 [J], 杨扬;兰瑞红;龚护民
4.胰腺导管癌中血管生成、细胞增殖指数、DNA倍性检测的临床意义 [J], 陈建武;史桂英;肖家诚
5.大肠癌和大肠腺瘤DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义 [J], 刘成霞;史宁;崔书华
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复 里学报( 医学 版 )
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胃癌 侧 群 细 胞 检 测 分 选 及 其 增 殖 能 力 的初 步 分 析
李 汪学j 唐兆庆 沈振斌 孙益红他 前 汤其群 秦新裕 雪 } 施
(复 旦 大学 附 属 中 山 医 院普 外 科 , 复 旦 大 学 生 物 医 学 研 究 院 一 ! 上海 203 ) 0 0 2
(rpdu idd , I荧 光 染 料 双 染 , 拉 帕米 拮 抗 对 照 , 用 流 式 细 胞 仪 荧 光 激 活 分 选 法 检 测 S po i m ieP ) i o 维 应 P细 胞 比 例 ; 通 过 细 胞 生 长 曲线 ( C C K 8法 ) s 对 P细 胞 体 外 增 殖 能 力 进 行 初 步 分 析 。结 果 3株 胃癌 细 胞 中 均 存 在 含 量 极 少 的 s P细 胞 , 比例 在 0 8 ~ 2 7 之 间 ; P细 胞 比例 随 着 胃癌 细 胞 分 化 程 度 降 低 而 下 降 ( . ( v . 7 7 . . s 2 2) s1 5 2 5 0 9 ,P=0 0 3 。人 胃癌 细 胞 系 MKN 2 .3 .2 ) 一8来 源 的 S P细 胞 体 外 培 养 1周 、 后 的 增 殖 倍 数 分 别 为 2 . 7和 2周 26 2 ( 明显 高 于 非 s 9, 1 P细 胞 培 养 后 的 I . 8和 14 36 2 。细 胞 生 长 曲线 显 示 ,P细 胞 体 外 增 殖 能 力 明显 强 于 nnS s o —P细 胞及 未 经 分 选 的 MK 8细胞 ( N2 P=( 0 4 。结 论 胃 癌 细 胞 系 中 存 在 比例 相 对 稳 定 的 s ) 4) . P细 胞 , P细 胞 比 例 s 随着 胃癌 细 胞 分 化 程 度 增 高 而 上 升 。 胃癌 s P细胞 体 外增 殖 能 力 明 显 高 于 非 s P细 胞 。 【 键 词 】 胃癌 ; 侧 群 细 胞 ; 肿瘤 干 细 胞 ; 细 胞 生 长 曲线 关
g srcc n e ell e t fe e tdfe e ta in g a e e eioa e y fu r s e c — c ia e el a ti a c rc l i swih di r n ifr n ito r d sw r s lt d b l o e c n e a tv td c l n f s r ig at rbeng s an d b l o o h o e H o c t3 3 2 a dpr p du id d ,t e h a a iyo o tn fe i t i e y fu r c r m e hs 3, 4 n o i im o i e h n t ec p ct f p o ie a in wa n e tg td r l r to s i v si a e wih u t r n v to n n l z d y c l r wt u v ( f t c lu e i ir a d a ay e b e l o h c r e CCK一 . g 8) Reu t S d o u a in wa e e t d i l o het r e g s rc c n e ell e , wih a p o o to f s ls i ep p lto s d t c e n a l ft h e a ti a c r c l i s n t r p r in o 0 8 . 一 2 . Pr p rin o h we ldfe e ta e c l .7 o o to f t e l i r n it d el KN一 8 — f M 2 w a h g e h n t e m o e a e s ih rt a h d r t— s1 5 . 7 v .9 , s0 3
【 要】 目的 摘 析 。方 法
检 测 和 分 选 胃癌 细 胞 系 中 的 侧 群 细 胞 (iep p lt n S ) 并 对 其 体 外 增 殖 能 力 进 行 初 步 分 s o u i , P , d ao
选 择 3株 不 同 分 化 程 度 的 人 胃癌 细 胞 系 MK 2 、GC 70 、GC 83 以 Hoc s 33 2 碘 化 丙 啶 N一8 S 9 1 B 一2 , eht 3 4 /
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