HPLC法测定三七伤药片、胶囊和颗粒中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rbl的含量

CHINA HEALTH
INDUSTRY
三七伤药片、三七伤药胶囊、三七伤药颗粒为骨科用药,只要功效为舒筋活血,散瘀止痛,用于跌打损伤,风湿瘀阻;急慢性扭挫伤,神经痛[1-2]。

该系列品种均由三七、制草乌、雪上一枝蒿、冰片、骨碎补、红花、接骨木和赤芍八味药材组成的复方制剂,三七为君药,具有散瘀
止血,消肿止痛之功效[3]。

控制其质量十分必要,参照中国药典三七项下分析方法进行了含量测定研究[4]。

实验
结果表明由于制剂中干扰因素较多,三七皂苷R1无法检测,因此对人参皂苷Rg1、Rb1的含量进行了测定,具有合理性,且方法易于操作,阴性无干扰,结果准确,重现性良好,可作为评价三七伤药系列品种的质控标准。

1仪器与试药
Agilent1100series 高效液相色谱仪;试剂均为色谱
纯或分析纯;对照品人参皂苷Rg1(110754-200421)、Rb1
(110734-200726),均购自中国药品生物制品检定所。

三
七伤药片为上海上联药业提供,批号:100301。

2色谱条件
Agilent HC C18分析柱(250×4.6mm,5μm),柱温40℃,流速0.8mL/min,检测波长203nm,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按表1进行梯度洗脱。

表1不同时间梯度洗脱的比较(%)
3试验方法
3.1对照品溶液的制备
精密称取在105℃干燥12h 的人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品,加甲醇制成每1mL 各含0.2mg
DOI:10.16659/ki.1672-5654.2017.13.077
HPLC 法测定三七伤药片、胶囊和颗粒中人参皂苷
Rg1、人参皂苷Rb1的含量
樊红军,谷杰,周丽丽
长春市食品药品检验中心,吉林长春
130021
[摘要]目的建立HPLC 法测定三七伤药片、三七伤药胶囊、三七伤药颗粒中三七的含量测定方法。

方法色谱柱:Agilent HC C18(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈:水,采用梯度洗脱程序;检测波长:203nm。

结果人参皂苷Rg1在0.276~2.346μg 范围内,线性关系良好,r =0.9999;平均回收率为99.01%(n =6),RSD=2.5%;人参皂苷Rb1在0.2432~2.0672μg 范围内,线性关系良好,r =0.9999;平均回收率为98.38%(n =6),RSD=1.5%。

结论该法简便,准确,重现性好,可作为评价三七伤药片、三七伤药胶囊、三七伤药颗粒的质控方法。

[关键词]三七;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;含量测定;高效液相色谱[中图分类号]R286.0
[文献标识码]A
[文章编号]1672-5654(2017)05(a)-0077-05
Analysis of HPLC Method in Measuring the Ginsenoside Rg1and Rb1in the
Sanqishangyao Tablets and Capsules and Granules
FAN Hong-jun,GU jie,ZHOU Li-li
Changchun Food and Drug Test Center,Changchun,Jilin Province,130021China
[Abstract]Objective To establish the method of HPLC method in measuring the ginsenoside Rg1and Rb1in the sanqis⁃
hangyao tablets and capsules and granules.Methods Chromatographic column Agilent HC C18
(250×4.6mm,5μ),mobile
phase:acetonitrile,water,gradient elution program,determine wavelength:203mm.Results Ginsenoside Rg1was between
0.276and 2.346μg,and the liner correlation was good,r =0.9999,The average recovery was 99.01%(n=6),RSD=2.5%.
Ginseng saponin Rb1in 0.2432~2.0672μg,and the liner correlation was good,r =0.9999,the average recycle rate
98.38%(n =6),RSD=1.5%.Conclusion The method is simple and accurate,and the reproducibility is good,which can be used as the quality control method of evaluating the Sanqishangyao tablets and capsules and granules.
[Key words]Sanqi;Ginsenoside Rg1;Ginsenoside Rb1;Measurement of constant;High-pressure liquid chromatography
[作者简介]樊红军(1966-),男,吉林长春人,本科,主任药师,研究方向:检验机构管理。

0~2525~7575~7676~8383~90
时间(min)20
20→3535→90902080
80→6565→101080流动相A 流动相B . All Rights Reserved.
的混合溶液,摇匀,即得。

3.2供试品溶液的制备
取该品2g,研细,精密称定,精密加入甲醇50mL,称定重量,放置过夜,超声处理(功率350W,频率50kHz)40min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25mL,水浴蒸干,残渣加
水15mL 使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,20mL /次,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇溶解并定量转移至10mL 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀即得,见图1、图2、图3。

3.3标准曲线制备
精密称取人参皂苷Rg1对照品
、人参皂苷
Rb1对
图1三七阴性对照溶液色谱图
图2人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1对照品溶液色谱图
图3三七供试品溶液色谱图
. All Rights Reserved.
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照品适量,加甲醇制成每1ml 含人参皂苷Rg1对照品0.138mg、人参皂苷Rb1对照品0.1212mg 的混合溶液,分别精密吸取2、5、8、11、14、17μL 注入液相色谱仪,依法测定,以对照品溶液的浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。

见表2、表3。

结果表明,人参皂苷Rg1在0.276~2.346μg、人参皂苷Re 在0.2432~2.0672μg 范围内,呈良好线性关系,符合外标法定量测定的要求。

3.4精密度试验
精密吸取供试品溶液5μL,注入液相色谱仪,重复进样6次,测定其色谱峰面积值。

见表4、表5。

表4人参皂苷Rg1精密度试验结果表5人参皂苷Rb1精密度试验结果
结果表明,所用仪器具良好的精密性。

3.5稳定性试验
取供试品溶液5μL,按正文色谱条件,于不同的时间进行测定,结果见表6、表7。

表6人参皂苷Rg1稳定性试验结果
表7人参皂苷Rb1稳定性试验结果
结果表明6h 内供试品溶液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量基本稳定。

3.6重复性试验
取同一批号样品(广西玉林制药有限公司310052),依正文方法独立操作,测定6次,结果见表8、表9。

结果表明本法具有良好的重复性。

3.7回收率试验
取已知含量的供试品:人参皂苷Rg13.7894mg/g、人参皂苷Rb12.8578mg/g 各6份,每份约1.0g,精密称定,分别精密加入配成含对照品溶液人参皂苷Rg1(0.04462mg/mL)、人参皂苷Rb1(0.035064mg/mL)的对照品溶液50mL,依含量测定项下方法测定。

计算回
收率,结果见表10、表11。

如上表所示,人参皂苷Rg1的平均回收率为99.01%,RSD=2.52%;人参皂苷Rb1的平均回收率为98.38%,RSD=1.51%;证明方法具有一定的准确性,方法可行。

3.8检出限与定量限遥
检出限为信噪比的3倍高,精密量取人参皂苷Rg1(138.0μg/mL)和人参皂苷Rb1(121.6μg/mL)对照品溶液,照正文方法检测,进样量为0.5μL。

检出限分别为0.069μg
和0.061μg。

定量限为信噪比的10倍高,精密量取人参皂苷Rg1(138.0μg/mL)和人参皂苷Rb1(121.6μg/mL)对照品溶液依照正文方法检测,进样量为1.5μL,定量限分别为0.207μg 和0.183μg。

连续测定6次,平均值分别为84.71(RSD=1.27%)和52.67(RSD=2.32%)。

符合定量分析的
要求。

峰面积RSD(%)
进样量(5μL)644.071
640.17
2
645.88
3
649.09
4
644.82
642.560.82
5
6
表8人参皂苷Rg1重复性试验结果
123456
序号0.98140.98680.98120.97950.98640.9588
测定值(mg/粒)
0.9807
1.17%
平均值(mg/粒)
RSD 表9人参皂苷Rb1重复性试验结果
123456
序号0.73860.74000.73810.75360.73580.7316
测定值(mg/粒)
0.7396
1.01%
平均值(mg/粒)
RSD 峰面积RSD(%)
进样量(5μL)646.591
648.832
644.413
652.184
644.07640.170.655
6
峰面积RSD(%)
进样量(5μL)373.011
385.262
386.923
388.114
384.45385.231.425
6
峰面积RSD(%)
进样量(5μL)365.661
367.382
375.923
375.914
372.68375.261.225
6
表2人参皂苷Rg1标准曲线数据
峰面积值回归方程
进样量(μg)115.68
0.276285.240.690
452.971.104
623.341.518
789.34939.701.932
2.346
Y=400.44x+9.42r =0.9999
表3人参皂苷Rb1标准曲线数据
峰面积值回归方程
进样量(μg)80.15
0.2432188.52
0.6081294.58
0.9728400.20
1.3376506.21
614.34
1.7024
2.0672Y=257.39x+1189
3.68r =0.9999
. All Rights Reserved.
(下转第83页)
3.9样品测定
依法测定三七伤药片、胶囊和颗粒样品。

见表12、表13、表14。

4讨论
不同厂家色谱柱耐用性考察:取同一供试品溶液分别采用Agilent HC C18(4.6×250mm,5μm)的色谱柱、
123456
序号 1.00641.00331.00841.00651.00301.0051
取样量(g) 2.87612.86722.88182.87642.79182.8724
样品含量(mg) 1.75321.75321.75321.75321.75321.7532
加标量(mg) 4.61984.60114.60134.58174.55074.5600
99.4598.9098.0897.27
100.3396.25测得量(mg)回收率(%)表10人参皂苷Rg1回收率试验结果
表11人参皂苷Rb1回收率试验结果
123456
序号 1.00641.00331.00841.00651.00301.0051
取样量(g) 3.81373.80193.83123.81403.80083.8087
样品含量(mg) 2.23102.23102.23102.23102.23102.2310
加标量(mg) 5.97665.99446.15026.01226.00095.9898
96.9498.27
103.9498.5298.6197.76测得量(mg)回收率(%)上海上联药业100301上海上联药业100302合肥今越药业100101合肥今越药业091201合肥今越药业100301四川大千药业100201四川大千药业100301
通化金马药业20100103
通化金马药业20100105长春银诺克药业20090701长春海外药业20100401
批号
0.8150.9660.3010.2090.2810.8000.7231.6401.0170.3200.520
0.8130.9700.3040.2050.2900.8000.7251.5771.0550.3250.522
0.81(薄膜衣0.35g)0.97(薄膜衣0.35g)0.30(糖衣片)0.20(糖衣片)0.29(糖衣片)0.80(糖衣片)0.72(糖衣片)1.60(糖衣片)1.03(糖衣片)0.32(糖衣片)0.52(糖衣片)
均值(mg/片)人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1总量(mg/片)
表12三七伤药片11批样品人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1总量测定结果
表13三七伤药胶囊10批样品人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1总量测定结果
广西玉林制药310071广西玉林制药310062广西玉林制药310069广西玉林制药310052广西玉林制药310068南风恒曲制药100301南风恒曲制药100302南风恒曲制药100303南风恒曲制药100304南风恒曲制药100205
批号
1.5671.5941.5251.7201.590.480.43
0.400.400.41
1.5651.5101.5131.7161.590.480.750.400.400.43
1.561.551.521.721.600.480.440.440.400.43
均值(mg/片)
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总量(mg/粒)
吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司20100101吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司20090303吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司20090304
批号
6.044.564.60
5.924.534.68
6.04.54.6
均值(mg/袋)
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总量(mg/袋)
表14三七伤药颗粒样品人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1总量测定结果
. All Rights Reserved.
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(上接第80页)
Diamonsil C18(250×4.6mm,5μm)的色谱柱、Agilent Extent C18(4.6×250mm,5μm)的色谱柱按正文拟订的方法
测定。

实验结果显示,所选用的三种色谱柱均达到方法系
统适用性的要求。

但是Agilent HC C18(250×4.6mm,5μ)柱和Agilent Extent C18(250×4.6mm,5μ)柱可在60min 内将人参皂苷Rg1、Rb1混合对照品溶液完全分离,Diamansil C18(4.6×250mm,5μm)柱超过100min,说明其对色谱柱有一定的选择性。

故本法采用Agilent HC C18(250×4.6mm,5μ)柱。

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[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部[S].
北京:中国医药科技出版社,2010:11.
(收稿日期:2017-02-11)
汇总分析,并将汇总分析出存在的问题下发整改意见书,要求相关科室进行持续改进。

同时投诉管理科根据汇总意见,制定整改督查计划书并交由相关职能科室进行专项督查。

4总结阶段(A)
根据检查结果,对该院医疗纠纷处理的过程进行检验,总结和分析医疗纠纷发生的主要原因,并进行效果评价,针对不足之处提出整改措施。

投诉管理科每季度对医疗纠纷处理情况出具统计分析报告,并在院周会和科室例会上进行通报,以便于大家及时排查和消除医疗安全隐患,防范医疗纠纷发生。

5效果
投诉管理科按照同样的数据收集方法(已最初投诉时间为准的有效医疗纠纷,包含直接向城区医患纠纷调处中心申请调解及司法诉讼),记录2014、2015、2016年医疗纠纷情况,见表1。

表12014、2015、2016年医疗纠纷发生与处理情况
医疗纠纷发生数的比较:经过对全院医疗质量的不断持续改进,该院新发生的医疗纠纷数量按20%左右的比例下降。

医疗纠纷赔款数额的比较:得益于医疗纠纷快速处置模式的推出,临床科室及时上报、有效沟通及投诉管理科的早期介入,使较多医疗纠纷在萌芽阶段就得到妥善处理,2016年度本院未有因医疗纠纷所致的群体性事件发生,赔款例均数同比下降。

2016年10月常州市武进人民医院接受了江苏省
卫生与计划生育委员会的三级医院现场评审,最终顺利通过了检查被评为三级乙等综合医院。

在评审过程中涉及条款“2-7-1-2妥善处理医疗纠纷”达A 类要求。

6结语
即使在2014年《关于依法惩处涉医违法犯罪维护正常医疗秩序的意见》出台后[3],也依然无法阻止“医闹”等恶性事件的发生。

因此,只有从医院内部各个环节开始做起,将提高医疗水平和医疗质量作为医院医疗管理的第一要务,才是有效规避医疗纠纷的有效手段。

将PDCA 质量管理办法引入医疗纠纷管理中可以使我们的思想方法和工作步骤更加条理化、系统化、科学化,使得医疗纠纷管理在一个循环结束后,每总结一次,管理质量就提高一步,如此循环与持续改进,不仅有效防范了医疗纠纷的发生,而且促进了医院的医疗质量、服务能力、管理水平的进一步提高。

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天津师范大学学报:社会科学版,2014,233(2):67-71.
(收稿日期:2017-02-10)
2014年2015年2016年
年份564434
纠纷(例)21.4022.70
同比下降(%)
519914820977841245783金额(元)
59.6041.60
同比下降(%)
92841476763664048.6023.10
例均金额(元)
同比下降(%). All Rights Reserved.。