川藏公路拉萨-林芝沿线藏猪沙门氏菌的流行病学与敏感药物筛选

川藏公路拉萨-林芝沿线藏猪沙门氏菌的流行病学与敏感药物
筛选
晋美多吉;马金英;拉巴次仁
【摘要】为了解拉萨-林芝公路沿线藏猪沙门氏菌的流行情况,通过常规的直肠棉拭子分离培养对沿线12个乡镇的1200份藏猪直肠棉拭子进行了检测.结果发现拉萨-林芝公路沿线12个乡镇存在沙门氏菌感染的情况,经细菌分离培养和生化鉴定,从62份直肠棉拭子分离出沙门氏菌,藏猪沙门氏菌病呈零星分布.采用药敏纸片扩散法对62株藏猪沙门氏菌进行了敏感药物筛选发现,拉萨-林芝公路沿线12个乡镇的藏猪沙门氏菌对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感,对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,对青霉素耐药.
【期刊名称】《养猪》
【年(卷),期】2017(000)005
【总页数】2页(P113-114)
【关键词】藏猪沙门氏菌;分离鉴定;敏感药物;拉萨-林芝公路沿线
【作者】晋美多吉;马金英;拉巴次仁
【作者单位】西藏自治区拉萨市达孜县农牧局,西藏拉萨 850100;西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所,拉萨 850009;西藏自治区畜牧总站,拉萨 850000
【正文语种】中文
【中图分类】S858.28
沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属成员，是一类条件性细胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌，血清型众多，能致多种动物患沙门氏菌病，该菌是自然界分布极为广泛的病原菌，几乎可以从所有脊椎动物乃至昆虫体内分离得到[1-2]。

鉴于川藏公路沿线的
旅游人士较多和拉萨-林芝公路沿线是藏猪养殖较为密集区，了解拉萨-林芝公路沿线藏猪沙门氏菌的感染情况与敏感药物筛选，在兽医及人医领域均有重要的公共卫生意义[1]。

笔者于2016年8月对拉萨-林芝公路沿线12个乡镇采集藏猪直肠棉
拭子共计1 200份，分离出了猪沙门氏菌，在此基础上进一步做了菌株分离及敏
感药物筛选，结果如下。

1.1.1 试验菌株拉萨-林芝公路沿线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡、金达镇、巴河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇为采样点，采集被检藏猪直肠棉拭子1 200头份，保存于1 mL营养肉汤的灭菌医用配离心管，车载冰箱4℃保存。

标明样品采集时间、地点、编号。

采样原则：每个采样点分别采集1岁以上藏猪直肠棉拭子40头份、断奶仔藏猪
60头份。

1.1.2 标准菌株沙门氏菌[CMCC（B）50094] 标准菌株购于杭州百思生物技术有
限公司。

1.1.3 细菌培养基及配制菌志贺氏增菌肉汤购于广东环凯微生物科技有限公司。

称取营养肉汤31.5 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15 min，待冷至常温，备用。

麦康凯琼脂培养基购于广东环凯微生物科技有限公司。

称取麦康凯琼脂粉末55 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压
灭菌15 min。

待培养基冷至50～55℃倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。

SS琼脂培养基平板、水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）培养基平板和三糖铁琼脂培养
管均购于杭州百思生物技术有限公司。

LB营养琼脂培养基平板购于上海凡仪科技发展有限公司。

1.1.4 沙门氏菌API-20E生化鉴定试纸条生化反应鉴定试纸条API-20E购于法国
梅里埃生物技术有限公司，用于肠杆菌属细菌的快速生化鉴定。

1.2.1 沙门氏菌的分离和初步鉴定细菌分离采用国标规定的标准方法（GB 4789.4—1994）[3]。

藏猪直肠棉拭子接种于选择性菌志贺氏增菌肉汤培养基中37℃于摇床上振摇过夜。

取一接种环细菌富集样本接种于麦康凯琼脂37℃培养
12 h。

将无色透明或中间有黑色圆点的单菌落接种琼脂，取典型菌落接种于三糖
铁（TSI）试管，37℃培养12 h，并进一步做生化鉴定、血清型鉴定及抗生素敏感性分析。

1.2.2 沙门氏菌的生化鉴定取疑似沙门氏菌典型菌落接种生化鉴定管37℃培养18～24 h。

根据参考文献[3]食品卫生微生物学检验有关沙门氏菌检验的标准进行
结果判断。

1.2.3 沙门氏菌API-20E试纸条的生化鉴定将少量疑似沙门氏菌典型菌接种于
API-20E试验条，培养20 h左右，加入相应显色试剂后观察其颜色的变化，根据说明表判读反应，参照分析图索引和APLAB PLus软件得到鉴定结果。

青霉素、庆大霉素、诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素9种药，按照常规药敏纸片扩散法于MH琼脂培养基平板上操作，并根据抑菌圈直径（Ф）判定药物敏感性，Ф≥20 mm为高度敏感，15 mm≤Ф＜20 mm为中度敏感，Ф＜15 mm为耐药。

从拉萨-林芝公路沿线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、
加兴乡、金达镇、巴河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇采集的藏猪直肠棉拭子1 200头份的样品中，共分离鉴定出62株沙门氏菌菌株。

对分离出的62株沙门氏菌菌株敏感药物筛选试验结果发现，从拉萨-林芝公路沿
线蔡公堂乡、章多乡、甲玛乡、工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡、金达镇、巴
河镇、百巴镇、更章门巴民族乡、八一镇不同乡镇分离获得的藏猪沙门氏菌致病菌株对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感，对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感，对青霉素耐药。

沙门氏菌生化反应繁杂，血清型众多，用常规的检验程序复杂，且不容易给出正确的结果。

鉴于科研条件有限，本研究未做血清型鉴定，只是在筛选鉴定出沙门氏菌的基础上针对青霉素、庆大霉素、诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素9种药做了敏感药物筛选试验。

从拉萨-林芝公路沿线12个乡镇藏猪养殖较为密集区分离出的62株沙门氏菌对卡那霉素、环丙沙星、氟苯尼考、先锋霉素和庆大霉素5种药高度敏感，对诺氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感，对青霉素耐药。

说明拉萨-林芝公路沿线藏农牧民经常盲目给发病猪使用青霉素，致使沙门氏菌产生耐药。

对发病藏猪，在确诊的基础上，有必要与相关教学科研单位协作，通过药敏试验，有目的、有针对性地用药，且用药应有足够疗程和剂量，尽量减少耐药菌株产生。

不可盲目滥用、乱用抗生素[4]导致菌群失调引起藏猪腹泻，尤其是藏猪仔猪[5]。

藏猪沙门氏菌病是由沙门氏菌属细菌感染藏猪引起的一种传染病，发病藏猪和带菌藏猪是主要传染源，可从粪、尿、乳汁以及流产的胎儿、胎衣和羊水排菌。

沙门氏菌很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间通过直接或间接的途径传播，没有中间宿主。

主要经消化道感染。

一年四季均可发生，但阴雨潮湿季节多发[1]。

感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。

人畜感染沙门氏菌后可呈无症状带菌，降低动物的繁殖力，或者可能加重病态或死亡率，也可表现为有临床症状的致死性疾病，造成巨大的经济损失。

同时严重威胁人们的身体健康和畜牧业的健康发展。

因而做好沙门氏菌病的防控工作在医学、兽医和公共卫生上都有十分重要的意义。

国家统计局发布统计报告说，党的十八大以来，我国城乡居民收入持续较快增长，收入差距不断缩小。

2016年，全国居民人均可支配收入基尼系数为0.465，比2012年的0.474下降0.009。

数据显示，十八大以来我国居民收入增速快于经济增速。

2016年全国居民人均可支配收入23821元，比2012年增长44.3%，扣除价格因素，实际增长33.30%，年均实际增长7.4%，快于同期GDP年均增速0.2个百分点，更快于同期人均GDP年均增速0.8个百分点。

同时，城乡收入差距持续缩小。

2016年，城镇居民人均可支配收入33 616元，
比2012年增长39.3%，实际增长28.6%，年均实际增长6.5%；农村居民人均可支配收入12 363元，比2012年增长47.4%，实际增长36.3%，年均实际增长8.0%；城乡居民人均可支配收入之比为2.72（农村居民收入=1），比2012年下降0.16。

【相关文献】
[1] 陈溥言.兽医传染病学[M] .第6版.北京：中国农业出版社，2016：117-125.
[2] 李决.兽医微生物及免疫学[M] .第2版.成都：四川科学技术出版社，2003：184-190.
[3] GB 4789.4—1994，食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验[S] .
[4] 陈洪生.动物疫病防控中存在的问题及应对措施[J] .畜牧与饲料科学，2015，36（1）：111-112.
[5] 王艳敏，古金元，谢全喜，等.仔猪菌群失调引起腹泻的微生态防治方法[J] .畜牧与饲料科学，2015，36（2）：114-119.。