竹叶多糖提取分离及体外抗氧化自由基的研究

第49卷第6期2021年3月
广州化工
Guangzhou Chemical Industry
Vol.49No.6
Mar.2021
竹叶多糖提取分离及体外抗氧化自由基的研究
周先泰陈蓉1,齐娜▽
(1桂林医学院药学院，广西桂林541000；2南方医科大学中西医结合医院，广东广州510315)
摘要:探讨竹叶多糖含量及体外抗氧化能力。

水提醇沉法得到竹叶粗多糖。

Sevag法脱蛋白和D101大孔树脂分离纯化, DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯脐)法和邻苯三酚法对粗多糖抗氧化性进行研究。

研究发现粗多糖收率0.525%,蛋白含量占粗多糖37.71%。

0.66mg/mL对DPPH自由基清除效果最大，清除率55.23%。

多糖浓度0.107-0.301mg/mL范围，对超氧自由基的清除效果逐渐提升。

结果表明水提醇沉法提取竹叶粗多糖产率较好，具有较好的体外抗氧化活性。

关键词：竹叶多糖；水提醇沉法；抗氧化；DPPH法；邻苯三酚法
中图分类号：R285.5文献标志码：B文章编号：1001-9677(2021)06-0080-05
Extraction and Separation of Polysaccharides from Bamboo and
Study on Antioxidant Free Radicals in Vitro*
ZHOU Xian-tai1,CHEN Rong1,QI Na12
(1College of Pharmacy,Guilin Medical University,Guangxi Guilin541000；2Integrated Hospital of
Traditional Chinese Medicine,Southern Medical University,Guangdong Guangzhou510315,China)
Abstract:The content of polysaccharide and antioxidant capacity in vitro were studied.The crude polysaccharide of bamboo was obtained by water extraction and alcohol precipitation.Sevag method was used to take off the protein and D101 macroporous resin to purification,the antioxidant activity of crude polysaccharides was studied by DPPH(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine)and o-phenylene three phenol method.The yield of bamboo polysaccharide by water extraction and alcohol precipitation was0.525%,and protein content accounted for37.71%of crude polysaccharide.When the solubility of crude polysaccharide was0.66mg/mL,the scavenging effect of DPPH radical was the highest,which was55.23%. When the solubility of crude polysaccharide was in the range of0.107~0.301mg/mL,the scavenging effect on superoxide radical was gradually improved.The results showed that the yield of crude polysaccharide from bamboo leaves was better by water extraction and alcohol precipitation,and crude polysaccharides had good antioxidant activity in vitro.
Key words：Lophatherum Gracile Brongn polysaccharide;water extraction and alcohol precipitation；antioxidant; DPPH method；0-phenylene three phenol method
竹子为禾本科(Gramineae)植物B,广泛分布于亚非大陆、南北美洲及太平诸岛地区，我国竹林资源占世界竹林资源的3%⑵。

其中竹叶(Bamboo)在我国作为传统中药材，2015年版药典一部记载其功效为清热除烦、生津、利尿的功效⑶。

当代药理学研究同样表明多糖具有广泛的药理作用，诸如抗肿瘤、降血糖⑷、增加机体免疫力⑺和抗心肌缺血⑷等作用，以及抗菌抗病毒和抗氧化作用。

目前针对竹叶多糖方面的研究仅有少量的工艺提取与活性研究，针对竹叶多糖抗氧化研究较少。

本研究旨在使用水提醇沉法制取竹叶粗多糖，并进一步对粗多糖进行纯化，探索水提醇沉法对竹叶多糖的提取率以及纯化多糖的产率。

并探索竹叶多糖对DPPH自由基以及超氧自由基的清除效果，对竹叶多糖的提取及抗氧化活性进行初步探索。

1实验
1.1材料
1.1.1原料
竹叶，购买于桂林市吉尔康大药店，经桂林医学院生药学教研室蓝伦礼老师鉴定为禾本科植物淡竹的干燥叶。

1.1.2试剂
95%乙醇(AR,批号：1712172),购于西陇科学股份有限
■■基金项目：广西自治区自然科学基金资助项目(2017GXNSFAA198061)；广西自治区科学研究与技术开发计划项目(桂科能1598025-30)；广西高等学校千名中青年骨干教师培育计划(桂教办[2018]348号)。

第一作者：周先泰(1989-),男，2018级硕士生，研究方向：药物新型递送系统。

通讯作者：齐娜(1979-),女，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：药物新型递送系统。

陈蓉(1989-),女，硕士，研究方向：药物新型递送系统。

第49卷第6期周先泰，等：竹叶多糖提取分离及体外抗氧化自由基的研究81
公司；葡萄糖（AR,批号：1605241）,购于汕头市西陇化工厂有限公司；抗坏血栓（AR,批号：1101051）,购于西陇化工股份有限公司；浓硫酸（AR,批号：1708251）,购于西陇科学股份有限公司；DPPH（AR）,购于阜阳曼林生物技术有限公司；邻苯三酚（AR）、氯仿（AR,批号：1801032）,购于西陇科学股份有限公司；正丁醇（AR）,购于西陇化工服务有限公司；Tris （批号：F20090225）,购于国药集团化学试剂有限公司；浓盐酸（AR）,购于西陇化工股份有限公司；丙酮（AR,批号：20100920）,购于衡阳市凯信化工制剂有限公司；乙瞇（AR,批号：170417）,购于四川西陇化工有限公司；D101大孔树脂、a-蔡酚，购于中国上海化学试剂采购供应站。

1.1.3仪器
BT224S电子天平，Sartorius；UV-1600PC紫外分光光度计，Mapada；KQ5200DA超声清洗仪，昆山超声仪器有限公司；RE2000A旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器，巩义市英峪予化制造厂；XW-80A涡旋混合器，上海精科实业有限公司；DZF-6050真空干燥机，上海一恒科学仪器有限公司。

1.2方法
1.2.1多糖样品制备
竹叶70t蒸憎水浸泡30min,料液比1：10,超声浸提20min/次，浸提3次，合并滤液，70t旋蒸浓缩至1：1（1g 竹叶1mL）,冷却后加3倍95%乙醇4t沉淀12-24h, 3000r/min离心10min,沉淀物分别用少量无水乙醇、丙酮、乙瞇多次洗涤后，40t真空干燥后，得粗多糖称重。

得到的粗多糖用Sevag法脱蛋白，随后使用D101大孔树脂纯化，流速1.0mL/min,纯水洗脱，待洗脱液无Molish反应“句停止洗脱70t旋蒸浓缩后烘干，4t密封保存样液。

1.2.2多糖样品含量测定
葡萄糖标准曲线绘制：采取苯酚-硫酸法绘制葡萄糖标准曲线，490nm问处测吸光度A值，以A值为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标（mg/mL）绘制标准曲线，求得回归方程：
C=aA+b
标准曲线中的方法，以样液为参比液，测溶液吸光度，根据回归方程计算样品中葡萄糖含量：
多糖含量=CD/Wxl00%
式中：C为样品中葡萄糖的含量（"g/mL）；D为样品稀释倍数；W为粉末样品质量。

1.2.3多糖抗DPPH自由基效应测定
表1DPPH溶液浓度
Table1DPPH solution concentration
组别0.1mg/mL DPPH50%乙醇/mL
10 4.0
20.5 3.5
3 1.0 3.0
4 1.
5 2.5
5 2.0 2.0
6 2.5 1.5
DPPH标准曲线绘制：采取DPPH法测多糖抗氧化活性，取1X10-4mol-L'1DPPH溶液，0.13mg/mL多糖溶液和0.2mg/mL 抗坏血栓溶液，分光光度计在190-800nm波长处进行扫描,确定最大吸收波长X maI o
DPPH溶液的配制见表1。

避光静置15min,50%乙醇空白对照，在DPPH最大吸收波长下，以DPPH浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标曲。

配置2.0mL0.1mg/mL的DPPH溶液，分别加入1mL不同浓度的竹叶多糖溶液或维生素C（Vc）溶液，混匀，50%乙醇加至4.0mL；空白管中为同浓度多糖样品液，加50%乙醇至4.0mL,摇匀，避光静置15min后，50%乙醇6mL和2mL蒸憎水混合调零，依据1.2.4最大吸收波长处测定吸光度，所有数据重复测定三次取均值。

样品对DPPH清除率=1-［（样品吸光度-空白吸光度）/0.2mg DPPH标准品吸光度］X100%
1.2.4多糖抗超氧阴离子效应测定
采取邻苯三酚法测定抗超氧阴离子效应，邻苯三酚自氧化吸光度测定：4.2mL蒸憎水和pH&2的4.5mL50mmol/L Tris-HC1缓冲溶液，25t水浴20min,立即加入0.5mL同条件预热的3mmol/L邻苯三酚，325nm每30s测吸光度，测定4min o pH&2的4.5mL50mmol/L Tris-HCl缓冲溶液、4.2mL蒸憎水和0.5mL10mmol/L HC1做空白调零。

多糖抗0；活性：按上述步骤加入邻苯三酚前先分别加入1mL各样品液（浓度为0.107mg/mL,0.2mg/mL,0.301mg/mL 粗多糖），蒸憎水减少1mL。

以4.5mL50mmol/L Tris-HC1缓冲溶液（pH&2）、3.2mL蒸僧水和1mL相应浓度的多糖溶液和0.5mL10mmol/L的HC1做空白调零。

O；清除率=（AA/At-AA2/At）/（AA1/At）xlOO%
式中：AA/At为邻苯三酚自氧化时的反应速率；AA2/At 为加入多糖样品液后邻苯三酚自氧化时的反应速率。

1.2.5统计分析
本研究中所得实验结果均重复3次，实验结果以均值士标准偏差（X士SD）表示，数据用Excel软件及Origin&5软件进行整理分析，采用Excel进行线性回归分析。

2结果与讨论
2.1多糖样品含量测定
在490nm波长处吸光度（A）对葡萄糖浓度（C）做线性回归方程为y=&0263x-0.0116,相关系数R'=0.9911。

在0.02-0.1mg/mL浓度内呈良好的线性关系。

方程中Y为吸光度，X 为多糖浓度（mg/mL）。

取提取后多糖粉末溶解于2mL水中，平行测定三次，取吸光度平均值计算多糖浓度C,按标曲方程计算多糖含量。

结果见表2,竹叶粗多糖含量为0.525%,脱蛋白之后多糖含量为0.327%,粗多糖中蛋白含量占粗多糖的37.71%。

表2多糖百分含量(n=3)
Table2The percentage of polysaccharides(n=3)
超声提取法Sevag法脱蛋白/%吸光度0.258±0.0120.324±0.007
多糖含量0.525±0.0220.327±0.007
2.2多糖抗DPPH自由基效应测定
图1从左到右分别为DPPH溶液、多糖溶液和Vc溶液全波长扫描，由图1可知，DPPH在525nm有最大吸收且多糖与维生素C在该波长处无干扰,取525nm作为DPPH检测波长。

在525nm下测定的吸光度（A）对DPPH浓度（C）做线性回归：DPPH回归曲线方程为y=0.2083.6x+0.0407,相关系数R2=0.9917o方程中Y为吸光度，X为DPPH浓度，单位: mg/mL o
82广州化工2021年3月
图1DPPH(A)、多糖(B)、Vc(C)全波长扫描
Fig.1DPPH(A),polysaccharide(B),Vc(C)full wavelength scanning
粗多糖测定的0.2mg DPPH标准管A为0.430；0.430；
0.0478o Vc测定0.2mg DPPH标准管A为0.478；0.500；0.500o
表3粗多糖清除DPPH吸光度测定
Table3The determination of DPPH absorbance by
crude polysaccharide
浓度/(mg/mL)A样品A空白A样_A空
0.0450.3440.0140.330
0.1890.3150.0370.278
0.4290.3050.0900.215
0.660.3490.1490.200
1.080.4660.2570.209
表4维生素C清除DPPH吸光度测定Table4The determination of DPPH absorbance by vitamin C
浓度/(mg/mL)A样品A空白A样-A空
0.001690.3190.0020.317
0.003380.250.0010.256
0.006770.1900.0010.189
0.02630.0810.0020.079
0.05410.0810.0020.079
将上述A值代入DPPH清除率计算公式。

可知粗多糖随浓度增加，对DPPH的清除率增大，在0.429巒mL到0.66巒mL 时，清除率增加不大。

浓度达1.08mg/mL,清除率下降。

维生素C随着浓度增加，对DPPH的清除率增大，浓度达0.0541mg/mL,清除率下降。

粗多糖有较好的清除DPPH的能力，维生素C对DPPH的清除率强于粗多糖。

计算结果如表5 和表6所示。

表5粗多糖清除DPPH清除率计算
Table5The removal rate of DPPH was calculated by
using crude polysaccharide
浓度/(mg/mL)清除率/%
0.04525.86
0.18937.74
0.42951.87
0.6655.23
1.0853.14
表6维生素C清除DPPH清除率计算
Table6Vitamin C clears DPPH clearance rate
浓度/(mg/mL)清除率/%
0.0016935.59
0.0033847.97
0.0067761.57
0.026383.96
0.054183.89
2.3多糖抗超氧阴离子效应
邻苯三酚自氧化速率经紫外分光光度计测量数据如表7所 示。

由表7可知邻苯三酚自氧化速率（AA/AJ二0.00437（AA/ A t：每隔30s吸光度的差值与时间之比）。

表7邻苯三酚自氧化吸光度
Table7Autoxidation absorbance of Pyrogallol 时间/s A】A?A3
300.4320.3470.274
600.7730.6110.501
90 1.0020.7940.661
120 1.1680.9290.780
150 1.295 1.0310.870
180 1.392 1.Ill0.941
210 1.471 1.1750.999
240 1.535 1.227 1.043
表80.107mg/mL粗多糖浓度管自氧化吸光度Table8Autoxidation absorbance of0.107mg/mL crude
polysaccharide concentration tube
时间/s Ai A2A3
300.3700.3100.300
600.6890.5910.569
900.9180.7880.755
120 1.0720.9240.882
150 1.173 1.0150.971
180 1.245 1.076 1.029
210 1.300 1.117 1.069
240 1.336 1.142
1.092
第49卷第6期周先泰，等：竹叶多糖提取分离及体外抗氧化自由基的研究83
分别用1mLO.107、0.2、0.301mg/mL浓度的粗多糖溶液根据1.2.4多糖抗邻苯三酚的测定方法，在4min内每隔30s 测定吸光度，每个粗多糖浓度平行测定三次。

测定结果见表8、表9、表10。

将表8、表9、表10中数值代入1.2.4公式中计算得粗糖溶度在0.107-0.301mg/mL溶度范围内，对邻苯三酚的清除率也随之上升，结果见表11。

表90.2mg/mL粗多糖浓度管自氧化吸光度Table9Autoxidation absorbance of0.2mg/mL crude
polysaccharide concentration tube
时间/s A】A2A3
300.3540.4440.443
600.6600.7880.769
900.8450.9900.973
1200.950 1.Ill 1.095
150 1.006 1.181 1.171
180 1.032 1.221 1.215
210 1.042 1.246 1.242
240 1.040 1.260 1.260
表100.301mg/mL粗多糖浓度管自氧化吸光度Table10Autoxidation absorbance of0.301mg/mL crude
polysaccharide concentration tube
时间/s A】A2A3
300.3680.4470.497
600.6540.7830.872
900.8040.966 1.092
1200.875 1.058 1.214
1500.897 1.106 1.285
1800.895 1.129 1.329
2100.880 1.139 1.359
2400.858 1.142 1.378
表11不同浓度多糖对邻苯三酚的清除率
Table11The clearance rate of pyrogallol in different
concentration of polysaccharide
粗多糖浓度/(mg/mL)清除率/%
0.107 5.89
0.20015.73
0.30124.93
3讨论
近年来，天然植物多糖的相关研究备受关注，不仅局限于我国，国外研究者们也逐渐聚焦于此，但目前为止，研究者们对于竹叶多糖的抗氧化研究较少，本研究利用水提醇沉法提取竹叶多糖，同时采取Sevag以及D101大孔吸附树脂对粗多糖进行精制，研究粗多糖在竹叶中的含量，以及粗多糖中蛋白含量和精制后多糖的产率。

结果表明竹叶中粗多糖含量为0.525%,多糖中蛋白含量为粗多糖的37.71%。

人体内活性氧的产生与细胞衰老关系密切〔勿，也与不少疾病有直接相关性，例如：帕金森综合征也〕、阿尔茨海默症「勿、糖尿病⑷等。

通常情况机体内存在诸如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)以及过氧化氢酶(Catalase,CAT)等内源性抗氧化剂以抑制活性氧自由基，正常生理状况下自由基产生以及内源性过氧化物酶之间的清除率处于动态平衡中。

当自身内源性抗氧化物酶清除率不及活性氧产生率时，则需要外源性抗氧化剂，以避免体内细胞出现氧化应激损伤细胞，对于外源性抗氧化剂，不少研究证实天然植物多糖对生物体而言是较为安全的抗氧化剂。

竹叶粗多糖在体外对DPPH的清除率以及多糖抗超氧阴离子效应的实验结果表明竹叶多糖具有明显的抗氧化活性。

4结论
竹叶中提取的多糖具有显著的体外抗氧化活性，对抗氧化物质而言有潜力运用于帕金森综合征、阿尔茨海默症、糖尿病等由体内活性氧导致氧化应激引发身体损伤的疾病治疗性药物或保健食品的开发。

由于竹叶资源在我国产量巨大且价格低廉，若竹叶多糖提取分离技术及相关生物活性等相关技术研究进一步成熟，可丰富竹叶保健用食品及药品品种，产生更大的经济利益。

参考文献
[1]Guo Z,Zhang Z,Yang X,et al.PSBR1,encoding a mitochondrial
protein,is regulated by brassinosteroid in moso bamboo(Phyllostachys edulis)[J]•Plant molecular biology,2020,103(1-2)；63-74.
[2]Bian F Y,Zhong Z K,Zhang X P,et al.Bamboo-An untapped plant
resource for the phytoremediation of heavy metal contaminated soils]J].
Chemosphere,2020.246：125750.
[3]国家药典委员会，中华人民共和国药典.一部[S].中国医药科技
出版社，2015;328.
[4]Forouzan Kurd,Vahid Samavati.Water soluble polysaccharides from
Spirulina platensis:extraction and in vitro anti-cancer activity[J].
International journal of biological macromolecules,2015,74：498-506.
[5]Feng B,Zhu Y,Sun C Y,et aL Basil polysaccharide inhibits hypoxia-
induced hepatocellular carcinoma metastasis and piogression through suppression of HIF-la-mediated epithelial-mesenchymal transition
[J].International journal of biolo^cal macromolecules,2019,137:32-
44.
[6]Sheng Z.Effervescent Granules Prepared Using Eucommia ulmoides
Oliv.and Moso Bamboo Leaves:Hypoglycemic Activity in HepG2Cells
[J].Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,
2016,2016：1-6.
[7]Yang L C,Hsieh C C,Lin W C.Characterization and
immunomodulatory activity of rice hull polysaccharides[J].
Carbohydrate polymers,2015,124：150-156.
[8]Zhang S H,Zhao Y L.Lentinan protects cardiomyocytes against
hypoxia-induced injury by regulation of microRNA-22/Sirtl.Artificial cellsf J].Nanomedicine,and biotechnology,2019,47(1)：3938_
3946.
[9]Hayashi T.Characterization of Structures and Antiviral Efiects of
Polysaccharides from Portulaca oleracea L[J].Chemical& Pharmaceutical Bulletin,2010,58(4):507-510.
[10]Deng Q F,Wang X,Chen H G.Structural characterization,
modification and hepatoprotective effects of polysaccharide from Mori Fructus[J].International journal of biological macromolecules,2020, 153：357-363.
[11]Huang G L,Mei X Y,Hu J C.The Antioxidant Activities of Natural
Polysaccharides[J].Current drug tai^ets,2017,18(11)：1296-1300.
(下转第111页)
第49卷第6期张世强，等：浅析重整装置进料带水的影响及对策111
石脑油的杂质含量合格。

根据目前的进料方式，生产部门根据进料水含量超标的情况积极联系上游油品罐区加强脱水，装置内在重整进料缓冲罐D-211水包处加强脱水，优化石脑油分憎塔C-101的操作，降低重整进料的水含量，经过处理之后重整进料水含量基本稳定在20~30m#kg左右,但仍高于设计要求(UOP要求不大于2mg/kg,目前国内装置达不到这个指标，本装置要求不大于20mg/kg)。

如果装置负荷可以维持在60%,也可以把冷重石全部引到石脑油分僧塔C-101塔进行脱水后再进入重整反应系统，但是这个流程在没有热重石进料的情况下，受C-101塔能力的限制，重整负荷很难在提高了。

2.3调整重整分憾和催化剂再生系统操作
合理范围内适当提高重整脱戊烷塔塔底温度，加强监测回流罐水包界位，水包界位上涨及时脱水，避免塔底和回流泵汽蚀导致系统波动。

对重整催化剂进行连续加样分析，根据分析结果适当调整注氯量，维持系统水氯平衡，保证催化剂的酸性功能。

适当的增大还原气量，带走还原气中的水。

加强再生系统烧焦操作，烧焦时控制好氧含量烧焦温度，烧焦温度控制在565t以下，防止烧坏催化剂和设备。

严格控制干燥区干燥气入口温度，确保再生烧焦空气干燥器运行正常，保证催化剂的干燥效果。

2.4氢气脱氯剂的处理
如果氢气脱氯剂受水影响较大，板结严重，导致压降增大，可以进行撇头处理。

将脱氯罐顶部板结的废剂取出，回装新的脱氯剂。

本装置的脱氯剂受水影响后压降增至55kPa,目前压差比较稳定，没有影响产品质量，备台新更换的脱氯剂，本台脱氯剂也快运行到中末期了，提前进行了更换。

3结语
罐区来的加氢裂化石脑油直接作为重整进料时，发生了严重的带水现象，经过调整反应和再接触系统、重整分憎和催化剂再生系统，历时一周的调整，重整反应恢复平稳。

通过与上游装置的的沟通协调，7月末至今，罐区来的加氢裂化石脑油水含量维持在30~40mg/kg左右，重整进料水含量在20~ 30mg/kg左右,循环氢中水含量在30mg/kg左右。

进料127t/h,反应总温降245基本接近正常数据值。

经历此次原料突然水含量升高事件我们可以总结出以下几点经验：
(1)原料产品质量的监控对装置十分重要，上游装置发生调整要及时通知下游装置。

(2)原料带水对重整装置有一定的影响，如果及时调整,催化剂可以基本恢复到原来的状态，可以保证产品质量合格。

本装置为了保证产氢量，反应温度只降到505没有严格遵循循环氢中水含量高于50mg/kg时，反应温度降到493导致催化剂比表面积由168m2/g降到146m2/g o
(3)原料带水之后会造成催化剂比表面积下降，催化剂的持氯能力下降，大量的氯和水流失到下游，应该加强监控，避免因为设备腐蚀造成生产波动⑷。

(4)操作人员应该加强监盘和巡检，管理人员应该加强指标监控，及时发现及时处理，把问题最小化，损失最小化。

参考文献
[1]李成栋.催化重整装置技术问答[M].北京：中国石化出版社,
2008：180.
[2]戴厚良.芳桂技术[M].中国石化出版社,2017：77-7&
[3]胡勇仁，张兰新，赵仁殿.微量水对Pt-Re/7-AJ2O3重整催化剂还
原的影响：1催化性能的影响[J].石油学报(石油加工)，1996,12
(1)：14-17,
[4]侯祥麟.中国炼油技术[M].北京:中国石化出版社,2001:179.
[5]徐承恩.催化重整工艺与工程[M].北京:中国石化出版社,2006：
507-521.
(上接第83页)
[12]Chen F,Huang G L,Yang Z Y,et aL Antioxidant activity of
Momordica charantia polysaccharide and its derivatives[J].
International journal of biological macromolecules,2019,138:673-
680.
[13]Chen S J,Liu H,Yang X Q,et al Degradation of sulphated
polysaccharides from Grateloupia livida and antioxidant activity of the degraded components[J].International journal of biological macromolecules,2020,156：660-66&
[14]Wu Q N,Luo M,Yao X D,et al.Purification,structural
characterization,and antioxidant activity of the COP-W1
polysaccharide from Codonopsis tangshen Oliv[J].Carbohydrate polymers,2020,236:116020.
[15]Yin Z H,Zhang W,Zhang J J,et al Isolation,purification,structural
analysis and coagulatory activity of water-soluble polysaccharides from Ligustrum lucidum Ait flowers[J].Chemistry Central journal,2017,
11(1)：98.
[16]Yamashita Y,Kawahara H,Obata H.Identification of a novel anti-ice-
nucleating polysaccharide from Bacillus thuringiensis YY529[J].
Bioscience,biotechnology,and biochemistry,2002.66(5):p.948-954.
[17]Chen L,Huang G L.Antioxidant activities of phosphorylated pumpkin
polysaccharide[J].Intemational journal of biological macromolecules,
2019,125：256-261.
[18]Ribeiro N A,Chaves H V,Silveira F D,et al.Sulfated polysaccharide
from the green marine algae Caulerpa racemosa reduces experimental
pain in the rat temporomandibular joint[J].Intemational journal of biological macromolecules,2020,150：253-260.
[19]Pop C,Berce C,Ghibu S,et al Effects of L.Polysaccharides on
Inflammation and Oxidative Stress Markers in a Pressure Overload-Induced Heart Failure Rat Model[J].Molecules(Basel,
Switzerland),2020,25(3):466.
[20]Wei W Q,Ji S Q.Cellular senescence:Molecular mechanisms and
pathogenicity[J].Journal of cellular physiology,2018,233(12)：
9121-9135.
[21]HO G,IE0.The Main Targets Involved in Neuroprotection for the
Treatment of Alzheimer's Disease and Parkinson Disease[J].Current Pharmaceutical Design,2020,26(4):509-516.
[22]Finley J W,Gao S.A Perspective on Crocus sativus L(Safiron)
Constituent Crocin:A Potent Water-Soluble Antioxidant and Potential Therapy for AlzheimeFs Disease[J].Journal of agricultural and food chemistry,2017,65(5):1005-1020.
[23]余倩莎.龙牙百合多糖提取物抗氧化活性及其对肿瘤细胞生长影
响[D].长沙:湖南农业大学，2017.
[24]Jemai H,Mahmoudi A,Feryeni A,et al.Hepatoprotective Effect of
Oleuropein-Rich Extract from Olive Leaves against Cadmium-Induced Toxicity in Mice[J].BioMed research intemational,2020,2020: 4398924.
[25]张淑杰，康玉凡.天然活性多糖研究进展[J].食品工业科技，
2018,38(02)：379-382,389.。