血液检验室内质控存在的若干问题及对策(一)
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
血液检验室内质控存在的若干问题及对策(一)
【关键词】血液检验;ELISA室内质控;对策
〔关键词〕血液检验;ELISA室内质控;对策
室内质量控制(IQC)是实验室人员采用一系列方法,连续评价本实验室工作的可靠程度。
确定报告能否发出,是保证实验室工作质量的重要措施。
目前采供血机构检测抗HCV、抗HIV、HBsAg均采用ELISA法,ELISA有其自身的特点,如灵敏度较高,同时影响因素也较多,这就更需加强质量控制。
本文就实验室内过程中出现一些问题及其对策报告如下。
1质控物
室内质控的开展要求有高质量的质控物,质控物的好坏直接影响监测,一般基层单位均选用卫生部临检中心或省检验中心提供的免疫质控血清,其具有良好的质量保证,但是在贮存运输和使用过程中受许多因素的影响。
质控物的购买应避开7月、8月、9月高温季节,以免邮寄过程中造成含量下降。
质控物要求-20℃保存,而质控物含量较低,4℃存放也会使含量下降。
一般HBsAg使用3d,抗HCV使用1周即需更换。
避免反复冻融,因反复冻融能使蛋白质变性抗,原成分及空间构象发生改变。
2试剂
从1994年10月起卫生部对诊断试剂实行统一管理批批检定。
目前使用的国内试剂厂家很多。
能通过批批检定只是起码要求,其灵敏度和特异性都有差异。
加之运输储存多种因素影响,到用户使用时质量已经发生了不同程度的变化,尽管省放免中心对10多家试剂进行了初筛,但目前仍无权威部门发布的试剂评价结果,总之初检试剂应选片段全,灵敏度高的,复检选项特异性好的试剂。
3加样与稀释
3.1减少误差
由于免疫试剂加样为10μl,多加或少加1μl就可造成10%的误差,因此移液器的准确性需经常校验,最好使用进口移液器,同时移液器和移液头间连接应紧密,建议取样时移液头应刚进液面,以免粘带血清。
稀释液勿用滴瓶滴加,以免造成稀释倍数的变化,对灰带区造成误判,使用移液器加样较稳定。
3.2稀释方式
在板中加入100μl稀释液再加10μl标本,待样品全部加完后混匀;预先进行1∶11倍稀释然后加到每孔中;在板中加入100μl降稀释液再加10μl标本,同时3次混匀。
根据报道第1种方式易致非特异性IgC吸附到包被抗原或固相载体上,第2种方式在大量标本检测时亦不适用,以第3种方式为好。
4温育
37℃温育常采用三种方式即恒温培养箱,水浴箱和电热块。
根据报道以恒温箱为主。
由于培养箱中板的周围都是37℃,而水浴箱的温度指标是水的温度,虽然酶标板漂浮在37℃水浴中板底37℃,但空气温度在开盖时会下降(尤其在冬季),温度上升比培养箱慢,达到37℃所需时间长,导致吸光度下降。