对萼猕猴桃叶中黄酮类成分的含量分析_吴迎春

仅有鉴定、临床应用方面的少量研究报道 [ 3- 8] , 而对 萼猕猴
师, 研 究 方 向: 中 西 医 结 合 肿 瘤 临 床 工 作。 E-m ai:l 桃叶则未有研究报道。近年来, 在连续对猫人参的化学、药
l ingchangquan@ hotm ai.l com。
理进行系统研究的基础上 [ 9- 11] , 笔 者研究表 明对萼猕 猴桃
guard C18 ( 10mm @ 4. 6mm ) , grad ient e lution w as em ployed w ith the m ob ile phase aceton itrile- 0. 5% acetic ac id so lu-
tion a t flow rate of 1. 00mL /m in; Co lum n tem perature: 26 e ; D e tection w ave length: 360 nm. R esu lts: T he standard curves o f to ta l flavono id, ry - 1, ry- 2 and ry - 3 w ere A = 8. 26 @ 10- 2 C+ 1. 90 @ 10- 3 ( r = 0. 9995) , A = 6. 84 @
exper im enta l ev idence for its qua lita tive con tro l and evalua tion. M ethods: Rutos ide- UV m ethod w as used for the deter-
m ination of to tal flavono id and HPLC m ethod was deve loped fo r the determ ination of kaempfero l- 3- O - B - D - g alacto-
芦丁对照品 (中 国药 品生物 制品 检验 所 ); ry - 1、ry 2、ry- 3均为自 制, 纯度 \ 98% ( 面积 归一 化法 ); 甲醇、乙 腈 (色谱纯, D IKM A 公 司 ); 水 ( 高 纯水, 自制 ); N aNO2、A l ( NO3 ) 3、N aOH、正己烷、氯 仿、乙醇等 试剂 均为 AR 级 (国 药集团上海试剂有限公司 )。 1. 3 药材
py ranos ide( ry- 1), actinoside E ( ry- 2) and actinoside F ( ry - 3) in leaves ofA ctinidia valva ta. T he H PLC m ethod
was deve loped w ith the conditions as fo llow ing: Shim - pack CLC - OD S column( 4. 6mm @ 25mm, 5Lm ), D IKM A Easy-
mg /mL, 0. 792~ 23. 760 L g /mL, 2. 570 ~ 77. 100Lg /mL and 2. 168~ 65. 040L g /mL, respec tive ly. Conclusion: The
me thod is feasible for quantitative analysis of to tal flavonoid, ry - 1, ry- 2 and ry - 3 in leaves o fA ctinid ia valva ta, and
对萼猕猴桃叶中总黄酮以及 ry - 1、ry- 2、ry- 3的定量分析方法, 也为对萼猕猴桃叶 的质量控 制和品质评 价提供 了重要的依据。
关键词: 对 萼猕猴桃叶; 黄酮; 含量测定; HPLC
中图分类号: R284. 1
文献标识码: A 文章编号: 1673- 7717( 2010) 05- 0954- 04
华
中
收稿日期: 2009- 12 - 30
对萼 猕猴桃 A ctinidia va lva ta D unn系猕 猴桃科猕 猴桃
医 药
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 ( 30572360 ); 上海市科委 中 药现代化专项基金资助项目 ( 04DZ19808 )
作者简介: 吴迎春 ( 1982 - ) , 男, 江苏 盐城 人, 助 教, 硕 士, 研 究 方
Quantitative Analysis of F lavonoids in Leaves ofA ctin idia valva ta
W U Y ing-chun1, 2, X IN H a-i liang2, SHENG Jia-yu2, ZHANG Y a-n i2, L ING Chang-Q uan2 ( 1. D epartm ent of T rad itional C h ineseM ed icine Chem istry, Sh anghai U n ivers ity of T rad itional C h inese M edicine, Shanghai 201203, Ch ina;
10- 5 C + 6. 53 @ 10- 2 ( r = 0. 9999), A = 8. 58 @ 10- 5C + 0. 124( r = 0. 9999) and A = 7. 89 @ 10- 5 C + 9. 54 @ 10- 2 ( r
= 0. 9999) , respective ly. T he standard curves of tota l ry - 1, ry- 2 and ry - 3 were linear in the range o f 0. 01~ 0. 09
( 1. 上海中医药大学中药化学 教研室, 上海 201203; 2. 第二军医大学长海医院, 上海 200433)
摘 要: 目 的: 分析对萼猕猴桃叶中总黄酮以及黄酮类 成分山柰酚 - 3- O - B - D - 吡喃半 乳糖苷 ( ry - 1) 、
对萼猕猴桃苷 E( ry- 2)、对萼猕猴桃苷 F ( ry- 3)的含量, 为对萼猕猴桃叶 品质评价和质量控制提供依据。方法: 采用芦丁比色法对对萼猕猴桃叶中总黄酮进行含 量分析; 建 立 HPLC法 对对萼 猕猴桃 叶中黄酮 类成分 ry - 1、ry
a lso prov ided m ean ing fu l ev idence for its qua lita tive contro l and ev aluation.
K ey w ords: leaves ofA ctinid ia valvata ; flavono id; quantitative-analysis; HPLC 中
2. Changhai H osp ital of S econd M ilitaryM ed ical U n iversity, Shangha i 200433, C hina)
A bstrac:t O bjective: T o determ ine con tent o f to tal flavono id and in leaves ofA ctinid ia va lva ta , wh ich m ay prov ide
样品于 2005年 10月 - 2007年 10月收集于浙江、江西 等地, 并经第二军医 药学院生药学教研室郑汉臣教授鉴定。 2 方法和结果 2. 1 总黄酮含量测定 2. 1. 1 对照品 液的制 备 精 密称取 芦丁对 照品 25. 0m g, 置于 25 mL容量 瓶中, 80% 乙醇溶解定容, 作为储备液 。精 密吸取芦丁 储备液 5. 0 mL, 置 50 mL 容量瓶 中, 80% 乙醇 定容, 即得浓度为 0. 1 mg /mL 的对照品液。 2. 1. 2 供试品液的制备 将各 对萼猕 猴桃叶 样品 60e 烘 干, 粉碎后过 2号筛, 精密称取药 材粉末 100 mg, 置 5 mL具 塞容量瓶中, 加入 80% 乙 醇 4 mL, 超声提取 60 m in, 放置至 室温, 以 80% 乙醇补加至 刻度, 作为供试品溶液。 2. 1. 3 标准曲线 精确吸 取上述 对照品液 1. 0、2. 0、3. 0、 4. 0、5. 0mL, 分别置 10 mL 容量瓶中, 加水至 5 mL, 各加 5% N aNO 2溶液 0. 4mL, 摇匀放置 6 m in, 加 10% 硝酸铝溶液 0. 4 mL, 摇匀, 放 置 6 m in。再 加入 4. 3% N aOH 溶 液 4 mL, 摇 匀, 并加水至刻度, 放置 15 m in, 置 比色 皿中, 在 510 nm 波 长处测定吸光度, 以 峰面 积积分 值 ( A ) 对对 照品 浓度 ( C) 进行线 性 回 归。 回 归 方 程 为 A = 8. 26 @ 10- 2 + 1. 90 @ 10- 3, r = 0. 9995, 线性范围: 0. 01~ 0. 09 m g /mL。 2. 1. 4 精密度试验 精密吸取 3号样品稀 释液 2. 00 mL, 共 6份, 分别置于 10 m 1容 量瓶中, 按 2. 1. 3法 测定, 结果 平均吸光度为 0. 518, R SD = 1. 183% , 表明 方 法精 密 度良 好。 2. 1. 5 加样回收率试验 精密称取 3号 样品 100 m g, 共 6 份, 分别加入 1 mg /mL的 芦丁对照品液 1 mL, 再加入 3 mL 的 80% 乙醇溶液, 按 2. 1. 2方法制备供试品液, 按 2. 1. 3法 测定, 结果见表 1。结果表明方法加样回收率良好。 2. 1. 6 稳定性试验 精密吸取 3号供试品液 2. 00 mL, 置 10 mL 容量瓶中, 按 2. 1. 3项下方 法, 利 用仪器提供 的时间
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第 28 卷 第 5期 2 0 1 0年 5月
பைடு நூலகம்
中华中医 药学刊
CH INESE ARCH IVES O F TRAD IT IO NA L CH INESE M ED IC INE
V o.l 28 N o. 5 M ay 2 0 1 0
叶含有较多的 黄酮 类、皂苷 类成 分, 具有 较强 的 抗氧 化活 性。本文采用芦丁 - 比色法对对萼猕猴桃叶中的总黄酮含 量进行定量分析, 建立 H PLC法对单 体黄酮成分山柰 酚 - 3 - O - B - D - 吡 喃半 乳糖苷 ( ry - 1)、对萼 猕猴 桃苷 E ( ry - 2) 、对萼猕猴桃苷 F ( ry - 3) 进行 定量分 析, 为对 萼猕猴 桃叶的品质评价和质量控制提供依据。 1材 料 1. 1 仪器
属植物, 主要分布于 浙江、江西、湖南等 地。对萼 猕猴 桃全 株均可药用, 其根为猫 人参, 系华东 地区常 用药材, 临 床用
向: 中药化学。
于治疗胃癌、肝癌、乳 腺癌等 [ 1- 2] 。目 前, 对于猫 人参 研究
学 刊
通讯作者: 凌昌全 ( 1957 - ) , 男, 安徽怀宁 人, 教授, 博士研 究生 导
TU - 1901型 双光束 紫外分 光光 度计 (北京 普析 通用 仪器有限责任公司 ); 岛津 LC - 20AD 高效液 相色谱仪 (四 元低压梯度洗脱 系统, DAD 检测 器 ); AUW 220D 型分 析天 平 (岛津公司 ) ; DL - 720型超 声波 自动 清洗 器 ( 上海 之信 仪器有限公司 )。 1. 2 试剂
- 2、ry- 3进行含量分析。色谱柱: Sh im - pack CLC- ODS色谱柱 ( 4. 6 mm @ 25 mm, 5Lm ); 保 护柱: D IKM A EasyGuard C18 ( 10 mm @ 4. 6 mm ), 流动相: 乙腈 - 0. 5% 醋酸 水溶液 梯度 洗脱; 柱温: 26 e ; 检测波 长: 360 nm; 流 速: 1. 00mL /m in。结果: 总黄酮的回归方程为 A = 8. 26 @ 10- 2 + 1. 90 @ 10- 3, r = 0. 9995, 线性范围: 0. 01~ 0. 09 mg / mL; ry- 1回归方程为 A = 6. 84 @ 10- 5 C + 6. 53 @ 10- 2, r = 0. 9999, 线性范围: 0. 792~ 23. 760L g / mL; ry - 2 回归方
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中华中医 药学刊
CH INESE ARCH IVES O F TRAD IT IO NA L CH INESE M ED IC INE
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对萼猕猴桃叶中黄酮类成分的含量分析
吴迎春 1, 2, 辛海量 2, 盛佳钰2, 张亚妮 2, 凌昌全 2
程为 A = 8. 58 @ 10- 5 C+ 0. 124, r = 0. 9999, 线性范 围: 2. 570~ 77. 100L g /mL; ry - 3回归方 程为 A = 7. 89 @ 10- 5 C + 9. 54 @ 10- 2, r = 0. 9999, 线性范围: 2. 168~ 65. 040L g /mL。结论: 该方法前处理简便, 分析 准确、快 速, 可 以作为