肿瘤的实验动物和细胞研究技术 ppt课件
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Laboratory, Cell Culture Department, Naval Supply Center, Oakland,CA) 人基因突变细胞及老年细胞培养库（Human Genetic Mutant Cell Culture and Ageing Cell,
Culture Repositories, Institute for Medical Research, Camden, NJ)
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9
6. 其他特性：
(a) 分泌激素和异位激素: 绒毛膜癌→HCG 垂体瘤→生长激素 肺燕麦细胞癌和一些甲状腺癌→ACTH 人肺巨细胞癌细胞株（PLA-801）→促性腺激素 肝癌→HCG
(b) 肿瘤细胞的受体表达: ER PR AR (c) 酶及同工酶活性:
酶活性保持(HTC→酪氨酸氨基转移酶)、变化 诱导剂 糖皮质激素、多肽激素
肿瘤细胞系:原代培养肿瘤细胞能连续传代（约7～10天传代一次） 半年以上,生长稳定, 并能保持肿瘤细胞的特性， 称为肿瘤细胞系(cell line)
肿瘤细胞株:细胞系经细胞克隆或其它方法获得具有某种生物学特性 的纯谱系的细胞称为肿瘤细胞株(cell strain), 细胞具有 相同的基因型和表型(单克隆)
Flow Laboratories; GIBCO
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16
特殊表型肿瘤细胞系（株）：
高转移 人肝细胞性肝癌细胞株MHCC97 人黑色素瘤细胞株MV3、 卵巢癌细胞株HO-8910PM、 肺巨细胞癌细胞株PGBE1
高度耐药 人红白血病细胞株K562/ADM对阿霉素的抗性增114.7倍
分泌产生激素、蛋白、酶或一些因子 人肺小细胞癌细胞株LU-165→抗利尿激素; 人肺腺癌细胞株LC-2/ad→α1-抗胰蛋白酶 人红白血病细胞株K562高表达端粒酶
肿瘤的实验动物和细胞研 究技术
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1
常用研究方式：
In Vitro: 体外研究，细胞、组织培养下进行
In Vivo: 体内研究，人类疾病的动物模型
Ex Vivo: 细胞经体外实验处理后，再回输到体内 体外处理：转染基因或改变环境(用一些因子) 使其分化等
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2
精品资料
• 你怎么称呼老师？ • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你
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20
(1) 化学致癌物 ▲ 诱发时间相对较短 ▲有剂量-效应关系 ▲基因毒化学致癌物一般具有高度亲电子性， 与生物大分子中富于电子的亲核残基相结合, 影响硷基对的正常配位或大分子的结构与功能 →正常细胞的癌变. ▲直接致癌物和前致癌物（间接致癌物）
ppt课件
21
常见化学致癌物:
1) 多环碳氢化合物: 25种以上, 以煤焦油的主要成分3,4-苯并芘
和3-甲基胆蒽的致癌性最强
2) 氨基偶氮化合物: 二甲基氨基偶氮苯亦称二甲基黄(奶油黄),
3’-甲基-4,4’-二甲基氨基偶氮苯(3’-Me-DAB)
3)芳香胺类: 苯胺印染工厂 吸入乙萘胺在肝变为氨基苯经肾排出
联苯胺→膀胱癌
2-乙酰氨基芴(2-AAF)
4)亚硝胺类:
亚硝酸盐+二级胺→亚硝胺类化合物 强致癌物 致癌谱甚广
是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
体外研究(In Vitro )
原代培养肿瘤细胞: 从肿瘤组织中分离得到的细胞在体外成功地进行 培养称为原代培养(primary culture)
细菌：培液混浊，高倍镜下隐约可见均匀散在细小菌体 真菌：培液混浊，高倍镜下可见菌丝或孢子 病毒：病毒核酸和蛋白产物 支原体：以核酸（DNA）荧光染色即H-stain(Hoechst 33258，
即二苯并咪唑染色)较为常用, 356nm光的激发下 可发出458nm的强荧光,
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13
体外正常细胞恶性转化的鉴定
5.组织特性的鉴定:
免疫细胞化学方法
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8
上皮性肿瘤标志: CK、上皮膜抗原（EMA）、 癌胚抗原（CEA）;
淋巴瘤抗原标志: 人白细胞分化抗原簇（CD）,有274个以上,
T淋巴细胞: B淋巴细胞:
UCHL-1(CD45RO), L26（CD20）,
软组织肿瘤标志：波形蛋白（Vm）
肌源性：结蛋白（Dm）、肌动蛋白、肌凝蛋白、肌红蛋白
胞质嗜碱性弱;核仁较小较少;
胞质嗜碱性强,核仁较大较多;多核巨细胞
多核巨细胞较少
较多
粘附性 细胞间粘附性较强,紧贴瓶壁生长 粘附性差,易脱落
生长特性 排列有方向性,单层生长,存在密度 方向性消失,多层重叠,密度依赖性抑制消失
依赖性抑制
对血清的依赖 较高
较低
扫描电镜观察 微绒毛少
微绒毛丰富
植物凝集素引起的凝集
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17
体内研究(In Vivo)
肿瘤动物模型： 自发性肿瘤 诱发性肿瘤 移植性肿瘤.
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18
一、自发性肿瘤
种系：大鼠的自发肿瘤不如小鼠多见，大动物更为少见 Sinclair猪到一岁时有85%可发生恶性黑色素瘤
品系： C3H小鼠 ― 乳腺癌发病率为97% BALB/c ― 乳腺癌发病率低 AKR小鼠 ―淋巴细胞性白血病发病率为70%~90% 近交系SJL/J小鼠 ―淋巴瘤(何杰金病)自发率高达91%
差别不明显 微绒毛不稳定,有时增多
较强 糖基化不完全
不稳定,某些株增高 不稳定
非整倍体 生长 长肿瘤
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15
世界各国的细胞库（cell bank）及索引
美国
美国典型培养细胞库（American Type Culture Collection, 即ATCC, Rockville,MD） 人与动物细胞培养目录（Catalog of Human and OtherAnimal Cell Cultures, Naval Biosciences
▲透射和扫描电镜
▲3D组织结构
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7
3. 核型及染色体观察:
整倍体,异倍体,染色体畸变、标记染色体,染色体分带分析, 相隔一定时间重复观察数次
4.生长特性:
分裂指数（[3H]-thymidine或5-BrdU的labeling index）、 生长曲线、 细胞群体倍增时间、 集落形成或贴壁率（plating efficiency） 半固体培养介质中的集落形成率
弱
较弱
细胞表面的糖蛋白和糖脂 正常
糖基化不完全
纤维连接蛋白
正常存在
减少或消失
纤溶酶原激活酶
较低
增高
胞质中微丝微管的排列
规则
紊乱
胞质cAMP浓度
较高
较低
核型
二倍体
非整倍体或假二倍体
琼脂培养
不生长
生长
接种异种易感动物
不长肿瘤
长肿瘤
与正常细胞之间差别不如纤维母细胞 大;多形性较常见
差别不明显 差别不明显,某些细胞株呈重叠生长
6
肿瘤细胞株的鉴定：
1. 有关的原始资料,包括供瘤病人的姓名、年龄、性别、病历号、 临床诊断（TNM）、活检病理诊断,手术切除日期、最后病理诊断 等
2.形态学观察:
▲普通倒置相差光镜:活细胞的形态, 细胞间桥,分泌颗粒,重叠生长,
▲Giemsa染色或H.E.染色的光镜
形态与肿瘤细胞的生长条件有一定关系: HeLa: 高浓度血清→长梭形; 低浓度血清→圆形细胞,排列如鹅卵石路面;
欧洲动物细胞培养库（European Collection for Animal Cell Cultures,即ECACC, PHLS/CAMR, Porton, Salisbury, England)
欧洲人类基因突变细胞库(European Human GeneticMutant Cell Bank, Department of Clinical Genetics, Erasmus University, Rotterdam)
改变培养条件：谷氨酸替代谷氨酰胺→脑星形胶质细胞谷氨酰合成酶
活性增7倍左右
特异的同工酶谱： 绒癌T3M-3p表pt课达件胎盘性碱性磷酸酶
10
(d) 癌基因及抑癌基因核酸及蛋白的表达：
高转移人卵巢细胞系HO-8910PM
表达：p53 p16 bcl-2 nm-23 CD44v6
c-erbB-2 EGFR
缺点：发病迟,发病时期不集中,发病率也不稳定
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19
二、诱发性肿瘤
优点：发生率、发病时间、发生部位及组织学类型均易控制 实验结果重复性相对较好
1.化学诱癌动物肿瘤模型 1775年英国医师Pott 扫烟囱 阴囊癌 1914年,日本学者山极和市川 煤焦油 皮肤癌 1934年Yashida用邻氨基偶氮甲苯诱发大鼠肝癌成功 我国从1960年代开始进行化学诱癌动物模型的研究 1956年亚硝胺和1961年黄曲霉毒素的致癌作用相继被发现
正常细胞体外恶性转化的鉴定指标(14项指标)
（第二届全国细胞和组织培养专题讨论会通过）
并形成集落
▲异种动物接种能生成肿瘤
▲端粒保持不变或延长以及端粒酶活性的增高
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14
指标
正常细胞
转化的纤维母细胞
转化的上皮细胞
形态
伸展良好,折光较弱;核质比小,
梭形,伸展较差,折光较强;核质比大,
神经源性： 神经微丝（NF）、S-100蛋白、 Leu-7、
神经元特异性烯醇化酶（NSE）、髓磷脂碱性蛋白(MBP) 组织细胞源性： α-1抗胰蛋白酶、 α-1抗糜蛋白酶、CD68
血管源性：八因子相关抗原、CD34、荆豆凝集素(UL)
基膜源性：纤连蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）
体外培养时肿瘤细胞株有可能会失去原本表达的某些组织抗原,抗原标志要 多选用几种抗体,以减少假阴性结果;
癌细胞系库(Collection of Cancer Cell lines, National Institute of Hygenic Sciences, Tokyo) 普通细胞库( General Cell Bank, Institute of Physical and Chemical Research of RIKEN, Saitama)
等基因的蛋白产物
不表达：Bax基因的蛋白产物
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11
7. 细胞株交叉污染的检测：
细胞遗传学方法： 染色体分析 特异的染色体标志探针作FISH G带核型分析鉴别同种肿瘤细胞 Q带分析检测人Y染色体
免疫学方法：HLA或动物的组织相容性抗原的测定
生化方法：同工酶谱或其它生化指标
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12
8. 微生物污染的检测：
不同分子的亚硝胺化合物仍有一定的器官亲和性
对称衍生物如二烷基亚硝胺→肝癌
不对称的亚硝胺→食管癌
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22
5)霉菌毒素: 种类较多 首推黄曲霉毒素(aflatoxin),存在于霉变的花生、
玉米及谷物中, 6)金属元素 :
砷、铬、镍、→肺癌 镉→前列腺癌.
(2)影响化学致癌的因素
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23
1) 动物方面 品系:
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5
肿瘤细胞株的建立： 1、 直接从人的肿瘤或动物的自发及诱发肿瘤组织分离培养
建系和建株; (从自发或诱发瘤)
2、从人或动物的移植肿瘤(如人肿瘤裸鼠移植瘤)组织分离 培养建系及建株; (从移植瘤)
3、用化学或生物(病毒)方法在体外转化正常的人或动物的 细胞株而获得肿瘤细胞株。(体外转化)
ppt课件
诱发肝癌时：F-344大鼠对DEN和2-AAF的敏感性要比其它品系的大鼠高 诱发皮肤肿瘤：BALB/c和SENCAR品系小鼠对DMNU、DENU的敏感性
大大高于Swiss品系小鼠
性别: 2AAF诱发肝癌：♂小鼠60%发生肝癌,♀小鼠不敏感.
F-344大鼠,♀比♂更敏感
年龄: 一般而言,动物年龄越小,对化学致癌物越敏感,
欧洲 日本
真核细胞培养库(Culture de Cellules Eucaryotes, Repertoire des Utilisateurs., M. Adophe, D. Gourdji, A.Tixier-Vidal, R. Robineaux, Inserm Publications,101 Rue de Tobiac,75654 Paris, Cedex 13 医学病毒学系（Department of Medical Virology,Institute de Pasteur, Paris)
敏感性： 胎鼠>新生鼠>成年鼠
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24
2) 化学致癌物方面
剂量阈值:
启动因子（initiator）不表现明显的剂量阈值 促癌因子（promotor）则有剂量阈值 一般的化学致癌物往往兼有启动和促癌的作用,因此仍可表现有剂量阈值 如3’-Me-DAB (60ppm) 致癌强度: 诱发大鼠肝癌总剂量:
Culture Repositories, Institute for Medical Research, Camden, NJ)
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6. 其他特性：
(a) 分泌激素和异位激素: 绒毛膜癌→HCG 垂体瘤→生长激素 肺燕麦细胞癌和一些甲状腺癌→ACTH 人肺巨细胞癌细胞株（PLA-801）→促性腺激素 肝癌→HCG
(b) 肿瘤细胞的受体表达: ER PR AR (c) 酶及同工酶活性:
酶活性保持(HTC→酪氨酸氨基转移酶)、变化 诱导剂 糖皮质激素、多肽激素
肿瘤细胞系:原代培养肿瘤细胞能连续传代（约7～10天传代一次） 半年以上,生长稳定, 并能保持肿瘤细胞的特性， 称为肿瘤细胞系(cell line)
肿瘤细胞株:细胞系经细胞克隆或其它方法获得具有某种生物学特性 的纯谱系的细胞称为肿瘤细胞株(cell strain), 细胞具有 相同的基因型和表型(单克隆)
Flow Laboratories; GIBCO
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16
特殊表型肿瘤细胞系（株）：
高转移 人肝细胞性肝癌细胞株MHCC97 人黑色素瘤细胞株MV3、 卵巢癌细胞株HO-8910PM、 肺巨细胞癌细胞株PGBE1
高度耐药 人红白血病细胞株K562/ADM对阿霉素的抗性增114.7倍
分泌产生激素、蛋白、酶或一些因子 人肺小细胞癌细胞株LU-165→抗利尿激素; 人肺腺癌细胞株LC-2/ad→α1-抗胰蛋白酶 人红白血病细胞株K562高表达端粒酶
肿瘤的实验动物和细胞研 究技术
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1
常用研究方式：
In Vitro: 体外研究，细胞、组织培养下进行
In Vivo: 体内研究，人类疾病的动物模型
Ex Vivo: 细胞经体外实验处理后，再回输到体内 体外处理：转染基因或改变环境(用一些因子) 使其分化等
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精品资料
• 你怎么称呼老师？ • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你
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(1) 化学致癌物 ▲ 诱发时间相对较短 ▲有剂量-效应关系 ▲基因毒化学致癌物一般具有高度亲电子性， 与生物大分子中富于电子的亲核残基相结合, 影响硷基对的正常配位或大分子的结构与功能 →正常细胞的癌变. ▲直接致癌物和前致癌物（间接致癌物）
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常见化学致癌物:
1) 多环碳氢化合物: 25种以上, 以煤焦油的主要成分3,4-苯并芘
和3-甲基胆蒽的致癌性最强
2) 氨基偶氮化合物: 二甲基氨基偶氮苯亦称二甲基黄(奶油黄),
3’-甲基-4,4’-二甲基氨基偶氮苯(3’-Me-DAB)
3)芳香胺类: 苯胺印染工厂 吸入乙萘胺在肝变为氨基苯经肾排出
联苯胺→膀胱癌
2-乙酰氨基芴(2-AAF)
4)亚硝胺类:
亚硝酸盐+二级胺→亚硝胺类化合物 强致癌物 致癌谱甚广
是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
体外研究(In Vitro )
原代培养肿瘤细胞: 从肿瘤组织中分离得到的细胞在体外成功地进行 培养称为原代培养(primary culture)
细菌：培液混浊，高倍镜下隐约可见均匀散在细小菌体 真菌：培液混浊，高倍镜下可见菌丝或孢子 病毒：病毒核酸和蛋白产物 支原体：以核酸（DNA）荧光染色即H-stain(Hoechst 33258，
即二苯并咪唑染色)较为常用, 356nm光的激发下 可发出458nm的强荧光,
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体外正常细胞恶性转化的鉴定
5.组织特性的鉴定:
免疫细胞化学方法
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上皮性肿瘤标志: CK、上皮膜抗原（EMA）、 癌胚抗原（CEA）;
淋巴瘤抗原标志: 人白细胞分化抗原簇（CD）,有274个以上,
T淋巴细胞: B淋巴细胞:
UCHL-1(CD45RO), L26（CD20）,
软组织肿瘤标志：波形蛋白（Vm）
肌源性：结蛋白（Dm）、肌动蛋白、肌凝蛋白、肌红蛋白
胞质嗜碱性弱;核仁较小较少;
胞质嗜碱性强,核仁较大较多;多核巨细胞
多核巨细胞较少
较多
粘附性 细胞间粘附性较强,紧贴瓶壁生长 粘附性差,易脱落
生长特性 排列有方向性,单层生长,存在密度 方向性消失,多层重叠,密度依赖性抑制消失
依赖性抑制
对血清的依赖 较高
较低
扫描电镜观察 微绒毛少
微绒毛丰富
植物凝集素引起的凝集
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体内研究(In Vivo)
肿瘤动物模型： 自发性肿瘤 诱发性肿瘤 移植性肿瘤.
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一、自发性肿瘤
种系：大鼠的自发肿瘤不如小鼠多见，大动物更为少见 Sinclair猪到一岁时有85%可发生恶性黑色素瘤
品系： C3H小鼠 ― 乳腺癌发病率为97% BALB/c ― 乳腺癌发病率低 AKR小鼠 ―淋巴细胞性白血病发病率为70%~90% 近交系SJL/J小鼠 ―淋巴瘤(何杰金病)自发率高达91%
差别不明显 微绒毛不稳定,有时增多
较强 糖基化不完全
不稳定,某些株增高 不稳定
非整倍体 生长 长肿瘤
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世界各国的细胞库（cell bank）及索引
美国
美国典型培养细胞库（American Type Culture Collection, 即ATCC, Rockville,MD） 人与动物细胞培养目录（Catalog of Human and OtherAnimal Cell Cultures, Naval Biosciences
▲透射和扫描电镜
▲3D组织结构
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3. 核型及染色体观察:
整倍体,异倍体,染色体畸变、标记染色体,染色体分带分析, 相隔一定时间重复观察数次
4.生长特性:
分裂指数（[3H]-thymidine或5-BrdU的labeling index）、 生长曲线、 细胞群体倍增时间、 集落形成或贴壁率（plating efficiency） 半固体培养介质中的集落形成率
弱
较弱
细胞表面的糖蛋白和糖脂 正常
糖基化不完全
纤维连接蛋白
正常存在
减少或消失
纤溶酶原激活酶
较低
增高
胞质中微丝微管的排列
规则
紊乱
胞质cAMP浓度
较高
较低
核型
二倍体
非整倍体或假二倍体
琼脂培养
不生长
生长
接种异种易感动物
不长肿瘤
长肿瘤
与正常细胞之间差别不如纤维母细胞 大;多形性较常见
差别不明显 差别不明显,某些细胞株呈重叠生长
6
肿瘤细胞株的鉴定：
1. 有关的原始资料,包括供瘤病人的姓名、年龄、性别、病历号、 临床诊断（TNM）、活检病理诊断,手术切除日期、最后病理诊断 等
2.形态学观察:
▲普通倒置相差光镜:活细胞的形态, 细胞间桥,分泌颗粒,重叠生长,
▲Giemsa染色或H.E.染色的光镜
形态与肿瘤细胞的生长条件有一定关系: HeLa: 高浓度血清→长梭形; 低浓度血清→圆形细胞,排列如鹅卵石路面;
欧洲动物细胞培养库（European Collection for Animal Cell Cultures,即ECACC, PHLS/CAMR, Porton, Salisbury, England)
欧洲人类基因突变细胞库(European Human GeneticMutant Cell Bank, Department of Clinical Genetics, Erasmus University, Rotterdam)
改变培养条件：谷氨酸替代谷氨酰胺→脑星形胶质细胞谷氨酰合成酶
活性增7倍左右
特异的同工酶谱： 绒癌T3M-3p表pt课达件胎盘性碱性磷酸酶
10
(d) 癌基因及抑癌基因核酸及蛋白的表达：
高转移人卵巢细胞系HO-8910PM
表达：p53 p16 bcl-2 nm-23 CD44v6
c-erbB-2 EGFR
缺点：发病迟,发病时期不集中,发病率也不稳定
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二、诱发性肿瘤
优点：发生率、发病时间、发生部位及组织学类型均易控制 实验结果重复性相对较好
1.化学诱癌动物肿瘤模型 1775年英国医师Pott 扫烟囱 阴囊癌 1914年,日本学者山极和市川 煤焦油 皮肤癌 1934年Yashida用邻氨基偶氮甲苯诱发大鼠肝癌成功 我国从1960年代开始进行化学诱癌动物模型的研究 1956年亚硝胺和1961年黄曲霉毒素的致癌作用相继被发现
正常细胞体外恶性转化的鉴定指标(14项指标)
（第二届全国细胞和组织培养专题讨论会通过）
并形成集落
▲异种动物接种能生成肿瘤
▲端粒保持不变或延长以及端粒酶活性的增高
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14
指标
正常细胞
转化的纤维母细胞
转化的上皮细胞
形态
伸展良好,折光较弱;核质比小,
梭形,伸展较差,折光较强;核质比大,
神经源性： 神经微丝（NF）、S-100蛋白、 Leu-7、
神经元特异性烯醇化酶（NSE）、髓磷脂碱性蛋白(MBP) 组织细胞源性： α-1抗胰蛋白酶、 α-1抗糜蛋白酶、CD68
血管源性：八因子相关抗原、CD34、荆豆凝集素(UL)
基膜源性：纤连蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）
体外培养时肿瘤细胞株有可能会失去原本表达的某些组织抗原,抗原标志要 多选用几种抗体,以减少假阴性结果;
癌细胞系库(Collection of Cancer Cell lines, National Institute of Hygenic Sciences, Tokyo) 普通细胞库( General Cell Bank, Institute of Physical and Chemical Research of RIKEN, Saitama)
等基因的蛋白产物
不表达：Bax基因的蛋白产物
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7. 细胞株交叉污染的检测：
细胞遗传学方法： 染色体分析 特异的染色体标志探针作FISH G带核型分析鉴别同种肿瘤细胞 Q带分析检测人Y染色体
免疫学方法：HLA或动物的组织相容性抗原的测定
生化方法：同工酶谱或其它生化指标
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8. 微生物污染的检测：
不同分子的亚硝胺化合物仍有一定的器官亲和性
对称衍生物如二烷基亚硝胺→肝癌
不对称的亚硝胺→食管癌
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5)霉菌毒素: 种类较多 首推黄曲霉毒素(aflatoxin),存在于霉变的花生、
玉米及谷物中, 6)金属元素 :
砷、铬、镍、→肺癌 镉→前列腺癌.
(2)影响化学致癌的因素
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1) 动物方面 品系:
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5
肿瘤细胞株的建立： 1、 直接从人的肿瘤或动物的自发及诱发肿瘤组织分离培养
建系和建株; (从自发或诱发瘤)
2、从人或动物的移植肿瘤(如人肿瘤裸鼠移植瘤)组织分离 培养建系及建株; (从移植瘤)
3、用化学或生物(病毒)方法在体外转化正常的人或动物的 细胞株而获得肿瘤细胞株。(体外转化)
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诱发肝癌时：F-344大鼠对DEN和2-AAF的敏感性要比其它品系的大鼠高 诱发皮肤肿瘤：BALB/c和SENCAR品系小鼠对DMNU、DENU的敏感性
大大高于Swiss品系小鼠
性别: 2AAF诱发肝癌：♂小鼠60%发生肝癌,♀小鼠不敏感.
F-344大鼠,♀比♂更敏感
年龄: 一般而言,动物年龄越小,对化学致癌物越敏感,
欧洲 日本
真核细胞培养库(Culture de Cellules Eucaryotes, Repertoire des Utilisateurs., M. Adophe, D. Gourdji, A.Tixier-Vidal, R. Robineaux, Inserm Publications,101 Rue de Tobiac,75654 Paris, Cedex 13 医学病毒学系（Department of Medical Virology,Institute de Pasteur, Paris)
敏感性： 胎鼠>新生鼠>成年鼠
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2) 化学致癌物方面
剂量阈值:
启动因子（initiator）不表现明显的剂量阈值 促癌因子（promotor）则有剂量阈值 一般的化学致癌物往往兼有启动和促癌的作用,因此仍可表现有剂量阈值 如3’-Me-DAB (60ppm) 致癌强度: 诱发大鼠肝癌总剂量: