蔬菜农药残留快速检测记录表
蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测
蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测（KJ201710）1范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。
本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。
酶抑制（率）法（分光光度法）2原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1丙酮（CH3COCH3）。
3.1.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。
3.1.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.45,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（C14H8N2O8S2）。
3.1.5碳酸氢钠（NaHCO3）。
3.1.6碘化乙酰硫代胆碱（ C7H16INOS）。
3.1.7pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。
3.1.8显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。
3.1.9底物：取125 mg碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。
保存期不超过两周。
3.1.10乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。
—1—3.2 参考物质3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥98%。
表1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量3.3 标准溶液的配制3.3.1克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。
实验2 乙酰胆碱酯酶抑制法快速测定果蔬中的残留农药
K 0K t 吸光度A实验二乙酰胆碱酯酶抑制法快速测定果蔬中的残留农药目前有机磷、氨基甲酸酯类农药是我国大量使用的杀虫剂，虽然这类农药与过去使用的有机氯农药相比，降解速度较快，但在果蔬中的残留仍然较为严重。
由于该类农药能抑制人体内乙酰胆碱酯酶的生理活性，神经传导因此受阻，引起神经麻痹乃至死亡，对人类健康造成极大危害。
对于果蔬中的农药通常采用气相色谱等方法进行分析，但分析时间长，操作步骤烦琐，适用于实验室分析。
长期以来在大部分果蔬市场中，通常采用乙酰胆碱酯酶抑制法进行快速检测，即以乙酰胆碱酯酶作为检测试剂，采用农药残留检测仪，根据乙酰胆碱酯酶活性变化的程度来测定果蔬样品中的残留农药。
一、 实验目的1． 了解果蔬中残留农药的分析方法；2． 掌握酶抑制分析方法的原理及操作方法； 3． 理解农药残留性评价的意义。
二、 实验原理有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，酶抑制法就是根据这一昆虫毒理学原理，对农药残留进行检测。
以乙酰胆碱为底物，在乙酰胆碱酯酶（ACHE ）的作用下，乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸，胆碱和二硫双对硝基苯甲酸（DNTB ）产生显色反应，使反应液呈黄色（于410nm 处有最大吸收峰）。
根据酶促反应动力学原理，在没有有机磷和氨基甲酸酯类农药存在时，底物在酶的催化作用下发生水解，反应速率可以用吸光度值随时间的变化率K 0来表示。
当有机磷和氨基甲酸酯类农药加入到酶的显色体系中时，农药抑制了酶的活性，影响显色体系的反应速度，此时体系吸光度随时间的变化率为K t ，则有机磷和氨基甲酸酯类农药对酶的活性的抑制率Y 的计算公式如下：%10000⨯-=K K K Y tK 0：空白样品的吸光度随时间变化曲线的斜率值K t ：样品溶液的吸光度随时间变化曲线的斜率值其中K 0和K t 都可通过以下过程进行推导和计算。
每日蔬菜农残检测报告
每日蔬菜农残检测报告
每日蔬菜农残检测报告
概述
蔬菜是人们日常饮食中不可或缺的一部分，但由于现代农业生产过程
中广泛使用化学农药和化肥，蔬菜中可能残留有害物质，对人体健康
造成潜在威胁。
每日对市场上销售的蔬菜进行农残检测显得尤为重要。
检测方法
目前，常用的蔬菜农残检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、液质联用法等。
这些方法可以对多种农药及其代谢物进行快速、准确
的定量分析。
检测项目
根据国家标准《食品安全国家标准食品中最大残留限量》（GB 2763-2019），常见的蔬菜农药类别包括有机磷、氨基甲酸酯、三唑类、苯
并咪唑类等。
在实际检测过程中，还应注意其他可能污染蔬菜的因素，如重金属、真菌毒素等。
结果解读
根据国家标准，蔬菜中农药残留量应该低于最大残留限量。
如果检测
结果超过限量，则需要采取相应措施，如销毁、退货等。
值得注意的是，即使蔬菜中农药残留量未超过限量，也不代表完全安全。
在购买蔬菜时，消费者应尽可能选择有机蔬菜或者自己种植。
市场情况
近年来，由于人们对食品安全的日益重视，市场上出现了越来越多的有机蔬菜和无公害蔬菜。
同时，政府也加强了对农产品质量安全的监管力度。
这些举措一定程度上保障了消费者的健康权益。
结论
每日对市场上销售的蔬菜进行农残检测是保障人们饮食安全的重要手段。
消费者也应提高食品安全意识，在购买蔬菜时尽可能选择有机或无公害产品，并注意清洗处理。
蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测(KJ201710)
附件蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测（KJ201710）1范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。
本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。
酶抑制（率）法（分光光度法）2原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1丙酮（CH3COCH3）。
3.1.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。
3.1.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.45,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（C14H8N2O8S2）。
3.1.5碳酸氢钠（NaHCO3）。
3.1.6碘化乙酰硫代胆碱（ C7H16INOS）。
3.1.7pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。
3.1.8显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。
3.1.9底物：取125 mg碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。
保存期不超过两周。
3.1.10乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。
—1—3.2 参考物质3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥98%。
表1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量3.3 标准溶液的配制3.3.1克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。
农药残留快速检测流程(卡片法)
农药残留快速检测流程一、前处理(一) 市场抽样：市场蔬菜样品的抽取应从同一货批的不同位置随机取样。
1、包装蔬菜的抽样：对于包装蔬菜（周转箱、纸箱、袋装等），同一货批样品，随机抽样，每件样品的取样量为1公斤。
2、散装蔬菜的抽样：散装蔬菜的抽样应与其总量相适应，每一货批蔬菜至少抽取5个样点。
在蔬菜个体较大情况下（大于2kg/个，样品至少由5个个体组成。
（二）样品的取样、制备和保存1 随机取5-10克样品（叶菜类取叶尖部位，瓜果类连皮带肉取样），放入小烧杯中，用剪刀剪成0.5cm*0.5cm大小，加蒸馏水至刚好将样品浸没。
2 置于超声波清洗器中震荡3分钟（如没有超声波清洗器可以用玻璃棒搅动，使菜叶与水分充分接触用手振摇1分钟）。
3 第一批最好做9个检样，同时做一个纯净水空白对照。
4 每剪完一个样品，剪刀要洗净后方可处理另一个样品，以免互相污染。
5、样品制备：将抽取的蔬菜样品混合，缩减成两份，一份作为检验样品，一份作为留样。
6、样品保存：样品应尽快检测。
当天不能检测，应保存于4度冷藏室中。
留样应低温冷冻保存。
二、样品测定步骤1 将农药残留速测仪接上电源预热，达到设定温度后即鸣笛提示。
取出速测卡，先将透明膜盖揭去，将速测卡沿中线对折一下，按农药残留速测仪说明书中的要求，将橙色药片向上插入试纸槽中。
2 用滴管吸取少量提取液，滴三滴至药片上，使其形成一个饱满的水珠。
3 加样完毕后，按开始键（START），速测仪自动计时，10分钟反应结束后会发出急促的提示音，此时合上仪器上盖，让橙红色药片与白色药片接触，3分钟显色反应完成后发出和缓的提示音。
结果判定打开速测仪上盖，观察和记录农药速测卡白色药片的颜色变化，蓝色为阴性，表明合格；浅蓝色为弱阳性，有微量农药残留，通常小于1mg/kg；白色为强阳性，表明农药残留大于1mg/kg不合格。
三、检测后处理1 将前处理装置，包括烧杯、滴管、剪刀等清洗干净，以免交叉污染。
2 用纸巾将仪器清洁，包括残留的水珠、菜叶、药片试剂。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)资料
➢ 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操 作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt
透射光 It
原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产 生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
酶抑制率法对部分农药的检出限
农药名称
敌敌畏 对硫磷 辛硫磷 甲胺磷 马拉硫磷
乐果
检出限 mg/kg
0.1 1
0.3
2
4 3
农药名称
氧化乐果 甲基异柳磷 灭多威 丁硫克百威 敌百虫 呋南丹
检出限 mg/kg
0.8 5
0.1Байду номын сангаас
0.05
0.2 0.05
说明
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液 中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处 理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿 素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少 色素的干扰。
当温度条件低于37° C，酶反应的速度随之放慢，加入酶液 和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定， 应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化D A0值在0.3 以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液 放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸 光度变化D A0值＜0.3 的原因：一是酶的活性不够，二是温 度太低。
酶抑制法快速检测蔬菜中农药残留灵敏度与准确性的研究
酶抑制法快速检测蔬菜中农药残留灵敏度与准确性的研究姚晓寰（深圳市计量质量检测研究院，广东深圳 518000）摘 要：本文对酶抑制法快速检测蔬菜中农药残留的灵敏度与准确性进行验证，分别使用酶抑制快速检测方法与气相色谱方法对10类50份蔬菜样品进行敌敌畏等10种有机磷农药残留量的检测。
结果表明，蔬菜中农药残留的酶抑制快速检测方法灵敏度与准确性可以满足快检需求，其对50批次实际样品的检测结果与气相色谱方法检测结果基本相符，能够满足基层市场监管部门和果蔬市场监控蔬菜质量的需求。
关键词：蔬菜；农药残留量；快速检测Sensitivity and Accuracy of Enzyme Inhibition Method for Rapid Detection of Pesticide Residues in VegetablesYAO Xiaohuan(Shenzhen Institute of Metrology and Quality Testing, Shenzhen 518000, China) Abstract: This article verifies the sensitivity and accuracy of enzyme inhibition method for rapid detection of pesticide residues in vegetables. The enzyme inhibition rapid detection method and gas chromatography method were used to detect 10 types of organic phosphorus pesticide residues such as dichlorvos in 50 vegetable samples from 10 categories. The results show that the sensitivity and accuracy of the enzyme inhibition rapid detection method for pesticide residues in vegetables can meet the needs of rapid detection. The detection results of 50 batches of actual samples are basically consistent with the results of gas chromatography, which can meet the needs of grassroots market regulatory departments and fruit and vegetable markets to monitor vegetable quality.Keywords: vegetables; pesticide residues; quick detection有机磷农药以其高效广谱、残留期短等优点，在蔬菜种植中应用十分广泛。
试验十蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 )方法一快速卡法一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色) ，有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；2、pH 7.5磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠［Na2HPO4?12HO］与1.59g无水磷酸二氢钾［KH2PQ］，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：1 、整体测定法(1)选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片，取5g防入带盖瓶中，加入10 mL 缓冲溶液，振摇50 次，静置2min 以上.(2)取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 C 恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
(3)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法(粗筛法)( 1 )擦去蔬菜表面泥土，滴2~3 滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
(2)取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
(3)放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 C恒温装置中放置10 min。
预反应10 min , 预反应后的药片表面必须保持湿润。
(4)将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：1结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
农药残留快速检测说明书
农药残留快速检测说明书执行标准:GB/T 5009.199-2003一、试剂保存配制前均为冷冻保存，有效期18个月（0-5℃冷藏保存为12个月）。
二、试剂配制缓冲液：取一包用510ml蒸馏水摇匀溶解后常温备用。
底物：取一瓶加入10ml蒸馏水摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
酶液：取一瓶加入10ml缓冲液摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
显色剂：取一瓶加入10ml缓冲液摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
三、检测样本制备1、取有代表性的蔬菜除去泥土，用天平称取2g，叶菜取叶片部分，瓜果取皮4g。
2、将菜样剪成1cm见方大小置于小烧杯内，加入10ml缓冲液，震荡1-2分钟。
3、将烧杯中的浸泡液用移液管吸取上清部分2.5ml移入另一试管内，即为样本提取液。
四、测试取一支试管加入2.5ml缓冲作为空白对照,然后与各样本提取液的试管分别依次加入酶液 100ul 显色剂 100ul 摇匀，放置10分钟底物100ul摇匀后马上倒入比色皿中然后立即放入仪器，按“开始空白分析”键后等待检测结果。
(做过对照后，接下来的检测则按“开始样品分析”，但重新开机或更换试剂后需要再做一次空白对照)注：检测时间为3分钟的空白对照值△A O应≥0.3；当温度低于20℃时应该采取加温措施，以提高数据的准确性；若△A O＜0.3，又无条件加温时，空白及样品的酶量可加倍。
五、结果判定抑制率＜50%时判定为合格；抑制率≥50%时农药残毒超标，必要时可进行定量检测。
六、注意事项1、试剂使用时，用一瓶配制一瓶，用前应摇匀；2、试剂应避免交叉污染，吸出后的试剂不可再打回瓶内；七、包装规格：500份，（酶、底物，显色剂）各1瓶，提取试剂2包。
农药残留快速检测说明书执行标准:GB/T 5009.199-2003一、试剂保存配制前均为冷冻保存，有效期18个月（0-5℃冷藏保存为12个月）。
二、试剂配制缓冲液：取一包用510ml蒸馏水摇匀溶解后常温备用。
蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测
近年来，由蔬菜中农药残留超标而引起的中毒事故时有发生，因此对蔬菜中农药残留的监测显得尤为重要。
在蔬菜生产中，所使用的农药主要包括有机磷类和氨基甲酸酯类农药[1]。
传统的有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留分析方法主要有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法及质谱联用[2]等，这些方法测试灵敏、准确度高，但预处理较为烦琐，测试时间较长，且仪器比较昂贵，对仪器的使用条件和操作人员要求也比较严格，只适用于实验室检测[3]。
如果能在蔬菜上市前快速检测出其农药残留是否超标，将能防止许多农药中毒事件的发生，确保消费者的安全。
为了满足市场需求，九十年代快速检测方法应运而生[4]，其中植物酯酶抑制法以其操作简单、方法灵敏、检测快速、原料来源广、成本低廉、保存期长、适合现场检测等优点被广泛使用[5]。
目前用于快速检测的植物酯酶主要是从大米、小米、玉米、面粉[6]、大豆[7]等粮食作物中提取，在很大程度上造成了粮食的浪费。
本实验通过使用从苜蓿这种非粮食作物中提取的植物酯酶，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，通过对蔬菜中常用的氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药的敏感性研究，确定了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明，该方法农药残留最低检测限较低，可以满足国内和欧盟对以上5种有机磷农药最低残留量的检测要求。
1试剂与仪器1.1仪器UV-2802PCS 型紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司），高速冷冻离心机（法国JOUAN ），蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测王亚飞，张金艳（黑龙江八一农垦大学文理学院，大庆163319）摘要：通过研究蔬菜中常用的5种有机磷农药对植物酯酶的抑制作用，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，确立了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明：该方法能快速检测氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药在蔬菜中的残留，最低检测限范围为0.002~0.05μg ·mL -1。
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留以及对该检测方法的评价王志波（如皋市农产品质量检验测试中心 226500）摘要：在人们广泛关注食品质量安全的今天，作为监控农产品质量安全的最直接的有效手段，蔬菜农药残留速测技术得到迅速发展。
蔬菜农药残留速测法主要有酶抑制法和化学试剂速测法两种。
它们都具有快速、简便、灵敏、成本低等特点。
在基层监督部门、蔬菜生产基地及市场得到广泛应用。
本文根据行业标准《NY／T448-2001》，利用酶抑制法和相关农残速测仪及配套试剂盒对我市主要批发市场、农贸市场、超市的蔬菜样品进行了检测。
关键词：质量安全；农药残留；速测；酶抑制Abstract：The increasing concern on the food security has stimulated the development of methods for rapid detection of pesticide residues which is the most direct and most effective means of quality-safety monitoring of agricultural products. The methods of rapid detection of pesticide residues on vegetables, including enzyme inhibition method and chemical method, have been widely used in primary regulation departments、vegetable production bases and markets due to their simple, rapid, sensitive and low costing characters. Vegetable samples collected from wholesale markets、farmer markets、supermarkets were detected by enzyme inhibition method using pesticide residues detector coupled with reagent set according to standard (NY／T448-2001) in this paper.Key words: agricultural products security;Pesticide residues; rapid test;enzyme inhibition1仪器与试剂1.1检测仪器RP－410速测仪，T－200型电子天平，电热恒温培养箱，可调移液枪（10～100微升；1-5毫升），配套玻璃仪器及其它配件。
农药残留检测结果记录表
莴苣
2月5日
1
1.399
合格
朱素华
2
8.821
合格
3
20.39
合格
莲花白
2月5日
1
17.35
合格
朱素华
2
-2.731
合格
3
2.432
合格
番茄
2月5日
1
0.739
合格
朱素华
2
4.405
合格
3
11.60
合格
萝卜
2月5日
1
-1.873
合格
朱素华
2
6.230
合格
3
4.492
合格
菠菜
2月5日
1
-8.330
合格
朱素华
2
4.740
合格
3
-5.276
合格
农药残留检测结果记录表
采样地点：建新农贸市场
蔬菜
品种
检测时间
检测结果
检测人
样品
抑制率(%)
结果判定
儿菜
2月5日
1
-1.611
合格
朱素华
2
10.97
合格
3
14.75
合格
萝卜
2月5日
1
15.95
合格
朱素华
2
11.85
合格
3
8.588
合格
花菜
2月6日
1
13.77
农药残留检测结果记录表
采样地点：藏经寺农贸市场
蔬菜
品种
检测时间
检测结果
检测人
样品
抑制率(%)
结果判定
实验二 乙酰胆碱酯酶抑制法快速测定果蔬中的残留农药
K 0K t 吸光度A实验二乙酰胆碱酯酶抑制法快速测定果蔬中的残留农药目前有机磷、氨基甲酸酯类农药是我国大量使用的杀虫剂，虽然这类农药与过去使用的有机氯农药相比，降解速度较快，但在果蔬中的残留仍然较为严重。
由于该类农药能抑制人体内乙酰胆碱酯酶的生理活性，神经传导因此受阻，引起神经麻痹乃至死亡，对人类健康造成极大危害。
对于果蔬中的农药通常采用气相色谱等方法进行分析，但分析时间长，操作步骤烦琐，适用于实验室分析。
长期以来在大部分果蔬市场中，通常采用乙酰胆碱酯酶抑制法进行快速检测，即以乙酰胆碱酯酶作为检测试剂，采用农药残留检测仪，根据乙酰胆碱酯酶活性变化的程度来测定果蔬样品中的残留农药。
一、 实验目的1． 了解果蔬中残留农药的分析方法；2． 掌握酶抑制分析方法的原理及操作方法； 3． 理解农药残留性评价的意义。
二、 实验原理有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，酶抑制法就是根据这一昆虫毒理学原理，对农药残留进行检测。
以乙酰胆碱为底物，在乙酰胆碱酯酶（ACHE ）的作用下，乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸，胆碱和二硫双对硝基苯甲酸（DNTB ）产生显色反应，使反应液呈黄色（于410nm 处有最大吸收峰）。
根据酶促反应动力学原理，在没有有机磷和氨基甲酸酯类农药存在时，底物在酶的催化作用下发生水解，反应速率可以用吸光度值随时间的变化率K 0来表示。
当有机磷和氨基甲酸酯类农药加入到酶的显色体系中时，农药抑制了酶的活性，影响显色体系的反应速度，此时体系吸光度随时间的变化率为K t ，则有机磷和氨基甲酸酯类农药对酶的活性的抑制率Y 的计算公式如下：%10000⨯-=K K K Y tK 0：空白样品的吸光度随时间变化曲线的斜率值K t ：样品溶液的吸光度随时间变化曲线的斜率值其中K 0和K t 都可通过以下过程进行推导和计算。
KJ201710蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法(2017年第113号公告)
附件蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测（KJ201710）1范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。
本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。
酶抑制（率）法（分光光度法）2原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1丙酮（CH3COCH3）。
3.1.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。
3.1.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.45,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（C14H8N2O8S2）。
3.1.5碳酸氢钠（NaHCO3）。
3.1.6碘化乙酰硫代胆碱（ C7H16INOS）。
3.1.7pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。
3.1.8显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。
3.1.9底物：取125 mg碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。
保存期不超过两周。
3.1.10乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。
—1—3.2 参考物质3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥98%。
表1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量3.3 标准溶液的配制3.3.1克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着现代城市化发展和经济的迅速增长，人们对食品的质量和安全性越来越关注。
由于蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的组成部分，因此其安全性备受关注。
然而，蔬菜中存在着各种农药残留，其中包括有机磷和氨基甲酸酯类农药，这些化合物被广泛用于蔬菜生产中的虫害和病害防治。
因此，蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测具有重要的现实意义。
有机磷和氨基甲酸酯类农药对人体健康有潜在的危害。
有机磷类农药与乙酰胆碱酯酶的结合会引起中毒作用，而氨基甲酸酯类农药也有潜在的毒性。
在食品中，这些化合物的残留量可能会对人体健康造成不利影响。
因此，为了保障食品安全，有必要开发一种快速和准确的检测方法，以检测有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留量。
目前，常用的农药残留检测方法包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相质谱法等。
这些方法通常需要耗费大量的时间和成本，且需要复杂的仪器设备和高度技术人员的操作技能。
这使得这些方法不适合于在食品加工和销售过程中进行快速检测。
近年来，基于生物技术手段，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光探针法等新的农药残留检测方法得到了广泛的研究和应用。
这些方法具有快速、准确、低成本和易操作等优点，且可以实现高通量检测和多重残留物的同时检测。
其中，基于ELISA技术的快速检测方法是目前应用最广泛的一种方法。
ELISA技术是一种基于免疫反应原理的化学测量方法，通常用于快速检测多种化合物的残留量。
它通过检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的抗原抗体结合反应，确定蔬菜中的农药残留量。
基于ELISA技术的农药残留检测方法具有很多优势。
首先，它可以提高检测速度和准确性，同时可以检测多种化合物的残留量。
其次，它可以在不需要复杂的化学试剂和设备的情况下进行实验操作，降低检测成本和提高检测效率。
此外，ELISA技术还能够在食品加工和销售过程中进行快速检测，以保障食品安全。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
技术应用J1392019年6月·下蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测袁柱良1 李海英2（1.2东莞市常平镇农业技术服务中心，广东 东莞 523560）摘 要 蔬菜中农药残留作为食品安全管理的重要内容，关于检验蔬菜中的农药残留量主要是检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
气相色谱法是检测这两类农药的主要标准方法，尽管所具有的灵敏度较高，但是需要耗费较长时间，不适合在临床检验中进行大力推广。
为此，找到快速检测方法刻不容缓。
关键词 蔬菜；有机磷；氨基甲酸酯类农药；残留量；快速检测通过检测农产品中的农药残留可充分确保农产品的质量安全，为此农产品检测的重点在于科学的检测农药残留量。
当下，我国有一百多种有机磷与氨基甲酸酯类农药，质量参差不齐，品种复杂，在检测时很难有效的应用色相谱方法[1]。
若使用CL-BIII残留农药测定仪，对于假阳性问题很难得到有效避免。
现就两种快速检测方法进行详细介绍，详情如下。
1 酶抑制法1.1 原理有机磷与氨基甲酸酯类农药在一定情况下能够对胆碱酯酶的正常功能进行有效抑制，且抑制率的高低直接取决于农药浓度。
通过对待测样品的检测可掌握对乙酰胆碱酶活性抑制情况的了解，根据紫外可见分光光度计原理和412nm 波长的吸光度随时间的变化值可将抑制率计算出来，同时能够初筛/定性分析待测样品。
阴性：抑制率不足50%、阳性：超过50%[2]。
1.2 调试仪器采用CL-BIII 八通道残留农药测定仪。
将电源接通后，开机进行半小时预热；设置参数，选择通道，对照试样与样品试样可分别在第1、2-8通道放置；设置当日测试日期；调0使吸光度为0.000.1.3 试剂配制显色剂：取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氢钠15.6mg，20ml 提取溶解，保存在4℃条件下。
提取溶液：取无水磷酸氢二钠11.9g、磷酸二氢钾3.2g，溶解时采用1000ml 蒸馏水，所制成的提取液pH 为8.0.乙酰胆碱酯酶：使用提取液进行溶解，控制3分钟吸光度变化值超过0.3，摇匀后保存在4℃条件下备用，保存期小于4天。