水环境温度对戊二醛杀菌效果的影响

水环境温度对戊二醛杀菌效果的影响作者：刘宏宇杨广

来源：《黑龙江水产》2024年第02期

文章编号：1674-2419（2024）02-0133-07

基金项目：天津市淡水养殖产业技术体系创新团队“营养需求与饲料岗位项目（编号ITTFRS2021000-011）”。天津市技术体系创新团队项目“淡水养殖产业营养需求与饲料（编号ITTFRS2021000-011）”。

作者简介：刘宏宇（1999.05- ），女，硕士在读研究生，从事水产养殖与与病害防治的研究。E-mail：****************。

通讯作者：杨广（1965.12- ），男，硕士，教授。E-mail：****************。

摘要：为了解水环境温度对戊二醛（glutaraldehyde，GA）杀菌效果的影响，在20℃、25℃和30℃三个温度条件下，定期检测了2株细菌（副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、维氏气单胞菌Aeromonas veroni）在不同浓度戊二醛水溶液中的致死情况。检测结果显示，戊二

醛对维氏气单胞菌的杀菌率与温度正相关，低药物浓度时（0.45 mg/L），30℃水体中的杀菌率在24 h达到90%以上，而较低温度（20℃）实现90%杀菌率需要27 h；当浓度升至1.8

mg/L时，30℃、5 h杀菌率可以达到90%，20℃时则需要延长至7 h；当更高药物浓度（18 mg/L）时，30℃、20 min可实现90%以上杀菌率，20℃时所需时间相应延长至30 min。戊二醛对副溶血弧菌灭菌效果的影响也呈现相似规律性，当药物浓度0.18 mg/L时，杀菌率分别在15 h（30℃）和18 h（20℃）达到90%以上；当药物浓度1.8 mg/L和18 mg/L时，30℃水体中分别于100 min和3 min达到90%以上的杀菌率；20℃时时间延长至180 min和5 min。该研究结果可为科学合理使用戊二醛提供参考。

关键词：温度；戊二醛（glutaraldehyde，GA）；维氏气单胞菌（Aeromonas veroni）；副溶血弧菌（Vibrio Parahaemolyticus）；杀菌率

中图分类号：S949文献标志码：A

戊二醛（glutaraldehyde，GA）是目前广泛使用的消毒剂之一，有广谱杀菌、杀病毒，甚至杀芽孢的特点，具有高效、低刺激、低腐蚀和安全低毒的优势，戊二醛主要用于医疗卫生领域怕高温、怕腐蚀的医疗器械消毒，畜牧业的消毒处理，以及在制革业作为皮革的鞣制剂使用。戊二醛在水產养殖业上的使用仅在最近几年开始，应用于水体消毒，防治水产动物的细菌性疾病。

戊二醛的消毒机理是通过烷基化反应使菌体蛋白变性，酶和核酸的功能发生改变，从而呈现杀菌作用。基于化学反应的消毒剂，作用效果受环境因素影响，其中温度是重要因素之一，有研究表明戊二醛的消毒效果与温度呈正相关关系，但均是在实验室条件下基于医疗卫生需要所进行的研究，以水产养殖为目的，用于预防水生动物细菌感染所开展的工作鲜有报道。

中国地域辽阔，南北差异及季节变化，导致不同地区养殖水体温度差异较大，因此了解温度对戊二醛消毒效果的影响具有重要实践意义。该研究以两种水产常见病原菌，副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）和维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）为对象，探讨了养殖用水中温度对戊二醛杀菌效果的影响，以期为不同温度条件下科学合理使用戊二醛提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验菌来源

试验所用细菌分别为维氏气单胞菌和副溶血弧菌，均由天津农学院水产动物免疫实验室馈赠，冷藏菌种用LB液体培养基复苏备用。

1.2 实验用水及预处理

实验所用淡水取自天津蓝科水产养殖有限公司水源池；海水取自天津立达海水资源开发有限公司，经三级沉淀后的养殖用水源水（盐度32‰），运至实验室后，均经三次过滤（依次为：多层纱布，中速定性滤纸，0.45 μm滤膜抽滤），121℃、30 min灭菌，保存备用（实验用水）。

1.3 菌悬液的制备

复苏菌种经35℃、120 r/min震荡培养12 h（培养基配方：胰蛋白胨10 g、酵母浸粉5 g、相应盐度实验水1000 mL），培养后的菌悬液经3000 r/min、10 min离心，取沉淀加入少量相应盐度的实验水，混匀后平板（培养基配方：胰蛋白胨10 g、酵母浸粉5 g、琼脂20 g，相应盐度实验水1000 mL）计数，根据计数结果加入对应盐度实验水，分别调配成浓度为（3～5）×105 CFU/mL的不同盐度菌悬液备用。

1.4 戊二醛消毒液的配制

实验用戊二醛质量浓度为20%（戊二醛原液）（市售，利洋水

产科技

有限公司生产，批号：230502）。

实验时，在不同实验用水中分别加入戊二醛原液，配制成浓度为0.2 mg/L、0.5 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、20 mg/L和200 mg/L的戊二醛实验液（戊二醛实验药液），并经0.22 μm针式过滤器滤过除菌，密封保存备用。

1.5 不同水环境温度下戊二醛杀菌实验

实验温度设定为20℃、25℃和30℃，所用戊二醛实验药液和菌悬液在使用前均预置所定温度。

消毒实验在15 mL离心管中进行，取4.5 mL不同浓度戊二醛实验药液，分别加入0.5 mL 菌悬液，每组设2个平行，另取4.5 mL无菌实验用水加入0.5 mL相应盐度菌悬液作为对照。离心管置相应温度水浴锅中。

消毒作用至预定时间后，从离心管中取0.1 mL液体，在相应盐度固体培养基上涂布计数（以菌落数在300左右为宜，菌落数过多时用相应无菌实验水稀释）。

菌种为维氏气单胞菌的药物浓度与取样时间设定：戊二醛浓度为0.45 mg/L（实验药液与菌悬液混合后，药物浓度相应下降）时，取样时间间隔3 h，至36 h结束；浓度为0.9 mg/L 时，间隔3 h采样，至18 h；浓度1.8 mg/L时，取样时间为0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3