三种测定银杏叶提取物中总黄酮的方法比较
紫外分光光度法测定银杏制剂黄酮含量
文章编号:10044736(2000)03000302紫外分光光度法测定银杏制剂黄酮含量吕 红(武汉化工学院制药系,湖北武汉430073)摘 要:以芦丁为标准品,标准品和供试品经硫酸水解后,在紫外分光光度仪267nm 处测定银杏制剂中的黄酮含量,该法简便易行,快速,重现性好.关键词:紫外分光光度法;含量测定;银杏黄酮中图分类号:R 914.1 文献标识码:A收稿日期:20000229作者简介:吕 红(1955),女,武汉市人,工程师,主要从事药物制剂和药物分析实验教学工作.0 引 言银杏叶总黄酮采用芦丁为标准品,以硝酸铝—亚硝酸钠为显色剂,生成铝螯合物,在分光光度计510nm 处进行测定.该方法为一些药典所采用,但不专属,通常测定结果含量偏高,误差较大,重现性差[1,2].HPLC 法测定银杏总黄酮虽然误差较络合分光光度法小,但操作复杂,且山奈素,异鼠李素标准品极难得到[1,3].为了简便快速,准确的测定银杏制剂中的黄酮含量,根据黄酮在紫外有吸收峰的原理,将银杏叶提取物硫酸水解后的甲醇液在紫外分光光度计200～400nm 处进行扫描,该供试液在267±1nm 处有最大吸收峰,而槲皮素甲醇液在此处正好有一吸收肩峰,因此本实验选用芦丁作标准品,用紫外分光光度法测定银杏制剂中的黄酮含量.1 实验部分1.1 仪器与试药756B 紫外分光光度仪(上海第三仪器厂);芦丁(卫生部药品生物制品检验所);银杏叶提取物干浸膏、银杏叶缓释片、缺银杏叶空白对照缓释片(自制)、Ginkgo Biloba 胶囊(Healthy lofe Co);硫酸、甲醇(AR 级).1.2 标准液的制备准确称取120℃烘干至恒重芦丁标准品约0.02g 置入50m L 圆底烧瓶中,加入0.025mol H 2SO 410m L 、甲醇20m L,沸水浴上回流1h,放冷过滤,用甲醇冲洗烧瓶及滤器,将滤液和洗液合并于50m L 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用0.8μm 微孔滤膜过滤,吸取滤液10m L 置于100m L 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀即得.1.3 供试液的制备取银杏叶提取物干浸膏10g ,银杏叶缓释片和缺银杏叶空白对照缓释片各20片分别研细,取Ginkg o B iloba 胶囊20粒混匀,以上各供试品于120℃干燥至恒重,准确称取各供试品约0.2g ,按照芦丁标准液的制备方法制备各供试液.1.4 空白参比试液的制备准确吸取0.025mol H 2SO 410m L 于50m L 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,吸取10m L 置于100m L 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀即得.1.5 测定波长的选定将以上配制的标准液,供试液及空白参比溶液于紫外分光光度仪200～400nm 之间进行吸收图谱自动扫描,如图1所示.银杏叶提取物,银杏叶缓释片和Ginkgo B iloba 供试液在267±1nm 处有最大吸收峰,该吸收峰不受供试液放置时间图1 标准液与供试液紫外吸收光谱图1—芦丁标准品;2—Ginkgo Biloba;3—银杏叶提取物干浸膏;4—银杏叶缓释片第22卷第3期 武 汉 化 工 学 院 学 报 V ol.22 N o.32000年9月 J . W uhan Inst. Chem. Tech. Sep. 2000的影响,吸收峰位置稳定.芦丁标准液在其最大吸收峰255nm的下降部位267±1nm处有一肩峰,不受试液放置时间的影响,吸收峰位置稳定.将标准液和各供试液在267nm分别测定吸光度后,再按标准加入法将各供试液与标准液分别制成混合液,在同一波长处测定,A总=A1+A2符合郎白比尔定律,因此选267nm作为测定波长.银杏叶空白对照缓释片供试液和空白参比溶液在240～400nm处无吸收峰.1.6 芦丁标准液工作曲线的制定分别准确吸取1.2中制备的芦丁标准液1、2、3、4、5m L于10m L容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,依次在紫外分光光度仪267nm处,以空白参比溶液调零依次测定,仪器输出浓度方程为Co rc=K.DATA+BK=0.370 B=0.00 R2=0.999 1.7 供试液的测定准确吸取1.3中制备的银杏叶干浸膏,银杏叶缓释片,Ginkg Biloba供试液各1m L于10m L容量瓶中,加甲醇于刻度,摇匀.在紫外分光光度仪267nm处,以空白参比溶液调零,测定其吸光度,由仪器按1.6给出的浓度方程,输出各供试液的浓度.测定结果见表1.表1 样品总黄酮含量供 试 液平均含量/%(N=5)RSD/%银杏叶提取物干膏14.440.091银杏叶缓释片 6.840.645Ginkgo B ilo ba 2.000.74 1.8 回收实验将1.3中制备的银杏叶干浸膏,银杏叶缓释片,Ginkg B iloba供试液分别制备5份,其银杏黄酮的含量是根据17供试液测定方法测得,按标准添加法分别加入1.2中的芦丁标准液1m L,制成供试品与标准品的混合液,按17供试液测定方法依次测定,结果见表2:表2 回收率实验结果供 试 液平均回收率/%(N=5)RSD/%银杏叶提取物干膏100.21.34银杏叶缓释片100.71.52Ginkg o Biloba100.21.372 结果与讨论2.1 溶剂与测定结果的关系本实验中所用甲醇如有异物,需蒸馏后再使用.否则影响测定结果.2.2 试液的制备与测定结果的关系标准液和供试液如只用滤纸过滤,滤液中有细小滤纸纤维,影响回收实验测定结果,因此有微孔滤膜过滤.2.3含量测定结果分析由Healthy Lofe Co.生产的Ginkgo Biloba胶囊剂,产品说明书上标明每粒胶囊含24%银杏总黄酮提取物60mg,胶囊中除有银杏提取物外还含有其它辅料,根据笔者称样计算,胶囊剂中银杏总黄酮的含量约为2.2%,本实验测得胶囊剂中银杏黄酮为2.0%.因该制剂并未标明胶囊中银杏黄酮的准确含量,实验中将其作为供试品进行银杏黄酮的含量测定,是将该制剂作为参考,其目的是为了验证本实验中采用的含量测定方法是否可行.结果表明本实验中银杏黄酮测定方法是可行的.胶囊剂中的辅料是根据显微鉴别推测,并根据推测结果所得辅料按1.3供试液制备方法制备,按1.5方法用紫外分光光度仪进行图谱自动扫描,在240～400nm处无吸收峰.本实验所测银杏叶干膏含银杏黄酮质量比为14.44%,如要达到24%的含量,还需将提取物精制.参考文献:[1] 扬义方.银杏叶及其制剂的定性定量分析[J].国外医药(植物药分册),1995(4):147～152.[2] 钱天秀.银杏研究状况[J].国外医药(植物药分册),1997(4):157～161.[3] 刘素艳,等.银杏总黄酮含量的HP LC测定[J].中国医药工业杂志,1999(11):513～514. (下转第7页)4武汉化工学院学报第22卷方便教师及时检查学生的实验数据,随着电脑越来越普及,Microsoft Office 又是几乎每台电脑中必备的软件,我们相信,利用Excel 处理实验数据的方法会得到进一步的推广和应用.参考文献:[1] 邝生鲁.物理化学实验[M ].武汉:武汉工业大学出版社,1996.144～145.[2] 东北师范大学.物理化学实验[M ].北京:人民教育出版社,1982.155～158.[3] 华东理工大学.物理化学实验与技术[M ].上海:华东化工学院出版社,1990.69～72.Data handling of measurements of surfacetension of solution by Microsoft ExcelZHAO Chun fang(Depar tment o f Pharmaceutical Technology ,W uhan Institute of Chemical Techno log y ,W uhan,430074,China )Abstract:A method by Microsoft Ex cel to handle the data ex periment in physical chemistry measure-ments of surface tension of solutions based on the biggest bubbles w as introduced.And the method is con-venient ,fast and reliant.Key words :Microsoft Ex cel ;measurements of surface tension;ex perimental data in physical chemistry本文编辑:张汉平 (上接第4页)The determination of flavonoids contentfor ginkgo biloba with ultraviolet spectrophotometryLU Hong(Department of Pha rmaceutical T echnolog y ,Wuhan Institute of Ch emical Technolo gy ,W uhan 430073,China )Abstract :Taking w ith rutin as standard sample,the flavonoids content in the ginkgo biloba w ere deter-mined by means of ultraviolet spectropho tometry at 267nm.The method is easy,quick,and the repeata-bility is v ery g ood .Key words :ultraviolet spectrophotometry;co ntent m eassuring;ginkgo biloba flav onoids本文编辑:张汉平 7第3期赵春芳:用EX CEL 处理液体表面张力测定实验数据。
高效液相色谱内标法测定银杏叶制品中的总黄酮含量
２ ４ｉ Ａ ｘ ｒ ｏ ｍ ｔａｏ ａ ｄ ４ Ｄ ｏｐｏｉ ａｉ（ ： ）ｗ ｓｕ。 ａ ｍ ｂ ｅｐａｅ Ｒｅ ｌ ｔ ａ ｌ ｅｒ ｎｔ ５ ｒ ｍｉｕｅ ｆ ｅ ｎｌ ｎ ％ ｈｓｈｒ ｃ １ １ ａ ｓｄｓｅ ｉ ｈｓ ． ｓ ｔ Ｉ ｗ ｓ ｉ ａ ｅ ｍ． ｔ ｈ ０． ｃ ｄ ｌ ｕ ｓ ｎ ｉ ｈ
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［］ 滕 雁 ， 厦年 Ｈ Ｌ ２ 蒋 ＰＣ测定羟基 尊树碱 及 注 射渣的含培［］ Ｊ
银 杏 叶提取 物 （ ｘａｔ ｉ ｇ ｉｂ ，Ｇ ） 品 Ｅｔｃ Ｇｎｏ Ｂｌ ａ Ｅ Ｂ 制 ｒ ｋ ｏ 用于 治疗冠心 病 、 绞 痛 、 血 压 、 心 高 支气 管 哮喘 及 脑 血管病等有较好疗效…， 内外已有大量 商品制剂 国
直接测定 ， 以及高效 液相色谱法 测定黄酮水解后生 成的 ３ 种主要苷元来测算黄酮含量的报告。作者在 此基础上 通过 实验建 立了 以水杨酸为 内标物 测定 Ｅ Ｂ 品中黄酮 总量的 Ｈ Ｌ Ｇ 制 Ｐ Ｃ方法 ， 获得满 意的效
ＡＢＳ ＬＴ ： ｋ ｏ ｅｔ ｌ ｈａ卸 ）￡ ｍｅｈ ｄｗｉ ｔｍａ ｔｎ ａｄｆｒ ｅｅ ｉ ｉｇｔｅｆ ｖｎ ｉｓｆ ｎ ｅｅ ｔ ｃ ５ Ｃ Ａｌ Ｔ ｓ ｂｉ ｎ ａ ｓ Ｉ ｔｏ ｔ ｉ ｅ ｌｓ ｄ ｒ ｔｍｔ ｎ ａｏ ｏｄ ｕ ｄｉ ｔ ｘｒ ｔ ｈｎ ａ ｏｄ ｎ ｈ ｌ ｏ ｎｈ ａｓ
高效液相色谱内标法测ห้องสมุดไป่ตู้银杏叶制品中的总黄酮含量
银杏叶P.E中银杏黄酮含量测定方法(H)
FZD0117
银杏叶提取物中银杏黄酮（Total Flavonglycoside）含量测定方法一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动相：甲醇:水:磷酸(50:50:0.3，V/V)
检测波长：360nm
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品约3mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取银杏叶提取物样品约35mg于100mL 圆底烧瓶中，加入甲醇-25%盐酸(4：1)的混合溶液25ml，振摇使样品溶解后，置沸水浴回流30min，迅速冷却至室温，转移到50mL容量瓶中，用甲醇冲洗圆底烧瓶并定容，摇匀即得供试样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，槲皮素（Quercetin）保留时间约为13min，山奈酚（Kaempferol）约为21min 异鼠李素（Isorhamnetin）约为23min。
银杏黄酮含量按下式计算：
（2.5Q+2.59K+2.44I）Ws×2
银杏黄酮含量（%）= ×S
As×Wi
式中Q、K、I分别为样品中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的峰面积As、Ws分别为槲皮素对照品的峰面积和称样量（mg）
S为槲皮素对照品的纯度(%)
Wi为样品称取量（mg）。
银杏叶提取物在保健食品中总黄酮测定方法的应用
RF>L@>P E>LI=3B4#B U*FDI QJJP <=>’5%))858&S ,7.$,)"# EF>--GF> U??>I@ QFGD@ T-@>F-3B4#(>K>N-’efD--GeR>I=NJA5 &""&5 6.S 6!&$6!!#
参考文献：
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摘
要： 目的 根据保健食品中总黄酮分析方法， 对银杏叶总黄酮 的分析方法进行优化和改进。 方法 多因素综合分析考察。 结果与结论 在样品处理中， 各参数优化为： 上样量在 $"() （!"($)!",’*- . *+） ， 最佳洗脱速度为 ()/ 滴 . !$0， 洗 !"’*+ 脱体积为 ’#*+， 洗脱溶剂为石油醚和无水乙醇。 关键词： 聚酰胺柱， 银杏叶提取物， 总黄酮， 紫外分光光度法
收稿日期： #$$-*)$*#+ ’ 通讯联系人 ， 女， 主管药师， 研究方向： 中药保健品分析。 作者简介：刘小柔 （!,(,1 ）
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不同洗脱溶剂的考察
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分 析 检 测
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不同厂家聚酰胺粉的考察
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银杏叶中有效成分黄酮的研究
银杏叶中有效成分黄酮的提取研究及黄酮的检验和分析姬晨辉（内蒙古农业大学理学院内蒙古呼和浩特010018）摘要：银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采取乙醇提取总黄酮的方法，用分光光度法测定总黄酮的含量。
关键词：银杏叶总黄酮乙醇含量测定Abstract: Ginkgo biloba is our country's endemic plants, also known as maidenhair tree. Ginkgo biloba is the oldest Mesozoic relict plant Ginkgo biloba dried leaves. Ginkgo has gymnosperms living fossil. According to the "Compendium of Materia Medica" records, ginkgo fruit with convergence lung asthma, only enuresis, vaginal discharge effect. In medicine has a high value in use. Ginkgo biloba extract organic solvent extraction method, water extraction, dilute alkali or alkaline aqueous alcohol extraction, supercritical extraction, ultrasonic extraction, enzymatic and so on. This paper adopts ethanol extract flavonoids method, using spectrophotometric determination of total flavonoids.Key word s: Ginkgo biloba Flavonoids Ethanol Determination1 材料与方法1.1 试验材料银杏叶采集于自然生长的银杏树叶、75%酒精、石油醚、旋转蒸发器、丙酮、4～5碳烷基醇、醋酸酯1.2 试验方法1.2.1 银杏叶总黄酮提取率计算方法银杏叶总黄酮提取率（%）=提取液中心黄酮的重/提取所用银杏叶中总黄酮含量*100%。
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 . 4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（0.1mol/L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤1.1提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取10.0g，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量【摘要】目的建立复方银杏叶片中银杏总黄酮含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，用Symmetry C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm )，以甲醇0.4%磷酸溶液（52∶48）为流动相，流速为1.0 ml·min-1，检测波长360 nm ，柱温35℃。
结果该法线性关系良好，平均加样回收率为98.35 % ,RSD为1.17 % ( n = 5 )。
结论该法操作简便，分离效果好，结果准确，专属性强，可作为复方银杏叶片的质量控制方法。
【关键词】复方银杏叶片；黄酮；槲皮素；山柰素；异鼠李素；高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish the determination method of flavonoids in compound Ginkgo biloba Leaves Tablets .MethodsThe analysis was performed on aSymmetry C18 column（4.6 mm ×250 mm,5 μm） with methanol 0.4% phosphoric acid( 52:48 ) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml ·min-1, and at a column temperature of 35℃. The detection wavelength was 360nm.ResultsThe linearity of this method was good.The average recovery of added samples was 98.35 % with RSD 1.17 %. (n=5 ) .ConclusionThe method is convient with a good separating degree for the determination of flavonoids and can be used to evaluate the quality of compound Ginkgo biloba Leaves Tablets.Key words：Compound Ginkgo biloba LeavesTablets； Flavonoid； Quercetin ； Kaempferol； Isorhamnetin； HPLC复方银杏叶片是由银杏叶提取物和广西野葛根提取物等制成的复方制剂，具有活血化淤，降低血脂，清除自由基和抗衰老等功效和作用［1］。
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量
HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）法是一种常用的分析方法，常用于药物、食品、环境等领域的分析。
本文将使用HPLC法来测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
1. 实验仪器和试剂准备- 仪器：高效液相色谱仪（包括采样器、色谱柱、检测器、色谱软件等）- 试剂：甲醇、乙醇、乙腈、纯净水、银杏叶软胶囊样品2. 样品制备将银杏叶软胶囊样品取重量（大约0.5克），加入适量的甲醇或乙醇中，以达到合适的浓度。
然后使用超声波清洗仪进行超声提取，提取时间约15分钟。
提取液离心，取上清液。
如果需要，可以通过滤膜过滤以去除颗粒杂质。
3. 色谱条件设置- 色谱柱：C18反相色谱柱（5μm，4.6mm×250mm）- 流动相：甲醇-水（80:20）- 流速：1.0 mL/min- 检测波长：280 nm- 注射体积：20 μL- 初始梯度：0-10分钟，甲醇-水（80:20）- 梯度条件：10-25分钟，甲醇-水（60:40）25-35分钟，甲醇-水（50:50）35-40分钟，甲醇-水（30:70）40-45分钟，甲醇-水（20:80）45-55分钟，甲醇-水（10:90）4. 标准曲线绘制选取适量的外标总黄酮标准品，加入适量的甲醇或乙醇中，得到一系列的浓度。
分别进行HPLC分析，测量各浓度的峰面积，并绘制出标准曲线。
5. 样品测试用之前制备好的样品提取液进行HPLC分析。
将待测样品注入色谱柱，使用上述的色谱条件进行分析。
分析时重复进行3次实验，并计算出平均值。
6. 数据计算利用标准曲线上的峰面积和浓度，计算出待测样品中总黄酮的含量。
7. 结果和讨论通过HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量，得到了样品的峰面积。
通过比对标准曲线，可以计算出样品中总黄酮的含量。
通过以上步骤，我们可以使用HPLC法测定银杏叶软胶囊中总黄酮的含量。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种常见的中草药，被广泛用于治疗心血管疾病、脑血管疾病等疾病。
银杏叶中含有丰富的总黄酮醇苷，是其主要药效成分之一。
因此，测定银杏叶片中总黄酮醇苷的含量对于研究其药效作用具有重要意义。
本文旨在介绍一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法。
一、实验材料和仪器1.实验材料银杏叶片粉末、无水乙醇、二氯甲烷、硫酸、硝酸、硼酸、钠氢碳酸、碳酸钠、硫酸铜、硝酸铅、氢氧化钠、酚酞指示剂、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等。
2.仪器紫外分光光度计、高速离心机、旋光仪、恒温水浴器、电子天平、磁力搅拌器等。
二、实验步骤1.提取样品中的总黄酮醇苷取适量的银杏叶片粉末，用无水乙醇进行浸提，提取液在恒温水浴器中加热回收至干燥。
将干燥后的提取物用二氯甲烷和无水乙醇混合溶解，制备成10mg/mL的样品溶液。
2.测定样品中总黄酮醇苷的含量将样品溶液加入紫外分光光度计中，以350nm为波长进行测定。
同时取一定量的样品溶液，用硫酸进行水解反应，加入硝酸、硼酸、钠氢碳酸等试剂，然后用碳酸钠进行中和，加入硫酸铜、硝酸铅等试剂，用氢氧化钠进行沉淀，最后用酚酞指示剂进行滴定。
3.计算总黄酮醇苷的含量根据测定结果，计算样品中总黄酮醇苷的含量。
具体计算公式如下：总黄酮醇苷含量（mg/g）=（C×V×D）/m其中，C为滴定所用的氢氧化钠的浓度，V为样品溶液的体积，D 为稀释倍数，m为样品的质量。
三、实验结果与分析本实验所得到的银杏叶片中总黄酮醇苷的含量为XXmg/g。
该结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
同时，该实验方法具有可靠性高、操作简便等优点，适用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。
四、结论本文介绍了一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法，该方法具有可靠性高、操作简便等优点。
实验结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
银杏叶提取物中总黄酮测定方法的研究
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盐酸、磷酸 ，分析纯 ；甲醇，色谱纯 槲皮素标
杏叶制成 的药 品 如德 国产金 纳 多 （ Ｉ Ａ Ｏ 法 准 品 （ Ｇ Ｎ Ｔ Ｎ） 中国药 品 生物 制 品检 定所 ） 银 杏 叶黄酮精 品 耳产达那康 ‘ＡＡ Ａ ＴＮ Ｋ ）等 但 是对 于银 杏 叶制剂 的质 （ 江苏邳 州 富伟 生化制 品有限公 司 ，２ ． 儿 ） 银 杏 ５
高效液相色谱技术 ｓ １ ，只是所用的洗脱液和检测手
：检 测波 长 ３ ｍ：流速 ０ ６ｎ 段不 同。进 行黄酮测 定时 ，一般要进 行水解 ，水解 的 学 院大连 化学 物理 研 究所 ）
好坏对于检测至关重要 。与普通 的Ｈ Ｌ 相比 灌注 １ ５ｌｍ ｎ ＰＣ ．ｍ ／ｉ；洗 脱液 ０５ ．％磷 酸水 溶液 一 甲醇 ‘ ０６ ， ４ ／０
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ｕ ｉｇｅ ｔｒ ａ ｓａ ｄ ｒ ｔｏ ． ｅｃ ｌｍ ｎ￣ａ ａ ｋ ｄｗｉ ４６ ｕ ｓｎ ｘｅｎ ｌ ｔｎ ａｄ ｍｅｈ ｄ Ｔｈ ｏｕ ． ｓｐ ｃ ｅ ｔ ＣＩ｛ ． ｍ × ２ ０ ｖ ｈ Ｒ ５ ｍｍ ）Ｔ ｅｍｏ ｉ ｈｌ ｏ ｓｓｅ ｌ ｈ ｂ ｌ ｐ ｆｅｃ ｎ ｉｔｄｏ ｅ ｓ
ｑ ａ ｔ：ｏ ｓ ｐｅａ ｄｔｅａｅ ｆ ｅ ｋｖｅｅ ｉ ｌ ｅ ｒ ｅａｉｎ ｈｐｆｏ ２ｕｇｍｌｏＩ ０ ｕ ｎ ｉ＇ ｆ ￣ ｌ ｎ ｈ ｒａｏ ｐ ａ ，ｒ ｎ ｉ ａ ｌｔ ｓ ｉ ｍ ／ 【 ｖ ＇ ｎ ｒ ｏ ｒ ８ ｍｌＴｈ ｖ ｒｇ ｘｏ ｅ＇ｖａ ｅａ ｅａ ｅｒ ：ｖ ｌ ｃｓ ￣ ｙ
银杏叶总黄酮提取方法的比较研究_齐丽霞
江西农业学报 2007,19(1):80~83A cta A gr i culturae Jiangx i银杏叶总黄酮提取方法的比较研究齐丽霞1,3,郑彦峰2,3,谈锋3*收稿日期:2006-06-28作者简介:齐丽霞(1983-),女,江西南昌人,从事应用生物工程学教研工作。
*通讯作者:谈锋。
(1.揭阳职业技术学院应用生物工程系,广东揭阳522000;2.四川大学生命科学学院,四川成都610064;3.西南大学生命科学学院、三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715)摘 要:采用正交试验法研究了溶剂乙醇的浓度、浸泡时间以及超声波提取时间3个因素对提取银杏叶中总黄酮含量的影响。
结果表明:银杏叶总黄酮的最佳提取工艺是60%的乙醇浸泡10h 后用超声波法提取25m i n 。
用ZTC1+1天然澄清剂除杂,虽然回收率减低了25.81个百分点,但使银杏叶黄酮的纯度提高了7.13个百分点。
微波水提取的效果优于超声乙醇提取和超声水提取。
关键词:银杏叶;总黄酮;超声波;微波;提取工艺中图分类号:S567.9 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2007)01-0080-04Co mparis on of Extraction Technology of F lavones fro m G inkgo LeavesQ I L i-x i a 1,3,ZHENG Y an-feng 2,3,TAN F eng 3*(1.D epart m ent of A ppli ed B i o l og i ca l Eng i neer i ng ,Ji eyang Vo cational and Technical Co lleg e ,G uangdong P rov i nce ,Ji eyang 522000,Ch i na ;2.Co ll ege of L ife Sc i ence ,S i chuan Un i versity ,Chengdu 610064,Chi na ;3.Co llege of L ife Science ,South w est U n i versity ,K ey L aboratory o f Eco-environ m ents i n Three G orges R eservo ir Reg i on ,M i nistry o f Educa tion ,Chongqi ng 400715,Ch i na)Abstract :The orthogonal test w as adopted to study t he effec ts of t hree factors i ncluding ethano l concentrati on ,soaki ng ti m e and extracti ng ti m e w ith u ltrason i c on t he ex tracti on rate o f flavones from g i nkgo .T he results showed that the best techno logy o f ex tracti ng fl avono i d fro m g i nkgo leaves w as extracti ng 25m i n after soak i ng for 10h w it h 60%e t hano.l N atural clar ifi er(ZTC1+1)reduced t he recovery rate o f fl avones by 25.81%,but it i ncreased the pur i ty by 7.13%.M icrowave extraction had m ore advantages than u ltrason i c extraction .K ey words :G i nkgo leaves ;F l avones ;U ltrason ic ;M icrow ave ;Ex tracti on technology银杏(Ginkgo biloba L .)原产我国,系侏罗纪的孑遗植物,以野生种存在于我国浙江天目山、大别山等地。
高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量
高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷含量宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【摘要】目的建立银杏叶提取物中总黄酮醇苷的HPLC含量测定方法.方法采用Hypersil ODS2色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以甲醇-0.4％磷酸溶液(55∶45)为流动相,检测波长360 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃.结果槲皮素、山奈酚、异鼠李素进样量分别在10.0～60.0 μg/ml、10.0～60.0 μg/ml、1.0～ 30.0 μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.42％、99.92％、98.11％.结论本方法简单、准确,可以用于银杏叶提取物中总黄酮醇苷的定量分析.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2016(037)001【总页数】3页(P33-35)【关键词】高效液相色谱法;银杏叶提取物;总黄酮醇苷【作者】宋唯唯;刘芬芬;刘彩红【作者单位】泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016【正文语种】中文【中图分类】R917银杏叶提取物(GBE)是银杏科植物银杏 Ginkgo biloba.L.的干燥叶经加工制成的提取物[1],具有扩张冠状动脉血管、改善脑循环及明显的抗血小板活化因子等独特的药理作用，主要活性成分为黄酮类和萜类内酯[2]，它们是制定银杏叶提取物和制剂质量标准的重要依据。
国内外制药行业所用的GBE的含量标准为:银杏黄酮质量分数 24%、银杏萜内酯质量分数 6%。
不论是为衡量提取工艺的优劣和控制GBE的质量,还是为后续药理药效的实验研究提供可靠的数据,建立一种能稳定、可靠的定量分析其主要药效物质黄酮类化合物的方法是十分必要的。
银杏叶提取物含有 20多种黄酮类化合物,通常都以糖苷的形式存在,测定每一种黄酮成分的含量十分复杂,这些成分的苷元部分为槲皮素、山萘酚、异鼠李素，通过测定样品酸水解后三种主要甙元含量，再乘以一定的因子换算成总黄酮的含量[3]，是国际上公认的衡量银杏叶提取物内在品质的依据。
紫外分光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量
ｅ ｉｉ ｎ ｎ ｔ ｏ ｄｒ ｐ ａ ａ ｉ ｔ ｎ ｅ ｏ ｅ ｉ ｃ ｎ ｂ ｓ ｄ ａ ｕ ｌ ｙｃ ｎ ｒ ｌ ｏ ｉ ｒ ｐ ｒ ｔ ｎ ｆ ｃ ｅ ｔ ｄ ｗｉ ｇ ｏ ｅ ｅ ｔｂ ｌ ｙａ ｄ ｃ ｖ ｒ ， ａ ｅｕ ｅ ｓｑ ａｉ ｏ ｔ ｒ ｈ ｓｐ ｅ ａａ ｉ 。 ａ ｈ ｉ ｙ ｔ ｏｆ ｔ ｏ Ｋｅ ｒ ｓ Ｇｉ ｋ ｏｂ ｌ ｂ ａ ｅ ； ｈ ｔ ｌ ｌｖ ｎ ｉ ｓ ＵＶ ｍｅｈ ｄ ｅｅ ｍｉ ａ ｉｎ ｏ ｏ ｔｎ ｙ ｗｏ ｄ ： ｎ ｇ ｉ ａＬ ｌ ｖ ｓ Ｔ ｅｔ ａ ａ ｏ ｏｄ ； ｔ ｏ ；ｄ ｔ ｒ ｎ ｔ ｆ ｎ ｅ 物具 有 捕获 游 离基 和抑 制血 小板 活
０ ２ １０Ｃ干燥至恒重 ） ５ ｌ ．５ ０ ｇ（２ 。 置 ０ 容量瓶 中 ， ｍ 加 ７ ％乙醇适量 ， ０ 水浴加热 ， 溶解 ， 放冷 ， ７ ％乙醇 用 ０ 稀释至刻度 ， 摇匀 ， 配制成 Ｏ ｇ ｍ 的对照 品溶 ．ｍ ／ ｌ ５ 液。 ． ２２ 供 试 品 溶 液 的 配 制 精 密 称 取 银 杏 叶 ５１ ０ ． ． ． ４ｇ ０
至 １０ｍｌ ０ 的锥 形 瓶 中 ， ７ 加 ０％乙醇 ７ ， 声 ４ ５ｍｌ 超 ５
ｍｎ 冷却 ， ｉ ， 陷 过滤 ， 滤液蒸干 ， ７ 用 ０％乙醇定容 于 １０ ｌ ０ 容量瓶 中， ｍ 作为供试品溶液。 ２ 测 定波 长的选择 精 密移 取对 照 品溶 液 ２） ． ３ ． （ ０ ｍ１ １ ｍｌ 置 ０ 容量 瓶 中 ， 序 依 次加人 ５％Ｎ Ｎ 按顺 ａ Ｏ 溶
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究
银杏叶中总黄酮的提取工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中总黄酮是其主要有效成分之一。
因此，提取银杏叶中的总黄酮具有重要的研究价值和应用前景。
本文将介绍银杏叶中总黄酮的提取工艺研究。
一、总黄酮的提取方法目前，常用的总黄酮提取方法主要有超声波法、微波法、超临界萃取法、水提法、乙醇提法等。
其中，乙醇提法是最常用的方法之一，其操作简单、成本低廉、提取效果较好。
二、提取工艺的优化1.提取溶剂的选择乙醇浓度是影响提取效果的重要因素之一。
一般来说，乙醇浓度越高，提取效果越好。
但是，过高的乙醇浓度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取溶剂的选择上进行优化。
2.提取时间的控制提取时间是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取时间越长，提取效果越好。
但是，过长的提取时间会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取时间的控制上进行优化。
3.提取温度的控制提取温度是影响提取效果的另一个重要因素。
一般来说，提取温度越高，提取效果越好。
但是，过高的提取温度会导致提取物中杂质含量增加，从而影响提取效果。
因此，需要在提取温度的控制上进行优化。
三、总结总黄酮是银杏叶中的主要有效成分之一，其提取工艺的优化对于提高提取效果具有重要的意义。
在提取工艺的优化过程中，需要选择合适的提取溶剂、控制提取时间和提取温度，以达到最佳的提取效果。
未来，还需要进一步深入研究银杏叶中总黄酮的提取工艺，以提高其应用价值。
银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶中总黄酮的提取
1 银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶是以银杏树(Ginkgo biloba L.)叶片为原料，是世界上著名的汉药，具有活血、散瘀、抗氧化和神经保护等功效。
其中，总黄酮是其最重要的活性成分之一，具有明显的保护神经及消除氧自由基的功效。
因此，总黄酮的提取技术对于银杏叶药材活性成分的研究具有重要意义。
2 材料与方法
银杏叶样品（湖南洞庭湖产）500克，70%乙醇(200mL)，6次甲醇-水混合溶剂，1次甲醇提取。
多相混合物高效液相色谱法，仪器模式为Agilent1220树脂柱（AgilentC18(250mm×4.6mm，5μm)），流动相为缓冲溶液：锂溶液50mmol/L，流速A=0.2mL/min，B=0.2mL/min;从低比重A=0%，到高比重B=25%，线性升温时间15min。
常规参数为254nm检测器，测定波长320nm处的量值;样品灌注量20μL。
3 结果
提取中，银杏叶中总黄酮的提取量为2.37g，其含量约为0.47%。
除此之外，还检测到银杏叶中其他成分，其中主要成分为黄酮类化合物RG3、G4。
4 结论
通过对银杏叶中总黄酮的提取，证明了多相混合物高效液相色谱法是一个实用的提取技术，能够在银杏叶中有效提取总黄酮。
这种技术无论在提取效率，还是提取纯度方面，都获得较高的效果。
银杏叶中黄酮的提取原理及方法
银杏叶中黄酮的提取原理及方法SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#银杏叶中黄酮提取及含量测定一、实验目的提取银杏叶中的总黄酮并测定其含量。
二、实验原理银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法；韩玉谦等采用超临界流体萃取法，在70%乙醇溶液中加热回流法和 CO2 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84 . 4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多；乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到 8 6 . 7 %。
银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。
分光光度法自20世纪 9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法[1]。
本实验采用乙醇作溶剂进行索氏提取，建立了用Al(NO3)3显色法对芦丁标准品和银杏叶提取液进行光谱扫描测定银杏叶总黄酮含量的方法[2]。
三、实验仪器和试剂材料：银杏叶粉末50g试剂：标准芦丁样品，无水乙醇（600ml），50mlAl(NO3)3（L），乙醚，5%NaNO2溶液，10%AL(NO3)3，4%NaOH溶液。
仪器：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、烘箱、烧杯、容量瓶（100ml1个、50ml1个、10ml6个）、索氏提取器、减压蒸馏装置、锥形瓶、沸石等。
四、实验步骤提取银杏叶中总黄酮（1）将银杏叶洗净, 在103℃下烘干至恒重,用研钵捣碎制得银杏叶粉（2）准确称取，置于索氏提取器中，按下列条件加热回流提取：乙醇浓度80％，料液比1：20(g／ml)，回流温度85℃，回流时间2 h，平行进行1~3次实验。
银杏叶提取物总黄酮含量分析方法的研究
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银 杏 叶提 取 物 总黄 酮 含 量 分析 方 法 的研 究
郑 启 波
（ 尔滨仁 皇药业 有 限公 司 ， 哈 黑龙 江 哈尔滨 １０３ ） ５００
摘要 确定银 杏叶提 取物总黄酮含量测定方法。用紫外可见分光光度 法和 高效液相 色谱 法对提取物 中的银 杏叶总黄酮 含 量进行测定 ， 并相互 比较 ， 确立紫外可见分光光 度法为快速 、 简便 、 准确的方法 ， 为银 杏叶总黄酮含 量测定的常用方法。 作
Ｓ ｂｅｔｏ ｅｓ ｒｎ ｔｏ ｆＧｉｋ ｏ ｕ ｊｃ ｎＭ ａｕ ｉｇＭｅｈ ｄ ｏ ｎ ｇ
Ｂｉｏ ａ Ｅｘ ｒ ｃ ａ ｏ ｏ ｄ ｎ ｅ ｔ ｌ ｂ ｔ ａ ｔＦｌ ｖ ｎ ｉ ｓ Ｃｏ ｔ ｎ
Ｚ Ｎ Ｑｂ ＨＥ ｉｏ （ ａｂ ｅｈ ａｇＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｏ ，ｔ． Ｈ ｒｉ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ Ｈ ｒｉ Ｒ ｎｕｎ ｈｒ ａｅｔ ａ Ｃ ． Ｌｄ ， ａｂｎ１０ ３ ，ｈｎ ） ｎ ｃ
银杏叶为银杏科植物 ， 味苦 、 甘涩 、 性平 ， 活血养 心、 敛肺 涩肠 。主治胸痹心痛 ， 咳痰嗽 ， 泻痢疾 。银 杏 叶提取 物 喘 泄 （Ｇ ） Ｅ Ｂ 具有广泛 的药 理作 用 ， 其提取物 （ ｘ ａｔ ｆ ｉｋｏＢ— ｅｔ ｃ ｏ ｎ ｇ ｉ ｒ Ｇ ｌｂ ，Ｇ 中主要 活性成分 为黄酮类和萜类内酯。它们在改 ｏａ Ｅ Ｂ） 善心脑血管循环 、 老年性外周循环障碍及老年痴呆症方 面具 有很好 的疗效 ， 抑制血小板凝聚酶 、 菌 、 有 抗 抗病毒 、 氧化 、 抗
关键词 银 杏 叶 总 黄 酮 ； 光 光 度 法 ； 效 液相 色谱 法 ； 取 工 艺 分 高 提
银杏叶中黄酮提取方法
杨隆荷 200913007006银杏叶黄酮的研究程序溶剂提取法：国内外使用最广泛的方法，步骤多、周期长、产率低、产品中有机溶剂易残留。
溶剂系统主要有乙醇，水溶液、丙酮-水溶液、NaOH-水溶液、NaOH-乙醇等。
精提物常在粗提物制备基础上精制，常用液-液提取法、沉淀法和吸附．洗脱法。
以60％丙酮为起始溶剂粗提取，再脱脂、去银杏酚酸等15道工艺制成提取物。
NaOH-水溶液提取效果最好，NaOH-乙醇溶液次之，正丁醇萃取水溶液中银杏黄酮苷，获得最佳萃取条件为萃取5 min温度60℃4次，萃取物中黄酮苷含量为57％。
V水：V正丙醇=1:25最佳。
银杏叶精提物树脂吸附纯化法以石油醚回流提取，再以80％乙醇回流提取，减压浓缩，新型澄清剂沉降，树脂分级吸附，pH值为3—4酸水和酸性25％乙醇洗涤，75％乙醇洗脱，喷雾干燥具体方法：将银杏叶洗净，于60℃烘干至恒重，粉碎，过50目筛。
称取粉末25 g，置于索氏提取器中恒重，粉碎，过50目筛。
称取粉末25 g，置于索氏提取器中加入60％乙醇至250．0 ml，80℃下回流提取3．0 h，蒸馏回收乙醇，并用活性炭脱色，得银杏叶黄酮提取物。
乙醇浓度为50％一70％时,提取率随浓度增加提高，当浓度70％时提取率达最大。
随水浴温度升高总黄酮提取率快速增加。
当温度80℃时提取率达最大。
提取时间为三小时为佳。
黄酮及其甙类预实验方法（1）盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg →红色（2）三氯化铝反应：+AlCl3 →黄色（3）浓氨水反应：+NH3 →亮黄或橙色（4）薄层层析检查：吸附剂——聚酰胺或硅胶G（1）盐酸一镁（或锌）粉试验：取检品的乙醇溶液1ml，加放少量镁粉（或锌粉），然后加浓盐酸4－5滴，置沸水浴中加热2－3分钟，如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙（以同法不加镁或粉做一对照，如两管都显红色则有花色素存在。
如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色，即证明含花色素）。
黄酮类的乙醇溶液，在盐酸存在的情况下，能被镁粉还原，生成花色甙元而呈现红色或紫色反应（个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色）。