(人教版)2019版高考一轮：111-基因工程ppt优化课件(有答案)-(生物)
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高考生物复习
[归纳总结] (1)与 DNA 有关的四种酶的辨析
种类 项目
限制酶
DNA连接 酶
DNA聚合酶
解旋酶
作用底物
DNA分子
DNA分子 片段
脱氧核苷酸
DNA分子
磷酸二酯
碱基对间
作用部位 磷酸二酯键
磷酸二酯键
键
的氢键
形成黏性末 形成重组 形成新的 形成单链 作用结果
端或平末端 DNA分子 DNA分子 DNA分子
高考生物复习
有关基因工程的 7 个易混易错点 (1)在切割目的基因和载体时用同一种限制酶，目的是产生相 同的末端。 (2)将一个基因从 DNA 分子上切割下来，需要切两处，同时 产生 4 个末端。 (3)不同 DNA 分子用同一种限制酶切割产生的末端都相同， 同一个 DNA 分子用不同的限制酶切割，产生的末端一般不 相同。
高考生物复习
固考基·双基体系优化
高考生物复习
一、基因工程的基本工具
高考生物复习
2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中 稳定存在 ，并且可以 __遗__传__给__下__一__代___，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成
高考生物复习
高考生物复习
3．“分子缝合针”——DNA 连接酶
(1)作用：将限制酶切割下来的 DNA 片段拼接成 DNA 分子。
(2)类型
种类 来源
E·coli DNA 连接酶 大肠杆菌
T4DNA 连接酶 T4 噬菌体
可以连接黏性末端和平末
功能特性 只能连接黏性末端 端，但连接平末端之间的效
率较低
相同点 都缝合磷酸二酯键，如图：
(3)构建过程
高考生物复习
植物： 农杆菌转化法 、基因 3.将 入目 受的 体基 细因 胞导—方法动枪物法 ：、显花微粉注管射通道技法术
微生物： 感受态细胞 法
高考生物复习
利用 DNA 分子杂交 技术检测目 的基因的有无 利用 分子杂交技术 检测目的基因 目的基因的 的转录 4.检测与鉴定利用 抗原—抗体杂交 检测目的基因 的翻译 利用个体生物学水平的检测鉴定重 组性状的表达
AATT C……G G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA 除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必 须具有的特点是___________________________________。
高考生物复习
(3)按其来源不同，基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类，即 __________DNA 连接酶和__________DNA 连接酶。 (4)反转录作用的模板是__________，产物是______________。 若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。 (5)基因工程中除质粒外，_________和________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理 的大肠杆菌作为受体细胞，原因是__________________________ _____________________________________________________。
进展
临床实验
临床应用
高考生物复习
四、蛋白质工程
高考生物复习
助考技巧启动高考长句应答模式 1．基因工程四步曲中，哪些步骤中发生了碱基互补配对？ 提示：只有第三步“将目的基因导入受体细胞”没有发生碱 基互补配对，其他三步中都涉及碱基互补配对。①第一步中 发生在反转录法合成目的基因或 PCR 技术扩增目的基因过 程中。②第二步中发生在黏性末端相互连接过程中。③第四 步中目的基因的导入检测、转录检测发生碱基互补配对。
高考生物复习
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的 有________和________，其中既能连接黏性末端又能连接平 末端的是____________________。
高考生物复习
(1)由图(a)可知，尽管 BamHⅠ和 Sau3AⅠ两种限制酶的识别位 点不相同，但两种酶切割后产生的 DNA 片段具有相同的黏性末 端，故被 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与图(b)中表达载 体被 Sau3AⅠ酶切后的产物连接。(2)运载体上的启动子和终止 子具有调控目的基因表达的作用，由于甲和丙的目的基因分别插 入在启动子的上游和终止子的下游，故这两个运载体上的目的基 因都不能被转录和翻译。(3)常见的 DNA 连接酶是 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶，但作用有所差别，T4DNA 连接酶既 能连接黏性末端，又能连接平末端，而 E·coli DNA 连接酶只能 连接黏性末端。
高考生物复习
(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种 含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不 能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达 的原因是_________________________________________ _________________________________________________。
高考生物复习
答案：(1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的 DNA 片段末端 与 EcoRⅠ切割产生的相同 (3)E·coli T4 (4)mRNA(或 RNA) cDNA(或 DNA) PCR (5)噬菌体 动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA)的 能力极弱
高考生物复习
2．(2016·高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表 示出了 EcoRⅠ、BamHⅠ和 Sau3AⅠ三种限制性内切酶的 识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体 上的 EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
高考生物复习
研考点·重点难点探究
高考生物复习
考点研析
1．基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程
结果(优点)
基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因
DNA分子水平 剪切→拼接→导入→表达 _定__向__改__造__生物性状，创造出人 类需要的基因产物或生物类型
高考生物复习
高考生物复习
三、基因诊断与基因治疗
基因治疗
基因诊断
原理 _基__因__重__组___及基因表达
DNA分子_杂__交__
将正常基因导入有基因缺陷
的细胞中，使该基因的_表__达__ 制作特定DNA探针与
方法 _产__物___发挥功能，以达到治
病人样品DNA混合， 分析__杂__交__带__情况
疗的目的
高考生物复习
4.载体 (1)条件与目的
条件
目的
稳定并能_复__制__
目的基因稳定存在且数量可扩大
有一个至多个限__制__酶__切割位点 可携带多个或多种外源基因
具有特殊的_标__记___基因
便于重组DNA的鉴定和选择
高考生物复习
(2)作用 ①作为运载工具，将目的基因 导入 宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
高考生物复习
(3)PCR 技术与体内 DNA 复制的比较
DNA复制
PCR技术
解旋方式
解旋酶催化
DNA在高温作用下变 性解旋
场所
细胞内(主要在细胞 细胞外(主要在PCR扩
核内)
增仪内)
区 别
酶
DNA解旋酶、普通 耐热的DNA聚合酶 的DNA聚合酶等 (Taq酶)
温度条件
细胞内温和条件
需控制温度，在较高 温度下进行
高考生物复习
(2)限制酶选择时的两种特例 ①限制酶具有特异性，一般情况下，不同限制酶形成的黏性 末端不同。但也有不同限制酶处理后形成的黏性末端相同， 可以用 DNA 连接酶进行连接。如：G↓GATCC 和↓GATC 识别的序列不同，但处理后的黏性末端相同。
高考生物复习
②为了避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使 用相同的两种限制酶(如下图用 BamHⅠ和 HindⅢ，分别简 写为 B、H)分别切割目的基因和质粒，形成分别对应的相同 黏性末端进行连接。
高考生物复习
4．培育转基因动物时，受体细胞必须是受精卵，培育转基 因植物时的受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞。 5．目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；导入动物细 胞常用显微注射技术，导入微生物细胞常用感受态细胞法。 6．目的基因到了另一种生物体内能够成功表达的原理是所 有生物共用一套遗传密码。
高考生物复习
(1)DNA 分子经限制酶切割后产生的 DNA 片段的末端通常有两 种——黏性末端和平末端。(2)为了保证目的基因与运载体相 连，用另一种限制酶切割含目的基因的 DNA 后形成的黏性末 端必须与 EcoRⅠ切割形成的黏性末端相同。(3)DNA 连接酶有 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶两类。(4)反转录的模板是 mRNA，产物是 DNA。大量扩增反转录产物常采用 PCR 技术。 (5)在基因工程中使用的运载体除质粒外，还有噬菌体、动植物 病毒等。(6)经 Ca2＋处理后的大肠杆菌更易吸收周围环境中的 DNA 分子。
2.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称。无论是奇数个碱基 还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如 ，以中 心线为轴，两侧碱基互补对称；=CG=CG=A=T=GC=GC=以==AT===为轴，两 侧碱基互补对称。
高考生物复习
(2)切割后末端的种类
合成的对象
DNA分子
DNA片段或基因
高考板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 ②原料：均为四种脱氧核苷酸 联 ③酶：均需要DNA聚合酶进行催化 系 ④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开 始连接脱氧核苷酸
高考生物复习
针对训练
1．根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段，其末端类型 有__________和__________。 (2)质粒运载体用 EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
高考生物复习
(4)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以 便进行检测。 (5)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程 中的载体是 DNA 分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜上载 体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。 (6)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞) 没有碱基互补配对现象。 (7)①基因表达载体中，启动子(DNA 片段)≠起始密码子(位于 mRNA)；终止子(DNA 片段)≠终止密码子(位于 mRNA)；②基 因表达载体的构建是最核心、最关键的一步，在体外进行。
第十一单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程
C目录 ONTENTS
固考基·双基体系优化 研考点·重点难点探究 悟高考·真题演练 课时作业
高考生物复习
[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技 术(含 PCR 技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程 (Ⅰ)。5.实验：DNA 的粗提取与鉴定。
a．所选限制酶要与切割目的基因的 限制酶 一致，以确保 产生相同的末端。 b．质粒作为载体必须具备 标记 基因等，所以所选择的限制 酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶 SmaⅠ会破坏标 记基因；如果所选酶的切割位点不止一个，则切割重组后可 能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组 后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
高考生物复习
(3)限制酶的选择技巧
高考生物复习
①根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类 a．应选择切割位点位于目的基因 两端 的限制酶，如图甲 可选择 PstⅠ。 b．不能选择切割位点位于目的基因 内部 的限制酶，如图 甲不能选择 SmaⅠ。 ②根据质粒的特点确定限制酶的种类
高考生物复习
图(a)
高考生物复习
根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)经 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体 被_____________________________________酶切后的产物 连接，理由是_____________________________________。
高考生物复习
2．将目的基因导入受体细胞时，能否仅把目的基因整合到 线粒体 DNA 或叶绿体 DNA 上？为什么？ 提示：一般不能。如果仅把目的基因整合到线粒体 DNA 或 叶绿体 DNA 上，由于细胞分裂可能导致目的基因丢失，无 法稳定遗传。
高考生物复习
1.限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷 酸序列，并在特定的位点上切割 DNA 分子。DNA 连接酶 的作用部位是磷酸二酯键。 2．质粒是常用的载体，它是一种小型的双链环状 DNA 分 子，具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。 3．基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记 基因。
[归纳总结] (1)与 DNA 有关的四种酶的辨析
种类 项目
限制酶
DNA连接 酶
DNA聚合酶
解旋酶
作用底物
DNA分子
DNA分子 片段
脱氧核苷酸
DNA分子
磷酸二酯
碱基对间
作用部位 磷酸二酯键
磷酸二酯键
键
的氢键
形成黏性末 形成重组 形成新的 形成单链 作用结果
端或平末端 DNA分子 DNA分子 DNA分子
高考生物复习
有关基因工程的 7 个易混易错点 (1)在切割目的基因和载体时用同一种限制酶，目的是产生相 同的末端。 (2)将一个基因从 DNA 分子上切割下来，需要切两处，同时 产生 4 个末端。 (3)不同 DNA 分子用同一种限制酶切割产生的末端都相同， 同一个 DNA 分子用不同的限制酶切割，产生的末端一般不 相同。
高考生物复习
固考基·双基体系优化
高考生物复习
一、基因工程的基本工具
高考生物复习
2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中 稳定存在 ，并且可以 __遗__传__给__下__一__代___，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成
高考生物复习
高考生物复习
3．“分子缝合针”——DNA 连接酶
(1)作用：将限制酶切割下来的 DNA 片段拼接成 DNA 分子。
(2)类型
种类 来源
E·coli DNA 连接酶 大肠杆菌
T4DNA 连接酶 T4 噬菌体
可以连接黏性末端和平末
功能特性 只能连接黏性末端 端，但连接平末端之间的效
率较低
相同点 都缝合磷酸二酯键，如图：
(3)构建过程
高考生物复习
植物： 农杆菌转化法 、基因 3.将 入目 受的 体基 细因 胞导—方法动枪物法 ：、显花微粉注管射通道技法术
微生物： 感受态细胞 法
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利用 DNA 分子杂交 技术检测目 的基因的有无 利用 分子杂交技术 检测目的基因 目的基因的 的转录 4.检测与鉴定利用 抗原—抗体杂交 检测目的基因 的翻译 利用个体生物学水平的检测鉴定重 组性状的表达
AATT C……G G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA 除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必 须具有的特点是___________________________________。
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(3)按其来源不同，基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类，即 __________DNA 连接酶和__________DNA 连接酶。 (4)反转录作用的模板是__________，产物是______________。 若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。 (5)基因工程中除质粒外，_________和________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理 的大肠杆菌作为受体细胞，原因是__________________________ _____________________________________________________。
进展
临床实验
临床应用
高考生物复习
四、蛋白质工程
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助考技巧启动高考长句应答模式 1．基因工程四步曲中，哪些步骤中发生了碱基互补配对？ 提示：只有第三步“将目的基因导入受体细胞”没有发生碱 基互补配对，其他三步中都涉及碱基互补配对。①第一步中 发生在反转录法合成目的基因或 PCR 技术扩增目的基因过 程中。②第二步中发生在黏性末端相互连接过程中。③第四 步中目的基因的导入检测、转录检测发生碱基互补配对。
高考生物复习
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的 有________和________，其中既能连接黏性末端又能连接平 末端的是____________________。
高考生物复习
(1)由图(a)可知，尽管 BamHⅠ和 Sau3AⅠ两种限制酶的识别位 点不相同，但两种酶切割后产生的 DNA 片段具有相同的黏性末 端，故被 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与图(b)中表达载 体被 Sau3AⅠ酶切后的产物连接。(2)运载体上的启动子和终止 子具有调控目的基因表达的作用，由于甲和丙的目的基因分别插 入在启动子的上游和终止子的下游，故这两个运载体上的目的基 因都不能被转录和翻译。(3)常见的 DNA 连接酶是 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶，但作用有所差别，T4DNA 连接酶既 能连接黏性末端，又能连接平末端，而 E·coli DNA 连接酶只能 连接黏性末端。
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(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种 含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不 能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达 的原因是_________________________________________ _________________________________________________。
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答案：(1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的 DNA 片段末端 与 EcoRⅠ切割产生的相同 (3)E·coli T4 (4)mRNA(或 RNA) cDNA(或 DNA) PCR (5)噬菌体 动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA)的 能力极弱
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2．(2016·高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表 示出了 EcoRⅠ、BamHⅠ和 Sau3AⅠ三种限制性内切酶的 识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体 上的 EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
高考生物复习
研考点·重点难点探究
高考生物复习
考点研析
1．基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程
结果(优点)
基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因
DNA分子水平 剪切→拼接→导入→表达 _定__向__改__造__生物性状，创造出人 类需要的基因产物或生物类型
高考生物复习
高考生物复习
三、基因诊断与基因治疗
基因治疗
基因诊断
原理 _基__因__重__组___及基因表达
DNA分子_杂__交__
将正常基因导入有基因缺陷
的细胞中，使该基因的_表__达__ 制作特定DNA探针与
方法 _产__物___发挥功能，以达到治
病人样品DNA混合， 分析__杂__交__带__情况
疗的目的
高考生物复习
4.载体 (1)条件与目的
条件
目的
稳定并能_复__制__
目的基因稳定存在且数量可扩大
有一个至多个限__制__酶__切割位点 可携带多个或多种外源基因
具有特殊的_标__记___基因
便于重组DNA的鉴定和选择
高考生物复习
(2)作用 ①作为运载工具，将目的基因 导入 宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
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(3)PCR 技术与体内 DNA 复制的比较
DNA复制
PCR技术
解旋方式
解旋酶催化
DNA在高温作用下变 性解旋
场所
细胞内(主要在细胞 细胞外(主要在PCR扩
核内)
增仪内)
区 别
酶
DNA解旋酶、普通 耐热的DNA聚合酶 的DNA聚合酶等 (Taq酶)
温度条件
细胞内温和条件
需控制温度，在较高 温度下进行
高考生物复习
(2)限制酶选择时的两种特例 ①限制酶具有特异性，一般情况下，不同限制酶形成的黏性 末端不同。但也有不同限制酶处理后形成的黏性末端相同， 可以用 DNA 连接酶进行连接。如：G↓GATCC 和↓GATC 识别的序列不同，但处理后的黏性末端相同。
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②为了避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使 用相同的两种限制酶(如下图用 BamHⅠ和 HindⅢ，分别简 写为 B、H)分别切割目的基因和质粒，形成分别对应的相同 黏性末端进行连接。
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4．培育转基因动物时，受体细胞必须是受精卵，培育转基 因植物时的受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞。 5．目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；导入动物细 胞常用显微注射技术，导入微生物细胞常用感受态细胞法。 6．目的基因到了另一种生物体内能够成功表达的原理是所 有生物共用一套遗传密码。
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(1)DNA 分子经限制酶切割后产生的 DNA 片段的末端通常有两 种——黏性末端和平末端。(2)为了保证目的基因与运载体相 连，用另一种限制酶切割含目的基因的 DNA 后形成的黏性末 端必须与 EcoRⅠ切割形成的黏性末端相同。(3)DNA 连接酶有 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶两类。(4)反转录的模板是 mRNA，产物是 DNA。大量扩增反转录产物常采用 PCR 技术。 (5)在基因工程中使用的运载体除质粒外，还有噬菌体、动植物 病毒等。(6)经 Ca2＋处理后的大肠杆菌更易吸收周围环境中的 DNA 分子。
2.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称。无论是奇数个碱基 还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如 ，以中 心线为轴，两侧碱基互补对称；=CG=CG=A=T=GC=GC=以==AT===为轴，两 侧碱基互补对称。
高考生物复习
(2)切割后末端的种类
合成的对象
DNA分子
DNA片段或基因
高考板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成 ②原料：均为四种脱氧核苷酸 联 ③酶：均需要DNA聚合酶进行催化 系 ④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开 始连接脱氧核苷酸
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针对训练
1．根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段，其末端类型 有__________和__________。 (2)质粒运载体用 EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
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(4)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以 便进行检测。 (5)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程 中的载体是 DNA 分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜上载 体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。 (6)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞) 没有碱基互补配对现象。 (7)①基因表达载体中，启动子(DNA 片段)≠起始密码子(位于 mRNA)；终止子(DNA 片段)≠终止密码子(位于 mRNA)；②基 因表达载体的构建是最核心、最关键的一步，在体外进行。
第十一单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程
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固考基·双基体系优化 研考点·重点难点探究 悟高考·真题演练 课时作业
高考生物复习
[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技 术(含 PCR 技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程 (Ⅰ)。5.实验：DNA 的粗提取与鉴定。
a．所选限制酶要与切割目的基因的 限制酶 一致，以确保 产生相同的末端。 b．质粒作为载体必须具备 标记 基因等，所以所选择的限制 酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶 SmaⅠ会破坏标 记基因；如果所选酶的切割位点不止一个，则切割重组后可 能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组 后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
高考生物复习
(3)限制酶的选择技巧
高考生物复习
①根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类 a．应选择切割位点位于目的基因 两端 的限制酶，如图甲 可选择 PstⅠ。 b．不能选择切割位点位于目的基因 内部 的限制酶，如图 甲不能选择 SmaⅠ。 ②根据质粒的特点确定限制酶的种类
高考生物复习
图(a)
高考生物复习
根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)经 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体 被_____________________________________酶切后的产物 连接，理由是_____________________________________。
高考生物复习
2．将目的基因导入受体细胞时，能否仅把目的基因整合到 线粒体 DNA 或叶绿体 DNA 上？为什么？ 提示：一般不能。如果仅把目的基因整合到线粒体 DNA 或 叶绿体 DNA 上，由于细胞分裂可能导致目的基因丢失，无 法稳定遗传。
高考生物复习
1.限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷 酸序列，并在特定的位点上切割 DNA 分子。DNA 连接酶 的作用部位是磷酸二酯键。 2．质粒是常用的载体，它是一种小型的双链环状 DNA 分 子，具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。 3．基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记 基因。