法测定复方双氯芬酸钠注射液的含量

HPLC法测定复方双氯芬酸钠注射液的含量
李金阳
(安徽省滁州市药品检验所,滁州　239000)
摘要　目的　建立HPLC同时测定注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的方法。

方法　以ODS为固定相,醋酸钠溶液-甲醇(40∶60)为流动相。

检测波长为220nm,流速为110ml・min-1,外标法。

结果　双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的浓度线性范围分别为1012～30614mg・L-1和311～9312mg・L-1,回收率分别为10011%和9918%。

结论　方法简便、快速、准确,能同时测定复方双氯芬酸钠注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因。

关键词　HPLC;复方双氯芬酸钠;注射液;含量测定
Determination of cmpound diclofenac sodium injection by HPLC
L I Jin2Yang
(Chuz hou Instit ute f or D rug Cont rol,Chuz hou　239000)
ABSTRACT　AIM　Diclofenac sodium and Lidocaine Hydrochloride were determined by HPLC in Compound diclofenac sodium injec2 tion1METH ODS　Shim2pack CLC2ODS(150×416nm,5μm)S odium acetate solution2methanol(40∶60)as Mobile phase,folw rate was110ml・min-1,detection wavelength was220nm.RESU LTS　The Linear range was1012～30614mg・L-1for diclifenac sodi2 um and311～9312mg・L-1for lidocaine Hydrochloride1The average recovery were10011%and9918%1CONC L USION　This methed is rapid,simple,and accurate1
KEY WORDS　HPLC;compound diclofenac sodium injection;assay
复方双氯芬酸钠注射液是一种由双氯芬酸钠和盐酸利多卡因混合而成的灭菌水溶液注射剂,为消炎镇痛药,国内已有厂家研究开发出该复方制剂,其注射液中双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的原料质量标准〔1〕均采用容量法测定含量,不适合本品的含量测定。

本文采用HPLC法可以同时测定这两组分的含量,该方法快速、简便、结果准确。

1　仪器与试药
ShimadzuLC210A T泵,SPD210A检测器,C2R6A色谱处理处,Shim2Pack CLC2ODS150mm×416mm色谱柱;双氯芬酸钠(103342001)对照品由中国药品生物制品检定所提供,盐酸利多卡因对照品(由原料精制),经HPLC归一法分析含量为9919%;复方双氯芬酸钠注射液(2ml:双氯芬酸钠75mg和盐酸利多卡因20mg)由安徽明光制药厂提供;实验中所用化学试剂为分析纯和色谱纯。

2　色谱条件
用十八烷基键合硅胶为填充剂;以醋酸钠溶液(取醋酸钠1164g,加水1000ml,混匀,用稀醋酸调p H值至510)2甲醇(40∶60)为流动相,检测波长为220nm,流速为1ml・min-1,进样量为20μl,室温,理论塔板数按利多卡因峰计算应不低于1500。

样品色谱图见图1。

3　实验方法与结果
311　专属性　精密量取本品空白辅料溶液、本品不加盐酸利多卡因的阴性溶液和本品不加双氯芬酸钠的阴性溶液各110 ml,同含量测定法操作,结果表明,辅料不干扰双氯芬酸钠和
考察项目:性状、水分、p H、含量等。

2.2.1.1　高温试验　将本品在60℃高温下放置10d,于第5 d,10d分别取样,按考察项目进行测定,结果见表1。

2.2.1.2　高湿试验　将样品去盖,置25℃,RH=9215%条件下,放置10d,分别于第5d、10d取样,按考察项目进行测定,结果见表1。

2.2.1.3　强光照射试验　将本品置于4500L X下光照10d,分别于第5d,10d取样,按考察项目进行测定,结果见表1。

2.3　加速试验　将3批注射用盐酸丁咯地尔模拟上市包装,置于40±2℃,RH=75±5%条件下放置6个月,分别于第0、
1、2、3、4、5、6个月取样,按考察项目进行测定,结果见表2。

2.4　长期试验　将3批样品模拟上市包装于(25±2)℃,RH =(60±5)%条件下放置36个月,分别于第0、3、6、9、12、18、24、36个月取样,按考察项目进行测定,结果见表3。

3　结果
从表1、表2、表3的结果看出,盐酸丁咯地尔在影响因素试验、加速试验、长期试验期间,各项质量指标基本不变。

4　讨论
本试验各项检测结果说明注射用盐酸丁咯地尔质量比较稳定。

建议有效期可定为3年。

参考文献
1　卫生部药品标准WS2215(X2170)298
2　中华人民共和国药典委员会,中国药典(二部),2000年版附录XI XC
・
7
5
・
安　徽　医　药　A nhui Medical and Pharmaceutical Journal　2002Dec;6(4)
盐酸利多卡因的含量测定,两组分的含量测定也不互相干扰,二者分离度10189。

并与容量法比较,结果见表1。

图1　样品色谱图
1:盐酸利多卡因;2:双氯芬酸钠
表1　2种含量测定方法的比较(标示量%,n =3)
样品编号
不加盐酸利多卡因
的阴性溶液
本法容量法
不加双氯芬酸钠的阴性溶液
本法容量法
199169919991299152100131001910019101113
9819
9917
10110
10116
312　
线性关系　精密称定双氯芬酸钠和盐酸利多卡因对照品适量,加50%甲醇溶解并定量稀释制成每1ml 约含1102和0131mg 的溶液,作为对照贮备溶液。

精密量取110、510、
1010、1510、2010、3010ml ,分置100ml 量瓶中,加50%甲醇溶
液至刻度,摇匀,精密量取20μl 注入液相色谱仪,记录色谱图,并以各组分主峰峰面积为纵坐标,组分浓度为横坐标,进行线性回归。

结果:双氯芬酸钠在1012～30614mg ・L -1浓度范围内回归方程为A =77233C +1225(r =019999,n =6)盐酸利多卡因在311～9312mg ・L -1浓度范围内回归方程为:A
=26310C -19244(r =019998,n =6)在上述浓度范围内测
定,结果表明,双氯芬酸钠和盐酸利多卡因线性关系良好。

313　
回收率试验　精密称取双氯芬酸钠对照品和盐酸利多卡因对照品6份,其中5份加入与处方相当量的辅料溶液,再将6份按含量测定项下的方法,依法测定,计算回收率,结果见表2。

3.4　
精密度试验　精密吸取回收率试验中制备的对照品溶液20μl 注入色谱仪,记录色谱图及峰面积,连续进样6次,双氯芬酸钠峰面积RSD 为0176%。

盐酸利多卡因峰面积RSD 为0164%。

315　
稳定性试验　上述对照品溶液放置8h 后,精密吸取20μl 注入色谱仪,记录色谱图,峰面积变化不大,按峰面积计算
其RSD 分别为0196%和1112%,溶液稳定。

表2　回收率试验(n =5)
序号
双氯芬酸钠
取样量/mg
回收率/%
RSD
/%
盐酸利多卡因
取样量/mg 回收率/%
RSD
/%
对照品37185
9194
12918710011719699132331561001491939911337115991481959918441126100171011199185
40124
99180158
10018平均值
10113
0153
9918
0169
316　
重复性试验　按含量测定项下的方法制备6份供试品溶液,分别精密吸取20μl 注入色谱仪,记录色谱图及峰面积,按峰面积计算其RSD 分别为0146%和0155%。

317　
样品含量测定　精密量取本品110ml ,置25ml 量瓶中,加50%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀;精密量取110ml ,置
25ml 量瓶中,加入50%甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取20
μl 注入液相色谱仪,记录色谱图;分别取盐酸利多卡因和经
105℃干燥至恒重的双氯芬酸钠对照品适量,精密称定,用50%甲醇溶液制成每1ml 中的含双氯芬酸钠60μg 和盐酸利
多卡因16μg 的溶液,同法测定,按外标法以峰面积计算,结果见表3。

表3　样品含量测定结果(标示量%,n =3)批号
双氯芬酸钠
盐酸利多卡因
010********(0131)10013(0151)010********(0124)10015(0136)010824
10116(0128)
10113(0149)
括号内为RSD (%)值
4　小结
411　
检测波长的选择　用对照品溶液,检测波长在210～260nm 之间变化,测量二者的峰面积结果表明:随着检测波
长的增大,被测物面积呈减小趋势,且二者的比值变化更大。

为了提高检测灵敏度,缩小二者峰面积的差异,选择220nm 作为检测波长。

412　
本文用HPLC 法同时测定双氯芬酸钠和盐酸利多卡因的含量,操作简便、省时、专属性强、结果满意。

参考文献
1　中国药典2000年版.二部,75,610
・85・安　徽　医　药　A nhui Medical and Pharmaceutical Journal 2002Dec ;6(4)。