水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织差异miRNAs的表达模式鉴定及分析

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蔡小艳等!水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织差异 E2YZ0C的表达模式鉴定及分析
蔡 小 艳!%王 鹏 程!邓 ! 凯!王 ! 萍!冯 万 有!张 晓 溪! 任艳萍!刘庆友!" 石德顺!"
%!#广西大学$亚热带生物资源保护利用国家重点实验室$南宁 )(&&&')%#广西壮族自治区畜牧研究所$南宁 )(&&&!&
摘!要为了探求水牛泌乳和非泌乳期关键调控差异表达 E2YZ0C及其表达模式$试验结合 L@D=O3高 通 量 测 序 和 生物信息学分析结 果 筛 选 出 !, 个 水 牛 乳 腺 组 织 在 泌 乳 期 和 非 泌 乳 期 差 异 表 达 的 E2YZ0C$设 计'筛 选 可 行 的 E2YZ0C反转录及实时荧光定量 PWY 引物$进行实 时 荧 光 定 量 PWY 验 证 差 异 表 达 E2YZ0C的 表 达 模 式* 结 果 发 现$E2YZ0 的差异表达模式 与 测 序 结 果 基 本 一 致* 泌 乳 期 E2YZ0*!&('E2YZ0*!%)3'E2YZ0*(&3*)N 和 E2YZ0* !',3的表达量均显 著 高 于 非 泌 乳 期 %<$&#&)&)E2YZ0*%"3 在 非 泌 乳 期 表 达 量 显 著 高 于 泌 乳 期 %<$&#&)&) E2YZ0*!'!'E2YZ0*!%)G和 E2YZ0*'"+在泌乳期表 达 量 均 高 于 非 泌 乳 期$但 差 异 不 显 著 %<#&#&)&)低 丰 度 的 E2YZ0*'"&和 E2YZ0*)"%在泌乳期表达量均显著高于非泌乳期%<$&#&)&*Z@1=D*!%(G在 泌 乳 期 和 非 泌 乳 期 差 异 不 显 著 %<#&#&)&$Z@1=D*)+ 在 泌 乳 期 比 非 泌 乳 期 高 %"#+" 倍 %<$&#&!&* 本 试 验 结 果 为 后 续 水 牛 乳 腺 研 究 提 供 了!-个 E2YZ0 的可 用 特 异 性 反 转 录 引 物 和 实 时 荧 光 定 量 PWY 引 物$E2YZ0*!&('E2YZ0*!%)3'E2YZ0*(&3*)N' E2YZ0*!',3'E2YZ0*%"3和 Z@1=D*)+-个水牛差异表达 E2YZ0C值得进一步研究* 关键词水牛)泌乳期)非泌乳期)乳腺组织)E2YZ0)鉴定)实时荧光定量 PWY 中 图 分 类 号 L,!'#,! ! ! ! 文 献 标 识 码 0! ! ! ! 文 章 编 号 !-+!*+%(-%%&!+&!!*(%%&*&"
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水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织差异 9.B6(-的表达模式鉴定及分析
!!水牛 作 为 发 展 中 国 家 重 要 的 乳'肉'役 兼 用 畜 种$被国际粮农 组织%Q0b&认为是最具 开发潜 力和 价值的家畜 * "!# 水牛奶因其脂肪'乳糖'蛋白质 和 灰 分的含量比普通牛 奶 高 而 备 受 人 们 的 青 睐$并 享 有 +奶中之王,的美称 * "%*(# 水牛奶中的钙'磷'铁'维 生 素含量均高于荷斯 坦 奶 牛$其 他 微 量 元 素 也 比 较 均 衡*水牛奶的脂肪 球 和 酪 蛋 白 胶 粒 都 较 大$加 工 成 干酪优势明 显 * "'# 但 因 其 产 奶 量 和 繁 殖 率 低$严 重 制约了其奶业的发展")#*E2>B@YZ0%E2YZ0&是 在 动植物中发现的一类通过转录后抑制基因表达的内 源 性 非 编 码 YZ0"-*"#* 越 来 越 多 的 证 据 表 明$ E2YZ0具有调控基因表达及细胞 分化'增殖 和 凋 亡 等多种功能 $可 "!&*!!# 能 对 基 因 功 能 研 究 和 疾 病 防 制 具有重要意义*近些年在各种动物乳汁中也发现了 E2YZ0$且 E2YZ0 有可能 通 过 哺 乳 从 母 体 传 递 给 新生儿以助于新生 个 体 的 正 常 发 育$扩 展 了 人 们 对 于 E2YZ0 调 控 功 能 范 围 的 理 解 * "!%*!(# 众 所 周 知$ 乳腺在发育和泌乳 期 受 到 激 素'生 长 因 子 和 一 些 蛋 白质的严格而 又 复 杂 的 调 控*E2YZ0 以 其 独 特 的 调控模式和表达特性迅速成为生物学领域的研究热 点 * "!'# 但近几年其主要集 中 于 乳 腺 癌 的 研 究 $ "!)*!-# 关于乳 腺 发 育 和 泌 乳 相 关 的 研 究 较 少 * "!'$!+# 随 着 测序技术的发展$高 通 量 测 序 技 术 相 继 诞 生 并 逐 渐 成熟* 该 技 术 通 量 高'成 本 低'灵 敏 度 高$可 以 获 得 低丰度的表达基因且不局限于已知的基因组序列信 息$适用于未知基 因 组 序 列 的 物 种$不 需 要 克 隆$操 作简单$应 用 领 域 广 * "!,*!"# 目 前$高 通 量 测 序 技 术 已成功运用于人'奶牛'奶山羊等生 物 E2YZ0 的 研 究中"%&#$结 果 发 现$牛 有 %+( 条 NB=*E2YZ0C$编 码 %",条 成 熟 体 E2YZ0C$%', 条 已 知 E2YZ0C在 泌 乳期和非泌乳期中 均 被 检 测 到$而 只 在 泌 乳 期 表 达 的已知 E2YZ0C为 !+ 条$在 只 在 非 泌 乳 期 表 达 的 为!, 条"%!#)利 用 L@D=O3测 序 技 术 检 测 出 山 羊 泌 乳 中期乳腺上 皮 细 胞 中 E2YZ0 的 读 数 约 占 小 YZ0
收 稿 日 期 %&!+*&'*%基金项目国家,-(重点项目课题%%&!(00!&%)&'&!广西科技厅项目%桂科合!'!%)&&,*%*!('桂科 0.!+!%"&'('桂科 00!-(,&&%-& 作 者 简 介 蔡 小 艳%!",%*&$女 $山 西 兴 县 人 $博 士 $研 究 方 向 !牧 草 及 草 食 动 物 遗 传 育 种 研 究 与 种 养 技 术 推 广 应 用 $/*E32D!>32O23@F34%,%"!-(#>@E " 通 信 作 者 刘 庆 友 $男 $广 西 南 宁 人 $博 士 $研 究 员 $研 究 方 向 !动 物 生 殖 生 理 $/*E32D!MFD2:%&&%"!%-#>@E