红树植物老鼠簕总三萜含量的测定

样品 ０ ｍｉｎ
对照品 １．０２６ 根 ０．０９７ 茎 ０．３２５ 叶 ０．２２９
吸光度 １５ｍｉｎ ３０ｍｉｎ ４５ｍｉｎ １．０１４ １．００１ １．０１２ ０．０９５ ０．０９１ ０．０９１ ０．３２６ ０．３１８ ０．３１１ ０．２２４ ０．２２６ ９５ ０．３１４ ０．２２８
对热带亚热带潮间带的红树林天然产物的研究是海洋天 然产物研究领域的新热点〔３〕 ，除了老鼠簕〔２，４ ～８，１１〕 外，学者对 黄槿、尖瓣海莲、水黄皮、银叶树〔１１ ～１４〕 等也纷纷开展化学成分 及其生物活性研究。 开发红树林药物价值，把经济效益与生 态效益相结合，促进海岸居民把其作为药用资源来加以保护 和种植，才可能使红树林避免进一步遭受破坏〔１３，１４〕 。 在对红 树林有效药物成分提纯、鉴定的基础上，参考目前灵芝、牛樟 芝产品以总三萜作为标志性功效成分，对老鼠簕根茎叶中的 总三萜含量测定，能为海洋药物的开发和红树林的可持续发 展提供一些研究基础。
表 １ 齐墩果酸回收试验结果
加入量 ／μｇ
测得量 ／μｇ
平均值 回收率 ／％ ＲＳＤ ／％
１０００
９８４ １００２ ９７８ ９８８
９８．８
１．２６
2 结果 2．1 老鼠簕总三萜含量结果 取老鼠簕根、茎、叶各 ３ 份，按 照 １．４．２ 处理，按 １．４．３ 测量，在 ５００ｎｍ 波长处测定吸收值， 代入标准曲线方程，计算。 根的总三萜含量为 ０．６２％，茎的 总三萜含量为 ２．２０％，叶的总三萜含量为 １．５９％（见表 ２）。
（ ２０１４０６ ）
叶中总三萜含量的紫外分光光度测定方法，为老鼠簕的开发 应用提供依据。 1 材料与方法 1．1 材料 老鼠簕于 ２０１４ 年 ２ 月采集于广东省深圳市南山 区华侨城湿地，植株高 １．６ｍ，经深圳市湿地阳光科技有限公 司张峰工程师鉴定为爵床科（ Ａｃａｎｔｈａｃｅａｅ ） 老鼠簕属植物，标 本现存于深圳市仁泰生物科技有限公司实验室。 1．2 仪器 Ｕ－１８００ 分光光度计（ 日本 ＨＩＴＡＣＨＩ 公司）；Ｌａｂｏ－ ｒｏｔａ ４０００ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ 旋转蒸发仪（德国 Ｈｅｉｄｏｌｐｈ） 1．3 试 剂 高 氯 酸、 冰 醋 酸、 香 草 醛、 硫 酸、 甲 醇、 盐 酸、 ＮａＯＨ、９５％乙醇等试剂为分析纯（ 天津市福晨化学试剂厂）； 齐墩果酸（ 对照品，中国药品生物制品检定所） 。 1．4 方法 参考测定黄槿〔１０〕 和灵芝孢子粉〔１１〕 中三萜化合 物的方法，并做相应完善修改。 １．４．１ 对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸对照品 ２０ｍｇ 置 １００ｍＬ 量瓶中用甲醇定容，摇匀，置于 ４℃避光室内保存， 即得对照品溶液（０．２ｍｇ・ ｍＬ －１ ）。 １．４．２ 供试品溶液制备：将采集的老鼠簕用自来水洗净，风 干，分别选取老鼠簕根、茎、叶适量，置于 ５０℃烘箱干燥 ４８ｈ；
图 １ 齐墩果酸吸收光谱图
１．４．４ 标准曲线的绘制：精密吸取齐墩果酸溶液 ０．２、０．４、 ０．６、０．８、１ｍＬ，按上述步骤在 ５００ｎｍ 处测定吸光度，以齐墩果 酸浓度 Ｘ 为横坐标，吸光度 Ｙ 为纵坐标，建立标准曲线。 计 算得到回归方程为 Ｙ ＝０．０１３７Ｘ ＋０．００４，Ｒ２ ＝０．９９８，齐墩果 酸在 ０．０４ ～０．２０ ｍｇ・ ｍＬ －１ 范围内线性关系良好。 １．４．５ 回收试验：加入齐墩果酸对照品溶液 ５．０ｍＬ 至 ９５％ 的乙醇浸泡，其余按照 １．４．２ 步骤：索式提取仪提取 ３ 次，每 次 １ｈ，合并 ３ 次滤液，用无水乙醇定容至 １００ｍＬ，摇匀。 回收 率为 ９８．８％，ＲＳＤ 为 １．２６％（见表 １）。
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海峡药学 ２０１５ 年 第 ２７ 卷 第 ３ 期
粉碎，各准确称取 １．０ｇ，９０℃水域，用 ９５％乙醇浸泡，索式提 取仪提取 ３ 次，每次 １ｈ，合并 ３ 次滤液，用 ９５％乙醇定容至 １００ｍＬ，摇匀，制得供试品溶液。 １．４．３ 波长的选择：取齐墩果酸对照品溶液 １．０ｍＬ（ 空白对 照为不加对照品溶液用乙酸乙酯至刻度） ， 置具塞试管中，水 浴挥干，加入 ５％香草醛－冰醋酸溶液 ０．４ｍＬ，高氯酸 ０．８ｍＬ， ７０℃水浴加热 １５ｍｉｎ， 冰水中冷 却 后， 移 至 １０ｍＬ 量 瓶 中 加 ９５％乙醇至刻度，摇匀，于紫外可见分光光度计上扫描。 结果 表明（见图 １），对照品溶液在 ５００ｎｍ 处有最大吸收峰，故确定 测定波长为 ５００ｎｍ。
本研究建立了一套测定红树植物老鼠簕总三萜含量的方 法，并经验证具有良好重复性、稳定性和回收率。 首次测定得 到，老鼠簕根的总三萜含量为 ０．６２％，ＲＳＤ ＝０．９１％（ ｎ ＝３）； 茎的总三萜含量为 ２．２０％，ＲＳＤ ＝３．９４％（ ｎ ＝３）；叶的总三 萜含量为 １．５９％，ＲＳＤ ＝５．０４％（ｎ ＝３）。
老鼠簕（Ａｃａｎｔｈｕｓ ｉｌｉｃｉｆｏｌｉｕｓ），爵床科，是一种生长于潮间 带的非胎生红树植物，小灌木，在我国福建、广东、广西、海南、 台湾、香港和澳门 ７ 省（ 区） 沿海均有分布〔１〕 。 《 全国中草药 汇编》 将其收录 其 中， 以 全 株 或 根 入 药， 具 有 清 热 解 毒、 消 肿 散结、止咳平喘之功效，主治淋巴结肿大、急慢性肝炎、肝脾肿 大、胃痛、咳嗽、哮喘〔２〕 。 在海南、广西、福建等地，老鼠簕作为 一种民间中草药已有应用〔３〕 。 老鼠簕的抗肿瘤、抗肝损伤的 有效成分逐渐被提取和鉴定，三萜、黄酮、生物碱是其中主要 的 ３ 类化合物〔４ ～８〕 。 对老鼠簕这一特殊海洋植物类群资源药 用价值开展研究具有重要的应用价值〔６，９〕 。 但经搜索数据库 文献，目前尚未见对红树植物老鼠簕的三萜化合物含量测定 的报道。 本研究以齐墩果酸为对照品，建立了老鼠簕根、茎、
平均 吸光度 １．０１２ ０．０９４ ０．３１９ ０．２２７
ＲＳＤ ／％
０．９１ ２．８６ ２．０７ １．０６
2．2 稳定性验证 取对照品和样品溶液各 １ｍＬ．按照 １．４．２
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处理，按 １．４．３ 每隔 １５ｍｉｎ 测定 １ 次。 在对照品、根、茎、叶组 别中 ＲＳＤ 值分别为 ０．９１％、２．８６％、２．０７％、１．０６％，表明本 方法在 ６０ｍｉｎ 内具有较好稳定性（见表 ３）。 3 分析与讨论
参考文献 〔１〕 林鹏 ．中国红树林生态系〔 Ｍ〕．北京：科学出版社，１９９７，８ －１６． 〔２〕 《 全国中草药汇编》 编写组 ．全国中草药汇编（ 下册） 〔 Ｍ〕．北京：
人 民 卫 生 出 版 社 ，１９７８ ：２３１ －２３２ ，７５６ ，８０４． 〔３〕 林鹏，林益明，杨志伟，等 ．中 国 海 洋 红 树 林 药 物 的 研 究 现 状、民
ABSTRACT：Ａｃａｎｔｈｕｓ ｉｌｉｃｉｆｏｌｉｕｓ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｍａｎｇｒｏｖｅ ｐｌａｎｔ ｗｈｉｃｈ ｈａｓ ｍｅｄｉｃａｌ ｖａｌｕｅｓ ．Ｔｏｔａｌ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｉｎ Ａ－ ｃａｎｔｈｕｓ ｉｌｉｃｉｆｏｌｉｕｓ ｗａｓ ｇｕａｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｍｅｔｈｏｄ ｕｓｉｎｇ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｓｔａｎｄａｒｄ ａｎｄ ５％ ｖａｎｉｌｌｉｎ－ｇＩａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ＆ ｐｅｒｃｈＩｏｒｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｃｏＩｏｒ －ｄｅｖｅＩｏｐｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕＩｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ，Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｗａｓ ｗｅｌｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｉｔｓ ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｔ ５００ｎｍ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．０４ ～０．２０ｍｇ ・ ｍＬ －１ ｗｉｔｈ ａ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｗｉｔｈｉｎ ０ ～ ６０ｍｉｎ．Ａｃａｎｔｈｕｓ ｉｌｉｃｉｆｏｌｉｕｓ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ０．６２％（ＲＳＤ ＝０．９１％，ｎ ＝３），２．２０％（ ＲＳＤ ＝３．９４％，ｎ ＝３），１．５９％（ ＲＳＤ ＝５．０４％，ｎ ＝３） ｏｆ ｔｏｔａｌ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｉｎ ｉｔ′ｓ ｒｏｏｔ，ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎ － ｔｅｎｔ． KEY WORDS：Ａｃａｎｔｈｕｓ ｉｌｉｃｉｆｏｌｉｕｓ ；Ｍａｎｇｒｏｖｅ；Ｔｏｔａｌ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ；Ｍａｒｉｎｅ ｎａｔｕｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔ ａｓ ｄｒｕｇ
关键词：老鼠簕；红树林；总三萜；天然海洋药物
中图分类号：Ｒ２８２．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－３７６５（２０１５） －０３－１２３８－００４７－０３
Determination of TotaI Tritepenoidic in Acanthus IIicifoIius
XU Gui－hong１，２ ，WANG Peng－ting２ ，YANG Qiong３ ，ZENG Liq－iang３ （１．Shenzhen Fairy Lake BotanicaI Gar－ den，Shenzhen ５１８００４，China；２．Shenzhen WetIand SunIight S ＆ T Company Limited，Shenzhen ５１８０００， China；３．Guangdong NeiIingding Futian NationaI Nature Reserve，Shenzhen ５１８０４０，China）
表 ２ 老鼠簕总三萜含量
样品
吸光度
根 ０．０９８ ０．０９１ ０．０８７ 茎 ０．３１７ ０．３３１ ０．３０６ 叶 ０．２３１ ０．２２９ ０．２２９
平均值 吸光度 ０．０９２ ０．３１８ ０．２２９
总三萜 含量 ／％
０．６２ ２．２０ １．５９
ＲＳＤ ／％
６．０５ ３．９４ ５．０４
表 ３ 稳定性验证结果
作者简介：徐 桂 红，男 （１９８５ －） 。 职 称：工 程 师。 主 要 从 事 植 物 多 样 性研究。 Ｅ－ｍａｉｌ：２５３８７７１３２＠ｑｑ．ｃｏｍ 通讯作者：杨 琼，女（１９７８ －） 。 学历：博士。 职称：高级工程师。 主 要从事红树林湿地保护研究。 Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｋｉｎｇ７８＠１２６．ｃｏｍ 基金项目：中央分成海域使用金支出项目（ 环保类） －－广东省深圳华侨 城滨海 湿 地 生 态 修 复 提 升 项 目； 深 圳 市 城 管 局 科 研 资 助 项 目
摘要：老鼠簕是一种重要的具海洋药用价值的红树林植物。 以分光光度法（ 齐墩果酸为对照品，５％香草醛－冰醋酸和高氯酸为显 色剂） 测定红
树植物老鼠簕中总三萜的含量。 实验结果表明：在 ５００ｎｍ 波长条件下，齐墩果酸在 ０．０４ ～０．２０ｍｇ・ ｍＬ －１ 范围内，０ ～６０ｍｉｎ 间，吸光度与含量线 性关系良好；首次测定得到，红树植物老鼠簕根的总三萜含量为 ０．６２％，（ ＲＳＤ ＝０．９１％，ｎ ＝３ ） ；茎的总三萜含量 为 ２．２０％ （ ＲＳＤ ＝３．９４％，ｎ ＝ ３） ；叶的总三萜含量为 １．５９％（ ＲＳＤ ＝５．０４％，ｎ ＝３） 。
间利用及展望〔 Ｊ〕．海洋科学，２００５，２９（９） ：７６－７９． 〔４〕 陈朝霞，刘军，陈胡兰，等 ．红树植物老鼠簕抗肝损伤有效部位化
学成分分离及含量测定〔 Ｊ〕．成都中医药大学学报，２０１２，３５ （３ ） ：
４２ －４４ ，５２． 〔５〕 梅燕，林军，侯软玲，等 ．老鼠簕对四氯化碳性致肝纤维化大鼠的
Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ ２７ Ｎｏ．３ ２０１５
红树植物老鼠簕总三萜含量的测定
徐桂红１，２ ，王鹏亭２ ，杨 琼３ ，曾立强３ （１．深圳市仙湖植物园管理处 深圳 ５１８００４ ；２．深圳市湿地阳光科技有 限公司 深圳 ５１８０００；３．广东内伶仃福田国家级自然保护区管理局 深圳 ５１８０４０ ）