HPLC法同时测定新会柑种子中7种成分
高效液相色谱法测定中药香加皮中7种孕甾烷糖苷类成分的含量
香加皮经南京 中医药 大学吴启南教授 鉴定 为萝
蘑 科植 物 杠 柳 P e r i p l o c a s e pi u m B g e . 的干 燥根 皮 , 产 地分别 为河南 、 甘肃 、 陕西 、 山西 ; 对照 品 p e r i p l o s i d e
等 7种 成 分 的 含 量 。 色谱 柱 : 菲罗门c 1 8( 1 0 0 am r  ̄ 4 . 6 mm, 2 . 6 I x m) ; 流动相 : 乙腈 一 0 . 1 % 磷酸 水溶液 , 梯 度 洗脱 , 流速 : 1 . 5 mL ・ m i n ~; 检 测 波长: 2 6 4 n m。 结 果 : 中药 香 加 皮 中 p e r i p l o s i d e C 、 p e r i p l o s i d e K、 p e r i p l o s i d e R、 p e r i p l o s i d e D、 p e r i p l o s i d e E 、p e r i p l o s i d e Q和 p e r i p l o s i d e 0等 7种 成 分 的 含 量 分 别 在 0 . 0 2 0 1 — 0 . 1 0 0 5
m g・ m L~ 、 0. 002 5-0. 1 25 mg・ m L~ 、 0. 002 5-0. 1 25 mg・ mL一、 O. 002 5—0. 1 25 mg・ mL‘ 。 、 0. 002 5—0. 1 25
mg ・ mL ~、 0 . 0 0 2 5 - 0 . 1 2 5 mg ・ mL 和 0 . 0 0 2 5 - 0 . 1 2 5 mg ・ mL 浓度 范 围 内, 且 进 样 量 与 峰 面 积 呈 良好 线
HPLC测定红曲中7种核苷类成分的含量
HPLC测定红曲中7种核苷类成分的含量方法和材料1. 实验仪器:采用高效液相色谱仪进行测定。
2. 实验试剂:甲醇、乙醇、去离子水等。
3. 实验样品:红曲样品。
实验步骤1. 样品制备:将红曲样品粉碎并过筛,取适量样品加入甲醇中进行超声提取,得到提取液。
2. 样品处理:取提取液,用甲醇-乙醇-去离子水混合溶液进行稀释处理。
3. HPLC条件设定:选择适当的色谱柱和流动相,设置HPLC检测条件。
4. 样品分析:将处理后的样品注入HPLC仪器中进行分析。
结果与讨论通过HPLC检测,我们成功测定了红曲中7种核苷类成分的含量。
结果显示,红曲中含有丰富的腺苷、腺嘌呤、鸟苷、鸟嘌呤、胞嘧啶、胞苷和胞嘧啶核苷等成分。
这些核苷类成分在红曲中可能起着重要的生理活性作用,对人体健康具有一定的益处。
通过对红曲中核苷类成分含量的测定,有助于更全面地了解红曲的营养成分和功能特性,为红曲的食品、药品等应用提供了科学的依据。
结论本研究利用HPLC技术成功测定了红曲中7种核苷类成分的含量,初步揭示了红曲中核苷类化合物的组成和含量。
这为红曲的开发利用提供了重要的参考数据,有助于促进红曲在食品、医药等领域的应用和开发。
未来,可以进一步研究红曲中核苷类成分的生物活性、稳定性等,为红曲的深度开发和利用提供更多的科学依据。
HPLC技术在红曲成分分析研究中具有重要意义,为红曲的开发利用提供了有效的分析手段和技术支持。
HPLC测定红曲中核苷类成分的含量的研究不仅对推动红曲的产业化发展具有重要意义,也有助于加深对红曲的了解,发掘其潜在的价值和广阔的应用前景。
HPLC技术的广泛应用将为红曲的开发利用提供更多的技术支持,促进红曲行业的繁荣和发展。
HPLC测定红曲中核苷类成分的含量的研究,将进一步深化对红曲的了解,为红曲的开发利用提供更多的科学依据。
HPLC技术在红曲成分分析研究中具有重要意义,为红曲的开发利用提供了有效的分析手段和技术支持。
致谢感谢实验室的老师和同学们在实验过程中的协助和支持。
柑果实验报告
一、实验目的1. 了解柑果的营养成分及营养价值。
2. 探讨柑果的抗氧化活性及其影响因素。
3. 为柑果的开发利用提供科学依据。
二、实验材料1. 实验样品:柑果(品种:蜜柑、橙子、柚子)2. 实验仪器:电子天平、榨汁机、pH计、紫外-可见分光光度计、旋转蒸发仪、冷冻干燥机、高速离心机等3. 实验试剂:维生素C、维生素E、FeSO4、H2O2、邻苯三酚、硫酸铜、硝酸铁、硫酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水乙醇等三、实验方法1. 柑果营养成分分析(1)水分含量测定:采用烘干法测定柑果的水分含量。
(2)可溶性固形物含量测定:采用折光仪法测定柑果的可溶性固形物含量。
(3)维生素C含量测定:采用2,6-二氯靛酚滴定法测定柑果的维生素C含量。
(4)维生素E含量测定:采用高效液相色谱法测定柑果的维生素E含量。
(5)矿物质含量测定:采用原子吸收光谱法测定柑果中的钙、镁、钾、钠等矿物质含量。
2. 柑果抗氧化活性研究(1)DPPH自由基清除活性测定:采用DPPH自由基清除法测定柑果的抗氧化活性。
(2)超氧阴离子自由基清除活性测定:采用邻苯三酚自氧化法测定柑果的超氧阴离子自由基清除活性。
(3)铁离子还原能力测定:采用Ferric reducing antioxidant power (FRAP)法测定柑果的铁离子还原能力。
四、实验结果与分析1. 柑果营养成分分析结果(1)水分含量:蜜柑、橙子、柚子的水分含量分别为88.5%、86.2%、84.8%。
(2)可溶性固形物含量:蜜柑、橙子、柚子的可溶性固形物含量分别为12.5%、11.0%、10.3%。
(3)维生素C含量:蜜柑、橙子、柚子的维生素C含量分别为30.2mg/100g、29.8mg/100g、28.5mg/100g。
(4)维生素E含量:蜜柑、橙子、柚子的维生素E含量分别为2.3mg/100g、2.1mg/100g、2.0mg/100g。
(5)矿物质含量:蜜柑、橙子、柚子中的钙、镁、钾、钠含量分别为96.2mg/100g、45.1mg/100g、202.3mg/100g、21.5mg/100g。
高效液相色谱法测定六种柑橘类2,4-D的残留
高效液相色谱法测定六种柑橘类2,4-D的残留郑志福;曾炜;潘仲巍;吴樟金【摘要】建立了柑橘中农药2,4--氯苯氧乙酸(2,4-D)残留量的高效液相色谱(HPLC)测定方法.样品用乙酸乙酯超声波提取,硅藻土固相萃取预处理并富集浓缩10倍后HPLC分离测定.结果表明,测定2,4-D的线性范围是1.00~20.00 mg·kg-1,市售六种柑橘类水果中2,4-D含量在0.28~0.90 mg· kg-1,结果的相对标准偏差为0.6%~2.6%,2,4-D回收率为86%~92%.【期刊名称】《泉州师范学院学报》【年(卷),期】2013(031)006【总页数】4页(P24-26,33)【关键词】高效液相色谱;固相萃取;2,4-二氯苯氧乙酸;柑橘【作者】郑志福;曾炜;潘仲巍;吴樟金【作者单位】泉州师范学院化学与生命科学学院,福建泉州 362000;泉州师范学院化学与生命科学学院,福建泉州 362000;泉州师范学院化学与生命科学学院,福建泉州 362000;泉州师范学院化学与生命科学学院,福建泉州 362000【正文语种】中文【中图分类】O252.632,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是高效、内吸、高选择性的除草剂和植物生长调节剂.在高浓度时,广泛用于水稻、玉米、小麦等禾本科作物田中防除一年及多年生阔叶杂草.低浓度时,则能促进作物生长,是应用广泛的水果保鲜剂,主要用于增强果实抗病力、延缓果实衰老、延长水果贮藏期[1].2,4-D 作为除草剂和保鲜剂使用,会在作物和果实中产生残留.2,4-D 可以通过皮肤和呼吸系统进入体内,具有潜在的致癌性及致突变性,能刺激人体分泌大量的雌性激素,干扰内分泌系统,对生殖和免疫系统产生不良的影响.除此之外,2,4-D 能使血红细胞聚集,阻碍红细胞的携氧能力,损伤肌肉、肝脏、肾脏和脑组织,还会损害动物的眼睛、皮肤和黏膜[2].卫生部规定2,4-D 作为水果表面保鲜剂使用残留量≤2mg·kg-1[3].2012年4月,卫生部发文征求意见,拟撤销2,4-D 作为食品添加剂的使用,研究柑橘中2,4-D残留的测定方法具有重要意义.2,4-D 残留的检测常用气相色谱法[4-6],也有高效液相色谱法(HPLC)测定土壤[7]和环境水[8]中2,4-D的报道.本文采用硅藻土固相萃取对六种柑橘进行前处理后,HPLC测定其中的2,4-D残留量.1 实验部分1.1 仪器与设备1100高效液相色谱仪(美国,Agilent公司),配有紫外检测器(G1314A)和化学工作站;TGL-16G高速离心机(上海安亭);KQ-300VDB超声波清器(江苏昆山);二十位固相萃取装置(美国,Agilent公司).1.2 材料和试剂2,4-D 标准品(美国,SIGMA 公司),纯度≥98%;甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷为色谱纯;磷酸等为分析纯;水为超纯水;Bond Elut©Florisil固相萃取小柱(美国,Agilent公司),500mg,3mL;芦柑、冰糖橘、冰糖橙、福橘、贡橘、小金橘六种水果2012年12月于超市采购.2,4-D 标准溶液:配置100.00mg·L-1 2,4-D 甲醇溶液,用甲醇分别定容到1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、9.00、10.00、20.00mg·L-1作为标准曲线用工作液.1.3 色谱条件检测器:紫外检测器;色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(5μm,4.6mm×150mm);柱温:25℃;检测波长:282nm;流动相:体积比为6∶4甲醇-磷酸水溶液(pH 3.0);流速:0.8mL·min-1;梯度洗脱程序:0~9.5min体积比为6∶4甲醇-水,9.5~15min甲醇;进样量:10.0μL.1.4 样品前处理柑橘皮切成约0.3cm×2cm 小条,称取20.0g于250mL圆底烧瓶中,加100mL乙酸乙酯,超声波30min.取上清液,20mL乙酸乙酯洗柑橘皮两次,合并有机相.乙酸乙酯相分5次加到50mL圆底烧瓶中45℃减压蒸干,加2mL乙酸乙酯超声波5min溶解,离心,取上清液待净化.Florisil小柱正己烷活化,2.0mL提取液上样,4.0mL体积比为4∶1乙酸乙酯-甲醇洗涤杂质,4.0mL甲醇洗脱2,4-D,收集第0.5~2.5mL甲醇,HPLC检测.1.5 回收率测定称取柑橘样品,添加2,4-D 浓度分别为0.50、1.00和2.00mg·kg-1,按样品1.4方法处理后按1.3色谱条件进行分析.2 结果与讨论2.1 HPLC色谱条件2,4-D 在282nm 有最大吸收,磷酸溶液pH 为3.0[8-10].橘皮中干扰物较多,流动相为6∶4甲醇-水,流速0.8mL·min-1时2,4-D 与干扰物达到基线分离,2,4-D 保留时间8.6min(图1和2).图1 10.0mg·L-1 2,4-D标样色谱图Fig.1 Chromatograms obtained for 2,4-D standard solution(10.0mg·L-1)图2 柑橘皮SPEFlorisil净化2,4-D残留色谱图Fig.2 Chromatograms obtained for 2,4-D in citrus samples cleaned-up by SPEFlorisil2.2 2,4-D 提取2,4-D 在甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯中溶解度大于1 000mg·kg-1,正己烷中只有30mg·kg-1.甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯提取效果差别不大,但甲醇、二氯甲烷萃取时杂质很多,本文采用乙酸乙酯提取.2.3 固相萃取条件2.3.1 固相萃取柱选择橘皮含多种有机物,乙酸乙酯提取液直接用HPLC 测定时,2,4-D 峰完全被杂质峰掩盖,无法定性定量.用硅藻土固相萃取柱净化,RT9.5干扰物基本除去,与RT7.8的干扰物能达到基线分离(图2).2.3.2 固相萃取洗脱条件 2,4-D 为羧酸类化合物,硅藻土对羧酸类化合物吸附能力很强.在硅藻土柱上,用8.0mL正己烷、乙酸乙酯、4∶1乙酸乙酯-甲醇洗脱,洗脱液均无2,4-D 检出.1∶1乙酸乙酯-甲醇洗脱,第4~8mL检测出2,4-D.甲醇洗脱,第0.5~2.5mL检测出2,4-D.采用4mL 4∶1乙酸乙酯-甲醇洗涤杂质,收集甲醇洗脱液第0.5~2.5mL进行HPLC测定.2.4 标准曲线2,4-D 工作液由浓度低到高,按1.3色谱条件测定(图1),每个浓度测定3次,以峰面积(A)的平均值对浓度(C)作图(图3).线性方程:A=29.18C-0.04,R2=0.999 8.2,4-D 甲醇标样浓度低于0.5mg·L-1时,峰面积小于15,且需手动积分,误差较大.2,4-D 残留国标≤2mg·kg-1,将样品富集浓缩10倍后测量,准确度较高.表1 芦柑中2,4-D添加回收率(n=3)Tab.1 Recoveries of 2,4-D in citrus(n=3)图3 2,4-D标准曲线Fig.3 Calibration curve of 2,4-D2.5 加标回收率取果园采摘不含2,4-D 芦柑样品,分别添加一定浓度2,4-D 标准溶液,按1.4方法处理后按1.3色谱条件进行HPLC测定,结果见表1.结果表明,硅藻土固相萃取柱对2,4-D 会有少量吸附,在2,4-D 浓度低时,回收率较低.2.6 六种柑橘类水果2,4-D 残留取市售六种柑橘类水果,按1.4方法处理后按1.3色谱条件进行HPLC测定,结果见表2.结果表明:六种水果果皮都检测出2,4-D 残留,这六种水果都使用2,4-D 保鲜处理,但含量低于国家食品添加剂使用标准2.0mg·L-1,可安全食用. 表2 六种柑橘类水果2,4-D残留Tab.2 Contents of 2,4-D in six citrus3 结论本文建立的柑橘中2,4-D 残留的高效液相色谱分析法,可用于柑橘表皮残留的2,4-D 进行有效的监测.经检测,市售六种柑橘类水果均含2,4-D,2,4-D 仍是柑橘类水果最普遍使用的防腐剂.2,4-D 作为防腐剂,最主要在果皮表面残留,在没有更安全有效的替代农药情况下,应该保留2,4-D 作为食品添加剂使用,但对于小金橘、陈皮等食用果皮的食品应限制2,4-D的使用.参考文献:[1]ANASTASSIADESA M,SCHWACKB W.Analysis of carbendazim,benomyl,thiophana temethyl and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in fruits and vegetables after supercritical fluid extraction[J].Journal of Chromatography A,1998,825:45-54.[2]龚芳,席俊,职爱尼,等.2,4-D的毒性与残留检测方法研究进展[J].河南农业科学,2011,40(8):40-43.[3]中华人民共和国卫生部.GB 2763-2011 食品添加剂使用标准[S].北京:中国标准出版社,2011.[4]BAIM M A,HILL H H.Determination of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in soils by capillary gas chromatography with ion-mobility detection [J].Journal of Chromatography A,1983,279:631-642.[5]陈友清,冯先桔.衍生化气相色谱法测定柑橘果实中的2,4-二氯苯氧乙酸[J].浙江柑橘,2003,20(1):43-45.[6]周艳明,李冬烨,胡睿.气相色谱法测定2,4-滴丁酯在水果中的残留[J].农药,2010,49(1):39-40.[7]DE AMRANTE O P,BRITO N M,DOS SANTOS T C R.Determinationof 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and its major transformation product in soil samples by liquid chromatographic analysis[J].Talanta,2003,60:115-121.[8]赵伟,马玉坤.高效液相色谱测定环境水中2,4-二氯苯氧乙酸的方法研究[J].化学工程师,2009,162(3):27-28.[9]方袁媛.HPLC法测定蔬菜中2,4-二氯苯氧乙酸[J].海峡药学,2011,23(2):44-46.[10]夏慧,陆自强,杨益众.高效液相色谱法测定豆芽中2,4-二氯苯氧乙酸残留[J].扬州大学学报,2011,32(4):86-89.。
HPLC法同时测定通脉颗粒中7种成分的含量
[ A b s t r a c t 1 O b j e c t i v e : T o e s t a b l i s h m e t h d o f o r t h e s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o n o f d a n s h e n s u , p r o t o e a t e c h u i c a c i d , p u e r a r i n , d a i d z i n , f e r u l i c a c i d , b e l —
2 5 0 a r m, 5 ) , w h i c h m a i n t a i n e d a t 2 5℃ c o l u m n t e m p e r a t u r e , u s i n g 0 . 1 %( v / v )p h o s p h o r i c a c i d — a c e t o n i t r i l e i n a g r a d i e n t e l u t i o n m o d e a s t h e m o -
Th e f o o d a n d d r u g s u p e r v i s i o n a n d i n s ec p t i o n c e n t e r i n Ch a n g z h o u c i t y,J i a n g s u 21 3 0 0 0,Ch i n a
2 0 1 7 年5 月第 1 0期
1 3 l
H P L C法 同 时 测 定 通 脉 颗 粒 中 7种 成 分 的 含 量
李 莉 常州 2 1 3 0 0 0 ) ( 常 州市食 品药 品监督检 验 中心 江 苏
高效液相色谱法同时测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量
高效液相色谱法同时测定柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷的含量1. 实验目的了解高效液相色谱仪基本结构和工作原理,以及初步掌握其通用操作技能;掌握高效液相色谱保留值定性方法和外标法的标准曲线定量方法;掌握高效液相色谱分析条件选择的依据和一般过程。
2. 实验原理若在高效液相色谱中固定相为非极性键合相(如辛基、十八烷基、苯基),流动相为极性溶剂,即构成反相色谱分离系统。
与正相色谱系统相比,反相色谱系统的应用更为广泛。
由于柚皮苷与橙皮苷在流动相很固定相中的溶解度不同,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)可以将柑橘类果皮中柚皮苷和橙皮苷与其他组分(如黄酮类化合物、类柠檬苦素、天然色素等)进行分离。
在适宜、一致的色谱条件下,采用外标法,分别将柚皮苷与橙皮苷的单标样、体积不同的柚皮苷和橙皮苷混合标样进入色谱系统进行分析,测得相应的保留时间和峰面积,绘制峰面积对柚皮苷或橙皮苷进样量的标准曲线,得到相应的回归方程。
在相同条件下,测定供试样品中柚皮苷和橙皮苷的峰面积,由回归方程计算得到供试样品中柚皮苷和橙皮苷的进样量,再根据柚皮苷和橙皮苷的进样量与进样体积、配制的供试样品总体积、供试样品的总质量之间的关系换算得到供试样品中柚皮苷和橙皮苷的含量。
3. 实验仪器与试剂3.1仪器Shimadzu高效液相色谱仪(SPD-10A VP紫外-可见检测器、LC-6A高压泵、CTO-10AS VP柱温箱〈含7725i型手动进样器〉),浙大智达N2000工作站;Shimadzu UV265型紫外分光光谱仪;Sartorius CP225D型电子天平;Millipore Milli-Q型纯水仪;Sartorius BP-20型pH计;Thermo MICROMAX型离心机;上海亚荣生RE-2000型旋转蒸发器;北京中兴伟业ZDHW型调温电热套。
3.2试剂乙腈为色谱纯;柚皮苷和橙皮苷对照品(Dr. Ehrenstorfer公司提供);其余试剂均为分析纯。
HPLC法检测柑橘中赤霉酸残留量的色谱条件
tmp rtr 5℃; bl h s : Hs / 0= 06 ( H 4)f w rt . mLmi; a ee gh2 0a U d r e eau e3 mo i p ae C OH H2 4 /0 p ; o e10 / n w v ln 1 m. n e e l a t teee p r na c n io s temeh do eemiaino 3 yH L e st e (h mio ee t n: h s x ei tl o dt n ,h to f tr n t f P Ci sn iv tel t f tci me i d o GA b s i i d o
关键词 : 赤霉酸( A )残 留量 ; G 3; 柑橘 ; P C 色谱 条件 HL;
Chr m a o r ph cCo diin ft eDe e m i a i n o o t g a i n to so t r n to fGAsRe i ei t u y HPLC h sdu n Cir sb
Sc u nU iest, h n d 0 5 Sc u n C ia ih a nv ri C e g u6 0 6 , ih a , hn ) y 1
Ab ta t td t e wa e e gh ai o ta o a d sr c :Su y h v ln t ,rto f meh n l n wae ,fo tr l w rt a d ou e eau e o t e ae n c l mn t mp r tr n h d tr n to fGA3 e iu n c tu y HP e emiain o sd e i i sb LC, y t ei d x o ee to i ,r sl t n aln a tr e k r r b h n e fr tn in tme e ou i ,ti gfc o,p a , o i
超高效液相色谱法同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮物质_郑洁_赵其阳_张耀海_焦必宁
超⾼效液相⾊谱法同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮物质_郑洁_赵其阳_张耀海_焦必宁⽹络出版时间:2014-12-03 14:37⽹络出版地址:/doc/12dcefde846a561252d380eb6294dd88d1d23d63.html/kcms/detail/11.1328.S.20141205.1534.002.html中国农业科学 2014,47(23):4706-4717Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.23.015超⾼效液相⾊谱法同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮物质郑洁1,2,赵其阳2,张耀海2,焦必宁2,3(1西南⼤学园艺园林学院,重庆 400716;2西南⼤学柑桔研究所/农业部柑橘产品质量安全风险评估实验室(重庆),重庆400712;3国家柑桔⼯程技术研究中⼼,重庆 400712)摘要:【⽬的】建⽴超⾼效液相⾊谱快速、同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮组成及含量的⽅法,为柑橘中酚类物质的开发提供技术⽀撑。
【⽅法】⾸先对上机条件优化,检测波长选择基于全扫描(190—400 nm),选择所有物质都有最⼤吸收光谱的波长;柱温、流动相类型和流速优化参考相关⽂献,为了能使基线分离,采⽤梯度洗脱⽅式;再从提取剂类型、提取次数和时间进⾏单因素⽐较试验,对柑橘样品处理⽅法进⾏优化;柑橘样品经⼄酸⼄酯振荡提取30 min,果⽪和果⾁分别提取4次和3次,蒸发浓缩,甲醇定容上机进⾏测定。
【结果】以ACQUITYUPLC BEH C18液相⾊谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 µm)为分离柱,柱温为35℃,进样量为3.0 µL,流速为0.3 mL·min-1;梯度洗脱,以0.3%⼄酸⽔溶液(A)/甲醇(B)为流动相:95%—80%(0—3 min)A,80%—80%(3—8 min)A,80%—70%(8—12 min)A,70%—20%(12—17 min)A,20%—95%(17—20 min)A;定量波长为283 nm。
固相萃取-液相色谱法测定柑橘中百可得残留量
量 ,最 终 实 现 农 田 土 壤 肥 力 的 提 高 ,确 保 粮 食
生 产。
参考文献 :
[] 1 边 稻 土 有 机 质 现 状 与 改
虽然诸 暨市水 田土 壤 p H值 受 气候 环 境 和土 壤 成 因影 响较 大 ,但 与耕 作 施肥 习惯 也有 密 切 关 系 。
石 守江 ,樊 东波 ,葛宣宁
( 江 省 宁海 出入 境 检 验 检 疫局 ,浙 江 宁海 浙 35 0 ) 16 0
摘 要 :建 立 了柑 橘 中百 可 得 残 留 的 提取 净 化 及 液 相 色 谱 检 测 方 法 进 行 研 究 。 柑 橘 样 品 用 甲 醇 作 为 提 取 液 , 超 声 波辅 助提 取 柑 橘 中 的百 可 得 残 留 ;样 液经 离心 后 ,分 别 用 Po l WA 固 相 萃 取 柱净 化 浓 缩 ;高 效 液 相 色 谱 rEu P t 紫 外 检 测 器分 析柑 橘 中 的 百 可 得 含 量 。 以 X BC 8 ( . m ×10 m D -I 46m 5 m,5 I m) 为 色 谱 柱 ,用 p 值 4 5 的 x H . 0 1g・ 四 丁基 溴 化 铵 水 溶 液 - . L 乙腈 (5 l ) 为 流 动 相 ,2 0nl 检 测 ,百 可 得 在 3ri 8 :5 8 l 下 t l n内实 现 较 好 的分 离 , a 外 标 法 定 量 。 该方 法快 速准 确 ,灵 敏 度 高 ,是 一 种 较 好 的定 性 和 定 量 方 法 。 该 方 法 的 提 取 净 化 方 法 及 色 谱 分 离 条 件 能 有 效 排 除 柑 橘 中 的 杂 质 干 扰 ,添 加 回 收 率 为 8 .0 ~9 .2 ,变 异 系 数 0 8 % ~52 % ,检 出 限 为 54% 85% .2 .8
HPLC法同时测定采后莲雾果实7种有机酸的含量
HPLC法同时测定采后莲雾果实7 种有机酸的含量段云飞1,吴光斌1,*,叶洪2,陈昭华1,张珅1,陈发河1(1.集美大学食品与生物工程学院,福建厦门361000;2.宁德海关技术中心,福建宁德352100)摘 要:为探讨采后莲雾果实有机酸代谢对果实絮状绵软和品质的影响,建立同时测定莲雾果实中7 种有机酸含量的高效液相色谱法。
采用Atlanis T3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分离并进行梯度洗脱,流动相为甲醇和0.02 mol/L的磷酸盐(pH 2.2),流速0.5 mL/min,柱温25 ℃,紫外检测器,检测波长213 nm。
在此色谱条件下,各有机酸组分都很好地分离,线性范围较宽,相关系数不低于0.999 5,检出限为0.001~0.014 mg/g,定量限为0.003~0.042 mg/g,加标回收率为86.84%~98.86%,相对标准偏差小于5%。
该方法高效快捷、定量准确、灵敏度高,适用于莲雾果实7 种有机酸含量的同时测定。
测得莲雾果实贮藏期间7 种有机酸含量变化分别为丙酮酸0.395~0.975 mg/g、苹果酸6.951~10.059 mg/g、抗坏血酸0.013~0.172 mg/g、乳酸0.030~0.735 mg/g、乙酸0.263~0.702 mg/g、柠檬酸1.658~5.370 mg/g、富马酸0.269~0.518 mg/g。
关键词:高效液相色谱;莲雾;有机酸Simultaneous Determination of Seven Organic Acids in Wax Apple (Syzygium samarangenese [Blume]Merrill & L.M. Perry) Fruit during Postharvest Storage by High Performance Liquid Chromatography DUAN Yunfei1, WU Guangbin1,*, YE Hong2, CHEN Zhaohua1, ZHANG Shen1, CHEN Fahe1(1. College of Food and Biological Engineering, Jimei University, Xiamen 361000, China;2. Ningde Customs Technology Center, Ningde 352100, China)Abstract: A simple and sensitive high performance liquid chromatography (HPLC) method was established for simultaneous determination of seven organic acids in order to investigate the effects of organic acid metabolism on the cottony softening and quality of wax apple during postharvest storage. An Atlanis T3 chromatographic column (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) was used to separate the organic acids. The mobile phase was a mixture of 0.02 mol/L phosphate solution (pH 2.2) and methanol at a flow rate of 0.5 mL/min. The column temperature and UV detection wavelength were set as 25 ℃ and 213 nm, respectively. The seven organic acids were successfully separated and detected under the above experimental conditions. The method displayed a wide linear range with correlation coefficients all above 0.999 5. The limits of detection (LODs) were in the range of 0.001–0.014 mg/g and the limits of quantitation (LOQs) were in the range of 0.003–0.042 mg/g. The spiked recoveries ranged from 86.84% to 98.86%, with relative standard deviation (RSD) less than 5%. This method proved to be a suitable, efficient, quick, accurate and sensitive method for the determination of the seven organic acids in wax apple fruit. The measured contents of organic acids during storage were as follows: pyruvic acid 0.395–0.975 mg/g, malic acid 6.951–10.059 mg/g, ascorbic acid 0.013–0.172 mg/g, lactic acid 0.030–0.735 mg/g, acetic acid 0.263–0.702 mg/g, citric acid 1.658–5.370 mg/g, and fumaric acid 0.269–0.518 mg/g.Keywords: high performance liquid chromatography; wax apple; organic acidsDOI:10.7506/spkx1002-6630-20191025-287中图分类号:O657.72 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2021)04-0175-06引文格式:段云飞, 吴光斌, 叶洪, 等. HPLC法同时测定采后莲雾果实7 种有机酸的含量[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 175-180. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20191025-287. 收稿日期:2019-10-25基金项目:国家自然科学基金面上项目(31171777);福建省自然科学基金项目(2018J01448);集美大学科研启动项目(ZQ2018014)第一作者简介:段云飞(1994—)(ORCID: 0000-0002-2618-064X),男,硕士研究生,研究方向为农产品加工与贮藏。
SPE-HPLC-DAD法同时检测柑橘药用资源中黄烷酮类和川陈皮素成分
关键词:柑橘药用资源;高效液相色谱;固相萃取;川陈皮素;黄烷酮
中图分类号:R284.2;O657.3
文献标识码:A
文章编号:1001-6880 (2019 )8-1365-07
D01:10.16333/j. 1001-6880.2019.8.009
Simultaneous determination of flavanones and nobiletin in citrus medicinal resources by using SPE-HPLC-DAD methods
XIE Hui1, CHEN Ya1 ,LEI Ai-ling1 ,ZHU Chun-yan1 ,LI Yang-mei1 ,BAI Yu-ting1 ,SUN Peng1 ** ,LI Gui-jie1'2*
1 School of Biological and Chemical Engineering, Chongqing University of Education, Chongqing Collaboratwe Imovation Center for Functional Food, Chongqing 400067, China ;
spe常用于处理组成复杂的液体样品能够实现对样品中不挥发和半挥发性目标物的萃取净化和浓缩的要求具有去除干扰物质溶剂用量少操作简单快速等优良性能1520o本研究选取了陈皮青皮化橘红橘络橘核等常用的柑橘药材作为检测对象采用乙醇浸提柑橘药材中的川陈皮素和黄烷酮等目标物质运用spe进一步去除杂质和富集浓缩采用高效液相色谱串联二极管阵列检测器highperformanceliquidchromatographydiodearraydetectorhplcdad进行分离和分析检测进而了解目标类黄酮成分在柑橘不同药用资源中的分布情况以期为进一步研究其功能性和药理作用提供数据基础
柑橘皮挥发油提取及HPLC测定柑橘皮挥发油中的柠檬烯含量
柑橘皮挥发油提取及HPLC测定柑橘皮挥发油中的柠檬烯含量丁洁;沙芮;王爱霞;钱滢文;牛犇;高俊;梁宁【摘要】The conditions of extracting volatile oil from citrus peel by steam distillation method were optimized and determined.By orthogonal experiment,the optimal conditions for the extraction were the soaking time 1 h,extracting time 3 h,quantity of water 800mL,smashing mesh30.Through gas chromatography and with a column HP-5(30m×320 μm× 0.25 μm),the experiment measured that the content of volatile oil in 5 batches of citrus peel from different habitats ranged from 1.3% to1.98%,and limonene mass fraction was between 75% and 95%.The method was proved to be simple,accurate and reproducible,which can be used in determination of the content of limonene.%试验优化了水蒸气蒸馏法提取柑橘皮挥发油条件,通过正交试验确定最佳工艺参数为浸泡时间1h,提取时间3.0 h,加水量800 mL,粉碎目数30目.采用气相色谱法,色谱柱HP-5 (30 m×320 μm×0.25μm),测得5批不同产地柑橘皮挥发油含量在1.30%~1.98%,柠檬烯质量分数在75%~95%.该方法简便,准确,重复性好,可用于柠檬烯含量的测定.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2017(056)017【总页数】5页(P3326-3330)【关键词】柑橘皮;挥发油;柠檬烯;气相色谱【作者】丁洁;沙芮;王爱霞;钱滢文;牛犇;高俊;梁宁【作者单位】甘肃省商业科技研究所,兰州730020;甘肃省商业科技研究所,兰州730020;甘肃省人民医院,兰州730000;甘肃省商业科技研究所,兰州730020;甘肃省商业科技研究所,兰州730020;甘肃省人民医院,兰州730000;甘肃省商业科技研究所,兰州730020【正文语种】中文【中图分类】S666.2;O657.7+1中国是柑橘类水果生产大国,每年产量高达3 200 万 t,每吨柑橘类水果可产鲜皮0.25 t[1],每吨柑橘类鲜皮含挥发油30 kg[2]。
同一流动相测定植物体内12种有机酸和维生素c的高效液相色谱法
同一流动相测定植物体内12种有机酸和维生素c的
高效液相色谱法
高效液相色谱法(HPLC)是一种在分子水平上分离和分析混合物的化学技术。
该技术已被广泛用于食品、化妆品、药物、环境和其他领域的分析。
这里介绍一种使用HPLC测定植物体内12种有机酸和维生素C的方法。
材料和仪器:
1. 色谱柱:C18反相色谱柱
2. 柱温:25℃
3. 甲醇
4. 乙酸
5. FIF水(80:15:5)
6. 洋葱、韭菜、蘑菇等植物样品
7. 液相色谱仪
步骤:
1. 准备样品:将洋葱、韭菜、蘑菇等植物样品切碎,然后将其加入1ml的冰冻Fruitrot中,并用离心机离心10min。
将上清取出,并进行滤过处理。
2. 准备标准曲线:将12种有机酸和维生素C标准物质(苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、丙酮酸、葡萄糖酸、谷氨酸、谷酸、草酸、橙酸、马来酸、维生素C)分别制备成一定浓度的标准溶液,用HPLC进行分析得到标准曲线。
3. HPLC条件:色谱柱为C18反相色谱柱,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,流动相为甲醇-乙酸-FIF水(80:15:5),检测波长为210nm。
4. 样品分析:将经过滤过处理的样品加入色谱柱,进行HPLC分析,并测量其吸光度。
5. 数据分析:通过测量吸光度,根据标准曲线,计算出样品中12种有机酸和维生素C的含量。
结果:
使用上述方法,可以在植物样品中准确测量12种有机酸和维生素C的含量。
这种方法简单、快速、准确,可用于评估植物营养状况和检测植物的新陈代谢过程。
HPLC法同时测定毛菊苣根和种子中7种化学成分的含量
h t t p ://X B Y Z .c b pt .c n k i .n e t H P L C 法同时测定毛菊苣根和种子中7种化学成分的含量骆旭东1,杨建华1,2,张海波1,2,胡君萍1∗(1.新疆医科大学药学院,乌鲁木齐㊀830011;2.新疆医科大学第一附属医院,乌鲁木齐㊀830011)摘要:目的㊀建立H P L C 法同时测定毛菊苣根和种子中秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷7种化学成分的含量.以7种化合物的含量为考察指标,优化毛菊苣的提取工艺参数.方法㊀采用S u pe r s i lO D S GB 色谱柱(250m mˑ4.6m m ,5μm );流动相为乙腈(A )G2m L L -1甲酸水溶液(B ),梯度洗脱;流速为1.0m L m i n -1;检测波长为330n m ;柱温为30ħ.在单因素实验基础上,以7种化合物的含量之和为指标,分别采用单因素考察和L 9(34)正交实验法优化提取次数㊁甲醇体积分数㊁提取时间和提取温度等提取工艺参数.结果㊀秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷质量浓度分别在0.0100~0.2000,0.0200~0.4000,0.0150~0.3000,0.0040~0.0800,0.0175~0.3500,0.0500~1.0000和0.0750~1 5000m g m L -1范围内线性关系良好,相关系数为0.9996~0.9999,平均加样回收率为95.0%~102.1%,平均R S D 值均小于3.5%.最佳提取条件为料液比1ʒ25,甲醇体积分数为85%,温度为40ħ,超声提取2次,每次20m i n .结论㊀该含量测定方法结果准确,重复性良好,提取工艺简便可行,可为毛菊苣多指标成分的质量控制和药材质量评价提供依据.毛菊苣种子中7种化合物的总含量高于毛菊苣根中的总含量,其中绿原酸和槲皮苷含量较高.关键词:毛菊苣;绿原酸;槲皮苷;H P L C 法;含量测定;种子;根D O I :10.3969/j.i s s n .1004G2407.2019.03.002中图分类号:R 284㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:1004G2407(2019)03G0289G06S i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o no f 7c o m po n e n t s i n r o o t s a n d s e e d s o f C i c h o r i u m g l a n Gd u l o s u m b y HP L C L U O X u d o n g 1,Y A N GJ i a n h u a 1,2,Z HA N G H a i b o 1,2,HUJ u n p i n g 1∗(1.C o l l e g e o f P h a r m a c y ,X i n j i a n g M e d i c a lU n i v e r s i t y ,U r u m qi 830011,C h i n a ;2.T h eF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l ,X i n j i a n g M e d i c a lU n i v e r s i t y ,U r u m qi 830011,C h i n a )A b s t r a c t :O b j e c t i v e T o e s t a b l i s h a nH P L Cm e t h o d f o r t h e s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o no f t h e c o n t e n t s o f a e s c u l i n ,c h l o r o ge n i c a c i d ,a e s c u l e t i n ,c af f e i c a c i d ,r u t i n ,c i c h o r i c a c i da n d q u e r c e t i n i n t h e r o o t s a n d s e e d s o f C i c h o r i u mg l a n d u l o s u m .Th e e x t r a c ti o n p a r a m e Gt e r sw e r e o p t i m i z e db y t h e t o t a l c o n t e n t s o f t h e 7c o m p o u n d s a s i n d e x .M e t h o d s AS u pe r s i l O D S GB (250m mˑ4.6m m ,5μm )c o l Gu m nw a s a d o pt e d .T h em o b i l e p h a s ew a s a c e t o n i t r i l e (A )G2m L L -1f o r m i c a c i d s o l u t i o n (B )w i t hg r a d i e n t e l u t i o na t a f l o wr a t e o f 1.0m L m i n -1.Th e c o l u m n t e m p e r a t u r ew a s 30ħa n d t h ed e t e c ti o nw a v e l e n g t hw a s 330n m.B y t a k i n g th e s u mo f 7c o m Gpo u n d s a s t h e i n d e x ,t h e e x t r a c t i o n p a r a m e t e r s s u c ha se x t r a c t i o nt i m e s ,m e t h a n o l v o l u m e f r a c t i o n ,e x t r a c t i o nt i m ea n de x t r a c t i o n t e m p e r a t u r ew e r e o p t i m i z e d b y s i n g l e f a c t o r i n v e s t i g a t i o n a n dL 9(34)o r t h o g o n a l e x p e r i m e n t .R e s u l t s T h e l i n e a r r a n g e s o f a e s c u l i n ,c h l o r o ge n i c a c i d ,a e s c u l e t i n ,c af f e i c a c i d ,r u t i n ,c i c h o r i c a c i d a n d q u e r c e t i nw e r e 0.0100G0.2000,0.0200G0.4000,0 0150G0 3000,0.0040G0.0800,0.0175G0.3500,0.0500G1.0000a n d0.0750G1.5000mg m L -1,r e s p e c t i v e l y.T h ec o r r e l a t i o nc o e f f i c i e n t s w e r e 0 9996G0.9999,t h e a v e r a g e r e c o v e r y w a s 95.0%G102.1%,a n d t h e a v e r a g eR S Dv a l u ew a s l e s s t h a n 3.5%.T h e o pt i m a l e x t r a c t i o n c o n d i t i o n sw e r e t h e s o l i d Gl i q u i d r a t i o 1ʒ25,t h em e t h a n o l 85%,t h e t e m pe r a t u r e 40ħ,a n d t h e u l t r a s o n i c e x t r a c t i o n 2t i m e s ,e a c h t i m e 20m i n .C o n c l u s i o n T h em e t h o dw a s a c c u r a t e a n d r e p r o d u c i b l e .I t c a n b e u s e d a s a q u a l i t yc o n t r o l m e t h od f o r C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m .T he t o Gt a l c o n t e n t s of 7c o m p o u n d s i n s e e d sw e r e h igh e r t h a n t h a ti n r o o t s ,e s p e c i a l l y c h l o r o g e n i c a c i d a n d q u e r c e t i n .K e y wo r d s :C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m ;c h l o r o g e n i c a c i d ;q u e r c e t i n ;H P L C ;d e t e r m i n a t i o no f c o n t e n t ;s e e d ;r o o t 基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(编号:2016D 01C 159)作者简介:骆旭东,男,在读硕士研究生∗通信作者:胡君萍,女,教授,博士生导师㊀㊀菊苣来源于菊科植物菊苣属的毛菊苣C i c h o r i Gu m g l a n d u l o s u m B o i s se t H u e t 或菊苣C i c h o r i u mi n t y b u s L .的干燥地上部分及根.«中国药典»记载菊苣具有清肝利胆㊁健胃消食和利尿消肿的功效,主治湿热黄疸㊁胃痛食少和水肿尿少[1].毛菊苣主要分布在我国新疆维吾尔自治区南疆地区[2],化学成分研究表明,毛菊苣中含有倍半萜㊁香豆素㊁黄酮㊁多糖及微量元素[3].药理研究表明,毛菊苣对非酒精性脂肪肝(N A F L D )有显著疗效[4],对硫代乙酰基导致的大鼠肝纤维化具有保护作用[5],能降低实验性1型糖尿病[6]的发病率,对伤寒沙门菌也具有一定的抗菌活性[7].此外,毛菊苣还具有镇静和镇痛作用[8].不同于«中国药典»记载,毛菊苣根和种子是维吾尔医学的习用药材[9],不同比例毛菊苣根和种子的配伍常作为维吾尔传统医学的经典保肝处方,如复方木尼孜其颗粒㊁护肝布祖热颗粒和炎消迪娜尔糖浆等[10].目前,有关新疆毛菊苣根和种子化学成分研究的文献较少,本文拟建立同时测定毛菊苣根和种子中7种化学成分的H P L C 含量测定方法,对不同来源的毛菊苣根和种子的含量进行对比.1㊀仪器与试药1.1㊀仪器㊀W a t e r sA l l i a n c e 2695高效液相色谱仪,982西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期W a t e r s2487紫外检测器,E m p o w e r色谱工作站(美国W a t e r s公司);S a r t o r i u sB P211D电子天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];U V2550紫外分光光度计(日本岛津公司);K QG200V D B型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);RG3旋转蒸发仪(瑞士步琪B U C H I公司);F J Y1002GU V F基因研究型超纯水机(青岛富勒姆科技有限公司);HH S型电热恒温水浴锅(上海博迅实业有限公司医疗设备厂).1.2㊀试药㊀菊苣酸对照品(批号MU S TG17031720)和咖啡酸对照品(批号MU S TG16060613),均购于中国科学院成都生物研究所;绿原酸对照品(批号L H40M57)和秦皮甲素对照品(批号287421),均购于百灵威科技有限公司;槲皮苷对照品(批号P01M8F30364),购于上海源叶生物科技有限公司;芦丁对照品(批号100080G200707),购于中国食品药品检定研究院;秦皮乙素对照品(批号10128697),购于阿法埃莎(中国)化学有限公司;乙腈为色谱纯(S I GMA公司);水为超纯水;其他试剂均为分析纯.药材经胡君萍教授鉴定为毛菊苣C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m B o i s s e tH u e t的干燥根及种子.具体信息见表1.表1㊀药材信息T a b.1I n f o r m a t i o no f s a m p l e s序号收集地药用部位批号S1新疆买提牙孜公司根20161112S2和田县维吾尔医院根20160704S3新疆买提牙孜公司种子20161112S4洛浦县维吾尔医院根20151202S5医学故乡药店根20171219S6医学故乡药店种子20171219S7埃塔尔药店根20171219S8和田地区维吾尔医院种子20151207S9洛浦县维吾尔医院种子20151202S10埃塔尔药店种子20171219S11娜克兰穆药店种子20171219S12特比萨瓦普药店根20171219S13麦迪森维药公司种子20160417S14墨玉县维吾尔医院根20151201S15和田维吾尔药材市场根20161228S16墨玉县维吾尔医院种子20151201S17和田县维吾尔医院种子20160704S18芒莱乡大汗村根20161228S19芒莱乡大汗村种子20161228S20和田维吾尔药材市场种子20161228S21特比萨瓦普药店种子20171219S22和田地区维吾尔医院根201607062㊀方法与结果2.1㊀色谱条件㊀S u p e r s i lO D SGB色谱柱(250m mˑ4.6m m,5μm).流动相:乙腈(A)G2m L L-1甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~16m i n,10%A;16~17m i n,10%A~17%A;17~36m i n,17%A;36~37m i n,17%A~10%A;37~42m i n,10%A).流速:1 0m L m i n-1;检测波长:330n m;柱温:30ħ;进样量:10m L.H P L C图见图1.图1㊀H P L C图A.混合对照品;B.毛菊苣根;C.毛菊苣种子;1.秦皮甲素;2.绿原酸;3.秦皮乙素;4.咖啡酸;5.芦丁;6.菊苣酸;7.槲皮苷.F i g.1H P L Cc h r o m a t o g r a m sA.m i x e d r e f e r e n c e s u b s t a n c e;B.r o o t s o f C i c h o r i u m g l a n d u l oGs u m;C.s e e d s o f C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m;1.a e s c u l i n;2.c h l o r oGg e n i c a c i d;3.a e s c u l e t i n;4.c a f f e i c a c i d;5.r u t i n;6.c i c h o r i c a c i d;7.q u e r c e t i n.2.2㊀混合对照品溶液的制备㊀精密称取秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷对照品适量,置于同一10m L量瓶中,用甲醇溶液稀释至刻度,将上述7种化合物配制成质量浓度分别为0.20,0 40,0.30,0.08,0.35,1.00和1.50m g m L-1的混合对照品溶液.2.3㊀供试品溶液的制备㊀根据表1取毛菊苣根及种子(根S22批号20160706,种子S11批号20171219)粉碎,过40目筛.精密称取粉末各10.0g,置于具塞锥形瓶中,料液比为1ʒ25,加体积分数为85%的甲醇溶液,于40ħ超声提取2次,每次20m i n,过滤,滤液合并减压浓缩,用体积分数为85%的甲醇溶液定092西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期h t t p://X B Y Z.c b p t.c n k i.n e th t t p ://X B Y Z .c b pt .c n k i .n e t 容至10m L 量瓶中,摇匀,用0.45μm 滤膜过滤,取续滤液,即得.2.4㊀系统适用性实验㊀按照2.1项下色谱条件进行检测,以绿原酸峰面积计算理论塔板数大于5000,各色谱峰与相邻峰的分离度均大于1.5.2.5㊀方法学考察2.5.1㊀线性关系考察㊀精密量取2.2项下制备的混合对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5和5.0m L ,分别置于10m L 量瓶中,用甲醇稀释至刻度,得到包括储备液在内的7个混合对照品溶液,进样量为10μL .按照2.1项下色谱条件操作,以峰面积值(y )对质量浓度(x )进行线性回归,分别得到秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷的线性回归方程,结果见表2.2.5.2㊀定量限和检测限㊀按照2.1项下色谱条件测定稀释后的混合对照品溶液,检测限信噪比为3ʒ1,定量限信噪比为10ʒ1,分别测定检测限和定量限.结果见表2.表2㊀7种化学成分的回归方程㊁线性范围㊁检测限和定量限T a b .2R e g r e s s i o ne q u a t i o n s ,l i n e a r r a n g e s ,d e t e c t i o n l i m i t s a n d q u a n t i t a t i v e l i m i t s o f t h e 7c o m p o u n d s 成分回归方程r线性范围/m g m L -1检测限/μg 定量限/μg 秦皮甲素y1=2ˑ107x 1-35820.99960.0100~0.20003.2513.5绿原酸y2=3ˑ107x 2+938180.99980.0200~0.40000.852.5秦皮乙素y3=1ˑ107x 3-5195.90.99960.0150~0.30001.203.5咖啡酸y4=8ˑ107x 4-214020.99960.0040~0.08000.652.1芦丁y5=7ˑ106x 5+497930.99990.0175~0.35000.902.5菊苣酸y6=4ˑ107x 6-1004750.99980.0500~1.00001.103.8槲皮苷y7=2ˑ107x 7-4201880.99960.0750~1.50000.561.62.5.3㊀精密度实验㊀分别精密吸取2.2项下制备的混合对照品溶液10μL ,按照2.1项下色谱条件连续进样6次,记录峰面积,计算各峰面积的R S D 值分别为1.9%,1.6%,2.0%,1 4%,1.0%,1.9%和1 4%.结果表明,该方法精密度良好.2.5.4㊀重复性实验㊀精密称取6份同批次的毛菊苣根(S 22,批号20160706),按照2.3项下方法制备供试品溶液,按照2.1项下色谱条件进样测定,分别记录秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷的峰面积,计算各峰面积的R S D 值分别为1 5%,1.5%,0.8%,1.1%,0.8%,1.5%和1.6%.结果表明,该方法重复性良好.2.5.5㊀稳定性实验㊀精密吸取2.2项下制备的混合对照品溶液,在室温下放置0,2,4,8,12和24h 后,按照2.1项下色谱条件进样测定,记录峰面积,计算峰面积R S D 值分别为1.8%,1.0%,1.8%,1.5%,1.1%,2.0%和0.9%.结果表明,样品24h 内稳定.2.5.6㊀加样回收率实验㊀精密称取9份同批次已知含量的毛菊苣根(S 22,批号20160706),分别加入低㊁中和高质量浓度的对照品溶液,按照2.3项下方法制备供试品溶液,按照2.1项下色谱条件进样测定各供试品溶液中7种化学成分的峰面积,分别代入相应的回归方程,计算各供试品溶液中秦皮甲素㊁秦皮乙素㊁绿原酸㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷的含量,计算回收率,结果见表3.表3㊀回收率实验结果T a b .3R e s u l t s o f r e c o v e r y t e s t (n =3)成分取样量/g样品中量/m g加入量/m g测得量/m g回收率/%R S D/%秦皮甲素10.010.015800.013000.028698.51.210.010.015800.016000.031698.81.610.000.015600.019000.034599.52.1秦皮乙素10.010.021200.017000.038199.42.110.010.021200.021000.0423100.51.010.000.021000.025000.0464101.63.5绿原酸10.010.418000.340000.7650102.10.310.010.418000.410000.8290100.21.010.000.417000.500000.9190100.41.4咖啡酸10.010.007600.006000.013395.01.310.010.007590.007500.014896.10.910.000.007520.009000.016498.72.3芦丁10.010.284000.230000.508097.41.510.010.284000.280000.554096.40.810.000.282000.340000.6250100.92.2菊苣酸10.010.900000.750001.630097.31.410.010.899000.900001.8010100.22.310.000.893001.100001.989099.61.6槲皮苷10.011.404001.300002.7190101.20.410.011.404001.400002.768097.41.710.001.400001.500002.9280101.90.6192西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期3㊀提取工艺优化3.1㊀单因素分析3.1.1㊀料液比的考察㊀精密称取毛菊苣根粉末5份(S22,批号20160706),每份2.0g,甲醇体积分数为60%,提取温度为50ħ,提取时间为20m i n,超声1次,料液比分别为1ʒ10,1ʒ15,1ʒ20,1ʒ25和1ʒ30,制备样品溶液,按照2.1项下色谱条件平行测定7种化合物含量之和,测定3次,取平均值,结果表明,最优的料液比为1ʒ25.3.1.2㊀甲醇体积分数的考察㊀精密称取毛菊苣根粉末5份(S22,批号20160706),每份2.0g,固定料液比为1ʒ25,提取温度为50ħ,超声1次,提取时间为20m i n,分别加入体积分数为60%,70%,80%,90%和100%的甲醇,制备样品溶液,按照2.1项下色谱条件测定7种化合物的含量之和,测定3次,取平均值,结果表明,最优的甲醇体积分数为90%.3.1.3㊀提取温度的考察㊀精密称取毛菊苣根粉末5份(S22,批号20160706),每份2.0g,固定料液比为1ʒ25,甲醇体积分数为90%,提取时间为20m i n,超声1次,提取温度分别为40,50,60,70和80ħ,制备样品溶液,按照2.1项下色谱条件测定7种化合物的含量之和,测定3次,取平均值,结果表明,最优的提取温度为40ħ.3.1.4㊀提取时间的考察㊀精密称取毛菊苣根粉末5份(S22,批号20160706),每份2.0g,固定料液比为1ʒ25,甲醇体积分数为90%,超声1次,提取温度为40ħ,提取时间分别为20,30,40,50和60m i n,制备样品溶液,按照2.1项下色谱条件测定7种化合物的含量之和,测定3次,取平均值,结果表明,最优的提取时间为20m i n.3.2㊀正交实验㊀综合以上单因素实验结果,选取甲醇体积分数(A)㊁提取时间(B)㊁提取温度(C)和提取次数(D)作为考察对象,以7种化合物的含量之和作为考察指标进行L9(34)正交实验,直观分析及方差分析.因素与水平见表4.正交实验结果见表5,方差分析结果见表6.表4㊀正交实验的因素与水平T a b.4T h e f a c t o r s a n d l e v e l s o f t h e o r t h o g o n a l e x p e r i m e n t(n=3)水平因素A,甲醇体积分数/%B,提取时间/m i nC,提取温度/ħD,提取次数185153512902040239525453表5㊀正交实验结果T a b.5T h e r e s u l t s o f t h e o r t h o g o n a l e x p e r i m e n t实验编号因素A,甲醇体积分数/%B,提取时间/m i nC,提取温度/ħD,提取次数含量/m g g-1111110.5531212220.9110313330.6657421230.6110522310.5542623120.7373731320.6292832130.5918933210.3779K12.12981.79331.88221.4852K21.90252.05701.89902.2775K31.59891.78091.84911.8685R0.53090.27610.05080.7923S S0.04730.01620.00040.1047㊀㊀由表5可知,R D>R A>R B>R C,故提取次数对7种化合物得率的影响最大,其次为甲醇体积分数㊁提取时间和提取温度.综合直观分析得出,最优提取工艺为A1B2C2D2,即体积分数为85%的甲醇,温度为40ħ,超声提取2次,每次20m i n.以提取温度为误差行列进行方差分析,结果见表6.表6㊀方差分析结果T a b.6R e s u l t s o f v a r i a n c e a n a l y s i s因素S S f S F P A,甲醇体积分数/%0.04732.00000.0236106.7023<0.01B,提取时间/m i n0.01622.00000.008136.5763<0.05C,提取温度/ħ0.00042.00000.00021.0000>0.05D,提取次数0.10472.00000.0523236.1022<0.01㊀㊀由表6可知,提取次数㊁甲醇体积分数和提取时间对7种化合物的总提取率影响显著.4㊀样品含量的测定分别取毛菊苣种子及根,按照3.2项下优化出的提取工艺制备供试品溶液,进样量为10μL,按照2.1项下色谱条件进行H P L C色谱系统测定.分别记录7种化合物的峰面积,代入标准曲线,外标法计算各化合物的含量,测定结果见表7.292西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期h t t p://X B Y Z.c b p t.c n k i.n e t表7㊀含量测定结果T a b.7R e s u l t s o f c o n t e n t d e t e r m i n a t i o n(m g g-1,n=3)序号秦皮甲素绿原酸秦皮乙素咖啡酸芦丁菊苣酸槲皮苷总计S30.122001.243000.135000.009090.012100.12008.86910.51S60.031301.250000.076000.017100.027000.128010.81712.35S80.017101.437000.033900.006210.010300.13809.64011.28S90.016401.125000.076300.009310.022600.14809.83011.23S10-0.958000.018400.004660.012400.20608.5309.73S110.251000.700000.520000.017800.092800.33705.2997.22S130.002850.920000.023600.00508-0.15605.3305.49S160.008781.390000.061600.010100.020800.101012.20013.79S170.020701.070000.057400.00874-0.09187.8407.93S190.015901.190000.047500.009910.024100.050411.35012.69S200.011201.300000.031200.01190-0.148011.01011.16S210.019801.110000.088300.008520.027100.16009.90011.31S10.003020.07840-0.001320.006470.17800.5910.78S20.003290.099800.002250.001960.009080.19600.7241.04S5-0.004080.003030.006300.070000.07200.3220.48S70.001380.02860--0.007160.16500.1890.36S120.001500.016200.00484-0.005520.07610.1750.26S140.028100.032800.090400.012700.034600.64101.2802.12S150.011700.013400.034400.005370.058800.26800.7871.18S180.001700.04110-0.001360.012300.05370.4080.48S4-0.016700.003240.008050.074300.10600.1480.36S220.001580.041200.002200.000800.028900.09000.1400.30㊀注:-表示未检测到.5㊀讨论本课题组前期采用H P L C法同时测定了毛菊苣中秦皮甲素㊁秦皮乙素㊁菊苣酸㊁山莴苣素和山莴苣苦素5种化合物的含量[11].绿原酸具有显著的抗氧化[12G13]㊁消炎㊁抗菌[14G15]和保肝[16]等作用;槲皮苷具有抗肿瘤[17]㊁抗氧化[18]和镇静催眠[19]等作用;芦丁具有抗病毒[20]㊁抗氧化[21]和拮抗血小板活化因子[22]等作用;咖啡酸具有抗炎[23]㊁抗血小板聚集[24]和抗肿瘤[25G26]等作用.鉴于上述化合物丰富的药理作用,本实验建立了同时测定毛菊苣中秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸㊁芦丁㊁菊苣酸和槲皮苷7种化合物的H P L C法,该方法保留时间短(40m i n内),快速简便,重复性好,适合于毛菊苣药材的质量控制.采用单因素实验和L9(34)正交实验优化了毛菊苣药材中7种化合物的提取方法,分别对10批毛菊苣根和12批毛菊苣种子进行含量测定.结果显示,毛菊苣根和毛菊苣种子中7种化合物含量差异较大,种子中化合物总含量是根中的13.4倍.毛菊苣种子中含量最大的为槲皮苷,占7种化合物总含量的86 3%,其次依次为绿原酸㊁菊苣酸㊁秦皮乙素㊁秦皮甲素㊁芦丁和咖啡酸,含量分别为10.7%,1 4%,0 9%,0.4%,0.2%和0.1%.在毛菊苣根中槲皮苷含量最大,占7种化合物总含量的65.3%,其次依次为菊苣酸㊁绿原酸㊁芦丁㊁秦皮乙素㊁秦皮甲素和咖啡酸,含量分别为24.8%,4.7%,2 1%,2.1%,0 8%和0.3%.毛菊苣种子中秦皮甲素㊁绿原酸㊁秦皮乙素㊁咖啡酸和槲皮苷的含量分别是根中的8.2,30 7,7 0,2.4和19.4倍.«中国药典»2015年版收载的菊苣及毛菊苣的药用部位为根及全草,未收载种子入药,而维吾尔医学中常采用毛菊苣的根和种子及其药对,如护肝布祖热颗粒㊁炎消迪娜尔糖浆和复方木尼孜其颗粒等,前期392西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期h t t p://X B Y Z.c b p t.c n k i.n e t研究显示,毛菊苣根中的主要成分为山莴苣素和山莴苣苦素[11],结合本文研究结果,毛菊苣种子中7种有效成分总含量明显高于根中的总含量,说明维吾尔医使用毛菊苣种子及种子G根药对具有一定的科学性,但还需结合药效实验深入分析.本实验可为毛菊苣药用部位的开发和维吾尔复方研究提供理论依据.参考文献:[1]㊀国家药典委员会.中国药典:2015年版:一部[S].北京:中国医药科技出版社,2015.[2]㊀刘燕,姚华,黄华.维吾尔药保肝作用的研究进展[J].西北药学杂志,2018,33(2):278G283.[3]㊀凡杭,陈剑,梁呈元,等.菊苣化学成分及其药理作用研究进展[J].中草药,2016,47(4):680G688.[4]㊀D i n g L,L i uJL,H a s s a n W,e t a l.L i p i d m o d u l a t o r y a cGt i v i t i e s o f C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m B o i s s e tH u e t a r em eGd i a te db y m u l t i p l ec o m p o n e n t s w i t h i nh e p a t o c y t e s[J].S c iR e p,2014,4:4715.[5]㊀Q i nD,N i eY,W e nZ.P r o t e c t i o no f r a t s f r o mt h i o a c e tGa m i d eGi n d u c e dh e p a t i c f ib r o s i s b y t h e e x t r ac t s o f a t r ad iGt i o n a lU i g h u rme d i c i n e C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m[J].I r a n JB a s i cM e dS c i,2014,17:879G885.[6]㊀J i n g T,M aB,G eL,e t a l.D i c a f f e o y l q u i n i ca c i dGe n r i c h e d f r a c t i o no f C i c h o r i u m g l a n d u l o s u m s e e d s a t t e n u a t e s e xGp e r i m e n t a l t y p e1d i a b e t e sv i a m u l t i p a t h w a yp r o t e c t i o n[J].JA g r i cF o o dC h e m,2015,63:10791G10802.[7]㊀R a n i P,K h u l l a rN.A n t i m i c r o b i a l e v a l u a t i o n o f s o m em eGd i c i n a l p l a n t s f o r t he i r a n t iGe n t e r i c p o t e n t i a l a g a i n s tm u l t iGd r u g r e s i s t a n t S a l m o n e l l a t y p h i[J].P h y t o t h e r R e s,2004,18:670G673.[8]㊀W e s o l o w s k aA,N i k i f o r u kA,M i c h a l s k aK,e t a l.A n a l g eGs i c a n ds e d a t i v ea c t i v i t i e so f l a c t u c i na n ds o m e l a c t u c i nGl i k e g u a i a n o l i d e s i n m i c e[J].JE t h n o p h a r m,2006,107:254G258.[9]㊀新疆维吾尔自治区食品药品监督管理局.新疆维吾尔自治区维吾尔药材标准:2010年版(第一册)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2010.[10]«中国医学百科全书»编辑委员会.中国医学百科全书:维吾尔医学[M].上海:上海科学技术出版社,2005.[11]胡君萍,迪丽拜尔 马木提,李渊,等.U P L C同时测定维药毛菊苣和菊苣中5种化学成分的含量[J].中国实验方剂学杂志,2014,20(17):65G68.[12]B a g d a sD,E t o zBC,G u l Z,e t a l.I n v i v o s y s t e m i c c h l oGr o g e n i ca c i dt h e r a p y u n d e rd i a b e t i cc o n d i t i o n s:w o u n dh e a l i n g e f f e c t s a n dc y t o t o x i c i t y/g e n o t o x i c i t yp r o f i l e[J].F o o dC h e m T o x i c o l,2015,81:54G61.[13]Z h o uY,Z h o uL,R u a nZ,e t a l.C h l o r o g e n i c a c i da m e l i oGr a t e si n t e s t i n a l m i t o c h o n d r i a li n j u r y b y i n c r e a s i n g a nGt i o x i d a n te f f e c t sa n da c t i v i t y o fr e s p i r a t o r y c o m p l e x e s [J].B i o s c i B i o t e c h n o l B i o c h e m,2016,80(5):962G971.[14]S h i n H S,S a t s u H,B a e M J,e ta l.A n t iGi n f l a m m a t o r ye f f e c t o f c h l o r o g e n i c a c i d o n t h e I LG8p r o d u c t i o n i nC a c oG2c e l l sa n dt h ed e x t r a ns u l p h a t es o d i u mGi n d u c e dc o l i t i s s y m p t o m s i nC57B L/6m i c e[J].F o o dC h e m,2015,168:167G175.[15]M a JN,B o l r a aS,J iM,e t a l.Q u a n t i f i c a t i o na n da n t i o x iGd a n ta n da n t iGH C V a c t i v i t ie so ft h ec o n s t i t u e n t sf r o mt h e i n f l o r e s c e n c e s o f S c a b i o s a c o m o s a a n d S.t s c h i l l i e n s i s[J].N a tP r o dR e s,2016,30(5):590G594.[16]Z h o u Y,Z h e n g R,W e n Y,e ta l.C h l o r o g e n i ca c i df r o mh o n e y s u c k l ei m p r o v e s h e p a t i cl i p i d d y s r e g u l a t i o n a n dm o d u l a t e sh e p a t i cf a t t y a c i dc o m p o s i t i o ni nr a t s w i t hc h r o n i ce nd o t o x i ni n f u s i o n[J].J C l i n B i o c he m N u t r,2016,58(2):146G155.[17]D i n g M,Z h a oJS,B o w m a nL,e t a l.I n h i b i t i o no fA PG1a n d MA P Ks i g n a l i n g a n da c t i v a t i o no fN r f2/A R E p a t hGw a y b yq u e r c i t r i n[J].I n t JO n c o l,2010,36(1):59G67.[18]云成悦,李潇彬,郑奎玲,等.头花蓼多酚不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性[J].食品工业科技,2018,39(3):61G64,70.[19]刘晓岩,王莹,李廷利.熊果酸与槲皮苷镇静催眠作用对N O,I LG1β和T N FGα水平的影响[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(9):162G165.[20]张慧锋,郭淑英,马莹慧,等.鱼腥草水提液及其主要成分体外对71型肠道病毒的抑制作用观察[J].山东医药,2018,58(7):28G32.[21]李帅,刘军军,安红钢,等.黑柴胡黄酮纯化及其与维生素C㊁芦丁协同抗氧化作用[J].中成药,2015,37(6):1370G1374.[22]陈文梅,金鸣,吴伟,等.芦丁抑制家兔血小板激活因子诱导血小板活化作用的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2002,22(4):283G285.[23]张春晖,张贵君,杨晶凡,等.中药黄金菊汤剂君药的6种抗炎药效组分含量测定[J].中国民族民间医药,2009,(9):1G3.[24]周凯.咖啡酸对硝基苯乙酯抗实验性血小板聚集及其药动学分析[D].重庆:西南大学,2014.[25]张弛.J N K1/H I FG1α和14G3G3η/E R K信号通路在咖啡酸抑制肝癌进程中的作用及机制[D].南京:南京医科大学,2017.[26]周广骏,胡誉怀,祝节涛,等.L CGM S/M S测定抗肿瘤活性物质咖啡酸G3,4G二羟基苯乙酯及其在人肝微粒体中的药物代谢特点研究[J].天然产物研究与开发,2017,29(5):849G855.(收稿日期:2018G10G26)492西北药学杂志㊀2019年5月㊀第34卷㊀第3期h t t p://X B Y Z.c b p t.c n k i.n e t。
HPLC法同时测定余甘子中5种成分的含量及主成分、聚类分析
HPLC法同时测定余甘子中5种成分的含量及主成分、聚类分析目的:建立同时测定余甘子中5种成分含量的方法,同时对广西不同产地余甘子中5种多元酚类成分的含量进行主成分分析和聚类分析。
方法:采用高效液相色谱法测定余甘子中没食子酸、没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸的含量。
色谱柱为Agilent Eclipse XDB,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为25 ℃,进样量为20 μL。
对含量测定结果进行主成分分析和聚类分析。
结果:没食子酸、没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸检测质量浓度线性范围分别为 1.994~31.90、0.159 8~2.556、4.533~45.33、14.75~88.49、2.956~47.30 μg/mL(r均≥0.999 8);检测限分别为0.025 6、0.027 1、0.052 9、0.186 7、0.133 1 μg/mL,定量限分别为0.085 1、0.089 3、0.170 6、0.615 2、0.441 9 μg/mL;精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均1.5,其他成分对待测成分的测定无干扰,理论板数以没食子酸、没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸峰计均>3 000,色谱图见图1。
2.4 线性关系考察精密量取“2.2.1”项下对照品贮备液A 0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL,对照品贮备液C 0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mL,对照品贮备液E 1.5、3.0、6.0、12.0、15.0 mL,对照品贮备液F 2.0、4.0、8.0、10.0、12.0 mL,对照品贮备液G 0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL,分别置于50 mL棕色量瓶中,加甲醇定容,制成系列混合对照品溶液。
精密量取上述系列混合对照品溶液各20 μL,按“2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积。
HPLC法同时测定余甘子中5种成分的含量及主成分、聚类分析
HPLC法同时测定余甘子中5种成分的含量及主成分、聚类分析作者:李琦裴河欢李静罗亚虹来源:《中国药房》2018年第11期中圖分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)11-1491-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.11.13摘要目的:建立同时测定余甘子中5种成分含量的方法,同时对广西不同产地余甘子中5种多元酚类成分的含量进行主成分分析和聚类分析。
方法:采用高效液相色谱法测定余甘子中没食子酸、没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸的含量。
色谱柱为Agilent Eclipse XDB,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为25 ℃,进样量为20 μL。
对含量测定结果进行主成分分析和聚类分析。
结果:没食子酸、没食子儿茶素、柯里拉京、诃子联苯酸、鞣花酸检测质量浓度线性范围分别为1.994~31.90、0.159 8~2.556、4.533~45.33、14.75~88.49、2.956~47.30 μg/mL(r均≥0.999 8);检测限分别为0.025 6、0.027 1、0.052 9、0.186 7、0.133 1 μg/mL,定量限分别为0.085 1、0.089 3、0.170 6、0.615 2、0.441 9 μg/mL;精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD 均关键词余甘子;高效液相色谱法;含量测定;主成分分析;聚类分析Simultaneous Determination of 5 Constituents in Phyllanthus emblica by HPLC and Its Principal Component and Cluster AnalysisLI Qi1,PEI Hehuan2,3,LI Jing2,3,LUO Yahong1(1.Guilin Institute of Food and Drug Inspection, Guangxi Guilin 541012, China;2.Dept. of Science Research, Qinzhou Hospital of TCM, Guangxi Qinzhou 535000, China;3.Qinzhou Institute of TCM, Guangxi Qinzhou 535000, China)ABSTRACT OBJECTIVE: To establish a method for simultaneous determination of 5 constituents in Phyllanthus emblica, and to conduct principal component analysis and cluster analysis of contents of 5 polyphenolic constituents in P. emblica from different producing areas of Guangxi. METHODS: HPLC method was adopted to determine the contents of gallic acid,epigallocatechin, corilagin, terminalia biphenyl acid and ellagic acid in P. emblica. The determination was performed on Agilent Eclipse XDB column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.1% phosphoric acid aqueous solution (gradient elution) at the flow rate of 1.0mL/min. The detection wavelength was set at 220 nm, and column temperature was 25 ℃. The sample size was 20 μL. The results of content determination was processed by principal componentanalysis and cluster analysis. RESULTS: The linear range of gallic acid, gallocatechin,corilagin, chebulagic acid and ellagic acid were 1.994-31.90, 0.159 8-2.556, 4.533-45.33,14.75-88.49, 2.956-47.30 μg/mL (r≥0.999 8), respectively. The limits of detection were 0.025 6, 0.027 1, 0.052 9, 0.186 7,0.133 1 μg/mL; the limits of quantitation were 0.085 1, 0.089 3, 0.170 6, 0.615 2,0.441 9 μg/mL, respectively. RSDs of precision, stability (24 h) and reproducibility tests were allKEYWORDS Phyllanthus emblica; HPLC; Content determination; Principal component analysis; Cluster analysis余甘子为大戟科植物余甘子(Phyllanthus emblica L.)的干燥成熟果实,异名油甘子、牛甘子、喉甘子、鱼木果等,是一味传统民族药,主要分布于福建、广东、广西等地。
高效液相色谱同时测定植物饮料中7种植物毒素
高效液相色谱同时测定植物饮料中7种植物毒素杜伟锋;张瑞瑞;周思;黄金凤;王永华;何敏恒;黄荣荣【摘要】建立了同时检测植物饮料中原百部碱、香豆素、黄连素、山道年、细辛脑、长叶薄荷酮和芦荟苷A7种植物毒素含量的高效液相色谱法.试样经HLB固相萃柱富集净化,甲醇洗脱,氮吹浓缩后用流动相起始梯度定容至1.0 mL,经Welch Ultimate XB-C.色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)分离,以甲醇-10 mmol/L乙酸铵水溶液(pH=3)为流动相梯度洗脱,通过紫外检测器进行检测.7种植物毒素化合物在0.20~100.00 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均>0.99,方法的检出限分别为0.2~6.5 μg/kg,定量限为0.8~21.6μg/kg.分别对3种植物饮料样品进行加标回收率实验,回收率为67.1%~104.0%,相对标准偏差(n=6)为1.08%~5.12%.该方法操作简单,具有较高的准确度和精密度,适用于植物饮料中7种植物毒素含量的检测.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)008【总页数】4页(P169-172)【关键词】植物毒素;植物饮料;高效液相色谱法【作者】杜伟锋;张瑞瑞;周思;黄金凤;王永华;何敏恒;黄荣荣【作者单位】华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510006;广州质量监督检测研究院,广东广州511400;广州质量监督检测研究院,广东广州511400;广州质量监督检测研究院,广东广州511400;广州质量监督检测研究院,广东广州511400;华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510006;广州质量监督检测研究院,广东广州511400;广州质量监督检测研究院,广东广州511400【正文语种】中文【中图分类】O652.63近年来,随着人们健康养生意识的提高,植物饮料受到越来越多人的青睐,凉茶等天然植物饮料销量迅速增长,产销量直追包装水、碳酸类饮料等传统饮品。
高效液相色谱法同时测定广陈皮药材中的11种化学成分
高效液相色谱法同时测定广陈皮药材中的11种化学成分叶晓岚;宋粉云;范国荣;毋福海【摘要】An HPLC method was developed for the simultaneous determination of 11 constitu⁃ents, 5⁃hydroxymethyl furfural ( 5⁃HMF ) , vicenin⁃2, hesperidin, hesperetin, isosinensetin, sinensetin,tetramethyl⁃O⁃isoscutellarein (TEOS), nobiletin,3,5,6,7,8,3′,4′⁃heptamethoxy⁃flavone ( HEPTA) , tangeretin,5⁃demethylnobiletin in Citrus reticulate ‘Chachi’ . The separa⁃tion was conducted on a Hanbon Benatach C18 column (250 mm×4�6 mm, 5μm) with acetoni⁃trile and 0�2% formic acid as mobile phases with gradient elution. The flow rate was 1�0 mL/min. The detection wavelength was 280 nm. The column temperature was 25℃. The results showed that the correlation coefficients ( r ) between concentration and chromatographic peak area of the 11 constituents were over 0�998 in the selected linear ranges. The limits of detection ( LODs, S/N=3) and limits of quantification ( LOQs, S/N=10) of the 11 constituents were in the range of 0�012 5-1�25 mg/L and 0�050 2-4�99 mg/L, respectively. The average recoveries ( n=3) of the 11 constituents were in the range of 96�4%-102�4% and the RSDs were 0�25%-4�01%. The developed method has been successfully applied for the analysis of eight samples from different cultivation regions in Guangdong Province. This method is simple, accurate and effective for the simultaneous determination of the 11 components, and suitable for the quality control of Citrus reticulate ‘Chachi’ .%采用高效液相色谱法( HPLC)同时测定了广陈皮药材中5⁃羟甲基糠醛、维采宁⁃2、橙皮苷、橙皮素、异甜橙黄酮、甜橙黄酮、异黄芩配基甲醚、川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′⁃七甲氧基黄酮、橘皮素及5⁃去甲川陈皮素11种化学成分的含量。
HPLC法检测柑橘中赤霉酸残留量的色谱条件
HPLC法检测柑橘中赤霉酸残留量的色谱条件包琴;唐洁;马力;祝瑞博;姚开【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2010(031)011【摘要】在确定了赤霉酸适宜检测波长的基础上,以保留时间、分离度、拖尾因子、谱图峰型、相对标准偏差等为指标.分别考察流动相甲醇与水的体积比、流动相流速及柱温对柑橘中赤霉酸检测结果的影响.结果显示,采用反相C18柱的HPLC法检测赤霉酸的适宜色谱条件为:柱温为35℃,流动相为体积比为40/60的甲醇-水溶液(pH4.0),流速为1.0mL/min,检测波长为210nm.在此条件下,HPLC检测柑橘中赤霉酸含量的灵敏度高(最低检出限0.0334μg,S/N=3),准确度较好(平均加标回收率为86.0%~91.0%,n=5),精密度较高(平均RSD为1.4097%,n=5).【总页数】5页(P141-145)【作者】包琴;唐洁;马力;祝瑞博;姚开【作者单位】西华大学生物工程学院,四川,成都,610039;西华大学生物工程学院,四川,成都,610039;四川大学轻纺与食品学院,四川,成都,610065;西华大学生物工程学院,四川,成都,610039;四川大学轻纺与食品学院,四川,成都,610065;四川大学轻纺与食品学院,四川,成都,610065【正文语种】中文【相关文献】1.采用最优色谱条件检测大米农药残留量 [J], 王功2.色谱条件对HPLC检测大豆中赤霉酸含量的影响 [J], 祝瑞博;唐洁;姚开;贾冬英;何强3.固相萃取-HPLC法同时测定浓缩柑橘汁中噻菌灵、多菌灵的残留量 [J], 刘晓松;高欣;童张法;刘军义4.HPLC法检测牛奶中喹诺酮类药物残留色谱条件的优化 [J], 吴建勇;梁秋艳;马雷;杨宇5.HPLC法检测石榴皮中鞣花酸的色谱条件优化(英文) [J], 夏小龙;彭蓉;李树垠;李端阳;干霞;白琦因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。