《体液蛋白质检验》PPT课件

• 营养监测:
前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白
• 出 / 凝血疾病:
纤维蛋白原、AT3、纤溶酶原
• 贫血:
触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶精性选P转PT铁蛋白受体
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检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
蛋白质的分离
透析、沉淀、盐析、电泳、层析、超速离心
血浆蛋白质的分类
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3、血浆蛋白质的分类
• 根据分离方法： ①盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白
质的亲水性和所带的电荷均有差别。） ②电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、α1－
球蛋白 、 α2 － 球蛋白、 β －球蛋白、纤维 蛋白原、γ－球蛋白。
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根据生理功能分类：
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二、一些临床常检测血浆蛋白质
1、白蛋白（albumin , Alb)
肝实质细胞合成，分子量66 458，
半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 在肝细胞中没有贮存。
•
分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽，
分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含糖的组分。
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7、 1抗胰蛋白酶（1-AT）
• 是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量 为5.5万，P1值4.8，含有10%-12%糖。在醋酸纤维薄膜 或琼脂糖电泳中泳动于α1区带，是这一区带的主要组分。 区带中的另2个主要组分；α1-酸性糖蛋白含糖量特别高， α1-脂蛋白含脂类特别高，因此蛋白质的染色都很浅。
• ⑴功能：①营养 半衰期12小时；
•
②运载 结合T3、T4、结合维生素A。
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参考范围 生理功能
临床意义
PA 0.18~0.45g/ 1、组织修补 降低具有意义：
L
2、运载功能 营养不良、急性炎
症、恶性肿瘤、肝
硬化、肾炎时血清
浓度降低。
Alb 36~46g/L
1、营养
增高：严重失水、
2、胶体渗透 输入过多
肾前性：病毒感染， 免疫疾患（SLE， Sjogren），恶性 肿瘤。
尿中升高： 肾前性 肾小管障碍： Fanconi， 氨基甙类抗生素， 重金属中毒， Wilwon， 烧伤。 肾小球障碍
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5、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)
★第一个被认定为急性时相反应蛋白, ★由肝细胞合成, 可结合多种细菌、真菌及原虫 体对内的多糖。 ★能激活补体，引发调理作用，增强 细胞的吞噬功能，对血小板凝聚和血块收缩 有抑制作用。
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电泳法分类
白蛋白（40－60％）
α1-球蛋白（α1-抗胰蛋白酶、血清 类粘蛋白、α1-酸性糖蛋白、甲胎 蛋白）
α2-球蛋白（α-脂蛋白、触珠蛋白、 铜蓝蛋白、α2-巨球蛋白）
β-球蛋白（转铁蛋白、血红素结合 蛋白、 β微球蛋白、纤维蛋白原、 β脂蛋白、补体）
γ-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位 置及C-反应蛋白）
HBCAb-IgM, HBCAg-IgG, 丙肝抗体，戊肝抗体
肿瘤标志物：细胞角质素抗原211，铁蛋白，甲胎 蛋白， 激素类: 催乳素(PRL)，促黄体生成素(LH)，促卵泡生成素(FSH)，
促甲状腺激素(TSH),胰岛素，
补体类：C3,C4
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一、血浆蛋白质的组成、功能及分类
1、血浆蛋白质的组成：
血凝室：纤维蛋白原，AT-Ⅲ（α2-球蛋白），各种凝血因
子除第Ⅳ因子（Ca2+）均为蛋白质，FDP,D-D是纤维蛋白 降解产物。
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检验学部属于蛋白质的实验项目
免疫室
免疫球蛋白IgM, IgG, IgA, C反应蛋白，前S1蛋白、类风湿因子 肝炎抗原抗体类：HAV-IgM， HBSAg, HBSAb, HBEAg, HBEAb,
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• AAT具有多种遗传分型，利用不同pH的缓冲剂和 电泳支持物，迄今已分离鉴定有33种等位基因 （allotypes），其中最多见的是PiMM型（为M 型蛋白抑制物的纯合子体）占人群的90%以上， 另外还有两种蛋白称为Z型和S型，可表现为以下 遗传分型：PiZZ、PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS， S型蛋白与M蛋白之间的氨基酸残基仅有一个差异。 对蛋白酶的抑制作用主要限于血循环中M型蛋白 的浓度。以MM型的蛋白酶抑制能力为100%相比， ZZ型的相对活力仅为15%、SS为60%、MZ为 57%、MS为80%，其它则无活性。
•
⒉ CRP与其它炎症因子的相关性： CRP与其它炎症
因子如白细胞总数、红细胞沉降率和多形核白细胞等具有密
切相关性。CRP与WBC存在正相关。在炎症反应中起着积
极作用，使人体具有非特异性抵抗力。在患者疾病发作时，
CRP可早于WBC而上升，回复正常也很快。故具有极高的
敏感性。
•
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5、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)
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★
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1）血液中的白蛋白
由于白蛋白在血浆中浓度高而且分子量小，其主 要生理功能是维持血液胶体渗透压（血液中80％ 的渗透压是由白蛋白承担的)/缓冲酸碱。 另外，白蛋白能结合诸如胆红素之类的疏水分子。 在体内担负转运各种离子、酶类、脂溶性物质、 激素和药物的功能。在机体营养作用中也起重要 作用（内源性氨基酸）。
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3）、微量白蛋白尿（MA）
尿ALB
正常成人尿ALB 大约3.90～24.4mg/24h
儿童 尿ALB
0～ 13.3mg/24h
尿Alb／Cr(肌酐)<2.5mg／mmol
尿中蛋白超过以上数值则称蛋白尿。
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2、前白蛋白（prealbumin, PA）
肝细胞合成，分子量54 000，半衰期12小时。 在pH8.6电泳中移速比白蛋白快而得名。
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3、转铁蛋白（transferrin , TRF 或 Tf）
【参考范围】2.5-4.3g/L 【临床意义】①属急性时相反应蛋白 ②并用 于贫血的诊断,缺铁性低色素贫血血浆转铁蛋 白含量增高,但铁的饱和度很低；红细胞对铁 利用障碍引起贫血时，血浆转铁蛋白正常或 降低，但铁的饱和度增加。
压
减少：丢失、肝脏
Hale Waihona Puke 3、维持PH 疾病、消耗性疾病、
4、运输作用
腹水形成、肾病、
严重感染、胶原病★。
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3、转铁蛋白（transferrin , TRF 或 Tf）
单链糖蛋白由肝及单核吞噬细胞系统合成，分子量 76500，位于β－球蛋白区带，负责运载消化管吸收 的及 红细胞降解释放的铁，以转铁－Fe3+复合物的 形式进入骨髓，用于合成血红蛋白。半衰期7天。血 浆中TRF的浓度受铁供应的调节，在缺铁状态时， 血浆TRF浓度上升，经铁有效治疗后恢复到正常水 平
• ⑤白蛋白的遗传变异：已发现20多中种。
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2）脑脊液中的白蛋白
• CSF中白蛋白全部来自血液。 CSF中白蛋白增高与血脑屏障通透性增高有关。 可见于多发性硬化症、病毒性脑炎或脑膜炎、 细菌性脑膜炎等颅内和椎管内炎症性疾病和某 些神经系统疾病。
• 参考范围：CSF白蛋白134～237mg／L
• ⒊ CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断：一旦发生炎 症，CRP水平即升高，而病毒性感染CRP大都正常。脓毒血 症CRP迅速升高，而依赖血培养则至少需要48小时，且其阳 性率不高。又如CRP能快速有效地检测细菌性脑膜炎，其阳 性率达99％。
•
⒋ 恶性肿瘤患者CRP大都升高。如CRP与AFP的联合
白蛋白、转铁蛋白、IgG 、 a1-微球蛋白、 B2-微球蛋白、a2-巨球蛋白、
Kap-轻链、Lam-轻链、Cystatin C
• 炎症:
CRP、a1-酸性糖蛋白、 触珠蛋白、a1-抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、SAA
• 类风湿性疾病:
RF、ASL、CRP、ADNaseB
• 心血管疾病:
ApoA-I、ApoB、ApoA II、ApoE、Lp(a)、肌红蛋白、纤维蛋白原、hsCRP
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6、 1酸性糖蛋白（1-AG）
0.25-2.0g/L,是电泳1- 球蛋白含量最高 部分, 但着色很浅。 •AAG是主要的急性时相反应蛋白， •在急性炎症时增高，显然与免疫防御功能有关明。 •早期工作认为肝是合成α1-糖蛋白的唯一器官， •近年有证据认为某些肿瘤组织亦可以合成。
升高：急、慢性感染，AMI，肾炎，结缔组织病， 自身免疫，过敏，恶性肿瘤。
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了解血浆蛋白质组成、功能及分类。 • 熟悉一些重要血浆蛋白质。 • 掌握疾病时血浆蛋白质变化 • 掌握体液蛋白质测定
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涵盖最广泛的临床检测指标
• 免疫功能:
IgA、IgG、IgM、C3、C4、Kap、Lam、IgG subclasses 1-4、IgE、C1抑制物
• 肾脏功能:
检测，可用于肝癌与肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP测定用
于肿瘤的治疗和预后有积极意义。手术前CRP上升，手术后
则下降，且其反应不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响，
有助于临床估价肿瘤的进程。
•
⒌ CRP用于评估急性胰腺炎的严重程度。当CRP高于
250㎎╱L时，则可提示为广泛坏死性胰腺炎。
• 正常参考值：＜10 ㎎╱L
2、血浆蛋白质的功能：
① 营养作用 ②维持胶体渗透压③维持正常PH ④运输作用⑤免疫与防御功能⑥催化作用⑦抑 制组织蛋白酶⑧代谢调节⑨凝血、抗凝血及纤 溶作用。
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蛋白质性质
• 氨基酸性质：两性电离及等电点、紫外吸 收、呈色反应。
• 生物大分子：胶体性质、变性、沉淀和凝 固等特点。
• 作为蛋白酶的抑制物，它不仅作用于胰蛋白酶，同时也作 用于糜蛋白酶、尿激酶、肾素、胶原酶、弹性蛋白酶、纤 溶酶和凝血酶等。AAT占血清中抑制蛋白酶活力的90%左 右。AAT的抑制作用有明显的pH依赖性，最大活力处于 中性和弱碱性，当pH4.5时活性基本丧失，这一特点具有 重要的生理意义。
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γ-球蛋白（各种免疫球蛋白主要位置及C-反应蛋白）：电泳分布在慢γ
区带，有时可以延伸到β区带
★
•【参考范围】＜8.0mg/L
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5、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)
• 临床意义：
• ⒈ CRP作为急性时相蛋白在各种急性炎症、组织损伤、 心肌梗塞、手术创伤、放射性损伤等疾病发作后数小时迅速 升高，并有成倍增长之势。病变好转时，又迅速降至正常， 其升高幅度与感染的程度呈正相关。
【参考范围】1.0-2.5mg/L(血清) ；尿： 0.2mg/L以下
【临床意义】 血浆β2－微球蛋白含量升高见于炎 症、肿瘤、各种类型白血病及肾功能衰竭，尿 毒症患者血清β2－微球蛋白可达40mg/L。
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2微球蛋白（ 2m）
血清升高： 肾小球滤过功 能低下，慢、 急性肾炎，肾 功能不全
参考范围：血清白蛋白35～55g／L
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• ⑵临床意义
• ①可以作为个体营养状态的评价指标 • ②血浆白蛋白明显减少时，可以影响许多
配体在循环血液中的存在形式；
• ③白蛋白增高较少见，在严重失水时，对 监测血浓缩有诊断意义；
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• ④白蛋白减少在不少疾病时常见：白蛋白的合成减少—— 急性或慢性肝炎；营养不连或吸收不良；遗传性缺陷—— 无白蛋白血症是一种极少见的代谢性缺损，血浆白蛋白含 量常低于1g/L，但可以没有症状（如水肿等），可能部分 由于血浆中球蛋白含量代偿性升高；组织损伤（外科手术 或创伤）或炎症（感染性疾病）引起的白蛋白分解代谢增 加；白蛋白的异常丢失——肾病综合症、慢性肾小球肾炎、 糖尿病、SLE等尿中白蛋白损失，烧伤及渗出性皮炎可以 从皮肤丧失大量蛋白质；白蛋白的分布异常——门静脉高 压引起腹水中有大量蛋白质。是从血管内渗漏入腹腔。
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4、β2－微球蛋白（ β2－microgluobin ,BMG 或β2－m）
由淋巴细胞合成，存在于所有有核细胞的表 面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞。可自由通 过肾小球滤过膜，但在肾小管几乎全部重吸 收，被重吸收的β2－微球蛋白在肾小管细胞 完全降解。
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4、β2－微球蛋白（ β2－microgluobin ,BMG 或β2－m）