ATP荧光法细菌总数快速检测系统

30 食品安全导刊 2011年12月刊ANALYSIS & TEST 分析与检测
全面提高我国食品卫生水平是解决食品安全问题的重要方面，不仅需要法制建设、执法管理、科技保障和全民科学、道德教育等诸多方面的努力，还要赖于建立一套能对食品原料、生产设备、流通营销环节的包装材料、窗口等进行有效卫生监督和预警的技术手段。

ATP荧光法细菌总数快检仪是一种利用新型微生物ATP生物发光法测定食品中细菌污染程度的快速检测设备。

其依据萤火虫发光原理研制，经国家有关部门鉴定，是具有自主知识产权的第一款国产细菌快检设备。

相对于传统的实验室培养法（48～72小时），该仪器在1～5分钟内即可完成测试，而且精确度高、操作简单、携带方便，与电脑连接，可即时检测样品，数分钟便可得到结果。

组成部件
体细胞裂解试剂组（TRA）：能专一而有效地裂解样品中的非细菌细胞（体细胞）并释出ATP ，然后通过过滤比色杯底部的滤膜将其排除。

ATP荧光法细菌总数快速检测系统
□ 沈阳中科靓马生物工程有限公司 供稿
细菌细胞裂解试剂组（XRA）：能专一而有效地裂解样品中细菌细胞并释出ATP 。

荧光反应试剂组（LLR）：能与样品中的细菌ATP相互作用并有效地发出荧光。

功能特点
ATP荧光法细菌总数快检仪可分度裂解及过滤除去非细菌的干扰，检测时间1～99秒自由设定，量程范围0～1010cfu/m L,实际检测的灵敏度（ATP）为5×10-18moL。

由于采用了光电倍增管光子计数技术并且有效地遮掩了体ATP 的干扰，该系统具
有很高的灵敏度，此外由于试剂组和微量荧光检测能检测低限相当于大约500个细菌ATP荧光值（RLU），加上拥有样品浓缩装置，系统灵敏性得到了进一步提高，可以检测水和液体制品，构成该系统的组成部件可安放在一个小型手提工具箱内（图1），总重量不超过2.5克，携带
方便，
系统操作简单。

图1 ATP荧光法细菌总数快检仪（BLW0401型）
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Dec 2011 CHINA FOOD SAFETY 31分析与检测 ANALYSIS & TEST
检测步骤
检测操作应在无菌室内进行，为避免操作过程中的交叉污染，操作人员应戴手套，待检样品要按无菌操作程序采集和处理，用PBS溶液制备成肉眼可见的凝絮、颗粒，过分黏稠样品须适当稀释。

某些检测试剂组用前10分钟应从冰箱内取出置室温平衡。

荧光检测仪、试剂组、检测样品应井然有序，合理安放。

（1）取出双层塑料质比色杯架，底层上垫放5张专用吸水纸，并将带滤膜比色杯放入架眼内，用移液器吸取检样50m L注入杯底。

检测前打开荧光检测仪电源，此时液晶显示屏显“0”值。

（2）用移液器从带蓝盖的TRA试剂瓶吸取体细胞裂解试剂组溶液，向杯底滴加4滴，透明塑料加压器置杯顶加压，使杯中非细菌ATP 、游离ATP通过底部滤膜排出，由吸水纸吸净。

重复加压步骤一次，取下比色杯置于可拉动抽屉内。

（3）用移液器从带粉色盖的XRA试剂瓶中吸取细菌细胞裂解试剂组液体两滴，垂直滴入杯底。

（4）用移液器从LLR试剂瓶吸取荧
光反应试剂组50mL加入杯底（图2），缓和的吸挤3次，混匀反应液（从滴加LLR 开始通过默数计时，直至抽屉推入检测室为止，务求时间一致对达到平行样品数据一致十分关键）。

（5）记录屏幕显示的相对荧光值（RLU）。

应用领域及优点
ATP荧光法细菌总数快检仪可供食品加工生产的全程监测，快速检测各种样品中的微生物细菌总数。

表1列出“快检系统”和“常规平皿计数”方法的差别
和利弊。

快检系统的优点和应用效益：可依据检测得到的实时资料，立即采取对应措施，减少浪费；可在综合分析检测数据的基
础上预测未
来可能发生的事故；减少清洁消毒的盲目性，提高决策的科学性；大幅度减轻常规细菌总数平皿检测的工作量，提高检测效率；有利于实施HACCP认证体系和管理标准化；为卫生监督员的现场处理提供可靠依据；可广泛应用于食品、饮料生产企业及宾馆饭店的日常卫生规范。

结论
国产便携式ATP细菌快速检测系统可以完成液体、固体、表面洁净度等全面的细菌快速检测，并能按国标法
将光值自由换算成细菌总数，适用于卫
监、工商、食药、环境、工商等相关食品安全执法部门做为执法手段，也可以用于各行业的企业做为微生物检测的手段，控制微生物指标。

本系统也可自动储存数据，且连接电脑操作简便，更增加了智能化的效果。

该仪器可满足常规检测的要求，达到国外同类产品的性能，并具有价格优势，将为提高我国食品安全水平，建立食品保持期科学预报和溯源制度、公共卫生生物突发事件预警体系，以及食品安全监管发面发挥重要作用。

表1 两种微生物细菌总数检测方法的比较
图2 从LLR试剂瓶吸取荧光反应试剂组
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