Ⅳ型胶原蛋白基因α1对胃癌细胞增殖、转移及凋亡的调控作用与机制

Ⅳ型胶原蛋白基因α1对胃癌细胞增殖、转移及凋亡的调控作
用与机制
李怡君;杨振威;陈晓露;司望利
【期刊名称】《新乡医学院学报》
【年(卷),期】2022(39)4
【摘要】目的探讨Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)对胃癌细胞增殖、转移及凋亡
的影响以及其潜在的调控机制。

方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织和人正常胃黏膜上皮细胞GES-1及胃癌细胞(SGC-7901、MKN-28、BGC-803、MGC-823、MKN-45和AGS)中COL4A1基因的表达。

根据6
种胃癌细胞中COL4A1基因的表达情况,AGS和SGC-7901细胞被用于后续的细
胞功能验证实验。

将AGS、SGC-7901细胞接种于6孔板,并于融合度达到90%后,将2种细胞分为对照组、阴性对照(NC)小干扰RNA(siRNA)组、siCOL4A1-1组、siCOL4A1-2组和siCOL4A1-2+740 Y-P组。

对照组细胞正常培养,不进行任何处理;NC siRNA组细胞转染NC siRNA,siCOL4A1-1组细胞转染siCOL4A1-
1,siCOL4A1-2组细胞转染siCOL4A1-2,siCOL4A1-2+740 Y-P组细胞转染siCOL4A1-2,然后使用50 mg·L^(-1)的740 Y-P处理90 min。

采用RT-qPCR检测5组细胞中COL4A1基因的表达情况,根据检测结果选择siCOL4A1-2组细胞进行后续实验。

采用细胞计数试剂盒-8检测对照组、NC siRNA组、siCOL4A1-2
组和siCOL4A1-2+740 Y-P组AGS和SGC-7901细胞培养1、2、3、4 d时的
增殖能力,膜联蛋白-V/异硫氰酸荧光素实验检测4组AGS、SGC-7901细胞凋亡
情况,Transwell实验检测4组AGS、SGC-7901细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测4组AGS、SGC-7901细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)
通路相关蛋白表达。

结果siCOL4A1-2组AGS细胞的增殖能力在培养3 d和4 d
时显著低于对照组和NC siRNA组(P<0.05),SGC-7901细胞的增殖能力在培养1、2、3、4 d时均显著低于对照组和NC siRNA组(P<0.05);siCOL4A1-2+740 Y-P
组AGS细胞的增殖能力在培养3 d和4 d时显著高于siCOL4A1-2组
(P<0.05),SGC-7901细胞的增殖能力在培养1、2、3、4 d时均显著高于
siCOL4A1-2组(P<0.05);其余各组细胞增殖能力比较差异均无统计学意义
(P>0.05)。

siCOL4A1-2组AGS、SGC-7901细胞的凋亡率均显著高于对照组和NC siRNA组(P<0.05);siCOL4A1-2+740 Y-P组AGS、SGC-7901细胞的凋亡率均显著低于siCOL4A1-2组(P<0.05);其余各组2种细胞凋亡率比较差异均无统计
学意义(P>0.05)。

siCOL4A1-2组AGS、SGC-7901细胞迁移能力和侵袭能力均
显著低于对照组和NC siRNA组(P<0.05);siCOL4A1-2+740 Y-P组AGS、SGC-7901细胞迁移能力和侵袭能力均显著高于siCOL4A1-2组(P<0.05);其余各组2
种细胞迁移能力和侵袭能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。

对照组与NC siRNA 组AGS、SGC-7901细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值比较差异无统计学意义(P>0.05);siCOL4A1-2组AGS、SGC-7901细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值
显著低于对照组和NC siRNA组(P<0.01);siCOL4A1-2+740 Y-P组AGS、SGC-7901细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值显著高于siCOL4A1-2组(P<0.01)。

结论沉默COL4A1能够通过抑制PI3K/Akt通路的激活抑制胃癌细胞增殖、迁移和
侵袭能力,促进细胞凋亡。

【总页数】7页(P311-317)
【作者】李怡君;杨振威;陈晓露;司望利
【作者单位】西安市中心医院消化科
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
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