分子生物学实验复习题
复习题分子生物学
习题第一章1．什么是分子生物学？2．列举分子生物学开展历程中的10个重大事件。
3．简述分子生物学的研究内容与研究热点。
4．根据你所学的知识谈谈分子生物学在生命科学以及社会经济活动中的地位与作用。
5．简述分子生物学开展史中的三大理论发现和三大技术创造。
6. 21世纪是生命科学的世纪。
20世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。
试阐述分子生物学研究领域的三大根本原那么，三大支撑学科和研究的三大主要领域？第二章一．名词解释：基因、端粒酶、假基因、Alu序列家族、断裂基因、重叠基因、变性、复性、C值矛盾中心法那么、增色效应二、选择题〔单项选择或多项选择〕1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是〔〕。
A．从被感染的生物体内重新别离得到DNA作为疾病的致病剂B．DNA突变导致毒性丧失C．生物体吸收的外源DNA〔而并非蛋白质〕改变了其遗传潜能D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2．1953年Watson和Crick提出〔〕。
A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B．DNA的复制是半保存的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D．遗传物质通常是DNA而非RNAE．别离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。
以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？〔〕A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高那么双链分开所需要的能量越少C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定E．就是单链发生断裂〔磷酸二酯键断裂〕时的温度4．DNA的变性〔〕。
(完整版)分子生物学复习题及其答案
一、名词解释1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。
22、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能3、基因：遗传信息的基本单位。
编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。
4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。
5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。
6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。
7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。
10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。
因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。
11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。
12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。
13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。
14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。
15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。
16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。
单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。
分子生物学复习题(含答案)
分子生物学复习题（含答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、有关 SNP 位点的描述,不正确的是A、生物芯片技术可提高 SNP 位点的检测准确性B、单个 SNP 位点信息量大,具广泛的应用前景C、在整个基因组中大概有 300 万个 SNP 位点D、被称为第三代 DNA 遗传标志E、SNP 位点是单个核苷酸的变异正确答案：A2、硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、高结合力B、非共价键结合C、本底低D、脆性大E、共价键结合正确答案：C3、关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案：E4、目前白血病的发病机制的研究主要集中的领域不包括A、融合基因与白血病B、白血病复发的后天因素C、白血病发病的先天因素D、遗传学疾病及白血病发病的后天因素E、基因多态性与白血病正确答案：B5、下列属于抑癌基因的是( )A、c-erb-2B、mycC、sisD、p53E、ras正确答案：D6、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用 mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT),有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便,成为探针的重要来源正确答案：E7、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、探针B、杂交C、变性D、复杂性E、复性正确答案：B8、SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案：D9、DNA 指纹分子的遗传性基础是A、连锁不平衡B、MHC 的多样性C、DNA 的多态性D、反向重复序列E、MHC 的限制性正确答案：C10、以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时,若能与突变探针及正常探针接合,则该样本为A、正常人B、不能确定C、纯合体患者D、杂合体患者E、携带者正确答案：E11、目前细菌表型分型的方法不包括A、血清学分型B、分子分型C、噬菌体分型D、生化分型E、抗生素敏感性分型正确答案：B12、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的 DNA 片段D、克隆于真核载体的 DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案：E13、定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得:A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案：A14、基因诊断对下列哪些疾病最具有确切的临床诊断意义A、肿瘤B、染色体疾病C、畸形D、单基因遗传病E、多基因遗传病正确答案：D15、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案：E16、操纵子结构不存在于:A、原核生物基因组中B、细菌基因组中C、大肠杆菌基因组中D、真核生物基因组中E、病毒基因组中正确答案：D17、分离纯化核酸的原则是( )A、保证一定浓度B、保持一级结构完整并保证纯度C、保持二级结构完整并保证纯度D、保持空间结构完整E、保证纯度与浓度正确答案：B18、关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案：E19、未知突变的检测,下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案：D20、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案：B21、有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域,通常不被转录D、形式为(CA)n/(TG)n、(AG)n、(CAG)n 等E、又称为可变数目串联重复序列(VNTR)正确答案：D22、关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能C、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因D、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案：A23、决定 PCR 反应特异性的是A、模板B、dNTPC、引物D、缓冲液E、Taq DNA 聚合酶正确答案：C24、关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是:A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案：E25、可作为分子遗传标记的是A、HLAB、单拷贝序列C、高表达蛋白D、RFLPE、染色体正确答案：D26、为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用,最好( )A、将核酸溶解保存B、将核酸小量分装保存C、将核酸冻干保存D、将核酸沉淀保存E、将核酸大量保存正确答案：B27、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测,避免浪费C、检测快速准确D、同时检测 TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案：E28、Sanger 双脱氧链终止法使用的链终止物是A、α-32P-dNTPB、dNTPC、ddNTPD、α-35S-dNTPE、NTP正确答案：C29、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、肺炎衣原体B、豚鼠衣原体C、沙眼衣原体D、鹦鹉热衣原体E、鼠衣原体正确答案：C30、实时荧光 PCR 中,GC 含量在 20%~80%(45%~55%最佳),单链引物的最适长度为A、35~50bpB、15~20bpC、5~70bpD、5~20bpE、70~90bp正确答案：B31、Southern 杂交通常是指( )A、DNA 与 RNA 杂交B、DNA 与 DNA 杂交C、RNA 与 RNA 杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA 与蛋白质杂交正确答案：B32、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称A、杂交B、变性C、复杂性D、复性E、探针正确答案：D33、第二代测序技术不能应用于A、从头测序、重测序B、转录组及表达谱分析C、小分子 RNA 研究D、个体基因组测序和 SNP 研究E、直接测甲基化的 DNA 序列正确答案：E34、目前已知感染人类最小的 DNA 病毒( )A、HIVB、HPVC、HBVD、HAVE、HCV正确答案：C35、下列方法中不属于 RNA 诊断的是A、Northern blotB、RNA 斑点杂交C、基因芯片D、mRNA 差异显示 PCR 技术E、逆转录 PCR正确答案：C36、RNA/RNA 杂交体的 Tm 值一般应增加A、1-5℃B、5~10℃C、10~15℃D、15~20℃E、20~25℃正确答案：E37、下列属于核苷酸三联体重复序列发生高度重复所致的是A、珠蛋白生成障碍性贫血B、脆性 X 综合症C、迪谢内肌营养不良D、血友病E、镰状细胞贫血正确答案：B38、逆转录 PCR 扩增最终产物的特异性由A、随机引物决定B、oligo-d(T)决定C、PCR 扩增的特异引物决定D、扩增效率决定E、逆转录酶决定正确答案：C39、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D40、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、症状前诊断D、携带者诊断E、耐药基因检测正确答案：A41、乳腺癌分子生物学检测的意义不包括A、预测早期乳腺癌复发、转移的风险B、筛选易感人群C、帮助减轻化疗的不良反应D、反映肿瘤的生物学行为E、筛选适合内分泌、化疗及靶向治疗的患者正确答案：C42、线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话”,相互影响,相互协调正确答案：A43、STR 法医鉴定的基础是A、孟德尔遗传定律B、蛋白质空间结构C、基因扩增技术D、碱基配对原则E、基因多态性正确答案：A44、以下哪种酶可用于 PCR 反应( )A、KlenowB、HindⅢC、Taq DNA 聚合酶D、RNaseE、Dnase正确答案：C45、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是A、NC 膜B、尼龙膜C、化学活性膜D、滤纸E、PVC 膜正确答案：E46、Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：A47、在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、表达异常B、基因结构变化未知C、点突变D、基因片段缺失E、基因片段插入正确答案：B48、关于 mtDNA 非编码序列,描述正确的是A、不参与 mtDNA 的复制、转录等,属于“无用”信息B、是高度重复序列C、占整个 mtDNA 的 15%,比例较大D、mtDNA 中有两段非编码区E、位于 mtDNA 的轻链正确答案：D49、变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案：E50、以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基正确答案：D51、关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用引物步移法C、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用随机克隆法D、大片段未知序列 DNA 测序,可以直接测序E、大规模基因组计划,可以使用多个测序策略正确答案：E52、组织 DNA 提取中,EDTA 的作用是A、抑制 DNaseB、沉淀 DNAC、减少液体表面张力D、抑制 RNaseE、去除蛋白质正确答案：A53、寡核苷酸探针的 Tm 简单计算公式为A、Tm=4(G+C)+2(A+T)B、Tm=2(G+C)+4(A+T)C、Tm=6(G+C)+4(A+T)D、Tm=2(G+C)+6(A+T)E、Tm=6(G+C)+2(A+T)正确答案：A54、对于 BRCA 基因突变的检测,以下最常用的方法是A、变性高效液相色谱法B、单链构象多态性分析C、变性梯度凝胶电泳D、异源双链分析E、直接 DNA 序列分析正确答案：E55、下列关于人类遗传病的叙述不正确的是A、人类遗传病是指由于遗传物质改变而引起的疾病B、遗传性疾病既可以直接诊断,也可以间接诊断C、人类遗传病包括单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病D、21-三体综合症患者体细胞中染色体数目为 47 条E、单基因病是指受一个基因控制的疾病正确答案：E56、第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR 基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2 基因正确答案：A57、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案：C58、关于 PCR-RFLP 错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR 产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR 扩增正确答案：D59、下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性:A、随机扩增 DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案：B60、点/狭缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、用于基因定位分析D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案：A61、DNA 提取中不能有效去除蛋白质的是A、酚/氯仿抽提B、SDSC、高盐洗涤D、蛋白酶 KE、RNase正确答案：E62、宫颈癌与 HPV 病毒感染密切相关,宫颈癌细胞产生的机制是A、HPV DNA 大量复制B、原癌基因被激活C、病毒增殖导致细胞破裂D、HPV 导致细胞凋亡E、病毒蛋白在细胞内堆积正确答案：B63、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8,可使比值升高的是:A、蛋白质B、酚C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：C64、关于 TaqMan 探针技术的描述,不正确的是A、R 基团与 Q 基团相距较远,淬灭不彻底,本底较高B、易受到 Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析,减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案：C65、基因芯片技术的本质是( ):A、核酸分子杂交B、蛋白质分子杂交技术C、连接酶链反应D、DNA 重组技术E、酶切技术正确答案：A66、编码 HIV 衣壳蛋白的是A、env 基因B、gag 基因C、vif 基因D、tat 基因E、pol 基因正确答案：B67、HIV 核酸类型是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：D68、检测靶序列是 DNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A69、HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAD、ssDNAE、-ssRNA正确答案：A70、关于 Sanger 双脱氧链终止法叙述错误的是A、每个 DNA 模板需进行一个独立的测序反应B、需引入双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)作为链终止物C、链终止物缺少3’-OH,使链终止D、测序反应结果是产生 4 组不同长度的核苷酸链E、高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离仅差一个核苷酸的单链 DNA 正确答案：A71、PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案：E72、以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案：E73、结核杆菌的分子生物学检验临床意义中不包括A、早期诊断B、耐药检测C、鉴别诊断D、疗效评价E、快速诊断正确答案：A74、目前被 DNA 自动化测序技术广泛采用的酶是A、大肠杆菌 DNA 聚合酶ⅠB、Klenow 片段C、测序酶D、耐热 DNA 聚合酶E、限制性内切核酸酶正确答案：D75、结构基因突变不包括A、基因表达异常B、基因点突变C、基因扩增D、基因缺失E、基因重排正确答案：A76、点突变引起的血友病 A 的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案：E77、大肠杆菌类核结构的组成是A、双链 DNAB、RNAC、蛋白质+DNAD、支架蛋白E、RNA+支架蛋白+双链 DNA正确答案：E78、作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理,其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案：A79、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、已明确母亲为携带者的婴儿B、没有 FraX 家族史C、发育迟缓或自闭症的患者D、未诊断的 MR 家族史E、有 FraX 体格或性格阳性征象者正确答案：B80、关于人工合成的寡核苷酸探针,下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案：E81、下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D82、下列几种 DNA 分子的碱基组成比例,哪一种的 Tm 值最高( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案：A83、关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用 DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d(T)理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E84、一个完整的生物芯片配套软件不包括A、统计分析软件B、生物芯片的图像处理软件C、画图软件D、生物芯片扫描仪的硬件控制软件E、数据提取软件正确答案：C85、线粒体疾病的遗传特征是A、女患者的子女约 1/2 发病B、母系遗传C、发病率有明显的性别差异D、交叉遗传E、近亲婚配的子女发病率增高正确答案：B86、在人类基因组中,编码序列占的比例为A、23%B、1.5%C、3%D、21%E、5%正确答案：B87、乙型肝炎病毒的核酸类型是( )A、双股 DNAB、负股 DNAC、正股 DNAD、单股 DNAE、DNA-RNA 二聚体正确答案：A88、对于相同大小的核酸片段,最快的转移方法是A、电转移B、真空转移C、毛细管电泳D、向下虹吸转移E、虹吸转移正确答案：B89、延伸的温度通常为A、95℃B、55℃C、37℃D、72℃E、25℃正确答案：D90、在 pH 为下述何种范围时,Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案：A91、标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、复性B、复杂性C、杂交D、变性E、探针正确答案：E92、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用( ):A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案：E93、与耳聋有关的最主要的 mtDNA 突变是A、点突变B、插入或缺失C、大片段重组D、拷贝数变异E、异质性突变正确答案：A94、荧光原位杂交的描述正确的是A、快速确定是否存在目的基因B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：C95、第三代测序技术的最主要特征:A、对单分子 DNA 进行非 PCR 的测序B、对 SNP 进行非 PCR 的测序C、高通量和并行 PCR 测序D、直接分析 SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP 研究正确答案：A96、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B97、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案：C98、生物芯片根据芯片上固定的探针种类不同可分为几种,不包括:A、DNA 芯片B、蛋白质芯片C、细胞芯片D、组织芯片E、测序芯片正确答案：E99、DNA 芯片的固相载体不可以用A、半导体硅片B、玻璃片C、滤纸D、硝酸纤维素膜E、尼龙膜正确答案：C100、DNA 自动化测序技术一般用不到的技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、电泳技术正确答案：B。
分子生物学复习题
1、分子生物学的定义从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。
2、简述分子生物学的主要研究内容。
a. DNA重组技术（基因工程）（1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽;（2）可用于定向改造某些生物的基因组结构;（3）可被用来进行基础研究b. 基因的表达调控在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。
c. 生物大分子的结构和功能研究（结构分子生物学）一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提：（1）拥有特定的空间结构（三维结构）；（2）发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。
结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。
它包括3 个主要研究方向：（1）结构的测定（2）结构运动变化规律的探索（3）结构与功能相互关系d. 基因组、功能基因组与生物信息学研究3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？（1）分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。
生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。
（2）分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3) 分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。
⑷分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。
1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的？简述其基本内容。
DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。
分子生物学复习题(基本完整版)
分子生物学复习题第一章1、蛋白质的三维结构称为构象()，指的是蛋白质分子中所有原子在三维空间中的排布，并不涉及共价键的断裂和生成所发生的变化。
2、维持和稳定蛋白质高级结构的因素有共价键(二硫键)和次级键，次级键有4种类型，即离子键、氢键、疏水性相互作用和范德瓦力。
3、蛋白质的二级结构是指肽链中局部肽段的构象，它们是完整肽链构象(三级结构)的结构单元，是蛋白质复杂的立体结构的基础，因此二级结构也可以称为构象单元。
α螺旋、β折叠是常见的二级结构。
4、一些肽段有形成α螺旋和β折叠两种构象的可能性(或形成势)，这类肽段被称为两可肽。
5、两个或几个二级结构单元被连接肽段连接起来，进一步组合成有特殊几何排列的局域立体结构，称为超二级结构（介于二、三级结构间）。
超二级结构的基本组织形式有αα，βαβ和ββ等3类6、蛋白质家族() ：一类蛋白质的一级结构有30％以上同源性，或一级结构同源性很低，但它们的结构和功能相似，它们也属于同一家族。
例如球蛋白的氨基酸序列相差很大，但属于同一家族。
超家族()：有些蛋白质家族之间，一级结构序列的同源性较低，但在许多情况下，它们的结构和功能存在一定的相似性。
这表明它们可能存在共同的进化起源。
这些蛋白质家族属于同一超家族。
7、结构域是一个连贯的三维结构，是可互换并且半独立的功能单位，在真核细胞中由一个外显子编码，由至少40个以上多至200个残基构成最小、最紧密也最稳定的结构，作为结构和功能单位，会重复出现在同一蛋白质或不同蛋白质中。
8、蛋白质一级结构所提供的信息有哪些？α螺旋、β折叠各自的特点？第二章1、是由脱氧核糖核苷酸组成的长链多聚物，是遗传物质。
具有下列基本特性：①具有稳定的结构，能进行复制，特定的结构能传递给子代；②携带生命的遗传信息，以决定生命的产生、生长和发育；③能产生遗传的变异，使进化永不枯竭。
2、链的方向总是理解为从5’—P端到3’—端。
的一级结构实际上就是分子内碱基的排列顺序。
分子生物学检验技术复习题与答案
分子生物学检验技术复习题与答案一、单选题（共80题，每题1分，共80分）1、世界上首次用已经分化成熟的体细胞核通过克隆技术培育的动物是A、克隆猪B、克隆绵羊C、克隆鼠D、克隆猴E、克隆奶牛正确答案：B2、检测靶序列是DNA的技术是A、Norther杂交B、Southern杂交C、Western杂交D、Eastem杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：B3、有关核酶的恰当解释是A、它是RNA分子，但具有酶的功能B、它是蛋白质C、是专门水解核酸的蛋白质D、它是由RNA和蛋白质构成的E、它是由DNA和蛋白质构成的正确答案：A4、下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板：A、单链DNAB、RNAC、cDNAD、肽链E、双链DNA正确答案：D5、双链DNA的Tm值主要与下面哪项有关A、C-T含量B、A-T含量C、T-G含量D、A-G含量E、C-G含量正确答案：E6、寡核苷酸芯片主要采用A、原位合成法制备B、杂交技术C、探针固化技术D、显微光蚀刻技术E、DNA微阵列的制作方法正确答案：A7、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、组织细胞提取C、cDNA文库法D、基因组文库法E、化学合成法正确答案：A8、凝胶色谱分离蛋白质的依据是A、等电点B、亲和作用C、固定相对蛋白质的吸附作用不同D、分子大小E、疏水作用正确答案：D9、α互补筛选法属于：A、免疫化学筛选B、酶联免疫筛选C、原位杂交筛选D、标志补救筛选E、抗药性标志筛选正确答案：D10、关于DNA双螺旋结构模型的叙述中，除了哪一项外其余都是正确的A、螺旋直径为2nmB、两股链间有严格的碱基配对关系C、两股核苷酸链呈反向平行D、为右手螺旋，每个螺距含10对碱基E、极性磷酸二酯键位于双螺旋内侧正确答案：E11、DNA变性的本质是下列哪种键的断裂？A、氢键B、二硫键C、离子键D、盐键E、共价键正确答案：A12、从细菌体内分离出的质粒DNA，在体外的状态是A、线性B、开环C、多聚体D、单链E、超螺旋正确答案：E13、下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中，不属于完全回文结构的是A、AAGATCTTB、AGAATTCTC、GGAATTCCD、CGTTAAGCE、TGAATTCA正确答案：D14、在基因工程中所使用的质粒DNA通常存在于：A、酵母染色体外B、哺乳类细胞染色体外C、细菌染色体上D、细菌染色体外E、酵母染色体上正确答案：D15、目前常用的基因表达体系细胞包括A、以上都是B、昆虫细胞C、大肠埃希菌D、哺乳动物细胞E、酵母细胞正确答案：A16、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB是一种可视物质B、EB特异性结合核酸分子C、EB插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光D、EB在紫外光下放射荧光E、EB是核酸转性染料正确答案：C17、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB特异性结合核酸分子B、EB在紫外光下放射荧光C、EB是核酸传性染料D、插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光E、EB是一种可视物质正确答案：D18、DNA提取中不能有效去除蛋白质的是A、RNaseB、酚-氯仿抽提C、蛋白酶KD、SDSE、高盐洗涤正确答案：A19、下列几种DNA分子的碱基组成比例,其中Tm值最高的是A、G+C-40%B、G+C=60%C、G+C=25%D、A+T=80%E、A+T=15%正确答案：E20、DNA超螺旋结构中哪项恰当A、核小体由DNA和非组蛋白共同构成B、以上都不恰当C、核小体由DNA和H1，H2，H3，H4各二分子构成D、组蛋白的成分是H1，H2A，H2B，H3和H4E、核小体由RNA和H1，H2，H3，H4各=分子构成正确答案：D21、最早发现的抑癌基因是A、VHLB、p53C、DCD、RbE、APC正确答案：D22、Southem杂交通常是指A、RNA与RNA杂交B、DNA与RNA杂交C、DNA与蛋白质杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA与DNA杂交正确答案：E23、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、cDNA文库法C、组织细胞提取D、基因文库法E、化学合成法正确答案：A24、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为A、0.5-2mmol/LB、0.3-1mmol/LC、0.5-1mmol/LD、2-2.5 mmol/LE、0.3-2mmol/L正确答案：A25、DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不恰当A、体内以B构型最常见B、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数C、DNA双螺旋中碱基对位于外侧D、同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似E、二股多核苷酸链通过A与T或C与C之间的氢键连接正确答案：C26、一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。
分子生物学复习题及答案-知识点
分子生物学一、单选题1、当一个真核基因处于活跃（转录）时（A）A.其启动子一般不带核小体B.整个基因一般不带核小体C.基因重的外显子一般不带核小体D.基因中的内含子一般不带核小体2、（C）是能够我复制的小型环状DNAA.内含子B.外显子C.质粒D.转座子3、下列关于转座子的描述不正确的是（A）A.所有的转座子均有IS序列B.所有的IS元件中均包含有编码转座酶的基因序列C.IS元件末端为短的反向重复序列D.转座可能会引起基因组DNA重排4、乳糖操纵子模型中，真正起诱导作用的是（C）A.胞外的乳糖B.胞内的乳糖C.别构乳糖D.半乳糖5、以下（D）不是原核生物基因表达的转录后调控机制。
A.稀有密码子和偏爱密码子的使用B.重叠基因对翻译偶联现象的调控C.魔斑核苷酸水平对翻译的调控D.增强子的影响6、关于蛋白质翻译—运转同步机制描述错误的是（D）A.蛋白质定位的信息存在于该蛋白自身结构中B.绝大部分被运入内质网内腔的蛋白质都带有一个信号太C.仅有信号肽不足以保证蛋白质运转的发生D.蛋白质达到靶位置的时候，信号肽必须切除7、地球生命物质最早出现的可能是（A）A. RNA分子B. DNA分子C.蛋白质分子D.质粒8、关于酵母双杂交技术，（D）描述是正确的。
A.用于研究DNA与DNA的相互作用B.用于研究DNA与蛋白质的相互作用C.用于研究DNA与RNA的相互作用D.用于研究蛋白质与蛋白质的相互作用9、原核细胞信使RNA含有几个其功能所必需的特征片段，它们是（D）A.启动子，SD序列，ORF，茎环结构B.启动子，SD序列，ORF，polyA，茎环结构C.转录起始位点，SD序列，ORF，polyA，茎环结构D. .转录起始位点，SD序列，ORF，茎环结构10、真核生物染色体组蛋白的所不具有的特征有（C）A. 进化上的极端保守性B.组蛋白H5富含赖氨酸C.有组织特异性D.肽链上氨基酸分布的不对称性11、如果有一段DNA产生了+1的移码突变，则能矫正的是（B）A.突变型氨酰tRNA合成酶B.有突变型反密码子的tRNAC.有切割一个核苷酸的酶D.有四个碱基长的反密码子的tRNA12、内固醇激素的受体蛋白分子不具有的区域是（C）A. 激素结合区B. 转录激活区C.操纵区D.DNA结合区13、在什么情况下乳糖操纵子的转录活性最高（A）A. 高乳糖、低葡萄糖B. 低乳糖、低葡萄糖C.低乳糖、高葡萄糖D.高乳糖、高葡萄糖14、第三代DNA遗传标记，可能也是最好的遗传标记方法是（D）分析法A.限制性片段长度多态性（RFLP）B. 小卫星DNAC.微卫星DNAD.但核苷酸多态性（SNP）15、以下（C）对于热激活蛋白诱导的基因表达的说法是错误的。
临床分子生物学检验复习题
临床分子生物学检验复习题（一）一、单选题1、分子生物学检验技术发展的第二个阶段是A.DNA测序技术B.生物芯片技术C.聚合酶链反应D.分子杂交技术2、下列不属于RNA水解产物的是A.胞嘧啶B.腺嘌呤C.胸腺嘧啶D.尿嘧啶3、不属于细胞增殖的物质准备和积累阶段的是A.G1期B.S期C.G2期D.M期4、下列哪种说法是错误的A.用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L NaOH初步处理B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃D.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清5、聚合酶链反应PCR的延伸温度是A.50℃B.60℃C.72℃D.95℃6、下列关于Taq DNA聚合酶的描述，错误的是A.使DNA链沿5´→3´方向延伸B.不具有3´→5´外切酶活性C.具有校正功能，能够修复错配的碱基D.催化形成3´, 5´-磷酸二酯键7、在PCR反应中，可以引起非靶序列扩增的是A.延伸时间过长B.引物加量过多C.缓冲液中镁离子含量过高D.温度过高8、关于SYBR Green I的描述，不正确的是A.荧光染料的成本低B.不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记C.操作比较简单D.特异性强9、DNA测序中，核酸分子储存和传递遗传信息是通过A.核苷的结构B.磷酸二酯键C.碱基顺序D.核苷酸的结构10、DNA探针的长度通常为A.1000-2000bpB.100-400bpC.<100bpD.400-500bp11、将待测DNA转移到硝酸纤维素膜上，再与探针进行杂交的技术是A.杂交淋巴瘤技术B.Western印迹杂交C.Southern印迹杂交D.Northern印迹杂交12、质粒的分子结构是A.线状双链DNA分子B.线状单链DNA分子C.环状双链DNA分子D.环状单链DNA分子13、以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称为A.转化B.转染C.感染D.转位14、蛋白质分离和提取的步骤可分为A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定15、用于蛋白质检测的标本长期保存于A.-20℃B.4℃C.-70℃D.室温16、用于检测HPV的分子生物学检测方法中，哪个具有高特异、高敏感、高通量、操作简便快速的特点A.核酸杂交技术B.流式荧光技术C.荧光定量PCRD.基因芯片技术17、检测TB的实验室技术中，哪种被认为是目前最先进的一种检测TB及其耐药性的方法A.PCR技术B.PCR-RFLP技术C.全自动结核杆菌检测技术 E.荧光定量PCR技术18、用于非结核杆菌PCR检测的痰液标本应置于A.1mol/L HCLB.生理盐水C.1mol/L NaOHD.变性剂19、临床检验标本可以短期保存于4℃的是A.DNAB.RNAC.蛋白质D.核酸20、核酸的最大吸收峰在A.260nmB.280nmC.320nmD.350nm21、移码突变导致蛋白质功能的改变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列22、错义突变和无义突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列23、短串联重复序列的拷贝数发生扩增而产生的突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列24、杂交反应效率高，非特异性杂交少的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针25、最常用的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针26、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针27、DNA双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，DNA分子成为单链，这一过程称A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期28、在第一次变性时应给予足够时间以便模板彻底变性，这一过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期29、引物与互补的单链DNA模板结合，形成杂交链的过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期30、哪一过程的反应时间取决于扩增产物长度A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期31、下列不属于L-α-氨基酸的是A.甘氨酸B.亮氨酸C.苏氨酸D.甲硫氨酸E.异亮氨酸32、下列密码子中，终止密码子是A.UUAB.UGAC.UGUD.UAUE.UCG33、下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A.结构基因大都为断裂基因B.产物多为单顺反子RNAC.含有大量的重复序列D.编码基因比非编码基因多34、在DNA重组技术中,最常用到的并存在于原核生物中的载体是A.YACB.人工染色体C.质粒D.噬菌体E.DNA35、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃.B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理36、影响DNA分离纯化效果的是A.材料新鲜，低温保存B.加核酸酶抑制剂C.剧烈振荡D.除净蛋白质E.除净多糖37、下列哪种方法不早根据蛋白分子大小进行蛋白分离纯化的A.透析B.超滤C.凝胶过滤层析D.离子交换层析E.离心38、不能作为PCR模板的是A.DNAB.RNAC.质粒和DNAD.蛋白质E.cDNA39、PCR中的脱氧核苷三磷酸不包括A.dATPB.dTTPC.dCTPD.dGTPE.dUTP40、Southern杂交通常是指A.DNA和DNA杂交B.DNA和RNA杂交C.RNA和RNA杂交D.蛋白质和蛋白质杂交E.DNA和蛋白质杂交41、目前临床分子生物学检验的标志物主要以（）为主A.核酸B.蛋白质C.代谢产物D.PCRE.基因组42、原核生物基因组中没有A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.操纵子43、质粒的主要成分是A.多糖B.蛋白质C.氨基酸衍生物D.DNA分子E.脂类44、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理45、DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的A.A-C含量B.A-T含量C.A-G含量D.G-C含量E.T-G含量46、下列不是影响DNA复性因素的是A.DNA浓度B.DNA的分子量C.温度D.碱基组成E.DNA的来源47、PCR反应体系的描述错误的是A.模板B.一条引物C.dNTPD.DNA聚合酶E.缓冲液48、有关PCR的描述下列不正确的是A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.由变性、退火、延伸组成一个循环D.循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量E.扩增的对象是DNA序列49、关于定量PCR的描述，不正确的是A.可以定量或半定量PCR产物的方法B.定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C.水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D.分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E.定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染50、以下为荧光染料技术的优点，不正确的是A.适合任何一个反应体系B.荧光信号量与PCR反应产物量成正比，可以实时监测C.荧光信号的检测在每一次循环延伸后，简单方便D.不需要进行凝胶分离等二次处理PCR产物，避免污染E.特异性高51、Sanger双脱氧链终止法使用的链终止物是A.NTPB.dNTPC.ddNTPD.a-32P-dNTPE.a-35S-dNTP52、关于Westerm印迹以下说法正确的是A.需要对靶蛋白进行放射性核素标记B.缺点是不能对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析C.检测的灵敏性为0.1-1ngD.是由凝胶电泳和固相免疫组成E.固相膜保存时间短53、目前已知感染人类最小的DNA病毒是A.HIVB.HPVC.HBVD.HAVE.HCV54、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A.可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B.可以实现对感染细菌的广谱快速检测C.可以对细菌进行基因分型D.可以检测病原菌耐药基因E.其检验技术都是PCR及其衍生技术55、不符合分子诊断特点的是A.灵敏度高B.特异性强C.样品获取便利D.易于早期诊断E.检测对象为自体基因56、下列因素中不会引起染色体畸变的是A.电离辐射B.妊娠反应C.环磷酰胺D.巨细胞病毒E.母亲年龄57、以下关于mtDNA的描述不正确的是A.mtDNA为闭合双链环状分子B.mtDNA非编码序列少,只占mtDNA6%C.mtDNA 重链(H)富含胞嘧啶,轻链(L)富含鸟嘌呤D.mtDNA呈母系遗传规律E.mtDNA在具有自主复制、转录功能58、以下不是原癌基因的特点的是A.广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B.在进化过程中，基因序列呈高度保守性C.通过表达产物DNA来实现功能D.在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E.对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需59、CYP450与一氧化碳结合物的最大吸收峰所在波长是A.350nmB.450nmC.280nmD.460nmE.550nm60、在器官移植中HLA配型最重要的位点是A.HLA-DRB.HLA-AC.HLA-BD.HLA-DPE.HLA-C二、判断题1、分子生物学检测的靶标是蛋白质。
分子生物学复习题
分子生物学复习题第一章绪论1、分子生物学概念及其主要研究内容。
①广义的分子生物学：是在分子水平上研究生命的重要物质的化学与物理结构、生理功能及其结构与功能的相关性，定量地阐明生物学规律，透过生命现象揭示复杂生命本质的一门学科。
狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因DNA的复制、转录、翻译和调控等过程，同时也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究基因的分子生物学。
②主要研究内容：DNA重组技术，基因表达调控，生物大分子的结构功能研究，基因组、功能基因组与生物信息学研究。
第二章遗传物质基础——核酸1、核酸是怎么发现的？肺炎双球菌转化实验，Avery的体外转化实验，T2噬菌体感染实验，烟草花叶病毒的感染实验，Conrat烟草花叶病毒的重建实验。
2、作为遗传物质必须具备的条件是什么？贮存并表达遗传信息，能把信息传递给子代，物理和化学性质稳定，具有遗传变化的能力。
3、简述DNA的二级结构及其特性？(1)生物大分子主链周期性折叠形成的规则构象称为二级结构，即DNA螺旋。
(2)特性：①为右手反平行双螺旋；②主链位于螺旋外侧，碱基位于内侧；③两条链间存在碱基互补：A与T或G与C配对形成氢键，称为碱基互补原则（A与T为两个氢键，G与C为三个氢键）；④螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm ，每10个核苷酸形成一个螺旋。
⑤含有大沟和小沟。
4、维持DNA二级结构的化学作用力。
①氢键：弱键, 可加热解链，氢键堆积, 有序排列(线性, 方向)。
②碱基堆积力(非特异性结合力)：范德华力，疏水作用力(不溶于水的非极性分子在水中相互联合, 成串结合的趋势力)。
③带负电荷的磷酸基的静电斥力。
④碱基分子内能(温度升高使碱基分子内能增加时，碱基的定向排列遭受破坏)。
5、何谓DNA变性和复性？影响DNA变性和复性的因素有哪些？(1)变性：双螺旋区氢键断裂，空间结构破坏，形成单链无规线团状，只涉及次级键的破坏。
分子生物学复习题(答案完善)(四川农业大学)
答案完善版本，不要太爱我，我只是神一般的女子！第二章一、填空题1、由DNA 和组蛋白组成的染色质纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。
P302、核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一阶段。
P323、DNA的二级结构分两大类：一类是右手螺旋，另一类是左手螺旋。
P374、如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3’末端，一个含有3’ 5’活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。
这个催化区成为校正核酸外切酶。
5、原核生物中有三种起始因子分别是 IF-1 、 IF2和IF-3。
P1376、由于新合成的DNA分子中，都保留了原DNA的一条链因此叫半保留复制 p437、复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起始点呈现叉子的形式，被称为复制叉.p438、为了解释DNA的等速复制现象，日本学者冈崎（okazaki）等提出了DNA的半不连续复制.p469、两条链均按5'到3'方向合成,一条链3'末端的方向朝着复制叉前进的方向,可连续合成,称前导链。
P4610、环状DNA双链的复制可分为θ型、滚环形和D型几种类型.p4711、真核细胞的DNA聚合酶和细菌DNA聚合酶基本性质相同，均以__dNTP___为底物，需要__Mg2+__激活，聚合时必须有 _模板链和_3’-OH末端_的引物链，链的延伸方向为5’→3’. (55页)12、DNA聚合酶的α的功能主要是引物合成,即能起始前导链和后导链的合成.（P55）13、DNA复制的调控主要发生在起始阶段_ ,一旦开始复制,如果没有意外的阻力,就可以一直复制下去直到完成.(P56)14、质粒DNA编码两个负调控因子_Rop蛋白______和反义RNA(RNA1),它们控制了起始DNA复制所必须的_引物合成__。
(P56)15、染色体的复制与_细胞分裂_一般是同步的，但复制与_细胞分裂_不直接偶联。
(P56)16、转座子分为两大类:插入序列和复合型转座子。
分子生物学总复习题(全)
DNA链聚合反应过程中，会在新生链3’-OH上根据模板的要求掺入相互 补的ddNTP。一旦掺入ddNTP后，新生链的延伸就终止。这样在每一个 反应体系中就生成具有相同的5’末端，而3’末端特定的各种长度的DNA 链。如在ddATP反应体系中，新生链的3’末端都是A，对应的模板链是T (图2-33)。然后四个反应体系的产物在同一胶面上分别进行聚丙烯酰胺 凝胶(PAGE)电泳分离。放射自显影后，得到互相错开的梯形图谱(图233)，即可读出DNA序列。 5、简述原核生物启动子的结构特点。
(5)、RNA编辑(RNA editing) RNA编辑(RNA editing)是指转录后某些RNA(特别是mRNA)的核苷
酸序列通过核苷酸插入、删除和取代而被改变的现象
9、简述真核生物II型启动子的结构多样性。 10、举例说明C值矛盾及其产生的原因？ 一个物种基因组的全部DNA含量称为该物种的C值。它总是恒定的，是 物种的一个特征。不同物种的C值差异很大，最小的枝原体只有106bp， 而最大的如某些显花植物和两栖动物可达1011bp 一般来说，随着生物的进化，生物体的结构和功能越来越复杂，其C值 就越大。但在有些生物类群中，C值不遵循这一规律，出现了很多令人 不解的现象。例如，在两栖动物中，C值小的可以低至109bp以下，C值 大的可以高达1011bp。而哺乳动物的 C值均为109bp的数量级。人们很 难相信亲缘关系十分接近的不同两栖动物，所需基因的数量会有100倍 的差别，甚至比哺乳动物更多。这种生物的C值大小与其进化程度和复 杂性不一致的现象称为C值悖理 (C value paradox,又称C值矛盾)。 引起C值矛盾的原因：
分子生物学复习题
1、分子生物学的定义。
从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。
2、简述分子生物学的主要研究内容。
a.DNA重组技术（基因工程）（1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ;（2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ;（3）可被用来进行基础研究b.基因的表达调控在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。
c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学）一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提：(1)拥有特定的空间结构（三维结构）；(2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。
结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。
它包括3个主要研究方向：(1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系d.基因组、功能基因组与生物信息学研究3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？(1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。
生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。
(2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。
(4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。
1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。
DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。
分子生物学复习题(含答案)
分子生物学复习题(含答案)证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是：()---(选择题)1953年Waton和Crick提出：()---(选择题)双链DNA中的碱基对有：()---(选择题)DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。
以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述：()---(选择题)DNA的变性：()---(选择题)在类似RNA这样的单链核酸所表现出的二级结构中，发夹结构的形成：()---(选择题)DNA分子中的超螺旋：()---(选择题)DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)()---(选择题)DNA在30nm纤丝中压缩多少倍()---(选择题)DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍()---(选择题)DNA在中期染色体中压缩多少倍()---(选择题)当新的核小体在体外形成时，会出现以下哪些过程()---(选择题)1953年Waton和Crick提出：()(e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变---(选择题)当一个基因具有活性时：()---(问答题)在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性(退火)反应.---(判断题)在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。
发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹，呈十字结构。
---(判断题)B型双螺旋是DNA的普遍构型，而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。
---(判断题)病毒的遗传因子可包括1到300个基因。
与生命有机体不同，病毒的遗传因子可能是DNA或RNA(但不可能同时兼有!)因此DNA不是完全通用的遗传物质。
---(判断题)C0t1/2与基因组大小相关。
---(判断题)C0t1/2与基因组复杂性相关。
---(判断题)非组蛋白染色体蛋白负责3nm纤丝高度有序的压缩。
分子生物学复习题(有详细答案)
绪论思考题：（P9）1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。
狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。
其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是后基因组时代？研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。
反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。
后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。
3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容）1953年Watson和Click发表了“脱氧核糖核苷酸的结构”的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。
1972~1973年，重组DNA时代的到来。
H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。
1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。
解读人类遗传密码。
4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。
又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。
相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。
生命科学又进入了一个全新的时代。
第四章思考题：（P130）1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。
分子生物学复习题(精品).doc
分子生物学2014年复习题第二章题目一、单选题（17小题，共18分）1.对Ds元件描述错误的是（）。
A.是自主转座元件B,是染色体断裂的位点C.与Ac元件相似 D.内部有缺失2.对非复制转座描述错误的是（）=A要求有解离酶B,移动元件到一个新的位点，在原位点上不留元件C,要求有转座酶D.涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变3.细菌的错配修复机制可以识别复制时新旧DNA链之间错误配对的碱基，这是因为（）。
A,新DNA链含有错误的碱基B.旧DNA链更倾向于含有错误碱基C.旧DNA链在特殊位点含有甲基化基团D.新DNA链在特殊位点含有甲基化基|才|4.下面叙述哪些是正确的?（）A. C值与生物体的形态复杂性呈正相关B. C值与生物体的形态复杂性呈负相关C.每个门的最大C 值与生物体形态复杂性是大致相关的D.每个门的最小C值与生物体形态复杂性是大致相关的5.DNA在10m纤丝中压缩多少倍?（）。
A. 6 倍B. 10 倍C. 40 倍D. 240 倍6.下列有关TATA盒（Hognessbox）的叙述，哪个是正确的：（）A.它位于第一个结构基因处B.它和RNA聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白D.它和反密码子结合7.理论上自发突变是随机发生的，并均匀分布于基因组中。
然而，精细分析表明，DNA中的某些位点较其他位点更易发生突变。
这些“热点”突变是由于（）。
A.存在可被进一步修饰（如脱氨基）的已修饰碱基（如甲基化），导致碱基转换并通过复制产生突变B. DNA 的空间结构选择性地使部分DNA暴露在诱变因子的作用下C.被修饰（如甲基化）碱基的存在，易于发生错配复制并因此产生突变D.DNA中富含A—T区域的存在，使得自发解链及错配碱基的掺入8.一个复制子是（）。
A.任何自发复制的DNA序列（它与复制起点相连）B.复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白质C.任何给定的复制机制的产物（如单环）D.复制起点和复制又之间的DNA片段9.最常见的DNA修饰是甲基化，在原核细胞中，下列叙述错误的是：A.鉴别需修复的损伤DNA。
临床分子生物学检验复习题带答案
单选：1、代表来自于上皮和外间充质两种不同的矿化组织的交界面的结构是A、牙本质牙骨质界B、釉质牙本质界C、牙乳头D、上皮根鞘E、牙囊2、关于釉柱的排列方向的临床意义，以下说法错误的是A、绞釉排列可增强抗剪切程度B、治疗龋洞时，不能保留悬空釉柱C、劈裂釉质时需要按照釉柱的排列方向进行D、平滑面龋呈尖端向釉牙本质界的三角形E、根面龋的形态与平滑面龋同为三角形3、在罩牙本质和透明层以内的牙本质称为A、管周牙本质B、管间牙本质C、前期牙本质D、球间牙本质E、髓周牙本质4、牙龈当中的胶原纤维束存在于A、上皮层B、固有层C、黏膜层D、黏膜下层E、棘层5、牙周膜中维持牙直立的主要力量且呈水平方向的主纤维是A、牙槽嵴组B、水平组C、斜行组D、根尖组E、根间组6、下列哪项不是被覆黏膜的特征A、无颗粒层B、无角化层C、上皮钉突短D、固有层界限不清E、无黏膜下层7、下列关于角质细胞棘细胞层叙述错误的是A、位于粒层的深部、细胞体积大B、由增生的基底细胞发育而来C、构成桥粒的蛋白质主要有桥粒芯蛋白和桥粒胶蛋白D、胞质常伸出许多小的刺状突起E、细胞多呈四边形8、以下属于以黏液性腺泡为主的混合性小涎腺的是A、腮腺B、下颌下腺C、舌下腺D、唇腺E、腭腺9、胞质内含有酶原颗粒的细胞是A、浆液细胞B、黏液细胞C、闰管细胞D、分泌管细胞E、肌上皮细胞10、侧舌隆突出现的时间是胚胎A、第四周B、第五周C、第六周D、第七周E、第八周11、胚胎第三周，前脑的下端出现的突起是A、额鼻突B、下颌突C、上颌突D、中鼻突E、球状突12、残余的牙板上皮可成为牙源性上皮性肿瘤或囊肿的来源，也可能被重新激活形成A、马牙B、上皮珠C、上皮根鞘D、多生牙E、异形牙13、牙髓细胞的来源为A、成牙本质细胞B、成釉细胞C、牙囊D、牙乳头的未分化间充质细胞E、成牙骨质细胞14、上皮隔的形成是上皮根鞘向根尖孔处生长弯曲多少角度形成A、90°B、60°C、50°D、45°E、30°15、单根牙的形成中，下列哪项组织能够诱导牙髓细胞形成成牙本质细胞A、上皮隔B、上皮根鞘C、牙囊D、牙乳头E、内釉上皮16、平滑面龋中，釉质晶体开始出现脱矿，晶体间孔隙较增大，用树胶可进入到孔隙中，属于平滑面龋的哪一层A、透明层B、暗层C、病损体层D、表层E、细菌侵入层17、平滑面龋的病损形态是A、烧瓶状，口小底大B、烧瓶状，口大底小C、浅碟状，口大底浅D、三角形，顶向釉牙本质界E、三角形，顶向釉质表面18、牙骨质龋临床上多见于A、乳前牙B、乳磨牙C、年轻恒牙根龋D、老年人冠龋E、老年人根龋19、釉质龋病变的主要部分是A、透明层B、暗层C、表层D、病损体部E、细菌侵入层20、以下哪一项不属于慢性牙髓炎的分类A、慢性闭锁性牙髓炎B、慢性溃疡性牙髓炎C、溃疡型慢性增生性牙髓炎D、上皮型慢性增生性牙髓炎E、牙髓网状变性21、以下选项哪一个是由病理性牙髓充血发展而来A、牙发育期间B、月经期C、妊娠期牙髓D、急性牙髓炎E、高空飞行22、龋损下方牙髓血管充血，血管通透性增加，液体渗出，组织水肿，有纤维蛋白渗出，此时称为A、急性牙周脓肿B、急性增生性牙髓炎C、急性化脓性牙髓炎D、急性浆液性根尖周炎E、急性浆液性牙髓炎23、急性根尖周炎最常见的排脓途径A、经龋洞排脓B、深的牙周袋排脓C、经黏膜、皮肤排脓D、可通过上颌窦排脓E、可通过耳道排脓24、根尖周肉芽肿患者若根尖部出现修复性反应，称为A、急性根尖周肉芽肿B、慢性根尖周脓肿C、急性根尖周脓肿D、致密性骨炎E、化脓性骨髓炎25、根尖周肉芽肿内上皮大多数可能来源于A、Serres 上皮剩余B、Malasssez 上皮剩余C、口腔粘膜上皮D、呼吸道上皮E、牙周袋壁上皮26、结合上皮向根方增殖，延伸，形成深牙周袋，是以下哪项病理表现A、牙周炎静止期B、牙周炎活动期C、牙周变性D、牙周创伤E、牙周萎缩27、慢性龈炎的病理变化主要有A、牙龈上皮出血B、牙龈上皮增生C、牙龈上皮脓肿D、龈沟壁处有炎症细胞浸润E、沟内上皮向根方增殖28、下列关于龈增生组织病理变化不正确的是A、纤维结缔组织增生B、粗大的胶原纤维束类似瘢痕组织结构C、胶原纤维水肿、变性D、毛细血管增生、扩张、充血E、炎症明显29、上皮基层下疱常见于A、红斑B、红斑狼疮C、天疱疮D、类天疱疮E、白斑30、下列哪项不是单纯性白斑的病理变化A、上皮表面过度角化B、上皮棘层增生C、上皮钉突增生延长D、上皮不典型增生E、上皮基底膜清晰31、慢性盘状红斑狼疮使用直接免疫荧光技术可检测出现荧光的是上皮的哪个具体部位A、角化层B、颗粒层C、棘层D、基底膜E、肌层32、腺样囊性癌又称为A、多形性腺瘤癌变B、Warthin瘤C、圆柱瘤D、腺淋巴瘤E、淋巴乳头状囊腺瘤33、肿瘤内含有筛孔状囊样腔隙，与藕的断面相似；孔内充满嗜酸或嗜碱性黏液样物质，有基底膜样结构，属于腺样囊性癌的哪种分型A、腺性型B、包膜型C、管状型D、黏液型E、实性型34、舍格伦综合征区别于其他涎腺慢性炎症的病理表现为A、从腺小叶中心淋巴细胞密集浸润B、腺小叶内导管形成上皮肌上皮岛C、腺小叶内腺泡全部消失，小叶轮廓仍保留，腺小叶缺乏纤维结缔组织D、腺小叶内导管增生扩张，形成囊腔或变性液化 E、病变小叶与正常腺小叶有界限，但无被膜间隔35、下列哪项不是慢性涎腺炎的病理表现A、小叶腺泡萎缩B、小叶导管上皮增生C、小叶导管扩张D、小叶轮廓保留E、小叶间质淋巴细胞浸润36、黏液囊肿常发生于A、下唇黏膜B、颊黏膜C、口底黏膜D、硬腭部黏膜E、软腭部黏膜37、含牙囊肿的定义是A、囊壁包含一个未萌出牙的牙根B、囊壁包含一个发育异常的牙体C、囊壁包含一个未萌出的牙体D、囊壁包含一个已萌出牙的牙根E、囊壁包含一个未萌出牙的牙冠38、成釉细胞瘤各分型的病理变化不包括A、上皮团块中出现纤维化B、上皮团块中出现囊性变C、上皮团块中出现颗粒性变D、上皮团块中出现鳞状化生E、上皮团块中出现角化珠39、最常见的牙源性肿瘤A、成釉细胞纤维瘤B、牙瘤C、Pindborg瘤D、牙源性角化囊性瘤E、成釉细胞瘤40、以下哪项为牙源性肿瘤A、含牙囊肿B、萌出囊肿C、黏液囊肿D、黏液纤维瘤E、Warthin瘤41、构成牙齿主体的是:A.釉质B.牙本质C.牙骨质D.牙髓E.牙周膜42、固有层内结缔组织乳头狭长，几乎接近上皮表面，乳头中含有许多毛细血管袢的黏膜是A、颊B、唇红C、舌腹D、软腭E、牙龈43、较易由淋巴道播散的口腔癌是A.唇癌B.颊癌C.牙龈癌D.舌癌E.腭癌44、侧支根管形成的原因是A、牙乳头部分坏死B、牙本质发育障碍C、颈环发育不良D、上皮根鞘断裂E、成牙本质细胞坏死45、口腔癌最常见的部位是A.颊B.唇C.口底D.舌E.牙龈46、关于慢性涎腺炎的病理表现，错误的是A.导管扩张B.腺泡萎缩C.纤维增生D.腺小叶坏死E.玻璃样变性47、关于附着龈，正确的是A.表面可见点彩B.色泽比游离龈稍红C.表面上皮无角化D.紧密附着于牙骨质，故名附着龈E.富有弹性，有一定活动度48、由牙周膜中的成纤维细胞形成的纤维不包括A.主纤维B.牙骨质中的穿通纤维C.固有牙槽骨中的穿通纤维D.牙骨质中的内源性纤维E.牙骨质中的外源性纤维49、关于牙槽骨生物学特性的叙述，不正确的是A、可由于不断新生而影响牙齿发育B、受到外界的压力，可表现为吸收C、具有高度的可塑性D、随牙齿的萌出而不断改建E、较牙骨质更容易吸收50、肉芽肿性唇炎的病理特点为A.固有层散在淋巴细胞浸润B.血管周围淋巴细胞浸润C.固有层淋巴细胞带状浸润D.结缔组织中淋巴细胞浸润并形成滤泡E.血管周围上皮样细胞及淋巴细胞结节样聚集51、腮腺肿瘤镜下见筛状结构，肿瘤细胞排列成圆形或卵圆形上皮团块，其间含大小不等的囊性腔隙，与藕的断面相似。
分子生物学实验必背十题
分子生物学实验必背十题1、简述双抗体夹心法（ELISA）原理定义、操作过程、注意事项。
（1）原理定义：将可溶性的抗原或抗体吸附到固相载体上，并保持其免疫活性，使之结合并吸附结合抗体或抗原，通过洗涤去除未结合成分，再与酶标记的抗体或抗原结合，并保留酶的活性，然后加入酶反应的底物，后者被催化变为有色产物，根据反应颜色的深浅进行免疫反应的定性和定量的方法。
（2）操作过程：①用一直抗体包被固相载体；②加入受检的标本（含待测抗原），使抗原与固相上的抗体结合；③加入以辣根过氧化物酶标记的已知抗体，使之与抗原结合。
标记的酶可催化底物（四甲基联苯胺）起显色反应，从而指示特异性抗原抗体反应的存在。
（3）注意事项：①对倍稀释抗原混匀时不要产生太多气泡；②酶标板要洗涤干净不要交叉污染；③加样时从最低稀释度逐一加至最高稀释度。
2、比较聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳。
（1）相同点：都是电泳方法，可用于物质的分离与鉴定。
（2）不同点：前者利用蛋白质分子大小形状的差异进行分离，后者利用的是两性电解质形成的光滑pH使蛋白质停留在与其pI相等的位置上进行分离；前者有扩散的作用，后者无扩散作用，因而物质更集中，分辨率高；电泳时间加长，前者电泳效果会变差，后者可使同一蛋白区带更狭窄，利于分辨。
3、比较向聚丙烯酰胺薄膜层析和凝胶柱层析。
（1）相同点：都是层析方法，可用于分离物质；固定相均为固体，流动相均为液体；与分离物质不发生反应，分离后可鉴定。
（2）不同点：前者属于特殊的吸附分配层析，后者属于分子筛层析；前者通过荧光观察判断分离物质，后者通过收集液的显色反应；前者原理与分离物质与聚丙烯酰胺薄膜形成氢键有关，后者利用分子颗粒大小有关。
4、使牛蛙红细胞细胞融合的试剂及其原理；红细胞计数。
（1）PEG；PEG具有强烈的吸水和凝聚沉淀蛋白质的作用，可改变细胞膜的结构，使两细胞接触点处脂类分子发生分散和重组，引起细胞融合。
（2）计数：格子数；稀释倍数。
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分子生物学实验复习题1.实验中为什么选用RNA而非DNA作为模板调取目的基因？因为真核生物，DNA出了含有编码序列外还含有非编码序列（内含子），而我们只需目的基因这段序列。
RNA是经过加工的，没有内含子，通过提取高质量的RNA再进行逆转录即可得到不含内含子的cDNA，即所需的目的基因。
2.RNA提取过程中的注意事项有哪些？（1）所有玻璃器皿均应于使用前180℃干烤3h或更长时间，塑料器皿可用0.1％DEPC浸泡或用氯仿洗涤。
（2）全部实验过程最好戴一次性手套，接触可能污染了RNA酶的物品后，应更换手套。
（3）配制的溶液应尽可能用0.1％DEPC在37℃处理12h 以上，然后高压灭菌除去残留的DEPC。
不能高压灭菌的试剂，用经DEPC处理过的无菌蒸馏水配制，然后用0.22um 滤膜过滤除菌。
3.逆转录反应，有哪几种引物可用？如何进行选择？（1）引物：OligodT：①长度适宜，一般为15~30个碱基；G+C含量，一般为40%~60%；②4种碱基应随机分布；③引物自身不应存在互补序列；④2个引物之间不应有多于4个碱基的互补；⑤引物3′端不应有任何修饰；⑥引物5′端可以修饰4.简述用氯化钙方法制备感受态细胞转化原理？（1）正在生长的大肠杆菌在0℃下加入到低渗的CaCl2溶液中，便会造成细胞膨胀成球（感受态细胞）。
（2）感受态细胞与外源质粒DNA形成一种粘着在细胞表面上的队DNAase抗性的羧基钙磷酸复合物。
（3）42℃下作短暂的热刺激期间，这种复合物便会被细胞吸收。
（4）进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。
（5）将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子。
5.转化过程中要注意哪些因素细胞生长状态和密度、质粒的质量和浓度、试剂的质量、防止杂菌和杂DNA的污染6.简述质粒DNA提取原理在pH12.0~12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性，但仍处于拓扑缠绕状态。
将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下，大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，二质粒DNA仍然为可溶状态。
通过离心，可去除大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA 及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。
7.请列举4种阳性克隆的筛选方法和鉴定方法（一）采用遗传学方法可筛选特定的重组体DNA1.利用抗性标记可筛选出带有载体的细菌克隆2.利用不同标记可筛选出带有重组体的细菌克隆①插入灭活法利用特定抗性基因的失活进行筛选②α-互补筛选是利用功能互补的基因片段（二）核酸杂交法适合从文库中筛选特定的DNA（三）PCR技术可对特定的DNA进行直接鉴定（四）酶切鉴定是利用限制酶酶切图谱鉴定特定的DNA 8.简单谈一下如何选定酶切鉴定时所用的酶限制性内切酶的选用必须根据载体和插入片段上酶切微点来确定。
酶切鉴定是必须的，基于下述：限制性图谱个体特异性，不同的载体或DNA分子物理图谱不同，酶切后片段大小不一样，电泳图谱一样。
统一载体连接不同的DNA片段，不同的载体连接统一片段（片段上也有位点）酶切图谱是不同的。
插入法（单酶单切点）或替代法（双酶双位点）酶切，一般来说用3种限制酶切：可鉴定载体及插入片段的大小、方向、切后并电泳分析，以确定是否得到预期的rDNA。
9.简述克隆大鼠的GAPDH基因的主要步骤①TRlzol试剂提取小鼠肝脏总RNA②核酸的定量③电泳检测④PCR产物4℃保存或琼脂糖凝胶电泳检测⑤从琼脂糖凝胶中分离回收PCR产物⑥6GAPDH基因的TA克隆、连接、转化10.Trizo:是直接从细胞或组织中提取总RNA 的试剂，内含异硫氰酸胍，酚等物质，异硫氰酸胍能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎。
核酸由于核蛋白二级结构的破坏而解离下来。
异硫氰酸胍同时抑制细胞释放出的核酸酶，保持RNA 的完整性。
11.荧光定量PCR中，请说明阈、基线、Ct值的概念。
Baseline（基线）：在PCR开始几个循环内所发散的荧光信号，这段时间内定量PCR仪器还未能检测到PCR产物的扩增，缺省设置为3-15个循环的荧光信号（背景荧光信号）。
Threshold（阈值）：用来确定Ct的荧光强度。
是在荧光扩增曲线上认为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段在任意位置上，一般荧光阈值的设置是基线（背景）荧光信号的标准偏差的10倍。
Ct值：到达阈值荧光信号所需要的循环数。
12.在做荧光定量PCR实验时要注意些什么？(1)在操作中，应使用不含荧光物质的一次性手套（经常替换）、一次性转移器吸头（带滤嘴自卸式），不能用手直接接触毛细管、离心管的底部。
(2)操作台、移液器、离心机、PCR扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或75%乙醇擦拭消毒。
每次实验前后用10%次氯酸和70%乙醇擦拭移液器、操作台。
(3)配制反应体系时，应注意移液器的使用方法，所有的液体都要缓慢加至管底，不要加至管壁，所有液体的混匀要用振荡器进行，不能用移液器吹打，反映体系配制完毕后低速离心数秒，避免产生气泡。
13.影响质粒转染效率的因素有哪些？转化率：转化效率/细胞总数影响因素：（1）载体：载体的性质、空间结构、分子大小等（2）受体细胞（3）转化过程获得高转化率的关键：感受态细菌的制备。
14.脂质体转染实验中，请说明脂质体接到转染的原理脂质体也称人工细胞膜，是由脂质双分子层组成的，在水中可以自动生成闭合的双层膜，最初，人们只是运用脂质体模拟生物膜，研究膜的构造及功能，从而发现了膜的融合及内吞作用，因而可用作外源物质进入细胞的载体。
现商品化的脂质体通常是阳离子脂类和中性脂类的复合体。
其中以阳离子脂类起主要作用，阳离子脂质体既能与DNA可以通过静电作用形成脂-DNA复合物，也能被表面带负电荷的细胞膜媳妇，从而引导DNA进入细胞。
中性脂类可促进胞内释放DNA。
15.请简述荧光素酶报告基因简单的实验流程。
（1）构建载体：把调控序列插入到含有萤火虫荧光素酶（Lue）或海参荧光素酶（Rlue）的载体中。
（2）转染（3）提供刺激（4）检测荧光16. RT-PCRRNA的多聚酶反应（RT-PCR）是以mRNA 为模板进行逆转录反应（reverse transcription，RT）与PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA模板。
RNA扩增包括两个步骤：在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合成RNA的互补cDNA，加热后cDNA与RNA 链解离，然后与另一引物退火，并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶DNA，最后扩增靶DNA.用途: 获得所需cDNA片段；检测基因表达注意问题：（1）PCR效率差异，重复性（2）内参选定（3）mRNA丰度逆转录：RNA、缓冲液、dNTP、逆转录酶、引物（随机引物:OligodT)PCR:cDNA、缓冲液、dNTP、rTaq、引物（特异引物)、Mg2+ 17.胶回收原理：回收柱（硅胶膜）在高盐、低PH值的情况下吸附DNA，在低盐、高PH值的情况下释放DNA。
影响胶回收的几个影响因素，PH值、高盐试剂、低盐洗脱试剂。
18.转化(Transformation)：是将外源DNA分子引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。
转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(R-, M-)，它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。
脂质体转染实验与荧光素酶活性检测一、什么是报告基因？所谓的报告基因（reporter gene）,是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
该基因的表达与插入基因的表达有关。
该技术的主要优点是高灵敏度、可信性及检测方便且适合大规模检测。
二、理想的报告基因：1. 内源性低 2. 细胞内其它的基因产物不会干扰报告基因的检测3.报告基因编码产物的检测应该快速、简便、灵敏度高并且重复性好三、荧光素酶报告基因载体常用的萤光素酶报告基因载体：萤火虫萤光素酶报告基因载体、海肾萤光素酶报告基因载体、pGL2 , pGL3 , pGL4萤火虫荧光素酶报告基因：萤火虫luc以其高度的灵敏性和很宽的线性范围而成为哺乳动物细胞中使用最多的报告基因。
本次所用载体：promega公司的pGL3-promoter所用质粒：pGL3-promoter-ERE(雌激素应答元件）与配体结合的ER发生构型改变，被激活形成二聚体，激活的ER二聚体与雌激素应答元件(estrogen response element, ERE)结合，ER- ERE复合物促使转录起始复合物形成并诱导转录。
四、荧光素酶报告基因简单实验流程：1、构建载体把调控序列连入到含有萤火虫萤光素酶（luc）或海肾萤光素酶（Rluc）的载体中2、转染3、提供刺激4、检测荧光五、转染原理：1.脂质体也称人工细胞膜，是由脂质双分子层组成的。
在水中可以自动生成闭合的双层膜，最初,人们只是运用脂质体模拟生物膜,研究膜的构造及功能,从而发现了膜的融合及内吞作用,因而可用作外源物质进入细胞的载体。
2.现商品化的脂质体通常都是阳离子脂类和中性脂类的复合体。
其中以阳离子脂类起主要作用，阳离子脂质体既能与DNA可以通过静电作用形成脂－DNA复合物，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附。
从而引导DNA进入细胞。
中性脂类可促胞内释放DNA。
Edit By Ben Brady, Yanyan.January 6th 2012.。