无菌操作与愈伤组织诱导

每完成一次操作后，及时将镊子、解剖刀插入酒精瓶中，下 次使用前需将酒精烤干后再使用

MS + BA 2mg/L + NAA 2mg/L

诱导培养条件

温度：25℃+/-1 光照：每天16小时和全黑暗比较
操作前的准备

实验课开始前30min. 将实验用具、无菌烟草苗等 无菌操作所需要的用品用酒精用75%酒精擦洗后置 于超净工作台上。

将不锈钢镊子、剪刀、解剖刀置于75%酒精 中

快速封好瓶口，用记号笔写上姓名和接种日期。 接种后的三角瓶置于24℃条件下黑暗培养一周，然后在同样温度下有 光照和全黑暗下培养直至愈伤组织基是否凝固
外植体切割时，动作要快，以免失水而影响生长
无菌操作期间不要讲话，更不能正对工作台打喷嚏和咳嗽 消毒过的手和实验用具在未完成无菌操作之前，不得置于无 菌区外
打开超净工作台风机和紫外灯。
穿好工作服，在自来水管下将手洗干净。
操作方法

在自来水管下将手洗净，然后用75%酒精将手消毒，再进入超净工作
台开始接种操作。

关闭紫外灯，点燃酒精灯，将镊子、解剖刀在酒精灯下烤干。 取一无菌培养皿，然后用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿 中，并用锋利解剖刀将叶片切成 5mm2 左右的小片，然后将其接种于 准备好的培养基上，一般每瓶接种4-5小片。
二、无菌操作与植物愈伤组织诱导

实验目的

掌握无菌操作技术；基本掌握植物愈伤组织诱导 培养技术和调控条件。

实验材料及设备

外植体材料：烟草无菌苗叶片；实验 1 配制的培 养基。
设备及工具：超净工作台；不锈钢镊子、剪刀、 解剖刀、酒精灯等；75%酒精,灭菌培养皿。

愈 伤 组 织 诱 导

培养基配方：