乳酸链球菌素(Nisin)及其在食品工业中的应用
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文章篇号:1007-2764(2003)增刊-0029-096
乳酸链球菌素(Nisin )及其在食品工业中的应用
幸治梅 刘勤晋
(西南农业大学食品学院 重庆 400716)
摘 要: 介绍了乳酸链球菌素(Nisin)性质,综述了乳酸链球菌素(Nisin)在食品防腐中的应用,以及对微生物防腐剂的发展趋势进行展望。
关键词: Nisin 性质;应用;展望
食品极易受到微生物侵袭而导致腐败,采用防腐剂
延缓腐败是贮存食品的有效手段之一。但人们发现不少化学防腐剂影响着人体健康,因此寻求广谱、高效、低毒(无毒)、纯天然的食品防腐剂已成为当今食品贮存研究的热点。而在天然防腐剂中,微生物素防腐剂成为研究、应用的一个重要方面。其中应用得较广泛的是乳酸菌素(包括乳酸链球菌、乳酸杆菌、啤酒片球菌等产生的抗生素)中的乳酸链球菌素(Nisin)。
1 Nisin 的性质
1.1 Nisin 的结构特点
早在1970年Gross 和Morell 已阐明Nisin 分子的一级结构由34个氨基酸组成,分子式是C 143H 228N 42O 37S 7,平均分子量315Da ,其活性体为二聚体或四聚体,分子量分别为7000和14000。Nisin 含有4种异常氨基酸,分别是脱氢丙氨酸(DHA )、β-甲基脱氢丙氨酸(DHB )、羊毛硫氨酸(ALA-S-ALA )和β-甲基羊毛硫氨酸(ABA-S-ALA ),它们通过硫醚键形成5个环。到目前为止,已发现Nisin 的种类包括A 、B 、C 、D 、E 和Z ,对Nisin A 和Nisin Z 研究较多,区别在于NisinA 的第27位AA 为His ,而Nisin Z 的第27位AA 为Asn ,其抗菌特性几乎无差别[1,2],其分子结构见下图所示。
1.2 Nisin 的理化性质
Nisin 作为一种白色易流动的粉末,其溶解度随pH 值的不同而不同,易溶于酸性溶剂,在0.02mol/L 的盐
酸中具有最大溶解度为118.0mg/L [3];
随着碱性增强,生物活性也减弱。在pH6.5,85℃经15min 加热,其活性损失15%,而当Nisin 溶于pH3的盐酸中经121℃,15min 加热仍能保持100%的活性。
Nisin 作为一种多肽类物质,添加于食品中不会被其中的微生物分解,对人体无毒害作用,但对蛋白水解酶(胰酶、唾液酶、消化酶等)很敏感,人食后在消化道内很快被水解成氨基酸,并且不改变肠道内的正常菌落,也不会与常用的其他抗生素(如青霉素、链霉素等)产
生交叉抗性,是一种安全的防腐剂。
1.3 Nisin 的抑菌性
Nisin 能抑制大部分G +菌的生长,包括产芽孢杆菌(如肉毒芽孢杆菌),耐热腐败菌(如嗜热脂肪芽孢杆菌),生孢梭菌等,而对酵母菌和霉菌无效,但在一定的条件下(如冷冻、加热、降低pH 值和经EDTA 及其它表面活性剂处理)对部分G -菌也有致死作用。
Nisin 对G +菌营养细胞的作用是在细胞膜上构建依靠膜电位的、短期存在的通道,使膜电位丧失,能量产生停止和细胞质中必需小分子组分流失,最后细胞解体;而对芽孢的作用是在芽孢萌发前期及芽孢膨胀期破坏其膜,以抑制其发芽过程。 2 Nisin 在食品工业中的应用
Nisin 不含任何非天然物质,对人体健康无毒害作用,在食品中添加定量Nisin ,不但对食品的色、香、味、口感等无副作用,而且有助于增进食品营养价值,降低其加工能耗。
2.1 在肉制品中的应用
肉制品的主要污染菌是G +菌, Nisin 作为G +菌抑制剂广泛应用在肉类加工中。Rayman 等(1981)提出[4],Nisin 可作为腌制肉制品中硝酸盐的替代剂或佐剂,以减少或避免亚硝胺类物质对人体健康的威胁。如在烟熏火腿时,加入3000IU/ml Nisin ,37℃能放56d 不变质,使
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硝酸盐用量由原来的150ppm减为40ppm,同时也能抑制其中杂菌的生长[5]。Graciela M等(1991)研究发现,乳酸菌发酵剂能抑制香肠中乳杆菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌和广泛G+菌的生长繁殖。袁秋萍认为从生产成本和防腐效果考虑Nisin在香肠中的适宜添加量为0.3g/kg[6]。
2.2 在乳及乳制品中的应用
经巴氏消毒的乳制品中仍存在肉毒梭菌,贮存中会产生一定毒素。Taraka等(1986)研究表明:在巴氏处理后的干酪中加入500~1000IU/ml Nisin能抑制肉毒梭菌的生长和毒素的产生,同时还能降低食盐和磷酸盐用量。Shehata等研究表明,少量Nisin添加于奶油巧克力生产中,能降低能耗,延长货架期。在新鲜奶中加入Nisin 30~50 IU/ml, 35℃下可使其货架期延长一倍[7];罐装炼乳中添加80~100IU/ml Nisin能减少10min灭菌时间。UHT奶中添加20IU/ml Nisin能完全抑制嗜热细胞菌芽孢的生长;在冷冻乳类甜点食品中添加50~100IU/mlNisin后可延长货架期4~6倍[8]。
2.3 在酸性罐头中的应用
Nisin在酸性下稳定性、抑菌性好,所以适用于酸性罐头食品的防腐。使用100~200IU/ml Nisin能有效阻止抗热微生物的生长繁殖,降低杀菌温度和缩短杀菌时间,同时保证酸性罐头食品的营养、风味和外观。
2.4 在啤酒酿造中的应用
乳杆菌和啤酒片球菌是啤酒酿造中常见的污染菌,Ogden K(1985)实验得出,只需在啤酒中加入1000IU/ml Nisin,则可除去杂菌,延长货架期,降低巴氏消毒强度,增强啤酒的品质和风味[9]。Radle F(1981)也曾报道,把Nisin应用于白酒酿造中,有效阻碍了肠膜状明串珠菌、啤酒片球菌和乳酸杆菌的生长,防止了杂菌污染。为了能提高葡萄酒的稳定性,建议向1000L 葡萄汁中添加30~50g Nisin,预先经充分搅拌,将它溶解于少量的果汁中。
2.5 方便食品中的应用
添加少量的Nisin于色拉酱、冷盘、面点和汤类等方便食品中,能有效抑制酵母菌、细菌的生长繁殖,效果可以和山梨酸盐等化学防腐剂媲美,且能使盐浓度下降为7%~9% 。
3 展望
Nisin发酵活力低,成本高,大力进行Nisin的基础研究和开发应用,可以从以下几方面着手:
3.1 采用基因重组技术构建高产、广谱抗性菌株,以期获得抗菌效果更好的天然防腐剂。
3.2 通过分子改造技术来改变微生物细胞的分子结构,使之具有更强的适应新环境的能力,生产出抗菌性能强、抗菌谱更大的天然防腐剂。
3.3 将微生物防腐剂与动植物或矿物防腐剂配合使用,以增强抗菌作用。如将Nisin与EDTA或其他表面活性剂配合使用,可扩大其抗菌谱,能抑制G-菌;将Nisin 与纳他霉素配合使用可使抑菌谱互补。
参考文献
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2郭本恒. Nisin的物理化学性质. 农牧产品开发[J]. 2001,2:4
3汤凤霞,蔡慧农.微生物防腐剂Nisin的研究与应用.食品科技[J].
2002,(11):46~48
4张署江,罗欣. Nisin的特性及在肉制品中的应用.肉类研究[J].
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5袁秋萍.乳酸链球菌素在肉制品中的应用.食品工业科技[J].
1998,(4):27~28
6Berwal J S, et al. Molds as protective cultures for raw dry sausages. Journal of food protection[J]. 1994,57(10):928
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in emulsifying oil in water. Food Sci[J].2000, 65(3):502
8王岁楼. 食品生物技术[M]. 北京:海洋出版社. 1998:264
9丁燕,杜金华.乳酸链球菌素(Nisin)的特性及其在啤酒工业中的应用. 酿酒[J]. 2002,29(1):41~44
Antimicrobial Additive And Its Application In Food Industry
Xing Zhimei, Liu Qinjin
(Department of Food Science, Southwest Agriculture University, Chongqing, 400716)
Abstract: This article introduced the character of antimicrobial Nisin and expatiated Nisin antisepticising to food, as well as prospected the development of microorganism anticorrosive additive.
Keywords: character of Nisin; application; expectation
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