人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)
vegf名词解释
vegf名词解释
VEGF，全称血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor），是一类具有高度生物活性的糖蛋白。
它是1989年由Ferrara等人在牛垂体
中纯化出来的一种蛋白质，并因其能够促进血管内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成而得名。
VEGF是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，具有促进血管通透性
增加、细胞外基质变性、血管内皮细胞迁移、增殖和血管形成等作用。
由于血管内皮生长因子会诱导肿瘤组织的血管生长，增加肿瘤血供，进而促进肿瘤的生长和转移，因此通过抑制血管内皮生长因子可以抑制肿瘤的生长。
临床中会使用抗血管内皮生长因子抗体如贝伐单抗等，用于肿瘤的治疗。
以上内容仅供参考，建议查阅关于VEGF的文献资料或咨询相关领域专家获取更全面和准确的信息。
血管内皮生长因子检测45
血管内皮生长因子检测45（最新版）目录一、血管内皮生长因子的概念二、血管内皮生长因子的作用三、血管内皮生长因子的检测方法四、血管内皮生长因子检测的意义五、结论正文一、血管内皮生长因子的概念血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，简称VEGF）是一种在血管内皮细胞中表达的蛋白质，它可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。
在生理过程中，血管内皮生长因子对于血管的生长和发育具有重要的调节作用。
二、血管内皮生长因子的作用血管内皮生长因子主要有以下作用：1.促进血管内皮细胞的增殖和迁移：血管内皮生长因子可以刺激血管内皮细胞增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。
2.促进淋巴管的形成：血管内皮生长因子可以与淋巴细胞结合，通过与血管内皮生长因子受体结合，诱导淋巴管的形成。
3.参与肿瘤生长和转移：血管内皮生长因子在肿瘤生长和转移过程中发挥重要作用，它可以促进肿瘤血管的发生和生长，从而为肿瘤提供营养和氧气，促进肿瘤的生长和转移。
三、血管内皮生长因子的检测方法血管内皮生长因子的检测方法主要包括以下几种：1.免疫学检测方法：如酶联免疫吸附试验（ELISA）等，通过检测血液或组织中血管内皮生长因子的表达水平，了解其含量。
2.实时荧光定量 PCR 法：通过检测血管内皮生长因子 mRNA 的表达水平，了解其基因表达情况。
3.蛋白质印迹法：通过检测蛋白质表达水平，了解血管内皮生长因子的含量。
四、血管内皮生长因子检测的意义血管内皮生长因子检测对于了解血管内皮生长因子在疾病发生和发展中的作用具有重要意义，它可以：1.诊断和监测肿瘤：血管内皮生长因子在肿瘤发生和转移过程中发挥重要作用，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解肿瘤的发生和转移情况，为肿瘤的诊断和监测提供依据。
2.评估治疗效果：在治疗过程中，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以评估治疗的有效性。
3.研究血管发生和生长的机制：通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解血管发生和生长的机制，为相关领域的研究提供依据。
人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书
产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。
开封后，保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
vegf正常值范围
vegf正常值范围VEGF（vascular endothelial growth factor）是一种重要的细胞因子，它在血管生成和维持方面起着重要作用。
正常情况下，VEGF 的水平处于一定的范围内，这对于维持身体各个系统的正常功能至关重要。
本文将针对VEGF的正常值范围进行详细讨论。
VEGF是由各种细胞产生的蛋白质，它对于血管内皮细胞的增殖、迁移和存活起着关键作用。
通过促进新血管的形成，VEGF在胚胎发育、组织修复和肿瘤生长等过程中发挥着重要作用。
然而，当VEGF的水平超出正常范围时，就可能导致一系列疾病的发生。
正常情况下，VEGF的浓度在血浆中较低，大约在15-100 pg/mL 之间。
这个范围是通过许多研究得出的，并且在不同实验室之间可能会有一定的差异。
然而，一般来说，如果VEGF的浓度超过100 pg/mL，就可能意味着存在某种异常情况。
VEGF的正常值范围可以在临床诊断和治疗中发挥重要作用。
例如，在心脏病患者中，测量血液中VEGF的浓度可以帮助医生评估患者的病情和预后。
如果VEGF的水平过高，可能意味着存在心脏病的并发症或病情进展。
相反，如果VEGF的水平过低，可能表明治疗效果不佳或存在其他健康问题。
除了心脏病，VEGF的异常水平还与其他一些疾病和病理过程有关。
例如，一些研究表明，癌症患者的血浆中VEGF的水平通常较高。
这是因为肿瘤细胞可以分泌大量的VEGF，以促进新血管的形成，从而满足肿瘤的生长和转移所需的营养和氧气。
因此，测量VEGF 的水平可以作为评估肿瘤严重程度和预测预后的指标之一。
一些炎症性疾病和自身免疫性疾病也与VEGF的异常水平有关。
例如，风湿性关节炎患者的关节滑液中VEGF的浓度通常较高。
这是因为炎症过程中，细胞会释放出大量的VEGF，以促进血管生成和炎症细胞的迁移。
因此，测量VEGF的水平可以帮助评估炎症的严重程度和指导治疗方案的选择。
VEGF的正常值范围在15-100 pg/mL之间，超出这个范围可能意味着存在某种疾病或病理过程。
血管内表皮生长因子检测原理
血管内表皮生长因子检测原理英文回答：The detection principle of vascular endothelial growth factor (VEGF) involves measuring the levels of this important growth factor in the blood. VEGF is a proteinthat plays a crucial role in the formation of new blood vessels, a process known as angiogenesis.There are several methods for detecting VEGF in the blood, with the most common being enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In ELISA, a specific antibody that binds to VEGF is coated onto a plate. Then, the blood sample is added, and if VEGF is present, it will bind to the antibody. A second antibody linked to an enzyme is then added, and a substrate for the enzyme is added, resultingin a color change that indicates the presence and amount of VEGF in the sample.Another method for detecting VEGF is through the use ofa protein microarray. This technique involves spotting tiny amounts of VEGF-specific antibodies onto a chip, which can then be exposed to the blood sample. If VEGF is present, it will bind to the antibodies on the chip, and this binding can be detected using fluorescent or chemiluminescent signals.In summary, the detection of VEGF in the blood involves using specific antibodies to capture and measure the levels of this important growth factor. These methods are crucial for understanding the role of VEGF in various diseases and for monitoring the response to VEGF-targeted therapies.中文回答：血管内皮生长因子（VEGF）的检测原理涉及测量血液中这一重要生长因子的水平。
血管内皮生长因子VEGF检测临床意义和检测优势
血管内皮生长因子VEGF检测临床意义和检测优势血管内皮生长因子是一种具有高度生物活性的功能性糖蛋白。
它是特异性的、生理作用强大的内皮细胞有丝分裂原，能作用于血管内皮细胞，使其增殖、迁移、管腔形成，参与血管生成并使毛细血管通透性增加。
它可致肿瘤血管异常生长，阻碍抗肿瘤药物有效输送至肿瘤组织内，并可刺激新生血管生长因子增加。
肿瘤与血管的关系：肿瘤生长和转移原理一方面，如果没有足够的血液供应和营养，肿瘤是长不大的，也就1-2mm3的样子。
肿瘤生长必须依赖血管的生成来提供必要的营养物质和氧气；另一方面，肿瘤的转移也需要血管通透性的改变来实现。
由此可见，肿瘤的生长、转移与血管是密切相关的。
VEGF检测的临床意义1、肿瘤的早期筛查。
肿瘤的生长、转移十分迅速，当肿瘤细胞团向实体肿瘤转化过程中，肿瘤细胞会产生大量VEGF，促进新生血管的生成，此时多为肿瘤Tis期和T1期，是肿瘤早期筛查的最佳时期，并可通过现有的临床手段予以确诊。
早期筛查可提高肿瘤患者的生存率，延长生存时间。
2、肿瘤的广谱性筛查。
有血管新生趋势变化，就伴随VEGF浓度变化。
VEGF可筛查几乎所有实体肿瘤，它的广谱性是其他检测指标不可代替。
3、VEGF可用于肿瘤临床诊断和预后评估。
临床上很多恶性肿瘤疾病缺乏特异性的肿瘤标志物，例如肾癌等。
而由于VEGF的广谱性、敏感性使得通过血液检测VEGF就可辅助诊断这类恶性肿瘤疾病。
同时，根据VEGF的水平变化可反映肿瘤的发展程度，对肿瘤的预后可作出判断。
一般而言，同一种恶性肿瘤，VEGF水平越高，肿瘤恶性程度也越高，预后相对较差。
VEGF检测优势1、早：在癌症发生的早期即可发现，对肿瘤早期发现具有重要意义；2、广：广谱性肿瘤标志物，适用于各种肿瘤的筛查和检测；3、准：联合其他肿瘤标志物检测提高诊断的准确性；4、高：灵敏度高，VEGF的最低检测限为pg级，分析灵敏度为目前肿瘤标志物中最高。
血管内皮生长因子(VEGF)研究现状与胶质瘤血管生成的关系
血管内皮生长因子（VEGF）研究现状与胶质瘤血管生成的关系血管内皮生长因子（VEGF）是一种细胞因子，它被认为是促进血管新生和血管再生的重要因素。
在生物学中，VEGF发挥着至关重要的作用，特别是在胶质瘤血管生成的过程中。
该过程被认为是导致胶质瘤发展和复发的重要因素之一。
因此，了解VEGF对血管生成的影响对于控制胶质瘤生长和治疗具有重要意义。
目前的研究表明，VEGF通过与其相关的受体结合来刺激内皮细胞生长和增殖，这导致了更多的血管形成。
VEGF有助于在正常生理和病理情况下刺激血管生成和再生。
在某些类型的肿瘤中，VEGF水平显着增加，这有助于增加其血供，从而使肿瘤细胞获得足够的氧气和营养物质。
胶质瘤是一种嗜恶性的颅内肿瘤，经常侵袭正常胶质组织，并在体内不断复发。
研究表明，VEGF也在胶质瘤的生物学过程中扮演着重要角色。
胶质瘤血管生成过程是复杂的，并且涉及到多种细胞因子和信号途径。
VEGF与细胞凋亡、血管内皮细胞信号转导、炎症反应和肿瘤细胞的生长和增殖等因素紧密相连。
VEGF通过激活血管内皮细胞表达其受体，从而导致了新的血管生成。
具体来说，VEGF作为生长因子，通过在内皮细胞表面上结合其受体，进而导致它们增殖和分化。
在胶质瘤中，VEGF是一种强力的自动分泌刺激因子。
这种刺激作用可以加速血管生成，因此在治疗中，VEGF与单克隆抗体联合使用已被证明能够显著降低胶质瘤的发生率和复发率。
此外，研究中发现，联合使用VEGF和单克隆抗体治疗胶质瘤的同时，也可能导致一系列不良反应。
如：头痛、高血压、口干、口腔疼痛、呕吐，对于这些不良反应的处理也是治疗过程中一个需要注意的问题。
总之，血管内皮生长因子在胶质瘤血管生成中发挥重要作用。
了解其控制血管生成的机制和VEGF在胶质瘤病理生物学中的作用，对于防止和治疗胶质瘤可能具有重要的临床应用价值。
尽管联合使用VEGF和单克隆抗体治疗胶质瘤存在一定的风险，但它仍然是一种有希望的治疗方法。
人血管内皮细胞生长因子
人血管内皮细胞生长因子A（VEGF-A）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中VEGF-A含量。
实验原理用纯化的VEGF-A抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的VEGF-A抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物（TMB）显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的VEGF-A呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板：一块（96孔）2、标准品（冻干品）：2瓶，请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2,000pg/ml，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成2,000pg/ml，1,000pg/ml，500 pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。
如配制1,000pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）2,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×20ml。
4、检测稀释液A：1×10ml。
5、检测稀释液B：1×10ml。
6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液A1:100稀释（如：10检测溶液A/990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
血管内皮生长因子在肺癌中的表达及临床意义
血管内皮生长因子在肺癌中的表达及临床意义王文生【摘要】目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌患者中的表达水平及临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测30例肺癌患者及20例健康人血清中血管内皮生长因子水平,并采用RT-PCR方法检测VEGF基因表达水平.结果:肺癌患者血清中VEGF及其mRNA水平与健康人相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:肺癌患者血管内皮生长因子(VEGF)水平明显高于健康人,其水平高低有助于肺癌诊断.【期刊名称】《包头医学院学报》【年(卷),期】2011(027)003【总页数】2页(P50-51)【关键词】肺癌;血管内皮生长因子;诊断【作者】王文生【作者单位】鹤壁职业技术学院医学院,河南省,鹤壁,458030【正文语种】中文肿瘤血管生成在肿瘤的生长、侵袭、转移过程中起着重要作用。
血管内皮生长因子(VEGF)能刺激血管内皮细胞生长和增殖，促进肿瘤血管生成，参与肿瘤的发生与发展［1］。
本研究通过检测肺癌患者血清VEGF水平及其mRNA表达情况，探讨其对肺癌诊断及评估预后的临床意义。
1 对象和方法1.1 对象30例肺癌均为2007年1月至2010年1月在我市人民医院住院的患者，其中男20例，女10例，年龄38～75岁，平均年龄55岁，所有病例均由病理学确诊。
20例对照来自本市卫生学校健康体检正常人，男12例，女8例，年龄30～65岁，平均54岁。
病例组和对照组之间年龄和性别分布差异无统计学意义。
1.2 ELISA检测血清 VEGF水平静脉血清标本100 μL，3 000 r/min 离心15 min，取上清，按照试剂盒(深圳晶美生物公司)说明书操作步骤进行。
1.3 RT－PCR检测VEGF mRNA水平无菌操作取抗凝外周血2～3 mL，Ficoll液分离单个核细胞，用Trizol提取液(Gibco/BRL公司)提取RNA。
RT－PCR按照逆转录酶试剂盒(天津康尔克生物科技有限公司)操作说明进行，以β－actin作为内参照。
(完整版)胎盘生长因子定量检测试剂盒(说明书)
胎盘生长因子定量检测试剂盒说明书（PLGF ELISA试剂盒：EIA4529 96T）1、简介PLGF酶免试剂盒可用于血清中人胎盘生长因子的定量检测.此试剂盒仅供体外诊断用。
血管生成和血管转化是胎盘正常发育过程中的重要步骤.血管生成和血管转化不正常是造成先兆性子痫妊娠和宫内胎儿生长迟缓的重要原因.胎盘生长因子是VEGF家族中一员，主要由胎盘分泌，它是一种有效的血管生成因子.PLGF相应的受体（可溶性的fms样酪氨酸激酶1）也具有促血管生成的性质。
2、实验原理PLGF ELISA试剂盒是一种固相的酶联免疫试剂盒,采用三明治夹心法的原理。
包被板的微孔中包被了能识别PLGF分子上独特抗原位点的单克隆抗体。
将含有一定量PLGF的病人样品加入到微孔中温育，之后洗板，洗板后加入对PLGF具有特异性的生物素标记多克隆抗体。
温育后洗板除去未结合的酶复合物.过氧化酶的结合量与样品中PLGF的浓度成正比。
加入底物液后，溶液所显示的颜色与样品中PLGF的浓度成正比。
3、试剂盒成分1）包被板，12＊8（可拆)，96孔,包被了抗PLGF抗体(单克隆）2）零标准品，1支,1ml，即用，0pg/ml,内含＜0.35的proclin防腐剂。
3）标准品1-5，5支,1ml，即用，浓度：25;50；125；500；1000pg/ml，内含＜0.35的proclin 防腐剂。
4）质控品，2支,1ml，即用,质控品的浓度值及可允许范围请见试剂瓶标签或质控单。
内含＜0.35的proclin防腐剂。
5）检测缓冲液，1支，30ml,即用，内含＜0。
35的proclin防腐剂.6）酶联物，1支，14ml，即用，生物素标记的羊抗人PLGF抗体，内含＜0。
35的proclin防腐剂。
7）酶复合物,1支，14ml，即用，内含链酶素辣根过氧酶复合物，内含0.01%的methylisothiazolone和0.02% bromonitrodioxane防腐剂。
人血管内皮生长因子（VEGF）酶联免疫检测试剂盒使用说明
人血管内皮生长因子（VEGF)酶联免疫检测试剂盒使用说明书AE98006Hu使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人血管内皮生长因子（VEGF)，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中血管内皮生长因子（VEGF)测定。
工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人血管内皮生长因子（VEGF)水平。
向预先包被了人血管内皮生长因子（VEGF)单克隆抗体的酶标孔中加入人血管内皮生长因子（VEGF)，温育；温育后，加入生物素标记的抗VEGF抗体。
再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人血管内皮生长因子（VEGF)的浓度呈正相关。
试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1200ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存VEGF抗体显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。
2．标准规格酶标仪。
3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
血管内皮生长因子检测45
血管内皮生长因子检测45血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，简称VEGF）是一种重要的生物活性蛋白质，它在很多生理和病理情况下起着重要的作用。
最近，血管内皮生长因子检测45成为了研究和临床实践中的热门话题，因为它对多种疾病的诊断和治疗具有重要意义。
1. 什么是血管内皮生长因子检测45？血管内皮生长因子检测45是一种用于测定血液中血管内皮生长因子水平的检测方法。
血管内皮生长因子是一类促进血管内皮细胞增殖和血管新生的蛋白质，它在很多疾病中起着调节血管生成和修复的重要作用。
血管内皮生长因子检测45可以通过测定血液中血管内皮生长因子的浓度来评估血管生成和血管功能的状态。
2. 血管内皮生长因子检测45在疾病诊断中的应用血管内皮生长因子检测45在很多疾病的诊断中有重要的应用价值。
它可以帮助早期发现和评估肿瘤的血供状态，为肿瘤的治疗方案选择提供依据。
血管内皮生长因子检测45还可以用于评估心脏病、糖尿病和其他循环系统疾病的严重程度，为临床治疗决策提供参考。
血管内皮生长因子检测45还可以用于监测器官移植后的血管修复情况以及血管疾病的治疗效果。
3. 血管内皮生长因子检测45对治疗的指导作用血管内皮生长因子检测45在疾病治疗过程中起着重要的指导作用。
通过监测血管内皮生长因子的变化，可以评估治疗的效果，并及时调整治疗方案。
在肿瘤治疗中，血管内皮生长因子检测45可以用于判断肿瘤对治疗的敏感性，进而选择合适的治疗药物和方案。
在心脏病治疗中，血管内皮生长因子检测45可以用于评估心脏血管的修复情况，指导后续的治疗措施。
4. 个人观点和理解血管内皮生长因子检测45的出现为疾病的诊断和治疗带来了新的机会和可能。
它可以通过直接测定血液中的生长因子水平，为疾病的早期诊断、治疗方案选择和疗效评估提供重要信息。
然而，血管内皮生长因子检测45目前仍处于研究阶段，还需要更多的临床验证和规范化的操作流程。
血管内皮生长因子(VEGF)、CAl25和CA72-4联合检测诊断卵巢癌的临床价值探讨
关 键 词 卵 巢 癌 ＶＥ Ｃ ２ Ｃ ７ ＧＦ Ａ１ ５ Ａ ２—４
Ｄｉｇ ｏｔ ｖ ｌ ａｉｎ ｏ ｓｕ ａ ｎ ｏ ｈ ｌ ｌ ｏ ｈ Ｆ ｃｏ ＶＥ ａ ｎ ｓ ｃＥ ａｕ ｔ ｆ ｉ ｏ Ｖａ ｃ ｌ ｒ ｄ ｔ ｅ ａ Ｇｒ ｗｔ ａ ｔ ｒ（ ＧＦ） Ｃ ２ ｎ Ａ ２— ｏ ｉｅ ｌ ｔｃｉｇ Ｏｖ ｒａ ｎ ｅ ． Ｎ Ｅ ｉ ， Ａ１ ５ ａ ｄ Ｃ ７ ４ Ｃ ｍｂｎ ｄｙｉ Ｄｅｅｔ ａ ｉｎＣａ ｃ ｒ ｎ ｎ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅ ｔ ｅ Ｔ ｖ ｌａｅｔｅ ｄａ ｎ ｓｉ ａｕ ｆｔｅｃ ｍｂｎ ｔ ｎｄ ｔｃｉｎｏ ａｃ ｌｒｅ ｄ ｔｅｉｌ ｒｗ ｈｆｃｏ ＶＥ ｓｒ ｃ ｊ ｃｉ ｏｅａｕ ｔ ｈ ｉｇ ｏｔ ｖｌｅ ｏ ｈ ｏ ｉａｉ ｅｅ ｔ ｆ ｓｕａ ｎ ｏｈ ｌ ｏ ｔ ａｔｒ（ ＧＦ）， ｖ ｃ ｏ ｏ ｖ ａｇ
—
４表 达 均 高 于 卵 巢 良性 肿 瘤 组 和 正 常 对 照 组 （ Ｐ＜０ ０ ） Ｒ Ｃ 曲 线 分 析 ： Ｅ Ｆ Ｃ １ ５ Ｃ ７ ．５ 。 Ｏ Ｖ Ｇ 、 Ａ ２ 、 Ａ ２—４诊 断 卵 巢 癌 的 曲 线 下 面 积
（ Ｕ ） 别 是 ０ ７ ２ ０ ８４ ０ ７ １ ３项 指 标 联 合 的 Ａ Ｃ是 ０ ９ １３项 指 标 联 合 检 测 的 Ａ Ｃ大 于 单 项 检 测 （ Ａ Ｃ分 ．９ ， ．３ ， ． １ ，５ 。 检测 中 Ｃ ２ Ａ１５敏 感 性 （ ９２ ） 高 ， Ａ ２— ６ ．％ 最 Ｃ ７ ４的特 异 性 （８ ２ ） 好 ， ８ ．％ 最 ３项 指 标 联 合 检 测 的 敏 感 性 和 特 异 性 分 别 为 ８ ． ％ 和 １０ ８．％。结论 ４７ Ｖ Ｇ 、 Ａ ２ 、 Ａ ２— Ｅ Ｆ Ｃ １５ Ｃ ７ ４三 种 指 标 联 合 检 测 能 有 效 提 高 卵巢 癌诊 断 的 准 确 度 。
血管内皮生长因子胎盘微血管密度在
在相关性ꎬ通过监测血清ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ水平以及控制患者血压变异性ꎬ对原发性高血压合并ＬＶＨ患者的诊治具有重要的参考价值ꎮ但本研究仍存在一定缺陷ꎬ所收集的样本量偏少ꎬ有待扩大样本量开展深入探究ꎮ综上所述ꎬ原发性高血压合并ＬＶＨ患者ＳＤ㊁ＱＴｃｄ明显升高ꎬ可能与患者血压变异性及血清ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ水平有关ꎬ通过监测血清ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ水平以及控制患者血压变异性ꎬ对原发性高血压合并ＬＶＨ患者的诊治具有重要的参考价值ꎮʌ参考文献ɔ[１]㊀ＸｕＭꎬＧｅＺꎬＨｕａｎｇＪꎬｅｔａｌ.ＭｏｄｉｆｉｅｄＣｏｒｎｅｌｌｅｌｅｃｔｒｏｃａｒｄｉｏ￣ｇｒａｐｈｉｃｃｒｉｔｅｒｉａｉｎｔｈｅａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｈｙｐｅｒｔｒｏ￣ｐｈｙｇｅｏｍｅｔｒｙｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ[Ｊ].ＣｌｉｎＨｙｐｅｒｔｅｎｓ(Ｇｒｅｅｎｗｉｃｈ)ꎬ２０２０ꎬ２２(７):１２３９－１２４６. [２]㊀张文婷ꎬ李方江ꎬ白雪琴ꎬ等.原发性高血压伴左心室肥厚患者常规治疗效果的影响因素分析[Ｊ].中国现代医学杂志ꎬ２０２２ꎬ３２(８):７４－７８.[３]㊀何碧柳ꎬ蔡玮贤.动态心电图在高血压合并左心室肥厚患者中的临床研究[Ｊ].中国医药科学ꎬ２０２０ꎬ１０(１７):２１７－２１９ꎬ２２３.[４]㊀汤峥丽ꎬ王芳ꎬ王唯坚.２４ｈ动态血压变化对老年Ｈ型高血压患者靶器官损伤发生情况的影响[Ｊ].中国临床医生杂志ꎬ２０２１ꎬ４９(３):３０５－３０９.[５]㊀陈黔宾ꎬ陈鸿钰ꎬ王玉蓉.老年高血压合并左室肥厚患者ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰꎬＧａｌ－３及ＭＡＵ检测及其临床意义分析[Ｊ].湖南师范大学学报:医学版ꎬ２０２１ꎬ１８(３):２４１－２４４. [６]㊀«中国高血压防治指南»修订委员会.中国高血压防治指南２０１８年修订版[Ｊ].心脑血管病防治ꎬ２０１９ꎬ１９(１):１－４４.[７]㊀ＡｈｍｅｄＳＮꎬＪｈａｊＲꎬＳａｄａｓｉｖａｍＢꎬｅｔａｌ.Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｓｓｅｎｔｉａｌｈｙｐｅｒｔｅｎ￣ｓｉｏｎｏｎｓｔａｎｄａｒｄｄｒｕｇｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].Ｄｉｓｃｏｖｅｒｉｅｓ(Ｃｒａｉｏｖａ)ꎬ２０２０ꎬ８(３):１１５－１２９.[８]㊀朱韵ꎬ杨盼ꎬ葛志祥ꎬ等.高血压患者心电图ＳＤ波在诊断左心室肥厚中的价值[Ｊ].中国动脉硬化杂志ꎬ２０２０ꎬ２８(２):１２３－１２７.[９]㊀杨志家ꎬ白彦芳ꎬ王绍伟ꎬ等.原发性高血压３级伴不同类型左心肥厚患者血清硫脑苷脂水平及相关性研究[Ｊ].大连医科大学学报ꎬ２０２０ꎬ４２(２):１１７－１２１.[１０]㊀王娇ꎬ俎德玲ꎬ屠晓鸣ꎬ等.原发性高血压患者血压变异性与左心室质量指数的相关性分析[Ｊ].中华老年心脑血管病杂志ꎬ２０２０ꎬ２２(２):１９３－１９６.[１１]㊀段春华ꎬ曹彦.老年慢性心力衰竭患者心功能与同型半胱氨酸表达水平的相关性研究[Ｊ].成都医学院学报ꎬ２０２０ꎬ１５(４):５０３－５０６.[１２]㊀杨志家ꎬ白彦芳ꎬ王绍伟ꎬ等.原发性高血压伴左心室肥厚患者血清硫脑苷脂与ＱＴ间期离散度和ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ水平的相关性研究[Ｊ].现代中西医结合杂志ꎬ２０２０ꎬ２９(１６):１７６１－１７６４.ʌ文章编号ɔ１００６－６２３３(２０２２)１２－２０９０－０５血管内皮生长因子胎盘微血管密度在胎盘植入并发感染患者中的表达及意义金凤梅１ꎬ㊀王丽萍２ꎬ㊀付久园２(１.河北省承德市中心血站ꎬ㊀河北㊀承德㊀０６７０００２.承德医学院附属医院ꎬ㊀河北㊀承德㊀０６７０００)ʌ摘㊀要ɔ目的:探究血管内皮生长因子(ＶａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒꎬＶＥＧＦ)㊁胎盘微血管密度(ＰｌａｃｅｎｔａｌｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙꎬＭＶＤ)与产后胎盘植入并发感染的关系ꎮ方法:本医院２０１１年９月至２０２１年２月胎盘植入患者５３５例ꎬ所有产妇治疗过程中取出的胎盘组织和静脉血为样本ꎮ使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎꎬＲＴ－ｑＰＣＲ)㊁酶联免疫吸附试验(Ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔｔｅｓｔꎬＥＬＩＳＡ)㊁蛋白免疫印迹(ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇꎬＷＢ)实验和免疫组织化学实验检测胎盘组织和血清中ＶＥＧＦ蛋白及其ｍＲＮＡ表达和ＭＶＤ表达ꎮ采用Ｐｅａｒｓｏｎ相关性分析ＶＥＧＦ与ＭＶＤ的关系ꎮ结果:与胎盘植入无并发感染组相比ꎬ胎盘植入并发感染组３５岁以上所占比例㊁剖宫产次数ȡ１患者所占比例和人工流产次数ȡ２患者所占比例更高(χ２＝８０.５５８㊁８２.３２０㊁１１６.６８１ꎬＰ均<０.００１)ꎬ且ＶＥＧＦ的ｍＲＮＡ㊁蛋白表达和血清含量均显著升高(ｔ＝２２.８３４㊁１５.５７５㊁７.８６２ꎬＰ均<０.００１)ꎬＭＶＤ值也显著升高(ｔ＝１０.０９６ꎬＰ<０.００１)ꎮＰｅａｒｓｏｎ相关分析ꎬ胎盘组织ＶＥＧＦ含量与ＭＶＤ值呈正相关(ｒ＝０.６４５ꎬＰ<０.００１)ꎮ结论:ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ在胎盘植入并发感染胎盘中表达升高ꎬ与胎盘植入０９０２ ʌ基金项目ɔ河北省承德市科学技术研究与发展计划项目ꎬ(编号:２０２００６Ａ０１７)ʌ通讯作者ɔ王丽萍并发感染呈正相关ꎬ且ＶＥＧＦ含量与ＭＶＤ值在感染胎盘中呈正相关ꎬ可作为胎盘植入并发感染治疗依据ꎮʌ关键词ɔ㊀胎盘植入并发感染ꎻ㊀血管内皮生长因子ꎻ㊀胎盘微血管密度ʌ文献标识码ɔ㊀Ａ㊀㊀㊀㊀㊀ʌｄｏｉɔ１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００６－６２３３.２０２２.１２.０３０ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＶＥＧＦａｎｄＭＶＤｉｎＰａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＰｌａｃｅｎｔａｌＩｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎＣｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｂｙＩｎｆｅｃｔｉｏｎＪＩＮＦｅｎｇｍｅｉꎬｅｔａｌ(ＣｈｅｎｇｄｅＣｅｎｔｒａｌＢｌｏｏｄＳｔａｔｉｏｎꎬＨｅｂｅｉＣｈｅｎｇｄｅ０６７０００ꎬＣｈｉｎａ)ʌＡｂｓｔｒａｃｔɔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ:Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ(ＶＥＧＦ)ꎬｐｌａｃｅｎｔａｌｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ(ＭＶＤ)ａｎｄｐｏｓｔｐａｒｔｕｍｐｌａｃｅｎｔａｌａｃｃｒｅｔａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｆｅｃｔｉｏｎ.Ｍｅｔｈｏｄｓ:Ｐｌａｃｅｎｔａｌｔｉｓｓｕｅａｎｄｆａｓｔｉｎｇｖｅｎｏｕｓｂｌｏｏｄｗｅｒｅｔａｋｅｎａｓｓａｍｐｌｅｓｏｆ５３５ｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎｗｉｔｈｐｌａｃｅｎｔａｌａｃｃｒｅ￣ｔａｉｎａｄｍｉｔｔｅｄｔｏｏｕｒｈｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍＳｅｐｔｅｍｂｅｒ２０１１ｔｏＦｅｂｒｕａｒｙ２０２１.Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐ￣ｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ(ＲＴ－ｑＰＣＲ)ꎬｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔｔｅｓｔ(ＥＬＩＳＡ)ꎬｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ(ＷＢ)ｔｅｓｔａｎｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＥＧＦｐｒｏｔｅｉｎꎬＶＥＧＦｍＲＮＡａｎｄＭＶＤｉｎｐｌａｃｅｎｔａｌｔｉｓｓｕｅａｎｄｓｅｒｕｍ.ＰｅａｒｓｏｎｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗａｓｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＶＥＧＦａｎｄＭＶＤ.Ｒｅｓｕｌｔｓ:Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｗｉｔｈｏｕｔｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｇｒｏｕｐꎬｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｏｖｅｒ３５ｙｅａｒｓｏｌｄꎬｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｃｅｓａｒｅａｎｓｅｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓȡ１ａｎｄｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｉｎｄｕｃｅｄａｂｏｒｔｉｏｎｔｉｍｅｓȡ２ｐａｔｉｅｎｔｓｉｎｔｈｅｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒ(χ２＝８０.５５８ꎬ８２.３２０ꎬ１１６.６８１ꎬＰ<０.００１)ꎬａｎｄｔｈｅｍＲＮＡꎬｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｓｅｒｕｍｃｏｎｔｅｎｔｏｆＶＥＧＦｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ(ｔ＝２２.８３４ꎬ１５.５７５ꎬ７.８６２ꎬＰ<０.００１)ꎬａｎｄｔｈｅＭＶＤｖａｌｕｅｗａｓａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ(ｔ＝１０.０９６ꎬＰ<０.００１).ＰｅａｒｓｏｎｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＶＥＧＦｉｎｐｌａｃｅｎｔａｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＭＶＤｖａｌｕｅ(ｒ＝０.６４５ꎬＰ<０.００１).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ:ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＥＧＦａｎｄＭＶＤｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｐｌａｃｅｎｔａａｃ￣ｃｒｅｔａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｆｅｃｔｉｏｎꎬｗｈｉｃｈｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎꎬａｎｄＶＥＧＦｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＭＶＤｖａｌｕｅｉｎｉｎｆｅｃｔｅｄｐｌａｃｅｎｔａꎬｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｆｅｃｔｉｏｎ.ʌＫｅｙｗｏｒｄｓɔ㊀Ｐｌａｃｅｎｔａｌｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｂｙｉｎｆｅｃｔｉｏｎꎻ㊀Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒꎻ㊀Ｐｌａｃｅｎｔａｌｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ㊀㊀胎盘植入原名病态粘附胎盘ꎬ是指胎盘绒毛不同程度的侵入子宫肌层ꎬ引起产时㊁产后出血ꎬ围生期紧急子宫切除和继发感染㊁损伤等严重的并发症ꎬ甚至母婴双亡[１]ꎮ造成胎盘植入的原因与多方面的因素有关ꎬ普遍认为与母体子宫内膜的损伤情况㊁胎盘附着部位㊁子宫手术史㊁子宫病变等有关[２ꎬ３]ꎮ胎盘植入的发生率逐年升高ꎬ由胎盘植入引起的产妇病死率已达到７~１０％[４]ꎮ胎盘植入没有典型的临床症状ꎬ临床诊断主要依据高危因素结合超声或者磁共振检查ꎬ确诊需要根据手术中或者分娩时所见及分娩后的病理学检查ꎮ随着胎盘绒毛侵入的加深ꎬ临床超声㊁磁共振检测的准确性将会降低ꎮ因此ꎬ早期预测胎盘植入发生及其是否存在并发感染的可能对临床上早期预防㊁治疗胎盘植入并发感染具有重要意义ꎮ大量研究报道ꎬ前置胎盘和胎盘植入的诊断均可通过血管内皮生长因子(ＶａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒꎬＶＥＧＦ)㊁胎盘微血管密度(ＭｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙꎬＭＶＤ)在母体中的含量进行预测[５]ꎮ于是推测ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ的表达水平可能与胎盘植入并发感染的可能性也存在联系ꎮ本研究拟通过检测分析５３５例胎盘植入患者的胎盘组织㊁血清中ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ的表达水平与胎盘植入并发感染的关系ꎬ揭示ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ在胎盘植入并发感染的中的价值ꎮ１㊀资料与方法１.１㊀临床资料１.１.１㊀样本来源:样本来自承德医学院附属医院２０１１年９月至２０２１年２月期间接诊的胎盘植入患者５３５例(其中终止妊娠后ꎬ发生感染者２１５例ꎬ剩余３２０例为未发生感染者)孕产妇的胎盘组织和静脉血ꎮ从医院病案科收集患者终止妊娠时孕周㊁病史㊁年龄㊁剖宫产次数㊁人工流产次数等临床资料ꎮ病历资料来自承１９０２德医学院附属医院病案科ꎮ纳入研究的所有住院分娩孕妇均需在住院后３ｄ内采血１.８ｍＬ至混有０.２ｍＬ的枸杞酸钠真空采血管ꎮ胎盘组织的获取均在剖宫产产出胎盘后快速剪取植入病灶区组织或正常胎盘中央组织２块ꎬ每块大小为１ｃｍˑ１ｃｍˑ１ｃｍ的立方块ꎮ一块组织用０.９％生理盐水冲洗后－８０ħ保存ꎬ另一块用１０％甲醛溶液封闭保存ꎮ胎盘植入并发感染诊断标准[６]:发热ꎬ体温>３７.８ħꎬ且具备以下ȡ２个条件ꎬ除外其他因素ꎬ可诊断:①子宫紧张有压痛ꎻ②实验培养结果证实ꎻ③末梢血白细胞计数>１５ˑ１０９Ｌ－１ꎮ纳入标准:所有患者均诊断为胎盘植入ꎻ临床资料完整ꎻ患者对本研究知情同意ꎻ排除标准:产前患有高血压㊁糖尿病㊁肝肾功能障碍㊁肿瘤㊁感染㊁多器官衰竭等疾病的患者ꎻ非单胎妊娠患者ꎻ因胎盘植入导致子宫切除者㊁手术死亡者ꎮ１.１.２㊀实验材料:ＴＲＩｚｏｌ液(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ)购自北京索莱宝公司ꎻ实时荧光定量聚合酶链式反应(Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃ￣ｔｉｏｎꎬＲＴ－ｑＰＣＲ)试剂盒购自ＴａＫａＲａ公司ꎻ人ＶＥＧＦ酶联免疫吸附试验(Ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔｔｅｓｔꎬＥＬＩＳＡ)检测试剂盒购自上海康朗生物科技有限公司ꎻ聚偏二氟乙烯膜(ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｉｄｅｎｅｆｌｕｏｒｉｄｅꎬＰＶＤＦ)购自北京康为世纪公司ꎻ兔抗血管内皮生长因子(ＶａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒꎬＶＥＧＦ)多克隆抗体㊁兔抗ＣＤ３４单克隆抗体㊁辣根过氧化物酶标记的二抗均购自上海艾博抗公司ꎻ辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素购自北京博尔西科技公司ꎻ二氨基联苯胺(３ꎬ３'－ｄｉａｍｉｎｏ￣ｂｅｎｚｉｄｉｎｅꎬＤＡＢ)显色试剂盒购自北京鼎国昌盛生物公司ꎮ１.２㊀方㊀法１.２.１㊀样本处理:将收集的胎盘组织㊁血清分为胎盘植入并发感染组㊁未感染组ꎮ将收集的全部胎盘组织从－８０ħ取出ꎬ备用ꎮ打开１０％甲醛溶液中保存的胎盘组织ꎬ用于制备石蜡切片ꎮ将采取的全部血液抽取上层血清ꎬ用于ＥＬＩＳＡ实验ꎮ１.２.２㊀ＲＴ－ｑＰＣＲ实验:将胎盘组织从－８０ħ取出ꎬ无菌研磨ꎮ加入３倍组织体积的无菌蒸馏水ꎬ充分研磨ꎬ然后用ＴＲＩｚｏｌ液提取组织中的总ＲＮＡꎬ并将其逆转录为ｃＤＮＡꎮ再采用ＳＹＢＲ－Ｇｒｅｅｎ荧光定量ＰＣＲ检测试剂盒(美国赛默飞世尔科技有限公司)检测ＶＥＧＦｍＲ￣ＮＡ表达ꎮｑＲＴ－ＰＣＲ检测程序(反应体系:１ˑＳＹＢＲＧｒｅｅｎⅠ混合物１０μＬ㊁０.２μｍｏＬ/ＬＰＣＲ上下游引物各０.５μＬ㊁重蒸水０.８μＬ㊁ＲＴ产物２μＬ㊁ꎻ反应条件:９５ħ变性(５ｍｉｎ)ꎬ９４ħ(３０ｓ)ꎬ６０ħ(３０ｓ)ꎬ７２ħ(４０ｓ)ꎬ共４０个循环)ꎮ以ＧＡＰＤＨ为内参ꎬ２－әәＣｔ法计算ＶＥＧＦ的相对表达量ꎮ反应程序设置程序按照ＲＴ－ｑＰＣＲ试剂盒要求设置:９５ħꎬ１０ｍｉｎꎬ４０个循环ꎬ６０ħꎬ６０ｓꎮＶＥＧＦꎬ上游引物ꎬ５'－ＴＧＣＧＧＡＴＣＡＡＡＣＣＴＣＡＣＣＡＡ－３'ꎬ下游引物５'－ＡＣＡＧＴＧＡＡＣＧＣＴＣＣＡＧＧＡＴＴ－３'ꎮＧＡＰＤＨꎬ上游引物ꎬ５'－ＡＡＧＡＧＧＧＡＴＧＣＴＧＣＣＣＴＴＡＣ－３'ꎬ下游引物５'－ＴＡＣＧＧＣＣＡＡＡＴＣＣＧＴＴＣＡＣＡ－３'ꎮ１.２.３㊀ＷＢ实验:将组织从－８０ħ冰箱中取出ꎬ充分研磨ꎮ加入５倍体积的裂解液ꎬ充分裂解ꎬ提取总蛋白ꎮ用ＢＣＡ试剂盒对蛋白定量ꎬ沸水中煮沸１０ｍｉｎ对蛋白变性ꎮ用变性后的蛋白上清液用于ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白电泳ꎬ将蛋白聚集在琼脂胶上ꎮ使用转膜仪将胶上的蛋白转移到ＰＶＤＦ膜ꎬ转膜过程需在４ħ低温条件下进行ꎮ再用２.５％的脱脂奶粉对膜进行３７ħ封闭２ｈꎮ结束后ꎬ将膜轻轻置入１ʒ１０００倍稀释的兔抗ＶＥＧＦ多克隆抗体溶液中ꎬ４ħ孵育一夜ꎮ取出膜ꎬ充分清洗ꎬ再浸入１ʒ５００倍稀释的辣根过氧化物酶标记的二抗溶液中ꎬ３７ħ反应１.５ｈꎮ最后用ＥＣＬ发光试剂盒显影曝光ꎮ１.２.４㊀ＥＬＩＳＡ实验:将ＶＥＧＦＥＬＩＳＡ检测试剂盒㊁待检测血清恢复至室温ꎮ按照ＶＥＧＦＥＬＩＳＡ检测试剂盒说明书要求操作ꎬ判定血清中ＶＥＧＦ的含量ꎮ１.２.５㊀免疫组织化学实验:参考乔小改等[７]的操作方法ꎬ检测组织中ＶＥＧＦ㊁微血管密度(Ｐｌａｃｅｎｔａｌｍｉｃｒｏｖｅｓ￣ｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙꎬＭＶＤ)的表达ꎮ免疫组织化学:将组织标本修剪成１ｃｍ３组织块ꎬ经石蜡包埋ꎬ切成４μｍ厚的切片ꎬ再展片㊁烤片㊁复水㊁修复㊁复温ꎮ然后使用山羊血清封闭处理ꎬ然后加入稀释的一抗溶液(ＶＥＧＦꎬ１ʒ２００ꎻＣＤ３４ꎬ１ʒ１００)ꎬ４ħ孵育过夜ꎮ恢复至室温后ꎬ充分洗涤ꎬ再置于稀释的拉更过氧化物酶标记的二抗溶液㊁辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素ꎮ结束后ꎬ经ＤＡＢ显色ꎬ复染㊁脱水㊁透明㊁封胶处理ꎮＶＥＧＦ㊁ＣＤ３４判定阳性标准为细胞质呈棕黄色ꎮ结果由病理医师采用双盲法独立判定ꎮ结果以阳性细胞的百分数作为判定标准:５％及以下为０分ꎬ６％~２５％为１分ꎬ２６％~５０％为２分ꎬ５１％~７５％为３分ꎬ７６％~１００％为４分ꎮ细胞染色深度积分法则:无着色为０分ꎬ淡黄色１分ꎬ棕黄色２分ꎬ棕褐色３分ꎮ结果:将上述两项的得分的乘积作为总分ꎮ总分在０~２分判为阴性ꎬ３~１２分判为阳性ꎮＭＶＤ值的计算采用Ｗｅｉｄｎｅｒ法ꎬ用ＣＤ３４标记微血管内皮细胞ꎬ棕黄色以上均为阳性ꎮ显微镜计数时ꎬ采用５点法观察㊁计数ꎬ视野内有染成棕黄色的血管内皮细胞计为１个ꎬ取平均值ꎮ１.３㊀统计学分析:数据均使用软件ＳＰＳＳ２２.０分析ꎮ２９０２对符合正态分布的数据ꎬ使用均数ʃ标准差表示ꎬ两组间比较采用独立样本ｔ检验ꎮ定性资料以ｎ(％)表示ꎬ行χ２检验ꎻ符合正态分布的变量采用Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析法分析变量间的相关性ꎮＰ<０.０５表示差异或相关性有统计学意义ꎮ２㊀结㊀果２.１㊀两组患者的临床资料比较:５３５例胎盘植入患者中ꎬ并发感染２１５例ꎬ占４０.１８％ꎬ年龄２６~４５岁ꎬ平均(３４.８７ʃ４.９１)岁ꎻ终止妊娠时孕周２８~３９周ꎬ平均(３３.９１ʃ２.４５)周ꎮ未并发感染３２０例ꎬ年龄２６~４３岁ꎬ平均(３２.０３ʃ４.１２)岁ꎬ终止妊娠时孕周２８~３９周ꎬ平均(３３.８３ʃ２.４３)周ꎮ胎盘植入并发感染组３５岁以上所占比例㊁剖宫产次数ȡ１患者所占比例和人工流产次数ȡ２患者所占比例均高于胎盘植入无并发感染组ꎬ差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮ见表１ꎮ表１㊀两组患者的资料分析ｎ(％)分组感染组(ｎ＝２１５)未感染组(ｎ＝３２０)χ２Ｐ年龄ȡ３５岁１０１(４６.９８)３９(１２.１９)８０.５５８<０.００１剖宫产次数ȡ１１０６(４９.３０)４３(１３.４４)８２.３２０<０.００１人工流产次数ȡ２１６２(７５.３４)８９(２７.８１)１１６.６８１<０.００１２.２㊀ＶＥＧＦ在两组胎盘植入患者胎盘组织中的表达及血清含量:结果如图１Ａ和表２所示ꎬ与胎盘植入无并发感染组相比ꎬ胎盘植入并发感染组胎盘组织中ＶＥＧＦ的ｍＲＮＡ和蛋白表达均显著升高ꎬ血清中ＶＥＧＦ含量显著升高(Ｐ<０.０５)ꎮ免疫组织化学结果如图１Ｂ㊁Ｃ所示ꎬ与未感染组相比ꎬ感染组胎盘组织呈明显的褐色(Ｐ<０.０５)ꎮ表２㊀ＶＥＧＦ在两组胎盘植入患者胎盘组织中的表达及血清含量分组ｎＶＥＧＦｍＲＮＡＶＥＧＦ蛋白ＶＥＧＦ(μｇ/Ｌ)感染组２１５８.９３ʃ０.４５０.９８ʃ０.０６１５.４８ʃ１.１３未感染组３２０５.６４ʃ０.３３０.６９ʃ０.０４１２.３９ʃ１.０２ｔ２２.８３４１５.５７５７.８６２Ｐ<０.００１<０.００１<０.００１图１㊀ＶＥＧＦ蛋白表达及免疫组织化学图Ａ:ＶＥＧＦ蛋白在胎盘组织中的表达ꎻＢ㊁Ｃ:ＶＥＧＦ在感染组和未感染组胎盘组织中的免疫组织化学图２.３㊀ＭＶＤ在胎盘植入并发感染患者胎盘组织中的表达:结果表３所示ꎬ与胎盘植入无并发感染组相比ꎬ胎盘植入并发感染组胎盘组织ＭＶＤ值显著升高ꎬ差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮ表３㊀ＭＶＤ在胎盘中的表达分组ｎＭＶＤｔＰ感染组２１５１８９.５７ʃ１２.３６１０.０９６<０.００１未感染组３２０１４６.６３ʃ１０.８９２.４㊀感染胎盘组织ＶＥＧＦ水平与ＭＶＤ的相关性:Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析ꎬ胎盘组织ＶＥＧＦ含量与ＭＶＤ值呈正相关(ｒ＝０.６４５ꎬＰ<０.００１)ꎮ３９０２３㊀讨㊀论胎盘植入并发感染的发生不仅与护理因素相关ꎬ还可能与患者体内一些基因表达失调有关[８]ꎮＶＥＧＦ参与了胚胎血管生成的多种生理病理过程ꎬＶＥＧＦ可促进胚胎发育ꎬ提高子宫内膜容受性ꎬ促进发育中的胚胎与子宫内膜的相互作用ꎬ参与胚胎着床过程[９]ꎮＶＥＧＦ在胚胎着床中具有多种的作用ꎬＶＥＧＦ表达的失调ꎬ可能导致不孕㊁胎盘植入并发症[１０]ꎮ柳月霞等[１１]在研究中发现ꎬＶＥＧＦ在胎盘植入患者血清中的表达水平明显高于疑似胎盘植入患者或正常孕妇ꎬ揭示ＶＥＧＦ在早期胎盘植入诊断的潜在价值ꎮ本研究检测了胎盘植入并发感染孕妇㊁胎盘植入未感染孕妇胎盘㊁血清中ＶＥＧＦ的表达水平ꎬ结果发现ＶＥＧＦ在胎盘组织的表达水平和血清中的含量均明显高于胎盘植入未感染孕妇ꎮ这与ＶＥＧＦ在胎盘植入孕妇胎盘中的表达高于前置胎盘孕妇胎盘的研究结果相类似ꎮ推测ＶＥＧＦ不仅具有预测胎盘植入发生的可能性ꎬ还有预测胎盘植入伴感染的潜力ꎮＭＶＤ的表达水平与妇科疾病㊁颅神经根疾病的发生㊁发展紧密相关ꎮ乔小改等[７]在研究中报道ꎬＭＶＤ在凶险性胎盘前置合并胎盘植入孕妇胎盘中的表达高于未合并胎盘植入孕妇ꎬ并且ＭＶＤ㊁ＶＥＧＦ在凶险性胎盘前置组织中的表达水平呈正相关ꎮ研究报道ꎬＭＶＤ在前置胎盘㊁胎盘植入孕妇胎盘组织中的表达显著上调ꎬ并且ＭＶＤ㊁ＶＥＧＦ在前置胎盘㊁胎盘植入孕妇胎盘组织中的表达成正相关ꎬ证实ＭＶＤ㊁ＶＥＧＦ在胎盘中的表达异常与胎盘植入的发病存在联系ꎮ由此可见ꎬＭＶＤ㊁ＶＥＧＦ在胎盘前置㊁胎盘植入孕妇胎盘中的异常表达确实参与疾病的发生发展过程ꎮ本研究检测了ＭＶＤ在胎盘植入并发感染孕妇㊁胎盘植入未并发感染孕妇胎盘组织中的表达发现ꎬＭＶＤ在胎盘植入并发感染胎盘中的表达明显升高ꎮ结合前人的实验结果ꎬ暗示孕妇胎盘组织中ＭＶＤ表达水平可能与该病的凶险程度有关ꎬ即ＭＶＤ越高ꎬ胎盘绒毛入侵子宫越严重ꎮ此研究还发现ꎬ胎盘植入并发感染胎盘组织中ＭＶＤ㊁ＶＥＧＦ的表达呈正相关ꎬ这与二者在胎盘前置㊁胎盘植入孕妇胎盘中的表达关系相一致ꎮ由这些实验结果猜测ꎬＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ在胎盘植入胎盘中的表达量可能能够初步推测孕妇发生胎盘植入并发感染的可能性ꎮ本研究是在支持ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ可用于预测前置胎盘㊁胎盘植入发生的基础上ꎬ进一步验证ＶＥＧＦ㊁ＭＶＤ与胎盘植入并发感染发生相关密切ꎮʌ参考文献ɔ[１]㊀ＣａｈｉｌｌＡＧꎬＢｅｉｇｉＲꎬＨｅｉｎｅＲＰꎬｅｔａｌ.Ｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｓｐｅｃ￣ｔｒｕｍ[Ｊ].ＡｍＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌꎬ２０１８ꎬ２１９(６):Ｂ２－Ｂ１６. [２]㊀ＣａｒｕｓｉＤＡꎬＦｏｘＫＡꎬＬｙｅｌｌＤＪꎬｅｔａｌ.ＰｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｓｐｅｃｔｒｕｍｗｉｔｈｏｕｔｐｌａｃｅｎｔａＰｒｅｖｉａ[Ｊ].ＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌꎬ２０２０ꎬ１３６(３):４５８－４６５.[３]㊀ＤｕｚｙｊＣＭꎬＣｏｏｐｅｒＡꎬＭｈａｔｒｅＭꎬｅｔａｌ.Ｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａ:ａｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｐｒｅｄｉｃｔａｂｌｅｒｉｓｋꎬｄｉａｇｎｏｓｉｓꎬａｎｄｍｏｒｂｉｄｉｔｙ[Ｊ].ＡｍＰｅｒｉｎａｔｏｌꎬ２０１９ꎬ３６(１０):１０３１－１０３８.[４]㊀ＣａｌＭꎬＡｙｒｅｓ－ｄｅ－ＣａｍｐｏｓＤꎬＪａｕｎｉａｕｘＥ.Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｓｕｒｖｅｙｏｆｐｒａｃｔｉｃｅｓｕｓｅｄｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｐｌａｃｅｎ￣ｔａａｃｃｒｅｔａｓｐｅｃｔｒｕｍｄｉｓｏｒｄｅｒｓ[Ｊ].Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｊｏｕｒｎａｌｏｆｇｙ￣ｎａｅｃｏｌｏｇｙａｎｄｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ:ｔｈｅｏｆｆｉｃｉａｌｏｒｇａｎｏｆｔｈｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎ￣ａｌＦｅｄｅｒａｔｉｏｎｏｆＧｙｎａｅｃｏｌｏｇｙａｎｄＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓꎬ２０１８ꎬ１４０(３):３０７－３１１.[５]㊀周冰峰ꎬ阚长利ꎬ侯敬ꎬ等.孕妇血清ＶＥＧＦ和ｓＦｌｔ－１联合多普勒超声诊断胎盘植入效果[Ｊ].中国计划生育学杂志ꎬ２０２１ꎬ２９(１):１１４－１１７.[６]㊀曹泽毅.中华妇产科(临床版)[Ｍ].北京:人民卫生出版社ꎬ２０１３.２２９.[７]㊀乔小改ꎬ蔡大军.凶险性前置胎盘组织中ＨＭＧＢ１蛋白表达及其与胎盘植入的关系研究[Ｊ].实用妇产科杂志ꎬ２０２０ꎬ３６(２):１３６－１４０.[８]㊀ＭｃＮａｌｌｙＬꎬＺｈｏｕＹꎬＲｏｂｉｎｓｏｎＪＦꎬｅｔａｌ.Ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｃｙｔｏ￣ｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔＤＯＣＫ４ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｏｖｅｒ－ｉｎｖａｓｉｏｎｉｎｐｌａｃｅｎｔａａｃｃｒｅｔａｓｐｅｃｔｒｕｍ[Ｊ].ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡꎬ２０２０ꎬ１１７(２７):１５８５２－１５８６１.[９]㊀ＭａｔｉｎＭꎬＭｒｇｅｌｉｎＭꎬＳｔｅｔｅｆｅｌｄＪꎬｅｔａｌ.Ａｆｆｉｎｉｔｙ－ｅｎｈａｎｃｅｄｍｕｌｔｉｍｅｒｉｃＶＥＧＦ(ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)ａｎｄＰｌＧＦ(ｐｌａｃｅｎｔａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)ｖａｒｉａｎｔｓｆｏｒｐｐｅｃｉｆｉｃａｄｓｏｒｐ￣ｔｉｏｎｏｆｓＦｌｔ－１ｔｏｒｅｓｔｏｒｅａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｂａｌａｎｃｅｉｎｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ[Ｊ].Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎꎬ２０２０ꎬ７６(４):１１７６－１１８４.[１０]㊀ＧｕｏＸꎬＹｉＨꎬＬｉＴＣꎬｅｔａｌ.Ｒｏｌｅｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ(ＶＥＧＦ)ｉｎｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ:Ｃｌｉｎｉｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ[Ｊ].Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０２１ꎬ１１(２):２５３. [１１]㊀柳月霞ꎬ王东旭ꎬ魏菊红ꎬ等.妊娠晚期母体血清ＶＥＧＦ㊁ＰｌＧＦ和ｓＦｌｔ－１对胎盘植入性疾病的预测价值[Ｊ].中国计划生育学杂志ꎬ２０１９ꎬ２７(１１):１３４－１３７.４９０２。
vegf检测评价指标
vegf检测评价指标Vascular Endothelial Growth Factor（血管内皮生长因子）简称VEGF，是一种在血管形成和维护过程中起主要作用的分子。
VEGF通过在血管内皮细胞上结合VEGF受体来促进新血管形成，并且参与多种疾病的发生和进展。
为了评估VEGF的作用和相关疾病的发生风险，VEGF检测成为研究人员广泛使用的评价指标。
目前，VEGF检测技术已经得到了不断的改进，主要包括ELISA法、荧光定量PCR法、免疫组织化学法以及免疫荧光法等多种方法。
其中，ELISA法具有灵敏而高效的特点，被广泛用于定量分析疾病患者血浆和组织中的VEGF水平。
荧光定量PCR法因其准确和快速，成为了常用的测定VEGF mRNA表达水平的方法。
免疫组织化学和免疫荧光法可用于检测VEGF蛋白的表达，同时也能够确定蛋白在哪些组织和细胞类型中表达。
此外，研究人员还采用荧光分析技术、生物传感器技术等先进技术，不断推进VEGF检测技术的研究与应用。
在疾病的诊断和治疗中，VEGF成为了一个重要的生物标志物。
例如，在肿瘤学上，目前许多疗法已经将VEGF作为肿瘤治疗的关键目标，如抑制VEGF等有望成为治疗肿瘤的一种新途径。
在人类的动脉粥样硬化中，VEGF也被证明对新血管形成和斑块稳定起重要作用。
研究表明，通过VEGF检测技术可以提高对此类疾病的诊断和治疗的准确性和效果。
总之，VEGF检测技术已成为检测疾病和评估治疗效果的重要手段，它在目前的实际应用中已经得到了证实。
最新研究也为我们提供了更好的VEGF检测方法和途径，愿将来的VEGF检测技术在更多的疾病中为人类的健康保驾护航。
血管内皮生长因子(VEGF)与神经系统疾病相关性研究进展
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2021, 11(2), 821-825Published Online February 2021 in Hans. /journal/acmhttps:///10.12677/acm.2021.112116血管内皮生长因子(VEGF)与神经系统疾病相关性研究进展刘晓扬，吕婷，杨光路*内蒙古医科大学，内蒙古呼和浩特收稿日期：2021年1月25日；录用日期：2021年2月9日；发布日期：2021年2月26日摘要血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一种具有高特异性重要促血管生成活性的生长因子，具有促进血管内皮细胞增殖分化，促进血管发生、血管生成、促进细胞迁移、抑制肿瘤细胞凋亡等作用，在调节正常和病理性血管生成过程中发挥积极作用，本文总结了神经系统多种疾病如癫痫、惊厥、脑梗死、脑肿瘤、脊髓炎及注意力缺陷多动障碍等与VEGF表达的相关性进展，目前，利用抗VEGF和抗VEGFRs治疗来阻断肿瘤或其他病理过程中的血管生成被认为是极其重要的。
关键词VEGF，癫痫，脑卒中，视神经脊髓炎Research Progress on the Relationshipbetween Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) and Nervous System DiseasesXiaoyang Liu, Ting Lv, Guanglu Yang*Inner Mongolia Medical University, Hohhot Inner MongoliaReceived: Jan. 25th, 2021; accepted: Feb. 9th, 2021; published: Feb. 26th, 2021AbstractVascular endothelial growth factor (VEGF) is a kind of growth factor with high specific and impor-*通讯作者。
一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒及其制备方法和使用方
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911393099.5(22)申请日 2019.12.30(71)申请人 上海复星长征医学科学有限公司地址 200444 上海市宝山区城银路830号(72)发明人 郭健健 (74)专利代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225代理人 顾艳哲(51)Int.Cl.G01N 33/68(2006.01)G01N 33/577(2006.01)G01N 33/574(2006.01)G01N 33/543(2006.01)G01N 33/535(2006.01)(54)发明名称一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒及其制备方法和使用方法(57)摘要本发明涉及一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒及其制备方法和使用方法，本发明试剂盒包括生物素化VEGF单克隆抗体，碱性磷酸酶标记的VEGF单克隆抗体，链霉亲和素磁珠，试剂盒适用于全自动化学发光免疫分析仪Lumiart -II -1，相比传统的ELISA试剂盒，全自动化操作减少手工误差，反应时间更短，灵敏度更高，实现高通量快速化测定，准确度高，特异性强，精确度和检测效率有了较大的提升，试剂盒可用于早期癌症风险筛查，肿瘤病人治疗疗效评估监测以指导用药、复发监测和预后等，具有良好的应用前景。
权利要求书2页 说明书5页 附图2页CN 111044734 A 2020.04.21C N 111044734A1.一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，包括生物素化VEGF单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的VEGF单克隆抗体以及链霉亲和素磁珠。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述的生物素化VEGF单克隆抗体中，VEGF单克隆抗体与生物素的摩尔质量比为1：45-55。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述的碱性磷酸酶标记的VEGF单克隆抗体中，VEGF单克隆抗体与碱性磷酸酶标记物的质量比为1：1-2。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）
使用说明书
【试剂盒名称】
人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）
【试剂盒用途】
定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的含量。
【检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。
将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子（VEGF））多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））含量。
【试剂盒组成】
1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL
2 标准品：1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL
3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL
4 标准品稀释液6mL10 说明书1份
5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张
6 酶标试剂6mL12 密封袋1个
备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：1600、800、400、200、100、50pg/ml
【需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、
待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。
最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【样本要求】
1、样本不能含叠氮钠（NaN
3），因为叠氮钠（NaN
3
）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
【注意事项】
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、本试剂盒定量范围为25-1600pg/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（25-1600pg/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。
6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟加入终止液
15分钟之内读OD值
计算
【检测范围】
25-1600pg/ml
【规格】
96T/盒
【贮藏】
2-8℃，避光防潮保存。
【有效期】
6个月。