碘显色法测定烟叶淀粉含量

碘显色法测定烟叶淀粉含量实验原理：

为了快速准确地测定烟草中的淀粉含量，借鉴食品中淀粉的测定，建立了碘显色法测定烟样中淀粉含量的方法。即在600nm处测定淀粉一碘反应液的吸光度，再根据淀粉标准曲线计算出烟草中的淀粉含量。

实验仪器和试剂：

仪器：分光光度计、电子天平

试剂：可溶性淀粉（标样）、碘和碘化钾（AR)、蒸馏水

实验方法：

一、溶液配制

1 碘-碘化钾溶液：精确称取0.5000gI2和5.000gKI于烧杯中，用蒸馏水溶解后转入到250mL容量瓶中，定容。

2 淀粉标准储备液：精确称取0.1500g直链淀粉和0.6000g支链淀粉于烧杯中，用沸水完全溶解、冷却后，分别转入500mL容量瓶中，定容摇匀后各取30mL移入到同一个100mL容量瓶中，定容后得到了淀粉混合标准溶液。

3 40％高氯酸溶液：市售的高氯酸如果要配置精确就必须先标定下它的具体浓度，这个浓度是质量分数的。如果要求不精确就可以用70%做为它的浓度了，然后进行稀释就好了。

4 80%乙醇-氯化钠饱和溶液：加入过量的氯化钠于80%的乙醇中，超声搅拌溶解后，直到溶液里还有没有溶解的氯化钠或者有氯化钠析

出，此时转移上清液即可。

二、标准曲线的制作

分别移取淀粉混合标准工作液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.O ml 置于50ml容量瓶中，加入5ml 40％高氯酸溶液，用蒸馏水定容，再取10ml定容后的溶液加1ml碘一碘化钾溶液使其显色，选定600nm为吸光波长，利用分光光度计检测。根据所测数值作出淀粉的标准曲线。其中x代表溶液中的溶液质量(单位为mg)，Y代表吸光度值，R2=0.999要在以上。

三、样品测定

准确称取磨碎的烟叶(过40目筛)O.2000g置于具塞三角瓶中，加入25 mL 80％的乙醇-氯化钠饱和溶液，50℃条件下振荡20min后过滤，再向滤渣中加入10 mL 40％高氯酸溶液，室温下振荡25 min，然后加入10 mL蒸馏水过滤，并将滤液置于100 mL容量瓶中，定容摇匀后即成待测液。取10ml待测液加1 mL碘-碘化钾溶液使其显色，在600 nm测定吸光度，然后从工作曲线上查出对应的含量。