临床基因扩增检验质量保证课件
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• 由实验室工作人员，采取一定的方法和步骤，连 续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和 控制本实验室工作的精密度，提高本室常规工作 中批内、批间样本检验的一致性，以确定测定结 果是否可靠、可否发出报告的一项工作。
• 可概括为:(1)执行者：实验室技术人员；(2)目的： 监测实验室测定的重复性；(3)功能：决定了当批 测定的有效性，报告可否发出。是对实验室测定 的即时性评价。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集时间对扩增检测结果 的影响
• 在疾病发展过程中，标本采集过早或过晚 都可能会给出假阴性结果。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集部位的准备
• 血液标本采集 • 分泌物标本:采集部位的清洁消毒 可去掉污染的微生物或其它杂物, 但应适度,过度清洁消毒有可能会 去掉或破坏靶微生物,故标本采集 部位的准备应由训练有素的人员进 行。
决定在实时的测定结果的可接受性。当EQA用来为执业许 可或实验室认证的目的而评价实验室操作时，常描述为实 验室能力验证（Proficiency testing, PT）。在以前的文献中， EQA常描述室间质量控制。
临床基因扩增检验质量保证
批 (Run)
• 在相同条件下所获得的一组测定。
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验质量保证
标本的类型和采集量
• 标本的类型: 血清(浆)、分泌物、痰、粪便、尿和 脑脊液等。 • 标本的采集量:应根据所测病原体而定。一般来说， 如果标本的量对病原体培养够用的话，则其量亦足 以用于核酸提取及其后的扩增检测。 • 对于定量测定来说，对标本的收集要求更为精确。
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验质量保证
标本运送
• 样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室。 • 样本中如加入了适当的稳定剂,如用于RNA测定加入
GITC的血清(浆)样本和用于DNA测定的EDTA抗凝血 等,则可在室温下运送或邮寄。 • 实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床样本的 运送条件作出相应的规定。
临床基因扩增检验质量保证
质量保证、室内质控和室间质评之间的关系
临床基因扩增检验质量保证
临床标本收集、运送、保存 及其质量控制
• 标本收集 • 标本保存 • 标本运送
临床基因扩增检验质量保证
标本收集
• 标本采集时间对扩增检测结果的影响 • 标本采集部位的准备 • 标本的类型和采集量 • 采样质量的评价 • 采样及运输容器 • 标本采集中的防污染
临床基因扩增检验质量保证
正态分布 的基本统 计学含义 可用均数 （X）、标 准差（s） 和概率来 说明。
临床基因扩增检验质量保证
ຫໍສະໝຸດ Baidu
临床基因扩增检验实验室 常规测定步骤
• 标本收集：选择测定项目、标本收集和保存。 • 实验室测定：标本接收、贴标签、样本处理、核酸
扩增、产物检测、测定的有效性和临床诊疗价值。 • 报告和解释：结果发出、结果解释和临床管理。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集中的防污染
• 采集中要特别注意污染，防止混入 操作者的头发、表皮细胞、痰液等； • 如使用玻璃器皿，必须经高压灭菌， 以使可能存在的RNase失活。
临床基因扩增检验质量保证
标本保存
•靶核酸(尤其是RNA)易受核酸酶的作用而 迅速降解，因此标本的保存对于核酸扩增 测定的有效性极为重要。 •使用GITC作为稳定剂保存标本，标本可 在室温下稳定约7天。
临床基因扩增检验质量保证
标本保存
• 临床体液标本长期保存应在-70℃下。 • 如为提取核酸后用于DNA扩增分析的样
本，可于10 mmol/L Tris,1mmol/L EDTA(pH7.5～8.0)缓冲液中4 ℃下保存。 • 用于RNA扩增分析的样本，则应于上述 缓冲液中-80℃或液氮下保存。 • 核酸的乙醇沉淀物则可于-20℃下保存。
临床基因扩增检验的 质量保证
卫生部临床检验中心 李金明
临床基因扩增检验质量保证
质量保证 (Quality Assurance,QA)
•为一产品或服务满足特定质量
要求提供充分可信性所必要的 有计划的和系统的措施。
临床基因扩增检验质量保证
室内质量控制（Internal Quality Control,IQC)的概念
临床基因扩增检验质量保证
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验的室内质量控制
•测定前的质量控制 •核酸样本的制备及其质量控制 •统计学质量控制 •质量控制的评价
临床基因扩增检验质量保证
测定前质量控制
•实验室设施、仪器设备及管理 •理想的试剂和操作方法 •人员培训
临床基因扩增检验质量保证
实验室设施、仪器设备及管理
• 临床基因扩增检验实验室应有充分合理 的空间、良好的照明和空调设备 ； • 实验室仪器设备应保养良好，实验用品 要达到相应的要求。加样器的校准？带 滤塞吸头的使用及质检？离心机？热循 环仪？水浴箱和/或恒温干浴仪？酶标仪 和洗板机？
临床基因扩增检验质量保证
室间质量评价（External Quality Assessment, EQA）
• 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位 机构，采取一定的办法，连续、客观地评价实验室的结果， 发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。 这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用来
定义
• 正态分布(Gaussian distribution) 当一质控物用同一 方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多 时，如以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相 应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中 为所有测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，亦 即正态分布，又称高斯分布。
采样质量的评价
• 血清(浆)标本:溶血、脂血等；
• 分泌物、痰：评价内容包括细胞组成，所需类型细胞 的数量和核酸总量。 评价方法：包括肉眼观察,显微镜下观察和化学分析 等。
临床基因扩增检验质量保证
采样及运输容器
• 标本的采集材料如棉签应为一次性使 用； • 采样及运输容器应为密闭的一次性无 菌装置； • 采样所用的防腐剂、抗凝剂及相关试 剂材料不应对核酸扩增及检测过程造 成干扰。
• 可概括为:(1)执行者：实验室技术人员；(2)目的： 监测实验室测定的重复性；(3)功能：决定了当批 测定的有效性，报告可否发出。是对实验室测定 的即时性评价。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集时间对扩增检测结果 的影响
• 在疾病发展过程中，标本采集过早或过晚 都可能会给出假阴性结果。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集部位的准备
• 血液标本采集 • 分泌物标本:采集部位的清洁消毒 可去掉污染的微生物或其它杂物, 但应适度,过度清洁消毒有可能会 去掉或破坏靶微生物,故标本采集 部位的准备应由训练有素的人员进 行。
决定在实时的测定结果的可接受性。当EQA用来为执业许 可或实验室认证的目的而评价实验室操作时，常描述为实 验室能力验证（Proficiency testing, PT）。在以前的文献中， EQA常描述室间质量控制。
临床基因扩增检验质量保证
批 (Run)
• 在相同条件下所获得的一组测定。
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验质量保证
标本的类型和采集量
• 标本的类型: 血清(浆)、分泌物、痰、粪便、尿和 脑脊液等。 • 标本的采集量:应根据所测病原体而定。一般来说， 如果标本的量对病原体培养够用的话，则其量亦足 以用于核酸提取及其后的扩增检测。 • 对于定量测定来说，对标本的收集要求更为精确。
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验质量保证
标本运送
• 样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室。 • 样本中如加入了适当的稳定剂,如用于RNA测定加入
GITC的血清(浆)样本和用于DNA测定的EDTA抗凝血 等,则可在室温下运送或邮寄。 • 实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床样本的 运送条件作出相应的规定。
临床基因扩增检验质量保证
质量保证、室内质控和室间质评之间的关系
临床基因扩增检验质量保证
临床标本收集、运送、保存 及其质量控制
• 标本收集 • 标本保存 • 标本运送
临床基因扩增检验质量保证
标本收集
• 标本采集时间对扩增检测结果的影响 • 标本采集部位的准备 • 标本的类型和采集量 • 采样质量的评价 • 采样及运输容器 • 标本采集中的防污染
临床基因扩增检验质量保证
正态分布 的基本统 计学含义 可用均数 （X）、标 准差（s） 和概率来 说明。
临床基因扩增检验质量保证
ຫໍສະໝຸດ Baidu
临床基因扩增检验实验室 常规测定步骤
• 标本收集：选择测定项目、标本收集和保存。 • 实验室测定：标本接收、贴标签、样本处理、核酸
扩增、产物检测、测定的有效性和临床诊疗价值。 • 报告和解释：结果发出、结果解释和临床管理。
临床基因扩增检验质量保证
标本采集中的防污染
• 采集中要特别注意污染，防止混入 操作者的头发、表皮细胞、痰液等； • 如使用玻璃器皿，必须经高压灭菌， 以使可能存在的RNase失活。
临床基因扩增检验质量保证
标本保存
•靶核酸(尤其是RNA)易受核酸酶的作用而 迅速降解，因此标本的保存对于核酸扩增 测定的有效性极为重要。 •使用GITC作为稳定剂保存标本，标本可 在室温下稳定约7天。
临床基因扩增检验质量保证
标本保存
• 临床体液标本长期保存应在-70℃下。 • 如为提取核酸后用于DNA扩增分析的样
本，可于10 mmol/L Tris,1mmol/L EDTA(pH7.5～8.0)缓冲液中4 ℃下保存。 • 用于RNA扩增分析的样本，则应于上述 缓冲液中-80℃或液氮下保存。 • 核酸的乙醇沉淀物则可于-20℃下保存。
临床基因扩增检验的 质量保证
卫生部临床检验中心 李金明
临床基因扩增检验质量保证
质量保证 (Quality Assurance,QA)
•为一产品或服务满足特定质量
要求提供充分可信性所必要的 有计划的和系统的措施。
临床基因扩增检验质量保证
室内质量控制（Internal Quality Control,IQC)的概念
临床基因扩增检验质量保证
理想的核酸扩增实验室设计A
产物分析区
临床基因扩增检验质量保证
临床基因扩增检验的室内质量控制
•测定前的质量控制 •核酸样本的制备及其质量控制 •统计学质量控制 •质量控制的评价
临床基因扩增检验质量保证
测定前质量控制
•实验室设施、仪器设备及管理 •理想的试剂和操作方法 •人员培训
临床基因扩增检验质量保证
实验室设施、仪器设备及管理
• 临床基因扩增检验实验室应有充分合理 的空间、良好的照明和空调设备 ； • 实验室仪器设备应保养良好，实验用品 要达到相应的要求。加样器的校准？带 滤塞吸头的使用及质检？离心机？热循 环仪？水浴箱和/或恒温干浴仪？酶标仪 和洗板机？
临床基因扩增检验质量保证
室间质量评价（External Quality Assessment, EQA）
• 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位 机构，采取一定的办法，连续、客观地评价实验室的结果， 发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。 这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用来
定义
• 正态分布(Gaussian distribution) 当一质控物用同一 方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多 时，如以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相 应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中 为所有测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，亦 即正态分布，又称高斯分布。
采样质量的评价
• 血清(浆)标本:溶血、脂血等；
• 分泌物、痰：评价内容包括细胞组成，所需类型细胞 的数量和核酸总量。 评价方法：包括肉眼观察,显微镜下观察和化学分析 等。
临床基因扩增检验质量保证
采样及运输容器
• 标本的采集材料如棉签应为一次性使 用； • 采样及运输容器应为密闭的一次性无 菌装置； • 采样所用的防腐剂、抗凝剂及相关试 剂材料不应对核酸扩增及检测过程造 成干扰。