PCR室实验耗材质检的标准操作程序

PCR室实验耗材质检的标准操作程序
1．目的：保证耗材的使用质量不会影响检测工作的正常进行。

2. 适用范围：核酸扩增荧光检测实验室常用耗材：1.5ml离
心管、0.5ml离心管、带滤芯的吸头。

3、操作步骤
3.1 检测1.5ml离心管
3.1.1目测:检查离心管有无畸形、破损、不能闭盖的情况。

3.1.2实验检测(每批随机抽样离心管50个用于实验检测)。

a.将抽取的50个目测合格的离心管插在浮板上,置于沸水浴锅中20分钟后取出，如发现有爆开情况发生，即认为该批离心管不符合本实验室实验要求，作退货处理。

b.再将这50个离心管加半量生理盐水后，1万转/分离心20分钟，如发现有管盖爆开或漏液情况发生，即认为该批离心管不符合本实验室实验要求，作退货处理。

c.经上述检测未发现不合格情况后，即启用该批耗材。

3.2 检测0.5ml离心管方法、步骤同上。

3.3 检测带滤芯的吸头
3．3．1检查吸头有无畸形、破损的情况，如无以上情况则做以下质检。

3．3．2滤心漏气检验：配制1%-2%甲基橙的水溶液，如果吸头的最大体积为100ul，则将加样器吸取体积调至
110~120ul（如果吸头的最大体积为200ul，则将加样器吸取体积调至210~220ul；如果吸头的最大体积为10ul，则将加样器吸取体积调至11~12ul），再套紧吸头，吸取甲基橙溶液，如滤心中有甲基橙溶液透过，表示滤心漏气，不能用于PCR 检测，作退货处理。

如果滤心中无甲基橙透过，则再检测10个吸头，假若都未发现滤心漏气现象即可启用该批吸头。

3．3．3吸头是否含抑制物、是否能有效防止气溶胶污染的检验：先纯化制备3份强阳性和10份阴性核酸标本，然后使用待评价带滤心吸头对强阳性样本来回吸取10次（模拟10份阳性样本的吸取），将最后一次的吸取液加至一含扩增反应液的管中，之后，换一个新吸头，连续吸取10份阴性样本分别至10个扩增反应管中，此过程重复3~5次，最后对每一管按所用试剂方法进行扩增检测。

强阳性样本如为强阳性，则可启用该批吸头；如出现阳性弱或出现阴性则说明吸头可能含有扩增抑制物，不能用于PCR检测，作退货处理。

所有阴性样本如为阴性，则可启用该批吸头；如出现阳性则表明吸头不能有效地防止气溶胶对加样器的污染，不能用于PCR检测，作退货处理。

备注：实验耗材在目测合格后基本上都可以初步通过验收。

如果在目测不合格或目测合格后出现甚至频繁出现爆管、堵塞、漏液、漏气等情况下，再由实验人员进行实验检测。

本文涉及以下表格，见SOP文件末的附图表：
消耗性材料验收记录表---附表12。