柱形病对黄颡鱼血液生化指标的影响_程辉辉_李大鹏

第46卷第2期Vol.46No.2淡水渔业Freshwater Fisheries2016年3月Mar.2016收稿日期：2015－05－23；修订日期：2015－11－10资助项目：“十二五”农村领域国家科技计划课题（2012BAD25B06）；中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（2014PY041）；湖北省自然科学基金重点项目（2012FFA029）第一作者简介：程辉辉（1990－），男，硕士研究生，专业方向为水产养殖。

E-mail ：chhwoter@通讯作者：李大鹏。

E-mail ：ldp@ ·研究简报·柱形病对黄颡鱼血液生化指标的影响程辉辉，李大鹏（华中农业大学水产学院，池塘健康养殖湖北省工程实验室，淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心，农业部淡水生物繁育重点实验室，武汉430070）摘要：为探究柱形病对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco ）生理机能的影响，随机选取患病和健康黄颡鱼各10尾，采集其血液，静置后离心分离血清以测定血液生化指标如皮质醇、乳酸（LD ）含量，乳酸脱氢酶（LDH ）、碱性磷酸酶（ALP ）活性，葡萄糖、白蛋白（ALB ）、总蛋白（TP ）、尿素氮（BUN ）、总胆固醇（TCHO ）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC ）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC ）含量，谷草转氨酶（AST ）、谷丙转氨酶（ALT ）活性。

结果显示：患病黄颡鱼血清皮质醇浓度和LDH 、AST 活性均极显著高于健康鱼，LD 含量和ALT 活性显著高于健康鱼。

与健康鱼相比，患病黄颡鱼血清葡萄糖含量极显著降低，而HDLC 、LDLC 、TCHO 、ALB 、TP 、BUN 浓度和ALP 活性无显著差异。

健康鱼肝细胞呈近圆形，形状较规则，细胞界线清晰，细胞核多位于细胞中央，呈圆形或椭圆形，肝细胞以中央静脉为中心形成放射状排列。

患病鱼肝细胞出现局部坏死、空泡化，形成坏死灶，伴有大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润。

结果表明：柱状黄杆菌感染可引起黄颡鱼鱼体显著的应激反应，并引起鱼体肝脏损伤。

关键词：黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco ）；柱形病；生化指标；皮质醇；肝脏组织中图分类号：S941.42文献标识码：A文章编号：1000-6907-（2016）02-0103-04The influence of columnaris disease on blood biochemicalprofiles in Pelteobagrus fulvidracoCHENG Hui-hui ，LI Da-peng（College of Fisheries ，Huazhong Agricultural University /Engineering Laboratory of Pond Aquaculture in Hubei Province /Freshwater Aquaculture Collaborative Innovation Center of Hubei Province /Key Laboratory of Freshwater Animal Breeding ，Ministry of Agriculture ，Wuhan 430070，China ）Abstract ：To investigate the effects of columnaris disease on physiological function in yellow catfish （Pelteobagrus fulvidra-co ），the sick and healthy yellow catfish ，respectively 10individuals ，were randomly selected to collect its blood for serum indices comparison．The serum indices included cortisol ，lactic acid （LD ），lactate dehydrogenase （LDH ），alkaline phosphatase （ALP ），glucose ，albumin （ALB ），total protein （TP ），blood urea nitrogen （BUN ），total cholesterol （TCHO ），high density lipoprotein cholesterol （HDLC ），low density lipoprotein cholesterol （LDLC ），aspartate amin-otransferase （AST ），alanine aminotransferase （ALT ）．The results showed that level of cortisol ，activities of LDH and AST in sick fish increased extremely significantly ，and LD content ，ALT activity increased significantly．Compared with healthy fish ，the glucose content in sick fish decreased significantly ，but the levels of HDLC ，LDLC ，TCHO ，ALB ，TP ，BUN and ALP activity had no significant difference．The liver cells of healthy fish were nearly round ，with regular shape and clear cell boundaries．Its cell nuclei were in the central and round or oval．Liver cells were radially arranged with center of central vein．The liver cells of diseased fish showed partial necrosis ，vacuolization ，accompanied by a large number of neutrophils and lymphocytes．The results suggested that it provoked significant stress response and liver damage in yellow catfish infected with Flavobacterium cloumnare ．DOI:10.13721/ki.dsyy.2016.02.018Key words：Pelteobagrus fulvidraco；columnaris disease；biochemical indicates；cortisol；hepatic tissue黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）隶属于鲇形目鮠科黄颡鱼属，广泛分布于在我国长江、珠江、黑龙江流域江河湖泊等水域，为我国名特经济鱼类之一。

在黄颡鱼人工养殖过程中，由于养殖环境恶化等原因，黄颡鱼病害时有发生［1］，常见有锚头鳋病、细管虫病、车轮虫病等［2］寄生虫性疾病以及出血性水肿病、肠炎病、烂鳃病［3］等细菌性疾病。

柱形病病原菌为柱状黄杆菌（Flavobacteriumcloumnare），主要危害鱼类的鳃，多见于斑点叉尾（Ietalurus punetaus）［4］，但柱形病引起黄颡鱼鱼体体表溃疡的病例鲜有报道。

鱼类自然感染柱状黄杆菌一般发生在水温大于20ħ的水环境中，而当水体温度为6 12ħ时，则较少感染发病［4］。

本研究对低水温（10 15ħ）条件下发病的黄颡鱼柱形病患病和健康鱼的血液生化指标进行对比分析，以探讨柱形病对黄颡鱼生理机能的影响特性，为黄颡鱼细菌性疾病的诊断和治疗提供科学依据。

1材料与方法1.1实验鱼黄颡鱼来源于湖北省公安县崇湖渔场，暂养于华中农业大学水产学院教学实习基地人工生态试验系统养殖缸内，暂养期间部分黄颡鱼自然感染柱状黄杆菌而患病并出现死亡，当时水温为10 15ħ。

1.2实验方法1.2.1采血和血清制备随机选取黄颡鱼柱形病患病鱼，体质量为（112.13ʃ31.13）g，体长（18.80ʃ1.86）cm和健康鱼，体质量为（108.41ʃ39.57）g，体长（18.67ʃ2.68）cm，各10尾（患病和健康鱼体质量和体长均无显著差异），采用MS-222（160mg/L）进行鱼体麻醉，尾动脉采血1mL左右，室温静置至血液分层后，1500r/min离心30min分离血清用于血液生化指标的测定。

1.2.2血液生化指标的测定血清皮质醇浓度采用竞争性放射性免疫测定法测定，检测试剂盒购自北京北方生物技术研究所。

乳酸（LD）含量，乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）活性均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定，相应操作参照说明书进行。

葡萄糖、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TCHO）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）含量，谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性指标均采用Chemix-800型全自动生化分析仪（日本希森美康公司）测定，相应操作参照说明书进行。

1.2.3肝脏组织石蜡切片观察解剖黄颡鱼柱形病患病和健康鱼鱼体，分离肝脏，采集肝脏样品（大小为3mmˑ3mmˑ3mm）于Bouin氏液固定24h，普通石蜡（56ħ）包埋、ＲN2135型切片机（德国Leica公司）连续切片（厚度5 6μm）、H.E染色后，最后用80i荧光显微镜（日本Nikon公司）观察并拍照记录。

1.3数据分析使用SPSS19.0软件独立样本T检验对数据进行分析，数据以平均值ʃ标准差形式表示，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

2结果2.1黄颡鱼柱形病患病鱼症状描述患病黄颡鱼除尾部背肌处皮肤斑块状褪色溃烂外，体色发黑，头部尤为明显；口腔、下颌和下颌至腹部粘附黄褐色物质，将其刮落，可观察到暴露出来的皮肤出现不同程度的腐烂；眼睛凹陷，体表黏液增多，但未见鳃丝肿胀糜烂等异常情况；少数病鱼腹部胸鳍处出现明显的破溃。

濒死黄颡鱼离群独游，行动缓慢，对外界刺激反应迟钝，偶见病鱼旋转翻滚。

解剖鱼体可见：症状轻微者，内脏器官无明显病变；症状严重者，肠壁变薄、肠道内充满黄色黏液，但未见腹水，其脂肪和肌肉组织也无出血现象。