康宁ipsc细胞基质胶培养步骤
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康宁ipsc细胞基质胶培养步骤
1.准备工作:将康宁iPSC细胞基质胶放在室温下,等待其回温至室温。
同时,将培养皿、吸头、移液器等耗材用70%乙醇消毒。
2.将康宁iPSC细胞基质胶倒入培养皿中,放入37℃恒温培养箱中,等待基质胶完全附着于培养皿底部。
3.将细胞培养液倒入基质胶涂覆的培养皿中,使其均匀分布,并放入37℃恒温培养箱中。
4.等待细胞生长至80%~90%的密度,用吸头将细胞培养液吸出,加入适量的细胞酶,置于恒温培养箱内,等待酶解反应完成。
5.加入等体积的细胞培养液,将细胞酶反应停止,用移液器将细胞液吸出,加入新的细胞培养液中,放回恒温培养箱中。
6.每隔一天更换一次细胞培养液,直至细胞生长至所需密度。
如果需要细胞冻存,则在此阶段进行。
7.进行所需的实验操作。
8.如需将细胞培养皿移至其他实验室进行操作,需先将细胞培养液吸出,加入保护剂,将培养皿放入干燥、无菌的运输盒中,运输至目标实验室。
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