沙门氏菌的检验

由于食品生产及流通的全球化、新的食品加工 技术的应用、东西方饮食习惯的交融、自然环 境的改变等因素的影响，目前沙门氏菌污染的 食物种类、季节及场所发生了重大变化。同时， 随着检测技术的发展，对于沙门菌的快速检测 方法层出不穷，有些方法已通过国际权威机构 认证（如AOAC）成为了国际标准方法。
1. 修订任务由卫生部全国食品卫生标准委员会下达， 由微生物标准协作组具体实施。
沙
门
非沙门菌
H抗原，LIA，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤 （KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原
菌
沙门菌
补充生化试验
非
沙
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
门
菌
ISO 6579:1993(E)
AOAC 967.25－967.28
处理样品
35℃ 24±2h
1mL+10mLSC
1mL+10mLTT
35℃ 24±2h
XLD & HE & BS
35℃ 24±2h（BS 24h&48h）
TSI & LIA
35℃ 24±2h
纯培养物
不纯培养物
MAC or XLD or HE
非
尿素酶＋
尿素酶－ 纯培养物
TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸
沙门氏菌血清学试验
H2S＋ 靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋
甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验
H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－
ONPG － 沙门氏菌
非如左述的各种反应结果 非沙门氏菌
细菌学分析手册（FDA/BAM）
样品（20类）25g
1. GB/T4789.4 2. AOAC Official Method ：967.26，967.27，967.28 3. ISO ：6579 4 . USFDA ： Bacteriological Analytical Manual,
Chapter 5: Salmonella。
1 前增菌； 2选择性增菌； 3 分离； 4 生化鉴定； 5. 血清学鉴定； 6.报告。
225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）
pH6.8±0.2 2ຫໍສະໝຸດ Baidu±2 h 35℃
TT 43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h
RV 24±2h 42±0.2℃
食品卫生微生物学检验（GB/T4789.4）
全国食品卫生标准委员会 微生物标准协作组
2008年11月14日-18日
修订背景 国内外方法 修订内容
前增菌 选择性增菌 分离平板 生化鉴定 血清学鉴定 报告
回顾一下食品卫生微生物学检验标准的制定， 经历了从无到有，从事该领域的工作者，花费了巨 大的心血，先后制修订了84版、94版、和2003版 的检验标准，每版的标准，都为该年代的食品卫生 工作提供了巨大的技术支持，同时也深深地烙上了 该时代的经济特征。
0.1 ± 0.02mL ＋10mL mRV
42± 0.5℃ 22~24h
42± 0.5℃ 22~24h
BGS & DMLIA or XLT4 35± 1℃ 18~24h & 48h
TSI & LIA 血清学试验
商业生化试剂盒或自动鉴定系统 or 传统生化鉴定
报告结果
AOAC Official Method 967.25 Salmonella in Foods Preparation of Culture Media and Reagents AOAC Official Method 967.26 Salmonella in Processed Foods Detection AOAC Official Method 967.27 Salmonella in Foods Identification AOAC Official Method 967.28 Salmonella in Foods Serological Tests
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL ＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
BS 36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h
DHL（或HE、WS、SS） 36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
国家标准 USFDA FSIS AOAC ISO
中华人民共和国国家标准
GB/T 4789.4-2003
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
前增菌法 25g＋BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL 36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
BS & XLD & HE
24±2h 35℃
TSI & LIA
LIA+
LIA－ TSI K/A
LIA－ TSI A/A
尿素酶，H抗原（多价H抗血清或SpicerEdwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶，
酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN， 丙二酸盐，吲哚），O抗原
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐
2. 兄弟单位、企业、公司为参与单位。 3. 共采集到数据800多个，专家反馈意见50余条（采
纳90%以上）条，形成标准的草案稿、送审稿。 4 . 时间跨度2004年—2006年
结合目前的国际标准和原标准的实际使用情况，针对原 标准的修订，我们遵循以下的修订原则： 1．以原国标为基础，保持与原标准的连续性； 2．参照国际分析协会（AOAC）、国际标准组织（ISO）及美 国食品药品管理局（FDA）的有关标准； 3．结合标准的比对实验和验证实验，积极吸取新方法、新技 术，修订标准。
非沙门菌
（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI）
+O抗原&H抗原
沙门菌
非沙门菌
USDA/FSIS MLG 4.02
样品
BPW or BPW（含结晶紫）
0.5 ± 0.05mL ＋10mL TT
35±1℃ 20-24h