人教版高中生物一轮复习必背知识(选修三)

第1单元基因工程 记忆网络图解
1.1 DNA 重组技术的基本工具
核心考点背记 1.1.1 基因工程的概念
1.1.2 限制性核酸内切酶一一“分子手术刀” （1）存在：主要存在于原核生物中。

（2）特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA 分子。

（3）识别的序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中心轴线两侧的双链八上的碱基是反向对称重复排列的。

如：以
CG
GC CG GC 中心线为轴，两侧碱基互补对称；GGTCC CCAGG 以T A
为
轴，两侧碱基互补对称。

（4）切割后末端的种类：DNA 分子经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端（如图所示）。

当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA 的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是
平末端。

切割分子时产生的两种不同末端(箭头表示酶的切割位置）
特别提示
①限制性核酸内切酶是一类酶而不是一种酶。

②限制性核酸内切酵作用的化学键为磷酸二酯键，而不是氢键。

③不同种类的限制性核酸内切酶识别与切割的位点不同。

这与酶的专一性是一致的。

1.1.3 DNA连接酶——分子缝合针
1.1.4 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
（1）载体具备的条件
①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

（3）其他载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。

综合
限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶与解旋酶
1.2 基因工程的基本操作程序
核心考点背记
1.2.1 基因工程的基本操作流程
1.2.2 目的基因的获取
（1）从基因文库（基因组文库或cDNA 文库）中获取
（2）人工合成目的基因：常用的方法有化学合成法和反转录法。

化学合成法：蛋白质−−
→−分析氨基酸序列−−→−推测RNA 碱基序列−−→−推测
DNA 碱基序列−→−用4种脱氧核苷酸人工合成目的基因
反转录法：分离出供体细胞mRNA −−
−−→−逆转录酶单链DNA −−−−−→−聚合酶
DNA 合成目的基因
（3）利用PCR 技术扩增目的基因：通过PCR （多聚酶链式反应）可
对已获取的目的基因进行扩增，在短时间内获取大量目的基因。

1.2.3 基因表达载体的构建一基因工程的核心
①用同一种限制酶分别切割载体与含目
的基因的DNA分子，产生互补的黏性末
端或平末端。

②用DNA连接酶将载体与目的基因“缝合”起来，形成重组DNA(基因表达载体)。

③将重组DNA导入受体细胞进行增殖和筛选。

（2）表达载体的组成：目的基因十启动子十终止子十标记基因。

①启动子：一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端。

它是与RNA 聚合酶结合的部位。

②终止子：一段特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

作用是使转录过程停止。

③标记基因：一般为抗生素基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基闽是否导入成功)。

1.2.4 将目的基因导入受体细胞
1.2.5 目的基因的检测和表达
1.3 基因工程的应用
核心考点背记
1.3.1 植物基因工程的应用
1.3.2 动物基因工程的应用
1.3.3 基因工程药物
（1）来源：转基因工程菌。

（2）成果：细胞因子、抗体、疫苗、激素等。

（3）作用：预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、糖尿病、类风湿等疾病。

1.3.4 乳腺生物反应器与微生物生产的比较
注意：
乳腺生物反应器受生物性别的限制，若从动物尿液中提取目的基因产物则不受性别限制。

1.3.5 基因治疗
（1）概念:把正常基因导人病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。

（2）基因治疗的方法
注意：
①基因治疗并非把健康的外源基因导入患者的所有细胞中，而只是导入某些功能细胞中，且是体细胞。

②基因治疗是治疗人类遗传病的根本方法,但由于尚未全面了解基因调控机制和疾病的分子机理，基因治疗只处于初期的临床试验阶段。

1.3.6 基因检测与基因治疗的比较
1.4 蛋白质工程的崛起
核心考点背记
1.4.1 基因工程及不足
（1）实质：将一种生物的基因转移到另一种生物体内、后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新性状。

（2）不足：在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。

（3）天然蛋白质的不足
天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。

1.4.2 蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

1.4.3 蛋白质工程的基本原则
1.4.4 基因工程和蛋白质工程的比较
第2单元细胞工程
记忆网络图解
2.1 植物细胞工程
✧核心考点背记
2.1.1 细胞工程的含义
2.1.2 细胞的全能性
（1）含义：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。

每个生物细胞都具有全能性的特点。

（2）细胞全能性的原因
生物体的每个细胞都含有该物种所特有的全套遗传信息，都有发育成为个体所需要的全部基因。

从理论上来说，一个染色体组中含有发育为该物种的个体所需的全部基因。

（3）细胞全能性大小的比较
①植物细胞>动物细胞（动物细胞只有细胞核具有全能性）。

②受精卵>生殖细胞（精子、卵细胞）>体细胞。

③体细胞：分化程度低的>分化程度高的，细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的，幼嫩的细胞>衰老的细胞。

（4）实现植物细胞全能性的条件
2.1.3 植物组织培养技术
（1）理论基础（原理）：细胞全能性
（2）过程
（3）培养条件：营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和有机酸等)、激素（如细胞分裂素、生长素等）及其他条件（无菌、适宜的温度和pH等）。

（4）材料的选择与处理
①幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。

②对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。

注意
①植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，蔗糖还可起到调节渗透压的作用。

②诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素浓度及配比。

③愈伤组织再分化形成植物幼苗时，需光照处理，以便诱导叶绿体的形成。

思维拓展
植物细胞工程中的“脱分化”与“再分化”
（1）脱分化和再分化的比较
（2）影响脱分化、再分化的因素
素
激物植
⎪⎩⎪⎨⎧<> 根生长长素浓度：促进生细胞分裂素浓度 芽生长长素浓度：促进发细胞分裂素浓度伤组织素浓浓度相当时：生成细胞分裂素浓度与生长
2.1.4 植物体细胞杂交技术
（1）概念:将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并将其培育成新的植物体的技术。

（2）原理：细胞膜的流动性和细胞的全能性。

（3）基础：植物组织培养。

（4）过程
特别讲解
①植物体细胞杂交的障碍:a.植物细胞都有细胞壁。

根据酶的专一性原理，用纤维素酸和果胶醉去除细胞壁。

b.原生质体融合。

人工诱导方法包括物理法，如离心、振动、电激;化学法，如聚乙二醇（PEG)等。

②杂种细胞的筛选:诱导原生质体融合后，将原生质体转移到适当的培养基上，使原生质体再生细胞壁。

人工诱导会形成多种融合细胞，可采用机械方法、生理学或遗传学方法筛选出杂种细胞，并将其进一步培养成杂种植林。

③杂种植林遗传物质的变化：细胞融合属于染色体变异，杂种植林的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,形成异源多倍体。

④植物体细胞杂交的原理:原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植林利用了细胞的全能性。

植物体细胞杂交
可以打破生殖隔离。

2.1.5 植物繁殖的新途径
（1）微型繁殖：不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖
（2）作物脱毒：生产上许多无性繁殖作物均受到病毒的侵染，从而导致品种严重退化，产量降低和品质变差。

利用植物分生组织（如茎尖、根尖）进行培养，可以使新长成的植株脱除病毒。

（3）人工种子:植物组织培养得到的胚状体、
不定芽、顶芽或腋芽，包上人工种皮就可形
成人工种子。

右图是人工种子的结构示意图。

人工种皮中可以加人适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等，以利于胚状体生长发育成幼苗。

2.1.6 作物新品种的培育
（1）单倍体育种：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。

离体培养单倍体幼苗纯合子
花药−
−→
−
−
−
单倍体育种的优点是后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。

（2）突变体的利用：在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响而发生突变。

从这些产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体，进而培育
成新品种。

（3）细胞产物的工厂化生产:可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物，如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。

2.1.7 植物组织培养和植物体细胞杂交
2.2 动物细胞工程
核心考点背记
2.2.1 动物细胞工程
2.2.2 动物细胞培养
（1）概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

（2）动物细胞培养的操作流程
特别说明
①动物细胞培养时，一般选取幼龄动物的组织、器官，其细胞的分化程度较低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。

②在动物细胞培养过程中，一般情况下10代以前的细胞核型不变，10代以后有些细胞核型发生改变，50代以后的细胞可能发生癌变。

③胰蛋白酶在动物细胞培养过程中的作用包括将组织分散成单个细胞，以及将贴壁细胞从瓶壁上分离下来，这样做的目的是避免动物细胞的接触抑制现象。

技巧方法
原代培养与传代培养
区别两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。

①第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，分散后培养，即
为原代培养。

②第二次：细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白剩走其从瓶壁上脱离下来，分散到多个培养瓶中继续培养,即为传代培养。

概念辨析：细胞贴壁（贴壁生长）和接触抑制
①细胞贴壁：培养液中分散的动物细胞，置于适宜的条件下，能够分裂，这些细胞贴附在培养瓶壁上，称为细胞贴壁，或贴壁生长。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象。

（3）动物细胞培养的基本条件
①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,并定期更换培养液。

②营养：需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配置而成的培养基称为合成培养基，在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。

③温度和pH：哺乳动物细胞体外培养的适宜温度多为（36.5±0.5）℃，多数细胞生存的适宜阳为7.2～7.4。

④气体环境:细胞培养所需的气体主要有O2和CO2，通常为95%空气加5%CO2的混合气体。

CO2气体能够调节培养基的pH。

2.2.3 植物组织培养与动物细胞培养的比较
2.2.4 动物细胞培养技术的应用
（1）生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。

（2）利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点,可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。

（3）培养的动物细胞用于检测有毒物质，判断物质的毒性。

2.2.5 动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）原理：动物体细胞核具有全能性
（2）过程:
（3）条件及原因
①体细胞核移植技术要选择MⅡ期的卵母细胞作受体细胞。

因为MⅡ期卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件。

②在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。

③培养的动物细胞一般传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。

因此，在体细胞核移植中，通常采用传代10代以内的细胞。

④核移植时，一般不选择生殖细胞作为供核细胞，因为生殖细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。

特别说明
动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体,原因是动物体细胞的全能性受到限制。

用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞的细胞核具有全能性。

（4）结果
①克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同，但不是完全相同，因为：克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞质。

生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。

②核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗传物质与供体个体的相同，属于无性繁殖，不会改变生物体的基因型。

（5）动物体细胞核移植技术的应用
①畜牧生产方面：培育良种动物。

②保护瀕危物种。

③医药卫生方面：生产医用蛋白、器官和组织移植等。

（6）动物体细胞核移植技术存在的问题
①成功率低。

②克隆技术的各个环节有待进一步改进。

③克隆动物存在健康问题,表现出遗传和生理缺陷。

2.2.6 动物细胞融合
（1）动物细胞融合：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，移为杂交细胞。

（2）诱导方法：化学法（聚乙二醇），灭活的病毒，物理法(离心、振动、电激等)。

（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。

2.2.7 单克隆抗体
（1）血清抗体与单克隆抗体
（2）单克隆抗体的制备
（3）制备单克隆抗体过程中有两次筛选
第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。

第二次筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。

因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。

（4）获取单克隆抗体的场所
①若在培养基中进行杂交瘤细胞培养,则从培养液中提取。

②若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。

（5）单克隆抗体的作用
①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异,并与一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。

②用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其他疾病。

注意
（1）植物体细胞杂交前需要去除细胞壁，制备原生质体，然后再人工诱导原生质体融合，而动物细胞可直接诱导融合。

（2）植物体细胞杂交最终获得杂种植林，而动物细胞融合通常用来获得杂种细胞或细胞产物，还不能获得杂种动物。

2.2.8 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
思维拓展
（1）核移植和植物体细胞杂交产生的后代中都含有两个亲本的遗传物质；植物组织培养和人工种子产生的后代中都只含一个亲本的遗传物质。

（2）植物细胞培养中去掉细胞壁的原因是这层细胞壁阻碍了植物体细胞杂交融合；动物细胞培养中用胰蛋白酶处理动物组织的目的是使组织分散成单个细胞。

第3单元胚胎工程
记忆网络图解
3.1 体内受精和早期胚胎发育
✧核心考点背记
3.1.1 胚胎工程的概念
是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎培养、胚胎分割、胚胎移楨、胚胎干细胞培养等技术,经过处理后获得的胚胎还需移棺到雌性动物体内产生后代，以满
足人类的各种需求。

3.1.2 精子的发生
（1）场所：睾丸。

（2）时期：从初情期开始直到生殖机能衰退。

（3）过程:发生的过程大体可分三个阶段。

（4）精子的变形
细胞核→成为精子头的主要部分
精高尔基体→发育为精子头部的顶体
子中心体→演变为精子的尾
细线粒体→聚集在尾的基部形成线粒体鞘
胞细胞内的其他物质→浓缩为原生质滴，最后脱落（5）精子的形态：外形似蝌蚪，分头、颈和尾三大部分。

3.1.3 卵细胞的形成
（1）形成部位：卵巢
（2）卵细胞的形成
①形成过程（如图所示）
②卵子受精的标志：当在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成了受精。

注意
刚排出的卵子尚未完全成熟，仅完成减数第一次分裂，需要在输卵管内进一步成熟，直到减数第二次分裂的中期才能与精子结合完成受精过程。

排出的印子是在输卵管内与精子受精的。

3.1.4 精子和卵子犮生的比较
3.1.5 受精作用
（1）受精作用的概念：精子和卵子结合形成合子（即受精卵）的过程。

（2）受精作用的场所:输卵管
（3）受精作用的过程
①受精前的准备阶段：
精子获能：精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才获得受精能力的生理现象。

卵子的准备：在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期，才具有与精子受精的能力。

②受精阶段：
第一步：精子穿越放射冠和透明带。

顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞，透明带反应是防止多精人卵受精的第一道屏障。

第二步：精子进人卵黄膜。

卵黄膜封闭作用是防止多精人卵受精的第二道屏障。

第三步：原核形成。

雄原核形成和雌原核形成。

第四步：配子结合。

雌雄原核融合形成合子（受精卵）。

（4）受精作用的意义：维护每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定；对于生物的遗传和变异十分重要。

3.1.6 胚胎发育的过程
（1）卵裂期的特点：细胞进行有丝分裂，细胞数目增加，但胚胎总体积不增加，或略有缩小。

（2）桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。

（3）囊胚时期细胞开始出现分化，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;出现囊胚腔。

（4）原肠腔时期的细胞进一步发育，内细胞团表层细胞形成外胚层，
发育成神经系统、感觉器官、表皮及其附属结构。

下方的细胞形成内胚层,发育成肝、胰等腺体，以及呼吸道、消化道上皮。

滋养层发育为胎儿的胎膜和胎盘。

3.2 体外受精和早期胚胎培养
核心考点背记
3.2.1 试管动物（婴儿）
“试管动物或婴儿”是指通过体外受精和胚胎移植技术而产生的动物或婴儿。

其过程如下：
繁殖方式是有性生殖。

培育“试管动物”的目的是加快优良种畜的繁殖速度；培育“试管婴儿”的目的是解决某些不孕问题。

3.2.2 体外受精
（1）体外受精的原理：人工模拟体内环境（包括营养、温度、pH等），使初级卵母细胞成熟和精子获能，最终完成受精和胚胎培养。

（2）体外受精主要操作步骤：
①卵母细胞的采集和培养；②精子的采集和获能；③受精。

（3）卵母细胞的采集和培养
方法技巧
卵母细胞采集的方法和操作的要领
方法一：对于实验动物如小鼠、兔及家畜猪、羊等卵母细胞采集时，可先用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后在适当的时间从输卵管中冲取卵子，并使其直接与获能的精子在体外受精。

方法二：从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。

后两种方法适用于大家畜和大型动物。

方法三：直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞，叫活体采卵。

需借助超声波探测仪、内窺镜或腹腔镜，直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。

后两种方法适用于大家畜和大型动物。

（4）精子的采集和获能
①精子的采集
②精子的获能
体外受精前可采用培养法和化学诱导法对精子进行获能处理。

精液由精子和精清两部分组成。

精清中含有一种能抑制精子获能的物质，因此在一般情况下，精液中的精子无法获能。

精子获能处理前进行离心处理，目的是除去精清以利于精子获能。

（5）受精
获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

3.2.3 胚胎的早期培养和生产试管牛的技术流程
（1）培养液的成分及用途
①成分
盐类：无机盐和有机盐；
调节物质：维生素和激素；
营养物质：氨基酸和核苷酸;另有水、血清等。

②用途：当精子与卵子在体外受精后，用于受精卵的继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。

特别提醒
①胚胎的早期培养与动物细胞培养所用的培养液类似，但是二者所依据的原理和培养目的不同。

②早期胚胎培养的培养液成分巧记两“盐”：无机盐和有机盐。

两“素”；维生素和激素。

两“酸”：氨基酸和核苷酸。

另有水、血清等。

③胚胎发育到适宜阶段时，既可向受体移植,也可冷冻保存。

早期胚胎一般是指可用于移植的胚胎，即在原肠胚之前的囊胚、桑椹胚甚至更早的阶段胚胎。

（2）“试管牛”工厂化生产的技术流程图
3.3 胚胎工程的应用及前景
核心考点背记
3.3.1 胚胎移植
（1）概念：是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

（2）优势
①充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。

②大大缩短了供体本身的繁殖周期，增加供体一生繁殖后代的数量，从而推动了畜牧业的发展。

（3）生理学基础及相应意义
（4）胚胎移植的基本程序
思维深化
胚胎移植中几个重要环节归纳
①供体选择的条件是具有优良遗传性能和生产性能的个体；受体选择的条件是健康体质，正常繁殖能力的同种个体。

对供体多用促性腺激素处理，使之产生更多的卵细胞。

②冲卵本质是冲出早期胚胎。

③对早期胚胎在体外培养到桑椹胚或囊胚阶段进行移植。

④胚胎移植后一定要对母牛进行是否姓娘的检查。

（5）实质
早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转换。

3.3.2 胚胎分割
（1）概念：指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，所得后代遗传物质完全相同。

（2）仪器设备:实体显微镜和显微操作仪。