第二讲 石蜡切片技术1：动物麻醉与取材

（16）神经 ）
部位：坐骨神经、股神经。 部位：坐骨神经、股神经。 方法：横切。 方法：横切。 注意：两端结扎固定，然后投入固定液中。 注意：两端结扎固定，然后投入固定液中。
（17）大脑 ）
部位：中央前回或后回。 部位：中央前回或后回。 方法：垂直切入。 方法：垂直切入。 注意：皮质、髓质均切到。 注意：皮质、髓质均切到。
猪 胃
（5）胃 ）
（6）肠 ）
动物：一般以小动物为好。 动物：一般以小动物为好。 部位：一般取各段肠管的中部。 部位：一般取各段肠管的中部。 方法：横切、纵切均可。 方法：横切、纵切均可。 横切： 可先取一段稍长的肠管， 横切 ： 可先取一段稍长的肠管 ， 用生理盐水冲去内 容物， 然后两端结扎， 再注入适量固定液后， 容物 ， 然后两端结扎 ， 再注入适量固定液后 ， 投入 固定液中4~6h后再取材，长约 后再取材， 固定液中 后再取材 长约0.5~1.0cm。 。 纵切：组织块经生理盐水洗涤后，贴于滤纸上， 纵切：组织块经生理盐水洗涤后，贴于滤纸上，然 后投入固定液中固定。 后投入固定液中固定。
石蜡切片技术1 第二讲 石蜡切片技术1
动物麻醉、处死、 动物麻醉、处死、取材
石蜡切片的一般过程
一、动物麻醉、处死 、取材 动物麻醉、 二、组织固定 三、组织冲洗、脱水 组织冲洗、 四、组织透明 五、组织浸蜡、包埋 组织浸蜡、 六、组织切片、贴片、烤片 组织切片、贴片、 七、组织片染色、封固、观察 组织片染色、封固、
（7）肾 ）
（8）肺 ）
部位：肺中部。 部位：肺中部。 方法：横切。 方法：横切。 注意：先从肺支气管或肺动脉注射适量的固定液， 注意： 先从肺支气管或肺动脉注射适量的固定液 ， 然后将全肺投入固定液中固定6~12h后，再取材。 然后将全肺投入固定液中固定 后 再取材。
支气管的各级分支：
支气管树（bronchial tree）：支气管由肺门进入 肺后反复分支，呈树枝状，故称支气管树。
（2）肝 ）
猪肝脏
（3）胰 ）
动物：以豚鼠为好。 动物：以豚鼠为好。 部位：以胰尾较好，因为此处胰岛较多。 胰岛较多 部位：以胰尾较好，因为此处胰岛较多。
马肝、胰
（4）食管 ）
动物：以较小者为好。 动物：以较小者为好。 部位： 一般取其下1/3段 ， 因为此处食管腺较 部位 ： 一般取其下 段 分层也较典型。 多，分层也较典型。 方法：一般做整体横切，长约 方法：一般做整体横切，长约0.5~1.0cm。 。 注意： 为防止收缩变形， 注意 ： 为防止收缩变形 ， 可在其内插入一条小 的圆形玻棒， 再进行固定； 的圆形玻棒 ， 再进行固定 ； 或取一段稍长的食 两端结扎， 将适量的固定液注入腔内， 管 ， 两端结扎 ， 将适量的固定液注入腔内 ， 并 置于固定液中， 后取材继续固定。 置于固定液中，4~6h后取材继续固定。 后取材继续固定
3．取材注意事项 ．
（1）动作轻柔，避免挤压组织。一般用刀片，少用 ）动作轻柔，避免挤压组织。一般用刀片， 或不用剪刀， 切取时要一刀下去， 或不用剪刀 ， 切取时要一刀下去 ， 不要来回拉锯式 拖动。 拖动。 内完成。 （2）及时取材。动物死后 ）及时取材。动物死后30min内完成。若制作电 内完成 镜标本，最好10min内完成。 内完成。 镜标本，最好 内完成 （ 3） 组织块大小适中 ， 一般为 ×1×0.3~0.5cm， ） 组织块大小适中， 一般为1× × ， 并有代表性。 并有代表性。 （4）取材后及时固定。 ）取材后及时固定。
石蜡切片的一般过程
一、动物麻醉
1．小动物 如小白鼠、大白鼠、豚鼠等，可将浸 ． 如小白鼠、大白鼠、豚鼠等， 有乙醚或氯仿（ 三氯甲烷） 的棉球， 有乙醚或氯仿 （ 三氯甲烷 ） 的棉球 ， 与动物一同 密闭于玻璃容器内，进行麻醉。 密闭于玻璃容器内，进行麻醉。 2．较大的动物 如兔、猫、狗、猴等 ． 如兔、 3%~4%戊巴比妥（钠），1ml/kg w静脉注射 戊巴比妥（ 戊巴比妥 静脉注射 或腹腔注射； 或腹腔注射； 20%氨基甲酸乙酯，5ml/kg w腹腔注射。 氨基甲酸乙酯， 腹腔注射。 氨基甲酸乙酯 腹腔注射
（11）脾 ）
（12）淋巴结 ）
部位：肠系膜淋巴结较好，髂内淋巴结、 部位 ： 肠系膜淋巴结较好 ， 髂内淋巴结 、 颈淋 巴结也可。 巴结也可。 方法：沿门部作正中纵切面，分为两半 。 方法：沿门部作正中纵切面，
门 部
（12）淋巴结 ）
（13）睾丸 ）
动物： 动物：猴、兔、大小白鼠较好，因大小适中。 大小白鼠较好，因大小适中。 方法：从睾丸外侧缘切至附睾，将其分为两半。 方法：从睾丸外侧缘切至附睾，将其分为两半。
THANKS!
（13）睾丸 ）
（14）子宫 ）
动物： 动物：兔、大小白鼠等小动物，因大小适中。 大小白鼠等小动物，因大小适中。 方法：自宫颈至宫体正中切开，作矢状切面。 方法：自宫颈至宫体正中切开，作矢状切面。 注意：包括内膜、肌膜和外膜。 注意：包括内膜、肌膜和外膜。
牛子宫、卵巢
（15）脊髓 ）
动物：较小者。 动物：较小者。 部位：颈膨大、腰膨大处。 部位：颈膨大、腰膨大处。 方法：横切。 方法：横切。
（20）内耳 ）
动物：豚鼠等较小的动物。 动物：豚鼠等较小的动物。 方法：整体取材。 方法：整体取材。 注意： 先用注射法固定 ， 然后将内耳整体取下 并投 注意 ： 先用注射法固定， 然后将内耳整体取下并投 入固定液中继续固定。 此外， 需用火棉胶包埋切片。 入固定液中继续固定 。 此外 ， 需用火棉胶包埋切片 。
回
（18）小脑 ）
部位：蚓部。 部位：蚓部。 方法：纵切。 方法：纵切。 注意：皮质、髓质均要切到。 注意：皮质、髓质均要切到。
（19）眼球 ）
动物：较小者。 动物：较小者。 方法：整体取材。 方法：整体取材。 注意： 将固定液从后房或颈静脉注入 ， 并投入固 注意 ： 将固定液从后房或颈静脉注入， 定液。此外，需用火棉胶包埋切片。 定液。此外，需用火棉胶包埋切片。
（二）取材的方法
组织取材是制片的一个重要的技术问 必须根据教学或科研的具体要求， 题，必须根据教学或科研的具体要求， 确定取材的部位和方法。否则， 确定取材的部位和方法。否则，对所 观察的组织结构，不是看不到， 观察的组织结构，不是看不到，就是 看不全。 看不全。 因此，在取材之前， 因此，在取材之前，必须弄清所取组 织器官的解剖位置、组织结构特点等， 织器官的解剖位置、组织结构特点等， 同时，还要掌握实际的操作技术， 同时，还要掌握实际的操作技术，不 能随意剖取组织器官材料。 能随意剖取组织器官材料。
（8）肺 ）
（9）心脏 ）
部位：左心室乳头肌处。 部位：左心室乳头肌处。 方法：沿乳头肌长轴作纵切。 方法：沿乳头肌长轴作纵切。
（9）心脏 ）
（10）胸腺 ）
动物：幼年
（11）脾 ）
部位：取中部。 部位：取中部。 方法：横切。 方法：横切。 注意： 注意 ： 先用生理盐水从脾动 脉注入冲洗， 脉注入冲洗 ， 同时切开脾静 将血液冲出， 脉 ， 将血液冲出 ， 至脾呈灰 白色，然后取材。 白色，然后取材。
三、动物取材
根据教学或科研的目的和要求， 选取适当的组 根据教学或科研的目的和要求 ， 织或部分器官。 织或部分器官。
（一）动物的选择
神经、循环、免疫、内分泌、感觉器官、 1．猴 神经、循环、免疫、内分泌、感觉器官、 泌尿、生殖系统的材料较好。 泌尿、生殖系统的材料较好。 神经、免疫、内分泌、消化、呼吸、泌尿、 2．狗 神经、免疫、内分泌、消化、呼吸、泌尿、 生殖系统的材料较好。 生殖系统的材料较好。 神经、内分泌、消化、泌尿系统、 3．猫 神经、内分泌、消化、泌尿系统、肌肉等 材料较好。 材料较好。 皮下组织、肠系膜、卵巢、 4．兔 皮下组织、肠系膜、卵巢、肺、耳壳等材 料较好。 料较好。
1．取材的顺序 ．
先取腹腔的脏器； 先取腹腔的脏器； 然后取胸腔、骨盆腔内的脏器； 然后取胸腔、骨盆腔内的脏器； 最后开颅取神经系统及其他材料。 最后开颅取神经系统及其他材料。
2．部分组织器官的取材 ．
（1）肌组织 ）
骨骼肌：以舌肌、肋间肌、缝匠肌为好。 骨骼肌：以舌肌、肋间肌、缝匠肌为好。 心肌： 以左心室乳头肌为好， 心肌 ： 以左心室乳头肌为好 ， 因为此处蒲肯野 氏纤维较多。 氏纤维较多。 平滑肌：膀胱、子宫、 平滑肌：膀胱、子宫、胃、肠均可。 肠均可。
（4）食管 ）
（5）胃 ）
部位：一般取胃体或胃底部，因此 部位：一般取胃体或胃底部， 处胃底腺丰富。当然， 处胃底腺丰富。当然，也可根据需 取其贲门部或幽门部。 要，取其贲门部或幽门部。 方法：纵切。 方法：纵切。 注意：用生理盐水洗去胃内容物， 注意：用生理盐水洗去胃内容物， 并将组织块（外层） 并将组织块（外层）铺展于滤纸上 以防卷曲，而后投入固定液中固定。 以防卷曲，而后投入固定液中固定。
骨骼肌： 骨骼肌：
心肌： 心肌：
左房室口 主动脉 左心房 右心房 主动脉口 右心室
肉柱 左房室口
左心室
瓣膜
室中隔
乳头肌
平滑肌： 平滑肌：
（Baidu Nhomakorabea）肝 ）
动物：以猪为好。 动物：以猪为好。 部位：猪肝分为左外、左内、右内、右外四叶， 部位： 猪肝分为左外 、左内 、 右内 、 右外四叶 ， 一 般左右外叶较大，可在其中部作纵切或横切取材。 般左右外叶较大，可在其中部作纵切或横切取材。 大小： 大小 ： 2~3mm厚。 因肝为实质性器官 ， 细胞排列 厚 因肝为实质性器官， 密集，固定液难以渗入，故组织块不能过大。 密集，固定液难以渗入，故组织块不能过大。
二、处死动物
1．空气栓塞法 兔等动物可用大空针从耳静脉 ． 注入空气，从而在血管中形成气体栓塞，导致 注入空气， 从而在血管中形成气体栓塞， 动物立即死亡。 动物立即死亡。 2．颈椎脱臼、断头法 适应于小动物。 ．颈椎脱臼、 适应于小动物。 3．直接放血处死 将动物麻醉或不麻醉后，切 ． 将动物麻醉或不麻醉后， 开股动脉或颈动脉放血致死。 开股动脉或颈动脉放血致死。
（一）动物的选择
5．羊 好。 6 ．猪 心脏、 膀胱、 心脏 、 膀胱 、 雌性生殖系统的材料较 肝、骨髓、脑垂体等材料较好。 骨髓、脑垂体等材料较好。 胰、内耳、肾上腺等材料较好。 内耳、肾上腺等材料较好。 皮下组织、 小肠、 皮下组织 、 小肠 、 嘴唇等材
7．豚鼠
8 ． 大 、 小白鼠 料较好。 料较好。
十二 指肠、空肠、回肠
肠绒毛
大肠：肠腺、淋巴组织
（7）肾 ）
动物：较小者为好。 动物：较小者为好。 方法： 最好先进行灌注固定， 而后取材， 方法 ： 最好先进行灌注固定 ， 而后取材 ， 即从肾动 脉注入固定液， 同时切开肾静脉， 当血液流尽后， 脉注入固定液 ， 同时切开肾静脉 ， 当血液流尽后 ， 将全肾投入固定液中固定2~4h后，再沿正中矢面剖 将全肾投入固定液中固定 后 然后在任一半面上， 开 ， 然后在任一半面上 ， 从皮质向髓质的方向切一 扇形组织块， 以确保皮质、 髓质完全， 扇形组织块 ， 以确保皮质 、 髓质完全 ， 再投入固定 液继续固定。 液继续固定。 注意：皮质、髓质一定要完整。 注意：皮质、髓质一定要完整。