总膳食纤维国标测定方法 符合 AC等
膳食纤维测定方法
膳食纤维的测定方法【摘要】膳食纤维被称为人体的第七营养素，对维持人体健康具有重要作用。
膳食纤维通过发酵产物短链脂肪酸和对肠道菌群的调节作用从而影响肠道健康，本文对膳食纤维的测定方法进行了综述。
【关键词】膳食纤维；定义；测定膳食纤维已被确认为与传统的六大营养素并列的“第七营养素”，对维持人体健康具有重要的生理作用。
膳食纤维的理化特性概括起来是膨胀作用、持水能力、胶体形成、离子交换、改善胃肠微生物菌落和产生低热量等。
这些特性产生的生理作用如下：使人产生饱腹感并抑制进食，从而预防肥胖；润肠通便，防治肠道疾病和便秘；调控血清胆固醇，降血压，防治冠状动脉硬化，胆石症和预防心脑血管疾病；降血糖，防治糖尿病等。
目前，结肠癌、炎症性肠炎和其他结肠紊乱疾病已经严重影响身体健康。
膳食纤维为肠道微生物生长提供均衡的能量和营养，这是维持结肠生态系统平衡所必需的，另外，膳食纤维的发酵，特别是丁酸发酵，有利于结肠健康。
目前国内外业已研究开发的膳食纤维共有6大类约30余种，其中实际生产和应用的不超过10种。
一、膳食纤维膳食纤维（dietary fiber，df）被认为是食物中不被人体胃肠道消化酶水解，但能被肠道微生物消化的物质，特别是植物成分。
膳食纤维包括非淀粉多糖，如纤维素、半纤维素、树胶、果胶，以及木质素、抗性糊精和抗性淀粉。
二、膳食纤维的测定世界卫生组织建议的总膳食纤维摄入量下限为每人每天27.0克，上限为每人每天40.0克。
由此可见：膳食纤维检测结果的表示及产品标签标示等方面的问题应该作为膳食纤维研究中的又一个重要方面，而检测结果是由膳食纤维的检测方法和检测标准决定的，因此有必要建立统一的检测方法和标准。
df的不同测定方法因其测定原理不同结果差异较大。
自20世纪60年代初以来，分析化学家们建立起大量的检测方法，具有代表性的几种方法为非酶重量法、酶-重量和酶-化学法。
（1）非酶重量法。
非酶重量法又称粗纤维测定法，由einhof于1801-1809年建立。
膳食纤维含量测定方法
酶-重量法1.原理：样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。
总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。
不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。
SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。
TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。
2.适用范围AOAC991.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。
3.仪器3.1烧杯：400或600ml高脚型。
3.2过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex60ml （Corning No.36060buchner，或同等的）。
如下处理：（1）在灰化炉525℃灰化过夜。
炉温降至130℃以下取出坩埚。
（2）用真空装置移出硅藻土和灰质。
（3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。
（4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。
（5）在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。
（6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至0.1mg。
3.3真空装置：（1）真空泵或抽气机作为控制装置。
（2）1L的厚壁抽滤瓶。
（3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。
3.4振荡水浴箱：（1）自动控温使温度能保持在98±2℃。
（2）恒温控制在60℃。
3.5天平：分析级，精确至±0.1mg。
3.6马福炉：温度控制在525±5℃。
3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。
3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。
干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。
3.9PH计：注意温控，用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。
3.10移液管及套头：容量100μl和5ml。
3.11分配器或量筒：（1）15±0.5ml，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。
国标中膳食纤维的含量要求
国标中膳食纤维的含量要求
一、总膳食纤维
根据我国国标规定，食品中总膳食纤维的含量最小值应为其质量分数的1.5倍，最大值为5g/100g食品。
二、可溶性膳食纤维和不可溶性膳食纤维
根据我国国标规定，每100g食品中，膳食纤维含量大于1.5g/100g食品的，可认定为含膳食纤维食品。
其中，可溶性膳食纤维应占膳食纤维总质量的50%以上。
三、粗纤维
粗纤维是指植物细胞壁中的木质素、纤维素、半纤维素、果胶、树胶等物质。
在我国国标中，粗纤维的含量被视为食品中膳食纤维的一部分。
四、木质素、纤维素、半纤维素
木质素、纤维素和半纤维素是植物细胞壁中的主要成分，也是膳食纤维的主要组成部分。
在我国国标中，这些物质的含量被视为食品中膳食纤维的一部分。
五、果胶、树胶
果胶和树胶是植物细胞壁中的一种多糖类物质，也是膳食纤维的一种。
在我国国标中，这些物质的含量也被视为食品中膳食纤维的一部分。
六、黏胶、藻类多糖和其他多糖
黏胶、藻类多糖和其他多糖也是膳食纤维的一种。
在我国国标中，这些物质的含量也被视为食品中膳食纤维的一部分。
总结：在我国国标中，对膳食纤维的含量有明确的要求。
其中，总膳食纤维的含量应在其质量分数的1.5倍以上，可溶性膳食纤维应占膳食纤维总质量的50%以上。
此外，粗纤维、木质素、纤维素、半纤维素、果胶、树胶、黏胶、藻类多糖和其他多糖等物质都被视为食品中膳食纤维的一部分。
食品中总膳食纤维的测定方法及改进措施研究
I FOOD INDUSTRY I 121食品中总膳食纤维的测定方法及改进措施研究文 罗丹广东产品质量监督检验研究院食物成分会被水解。
最后，通过测量未被分解的膳食纤维残留量，可以计算出样品中的总膳食纤维含量。
3.2高性能液相色谱法（HPLC）高性能液相色谱法（HPLC ）基于化学物质在液相中的分离和检测。
在HPLC 中，食品样品通常会经过前处理，以去除干扰物质，然后将其溶解在适当的溶剂中。
样品溶液随后被注入高性能液相色谱仪器中，经过色谱柱，其中包含固定相，如凝胶或其他材料。
由于样品中的化合物与固定相之间的亲和性不同，导致其在色谱柱中的流动速度也不尽相同，进而实现化合物的有效分离。
在分离后，化合物会通过检测器，通常是紫外光或荧光检测器，进行检测和定量。
通过测量峰面积或峰高度，可以确定样品中的膳食纤维含量。
4.现有测定方法存在的不足4.1精确性和准确性的挑战首先，对于酶解法来说，其中的一个主要问题是酶的活性和效率可能会受到多种因素的影响，如温度、pH 值和酶源的质量。
这些因素的变化可能导致不同实验条件下膳食纤维的酶解率有所不同，从而影响分析结果的准确性。
其次，样品的前处理步骤，如提取和洗涤，也可能影响膳食纤维的分离和测定，进一步增加了分析的误差。
最后，对于不同类型的膳食纤维，酶解法的适用性可能不同。
例如，对于某些水溶性纤维，酶解法可能不太适用，因为这些纤维在酶解过程中可能会被溶解或部分损失，导致低估其含量，这使得酶解法在区分不同类型纤维时存在局限性。
食品中总膳食纤维的测定方法是健康和营养研究以及食品工业中至关重要的一部分，其测量精度具有十分重要的影响。
本文对膳食纤维进行了论述，在此基础上探讨了膳食纤维的测定方法，即酶解法和高性能液相色谱法（HPLC ），同时对现有测定方法存在的不足进行了分析，并结合食品中总膳食纤维的测定特点，提出了针对性的改进措施，旨在促进食品中总膳食纤维测定水平的不断提高，为食品中膳食纤维的研究提供技术支持。
膳食纤维 标准方法
膳食纤维标准方法
膳食纤维是指人体无法消化吸收的碳水化合物类物质。
膳食纤维对人体健康具有重要的作用，包括促进消化系统健康、调节血糖和胆固醇水平、预防便秘以及控制体重等。
为了准确测量食物中的膳食纤维含量，需要进行标准方法的测定。
目前，国际通用的膳食纤维含量测定方法有两种：AOAC （Association of Official Analytical Chemists）方法和ISO （International Organization for Standardization）方法。
1. AOAC方法：AOAC方法是美国官方方法，也是国际上最常用的方法。
根据AOAC 991.43或AOAC 985.29方法，首先将食物样品经过一系列处理，如酶解、水解等，获得可溶性和不可溶性纤维。
然后，借助酶解、滴定、重量等技术手段，可以得到总纤维、不可溶性纤维和可溶性纤维的含量。
2. ISO方法：ISO方法是由国际标准化组织制定的方法，与AOAC方法相似。
ISO 13904和ISO 15954方法是常用的ISO 方法。
这些方法主要利用酶解、水解、甲弹法等技术，将膳食纤维分为不可溶性纤维和可溶性纤维，并使用滴定、重量等手段进行测定。
无论使用AOAC方法还是ISO方法，都需要进行样品的预处理、酶解、滴定等步骤，以获得准确的膳食纤维含量。
这些方法在实验室条件下进行，需要仪器设备和专业操作人员进行操作。
需要注意的是，虽然AOAC和ISO方法都是国际通用的标准方法，但在具体的实验操作过程中，可能会存在一些差异，因此在测定过程中应当依据相应的方法详细操作，并遵循实验室的操作规程。
总膳食纤维国标测定方法-符合AOAC等
总膳食纤维测定的介绍1、在α-淀粉酶的作用下，PH为6的磷酸盐缓冲溶液，95—100度下加热15分钟。
2、用蛋白酶在PH为7.5时60度培养30分钟。
3、用淀粉葡(萄)糖苷酶在PH为4.0---4.6下60度培养30分钟。
4、4体积的95%的乙醇沉淀。
5、过滤。
6、用78%和95%的乙醇和丙酮清洗沉淀物。
7、烘干称重。
8、干样可以拿去做凯氏定氮，也可以在525度的马弗炉里灰份5个小时，然后去称重。
不溶的膳食纤维的定义为进行烘干前用乙醇进行清洗并用温水洗涤后残留物。
总膳食纤维（TDF）—不溶膳食纤维= 可溶膳食纤维（SDF）标准酶法测定食品和饲料中的总膳食纤维量1、研磨分级样品2、在105度的烘箱烘干并恒重，在干燥箱中冷却到室温。
3、如果样品脂肪含量高于10%，需要用石油醚进行脱脂，在最终结果中再进行校正。
4、称出0.5—1克的样品，并转移到400毫升的烧杯中。
5、用α-淀粉酶在50毫升的PH为6的磷酸盐缓冲溶液中培养15分钟，培养温度为95—100度，温度可以用温度计控制。
6、冷却到室温，并用0.275 N 浓度的氢氧化钠溶液调节PH到7.5。
7、将烧杯和样品一起转移到磁力搅拌培养器中（GDE）。
8、在搅拌的情况下，加入蛋白酶在60度的情况下培养30分钟。
9、冷却到室温，用0.325的盐酸调节PH值为4.0—4.6。
10、在搅拌的情况下，加淀粉葡(萄)糖苷酶，在60度时培养30分钟。
11、通过加4体积的95%的乙醇沉淀可溶性膳食纤维，并且在室温下沉淀大约1个小时。
12、称量已经添加了0.5克的硅藻土(作为助滤剂)玻璃坩埚.13、将坩埚放在CSF6 (或者FIWE6)上,倒入上述操作的沉淀物,并用V ACUUM进行吸液排空,用78%的乙醇溶液进行洗涤转移沉淀物。
14、用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤玻璃坩埚中的沉淀物两次，再用10毫升95%的乙醇溶液洗涤两次，10毫升的丙酮溶液洗涤两次并排除废液。
膳食纤维的测定方法
膳食纤维的测定方法作者：赵升鹏周超进来源：《都市家教·上半月》2013年第05期【摘要】膳食纤维被称为人体的第七营养素，对维持人体健康具有重要作用。
膳食纤维通过发酵产物短链脂肪酸和对肠道菌群的调节作用从而影响肠道健康，本文对膳食纤维的测定方法进行了综述。
【关键词】膳食纤维；定义；测定膳食纤维已被确认为与传统的六大营养素并列的“第七营养素”，对维持人体健康具有重要的生理作用。
膳食纤维的理化特性概括起来是膨胀作用、持水能力、胶体形成、离子交换、改善胃肠微生物菌落和产生低热量等。
这些特性产生的生理作用如下：使人产生饱腹感并抑制进食，从而预防肥胖；润肠通便，防治肠道疾病和便秘；调控血清胆固醇，降血压，防治冠状动脉硬化，胆石症和预防心脑血管疾病；降血糖，防治糖尿病等。
目前，结肠癌、炎症性肠炎和其他结肠紊乱疾病已经严重影响身体健康。
膳食纤维为肠道微生物生长提供均衡的能量和营养，这是维持结肠生态系统平衡所必需的，另外，膳食纤维的发酵，特别是丁酸发酵，有利于结肠健康。
目前国内外业已研究开发的膳食纤维共有6大类约30余种，其中实际生产和应用的不超过10种。
一、膳食纤维膳食纤维（Dietary Fiber，DF）被认为是食物中不被人体胃肠道消化酶水解，但能被肠道微生物消化的物质，特别是植物成分。
膳食纤维包括非淀粉多糖，如纤维素、半纤维素、树胶、果胶，以及木质素、抗性糊精和抗性淀粉。
二、膳食纤维的测定世界卫生组织建议的总膳食纤维摄入量下限为每人每天27.0克，上限为每人每天40.0克。
由此可见：膳食纤维检测结果的表示及产品标签标示等方面的问题应该作为膳食纤维研究中的又一个重要方面，而检测结果是由膳食纤维的检测方法和检测标准决定的，因此有必要建立统一的检测方法和标准。
DF的不同测定方法因其测定原理不同结果差异较大。
自20世纪60年代初以来，分析化学家们建立起大量的检测方法，具有代表性的几种方法为非酶重量法、酶-重量和酶-化学法。
膳食纤维的测定方法
膳食纤维的测定方法
膳食纤维是指无法被人体消化吸收的植物性碳水化合物，主要包括可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。
目前常用的膳食纤维测定方法包括总膳食纤维测定和可溶性膳食纤维测定。
总膳食纤维测定方法：
1. 预处理：将样品中的可溶性膳食纤维去除，可以通过酶解、水解或碱解等方法进行。
2. 不溶性纤维测定：将预处理后的样品干燥并称重，然后在酸条件下水解，去除可溶性纤维，得到不溶性纤维的含量。
3. 可溶性纤维测定：将预处理后的样品加入酶解液中，在适当温度和时间下进行酶解，得到可溶性纤维的含量。
4. 计算总膳食纤维含量：将不溶性纤维和可溶性纤维的含量相加，得到总膳食纤维含量。
可溶性膳食纤维测定方法：
1. 预处理：将样品中的不溶性膳食纤维去除，可以通过酶解或机械破碎等方法进行。
2. 可溶性纤维测定：将预处理后的样品加入酶解液中，在适当温度和时间下进行酶解，得到可溶性纤维的含量。
这些方法可以使用不同的化学试剂和设备进行测定，常见的试剂有酸、酶和碱等。
测定方法的选择和优化需要考虑样品的性质、测定目的和仪器设备的可用性等因素。
纤维成分含量(公定质量百分率)
纤维成分含量（公定质量百分率）纤维成分含量（公定质量百分率）纤维成分是指由植物细胞壁中的纤维素和木质素组成的可溶性和不可溶性物质。
纤维成分对于人体健康非常重要，可以促进肠胃蠕动，预防便秘，降低胆固醇，控制血糖等等。
因此，在食品中添加纤维成分已成为一种普遍的做法。
食品中的纤维成分可以来源于自然食材，也可以添加剂的形式加入。
正式因为其在食品中的重要性，国家对于食品中纤维成分的含量也有所规定。
下面详细了解一下纤维成分含量的相关法规和标准。
1、法规和标准目前，我国对于食品中的纤维成分含量，是在《食品安全国家标准食品中纤维素的测定》中做出规定的。
在该标准中，纤维素的测定方法主要分为三种：酶解法、矿酸法和HPLC法，具体方法可参照国家标准22622-2013。
同时，标准还规定了不同种类食品中纤维成分的最低含量。
以谷物及其加工品为例，标准规定饼干、麦片、面包等谷物加工品中纤维素的最低含量为2.5g/100g（干物质），而五谷杂粮制品中该数值则取决于具体产品的性质和用途。
对于乳制品、肉制品和家禽蛋制品等非植物类食品，标准则规定纤维素100g中最低含量为0.5g。
2、纤维成分含量的制定纤维成分含量标准的制定是依据大量实验研究结果得出的。
根据研究发现，纤维成分的摄入量与肠道健康、心血管健康、血糖控制、减轻体重等方面有着密切关系，因此能够提供最佳营养效益的含量，也就成为了各个国家制定标准的标准。
不过，需要特别提醒的是，标准规定的纤维成分最低含量是根据健康人群的食品摄入需求来制定的。
因此，对于老年人、儿童以及患有相关疾病的人来说，食品中纤维成分的含量需要适当调整。
同时，纤维成分摄入过多也会对人体健康带来负面影响，如腹泻、疼痛等。
因此，食品中纤维成分的含量需要根据特定人群的需求来进行合理调整。
3、纤维成分含量的加工在食品加工过程中，纤维成分的含量容易受到不同的加工方法和工艺的影响。
有些加工过程会破坏食材中的纤维素或者在加工过程中减少纤维素的溶解度，从而降低食品中纤维成分的含量。
总膳食纤维国标测定方法符合AOAC等
算计
。量重的下剩后量重的土藻硅和埚坩掉减量重总的步前是量重的份灰 ,)克毫 1.0 度精(重称却冷中箱燥干在,时小个 5 干烘中炉弗马的度 525 在样的物淀 沉个二第,�52.6*N�量含白蛋的化消能不析分法方氏凯用样的物淀沉个一中其 。 �样复重的要需�量重的土藻硅和量重的埚坩掉 减量重的终最是量重的物淀沉。克毫 1.0 为度精重称�温室到却冷�上晚个一干 烘起一土藻硅和物淀沉同连埚坩璃玻将�中箱空真的度 07�中箱烘的度 501 在 。时小个半要需程过洗清个整� �作操上器仪�面表吹来气空的微细用�态状体 液持保�降下力能滤过的使膜滤的状胶果如。次 2 涤洗液溶酮丙的升毫 01�次 2 涤洗液溶醇乙的%59 的升毫 01�次 3 物淀沉涤洗液溶醇乙的%87 的升毫 02 用 。集收行进管导用液出滤�物淀沉的完解消 酶移转斗漏用。空真用利�中器滤过的�6EWIF� 6FSC 在放并重称起一土藻硅 同 。克毫 1.0 度精,时小个一重恒中箱烘的度 031 在埚坩璃玻,土藻硅的克 5.0 加添 。干晾中气空在�洗清水用�温室到却冷�时小 1 干烘炉弗马的度 525 在放�埚坩璃玻的净干全完。钟分 06 降沉下温室在�度 06 热预醇乙的%59 的升毫 082 �子拌搅掉拿 。钟分 03 养培浴水度 06 下况情的拌 搅续连在箔铝上盖�液溶� 酶粉淀糖萄葡 �酶苷糖)萄(葡粉淀的升毫 003 加添 。值 HP 制控计 HP 用,6.4—0.4 到 HP 节调酸 盐的 N523.0 用�温室到却冷。钟分 03 养培时度 06 在下况情的拌搅续连箔滤上 盖杯烧.)中液冲缓盐酸磷升毫 1 在放克毫 05(液溶酶白蛋的升微 001 加,度 06 到 降度温将水冷加添中 EDG 向,5.7 到 HP 节调液溶钠化氧氢的 N572.0 的升毫 01 用 。温室到却冷�出移中浴水从后然�度温好制控�钟分 51 持保度 001—59 在持保度温品样让�中浴水的度 001 到放。箔铝上盖,合混底彻,液溶 酶粉淀-α的定稳热的生微 001 加,子拌搅力磁加,中液溶冲缓酸磷的 6 为 HP 升毫 05 到合混,中杯烧的升毫 004 在,克毫 1.0 到度精重称�品样克 1 将。响影的果结 对素因等剂试掉去以除扣中果结从要后最 �行进中程过验实个整在该应验实白空
食品中膳食纤维含量的测定与分析
食品中膳食纤维含量的测定与分析随着人们健康意识的提升，越来越多的人开始关注食物中的营养成分，其中膳食纤维作为一种重要的营养物质备受关注。
膳食纤维在维持肠道健康、调节血糖和血脂、预防肥胖等方面起着重要的作用。
那么，如何准确测定食品中的膳食纤维含量呢？一、测定方法目前常用的测定食品中膳食纤维含量的方法包括酶解-重量法（AOAC 985.29）和酶解-HPLC法（AOAC 991.43），其中HPLC法相对较为准确和简便。
在使用HPLC法测定膳食纤维含量时，通常采用两种酶解方法，即使用α-淀粉酶和葡萄糖酸酶进行酶解。
通过比较未酶解样品和酶解后样品中的膳食纤维含量，可以计算出样品中的膳食纤维含量。
二、食品中膳食纤维的分析1.粗纤维含量的分析粗纤维是指食物中不容易被消化吸收的纤维部分，一般包括纤维素、半纤维素和木质素等。
粗纤维含量的分析是衡量食品中纤维素含量的一种方法，一般通过水解和洗涤的方式来进行。
首先，将食品样品经过一定时间的水解，然后用水或酸进行洗涤，最后干燥并称重。
所得的质量差值即为粗纤维的含量。
2.溶解性膳食纤维含量的分析溶解性膳食纤维是指在水中可溶解的膳食纤维，如果胶、树胶等。
溶解性膳食纤维含量的分析主要通过酶解-过滤的方法进行。
首先，将食品样品经过一定时间的酶解，然后用滤液进行过滤，将溶解性膳食纤维从样品中分离出来。
最后，将滤渣干燥并称重，所得的质量差值即为溶解性膳食纤维的含量。
3.不溶性膳食纤维含量的分析不溶性膳食纤维是指在水中不溶解的膳食纤维，如纤维素、半纤维素等。
不溶性膳食纤维含量的分析主要通过酶解-过滤的方法进行。
首先，将食品样品经过一定时间的酶解，然后用滤液进行过滤，将溶解性膳食纤维从样品中分离出来。
将滤渣干燥并称重，所得的质量即为不溶性膳食纤维的含量。
三、膳食纤维含量的参考范围根据世界卫生组织的建议，成年人每天的膳食纤维摄入量应为25-30克。
然而，现代人的饮食结构大部分偏向高脂肪、高糖分的食物，膳食纤维的摄入量普遍不足。
膳食纤维国标测定方法
膳食纤维国标测定方法
1. 嘿，你知道膳食纤维国标测定方法吗？比如说，就像我们要搞清楚一道菜里到底有多少营养一样，我们得有特定的办法来测定膳食纤维的量呀！这可太重要啦！
2. 膳食纤维国标测定方法，听起来是不是有点高大上？其实啊，就跟我们找东西一样，得有合适的途径才行呢！举个例子，你找钥匙要在特定的地方找，测膳食纤维也要用特定的手段呢！
3. 哇塞，你们晓得膳食纤维国标测定方法有哪些不？就好比我们要解开一个谜题，得按步骤来呀！比如说要准备这样那样的东西，然后一步一步操作，才能得出准确结果呢！
4. 嘿，别小看膳食纤维国标测定方法哦！这就像一场游戏，有它的规则和技巧呢！比如说，不同的方法就像是不同的策略，选对了才能玩得转！
5. 膳食纤维国标测定方法可不能随便乱来呀！这就如同搭积木，得按照正确的方式搭，不然就会倒掉哦！想想看，如果不规范操作，那结果能可靠吗？
6. 哇哦，了解膳食纤维国标测定方法真的超有趣的！好比我们探索一个神秘的宝藏，每一步都充满惊喜呢！像知道用什么仪器就好像找到了打开宝藏的钥匙一样呢！
7. 你们想一想，膳食纤维国标测定方法多关键呀！就像在大海中航行需要指南针一样，它能指引我们得到准确的信息呢！比如说某种食品中的膳食纤维含量到底有多少呢！
8. 膳食纤维国标测定方法真的不容小觑啊！这和我们的生活息息相关呀！就像每天要吃饭喝水一样自然又重要呢！总之，掌握好这些方法太有必要啦！
观点结论：膳食纤维国标测定方法非常重要且有趣，我们应该重视并深入了解它，这对我们的生活和健康都有着积极的意义。
食品营养标签管理规范--膳食纤维
食品营养标签管理规范卫生部印发 2008年5月1日开始实施推荐性法规：国家鼓励食品企业对其生产的产品标示营养标签。
卫生部根据本规范的实施情况和消费者健康需要，确定强制进行营养标示的食品品种、营养成分及实施时间。
营养标签是指向消费者提供食品营养成分信息和特性的说明，包括营养成分表、营养声称和营养成分功能声称。
食品企业在标签上标示食品营养成分、营养声称、营养成分功能声称时，应首先标示能量和蛋白质、脂肪、碳水化合物、钠4种核心营养素及其含量。
膳食纤维的定义膳食纤维（dietary fiber）膳食纤维是指植物中天然存在的、提取的或合成的碳水化合物的聚合物，其聚合度DP ≥ 3、不能被人体小肠消化吸收、对人体有健康意义的物质。
包括纤维素、半纤维素、果胶、菊粉及其他一些膳食纤维单体成分等。
食品中产能营养素的能量折算系数表 1 食物中产能营养素的能量折算系数* 1营养成分的标示包括能量和核心营养素的标识以及宜标示的营养成分的标示，膳食纤维属于宜标识的营养成分。
膳食纤维包括纤维素、半纤维素、果胶、菊粉及其他一些膳食纤维单体成分。
膳食纤维可根据其成分选择检测方法和标示方式。
1）以国标或GB/T 9822测定数据，标示为：不溶性膳食纤维…克（g）；2）以AOAC 、AOAC 方法测定数据，标示为：膳食纤维…克（g）；也可标示为：膳食纤维、可溶性膳食纤维、不可溶性膳食纤维，例如：膳食纤维…克（g）或膳食纤维…克（g）--可溶性膳食纤维…克（g）（自愿）--不溶性膳食纤维…克（g）（自愿）3）以AOAC其他方法测定的膳食纤维单体成分的数据，可标示出膳食纤维和单体成分如“膳食纤维（以xxx计）…克或g ”，例如：膳食纤维（以菊粉计）…克（g）“零”数值的表达当某食品营养成分含量低微，或其摄入量对人体营养健康的影响微不足道时，允许标示“0”的数值。
可标示的“0”的界限值如下表：表5 标示“0”的界限值** 用份表示的时候，同时要符合每100g“0”的界限值要求。
高膳食纤维的标准
针对食物中膳食纤维含量的测定，要符合国家的下列标准：1. GB 5009.88-2014 食品安全国家标准食品中膳食纤维的测定本标准规定了食品中膳食纤维的测定方法（酶重量法）。
本标准适用于所有植物性食品及其制品中总的、可溶性和不溶性膳食纤维的测定，但不包括低聚果糖、低聚半乳糖、聚葡萄糖、抗性麦芽糊精、抗性淀粉等膳食纤维组分。
2. GB/T 9822-2008 粮油检验谷物不溶性膳食纤维的测定本标准规定了测定谷物不溶性膳食纤维的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器设备、操作步骤、结果计算，以及精密度的要求。
本标准适用于谷物中不溶性膳食纤维的测定。
3. NY/T 1594-2008 水果中总膳食纤维的测定（非酶-重量法）本标准规定了水果中总膳食纤维含量测定的非酶-重量法。
本标准适用于总膳食纤维含量≥10%、淀粉含量≤2%（以干基计）的水果中总膳食纤维含量的测定。
4. GB 5413.6-2010 食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中不溶性膳食纤维的测定本标准规定了婴幼儿食品和乳品中不溶性膳食纤维的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中不溶性膳食纤维的测定。
膳食纤维产品的安全标准：1. DBS42/ 007-2015 食品安全地方标准魔芋膳食纤维本标准规定了魔芋膳食纤维的产品分类、技术要求、检验方法、检验规则以及标志、标签、包装、运输、储存和保质期。
本标准适用于湖北省地域范围内生产的供冲调或冲泡饮用的即食型魔芋膳食纤维。
魔芋膳食纤维产品分类：1）原味魔芋膳食纤维：以魔芋为单一原料，经加工、包装而成的供冲调或冲饮的即食型魔芋膳食纤维。
按照葡甘聚糖含量可以分为：特纯魔芋膳食纤维、高纯魔芋膳食纤维、魔芋膳食纤维。
2）复合魔芋膳食纤维：以原味魔芋膳食纤维为主要材料，添加其他食品原辅料和食品添加剂，经加工制成的供冲调或冲饮的即食型魔芋膳食纤维。
2. GB/T 22494-2008 大豆膳食纤维粉本标准适用于商品大豆膳食纤维粉。
对食品中总膳食纤维测定方法分析与优化路径论述
图 １ 膳食纤维检测方法
( 一) 酶重量检测法 酶重量检测法主要应用于植物性食品和肉制品中的总 膳食纤维含量的测定领域的ꎮ 其能够对食物中的可溶性膳 食纤维、不溶性膳食纤维进行分别测定ꎬ而在对低聚果糖、抗 性麦芽糊 精 以 及 淀 粉 等 其 他 类 膳 食 纤 维 成 分 的 测 定 效 果 略差ꎮ 在使用酶重量检测法进行膳食纤维含量的测定时ꎬ所涉 及的检测仪器有:天平、水浴振荡器、研磨器、膳食纤维试剂 盒、ｐＨ 试纸等ꎬ所用到的试剂有提取用的乙醇、反应过程用 到的乙酸等ꎮ 在进行检测前ꎬ技术人员需要对需要检测的食物样品进 行预处理:需要对 待 检 测 的 样 品 进 行 充 分 的 粉 碎ꎬ 在 粉 碎 均 匀后ꎬ为保证后续 的 实 验 效 果ꎬ 监 测 人 员 还 需 要 利 用 筛 选 仪 器对粉碎后的样本颗粒进行筛选ꎮ 酶重量检测法的使用过程中ꎬ酶解处理过程主要有如下 几项工作需要进行:利用 α－淀粉酶、蛋白酶、淀粉酶对样本 进行酶解ꎬ在酶解 过 程 中 需 要 严 格 控 制 酶 解 温 度ꎬ 注 意 保 持 酶的活性ꎬ温度过 高 或 过 低 丢 会 影 响 酶 解 效 果ꎬ 对 最 终 结 果 造成干扰ꎻ酶解过 程 对 时 间 也 有 着 严 格 控 制ꎬ 一 般 酶 解 时 间 维持在 ３０ 分钟左右ꎮ 在酶解过后ꎬ还 需 要 对 酶 解 样 本 进 行 沉 淀 与 抽 滤 处 理ꎮ 检测人员需要按照按照 ４ ∶ １ 的比例来向样本中添加浓度为 ９５％ 的乙醇ꎬ乙醇容易需要被预处理ꎬ需要提前加热到 ６０℃ ꎬ 在沉淀过程中ꎬ样本与乙醇的混合溶液需要放置在室温下进 行沉淀ꎮ 在完成样本溶液的抽滤后ꎬ需要将沉淀进行烘干承 重ꎬ并鉴定沉淀成分ꎬ从而进行膳食纤维含量计算ꎮ ( 二) 三维滤袋检测法 三维滤袋检测法与酶重量检测法在许多方面都具有相 似性或一致性ꎮ 该方法在进行食物样本的膳食纤维检测时 用到膳食纤维分析仪、膳食纤维试剂盒以及三维滤袋等器材 设备ꎬ需要 用 到 的 试 剂 主 要 有 盐 酸 以 及 丙 酮、 乙 醇 等 有 机 溶剂ꎮ 三维滤袋检测法与酶重量检测法在检测流程上具有一 致性ꎮ 在样品预处理过后ꎬ检测人员需要取 ５ 毫升 α－淀粉酶 溶液、１０ 毫升淀粉酶溶液ꎬ１００ 毫升含有 ０.５ 毫克蛋白酶溶液 用浓度为 ０.０２％ 的叠氨酸钠溶液进行稀释ꎬ同时ꎬ盐酸溶液也 需要用蒸馏水进行稀释ꎬ以达到反应规定的 ｐＨ 值ꎮ 三维滤袋检测法中ꎬ检测人员需要进行履带城中、样品
膳食纤维的测定方法
膳食纤维的测定方法酶-重量法1.原理：样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。
总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。
不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。
SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。
TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。
2.适用范围AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。
3.仪器3.1烧杯：400或600ml高脚型。
3.2 过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex 60ml（Corning No.36060 buchner，或同等的）。
如下处理：（1）在灰化炉525℃灰化过夜。
炉温降至130℃以下取出坩埚。
（2）用真空装置移出硅藻土和灰质。
（3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。
（4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。
（5）在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。
（6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至0.1mg。
3.3 真空装置：（1）真空泵或抽气机作为控制装置。
（2）1L的厚壁抽滤瓶。
（3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。
3.4振荡水浴箱：（1）自动控温使温度能保持在98±2℃。
（2）恒温控制在60℃。
3.5 天平：分析级，精确至±0.1mg。
3.6马福炉：温度控制在525±5℃。
3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。
3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。
干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。
3.9 PH计：注意温控，用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。
3.10 移液管及套头：容量100μl和5ml。
3.11 分配器或量筒：（1）15±0.5ml，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。
膳食纤维国标
膳食纤维国标
膳食纤维是指不能被人体消化吸收的一种营养素，但它可以帮助促进肠胃蠕动、降低胆固醇、稳定血糖等作用，因此在保持身体健康方面至关重要。
为了更好地促进人们对膳食纤维的认识和消费，我国发布了膳食纤维国标。
膳食纤维国标是由国家食品药品监督管理局发布的，主要是指导我国居民膳食纤维的消费量以及膳食纤维的检测方法等。
根据国标，成年人每天的膳食纤维摄入量应该达到25克以上，而儿童和老年人的摄入量则有所不同。
为什么要关注膳食纤维的摄入量？因为膳食纤维是人体所需的
重要营养素之一。
膳食纤维可以增加粪便体积，促进肠道蠕动，减少便秘和大肠癌的风险。
此外，膳食纤维可以阻止胆固醇的吸收，降低血脂、血糖水平，保护心脏健康。
那么，我们在每天的饮食中应该如何摄入足够的膳食纤维呢？以下是一些常见的富含膳食纤维的食物：
1. 水果和蔬菜：苹果、梨、香蕉、草莓、猕猴桃、菠菜、豌豆、胡萝卜等都是富含膳食纤维的水果和蔬菜。
2. 谷物类食品：糙米、全麦面包、燕麦片等都是富含膳食纤维的谷物类食品。
3. 豆类食品：豆腐、黑豆、红豆、绿豆等都是富含膳食纤维的豆类食品。
然而，我们不应该只是依靠单一的食物来摄入膳食纤维。
我们应
该在日常饮食中多样化，尽量摄入富含膳食纤维的不同食物。
此外，我们也可以选择添加一些膳食纤维补充剂来帮助我们达到每天所需
的膳食纤维摄入量。
总之，膳食纤维是我们身体所需的重要营养素之一，因此我们应该注意每天的膳食纤维摄入量。
通过多样化的饮食和适当的补充，我们可以保持身体健康，预防各种疾病。
膳食纤维的测定
“粗纤维”一词最早用于营养学研究，并被认为是对人体不起营养作用的一种非营养成分。
然而近年来分析技术的发展和对这种“非营养素”认识的提高，“粗纤维”也被“膳食纤维”所替代，而且赋予更丰富的内容。
膳食纤维大致分为二类，一类为可溶性的，一类为不可溶性的，二者合并即为总的膳食纤维。
它主要包括植物细胞壁的成分如纤维素、半纤维素、果胶、木质素、角质和二氧化硅等成分，最早曾有中型洗涤剂法和酸性洗涤剂法等，测定结果常不能包括全部。
本章所介绍的Englist建立的、AOAC推荐的方法。
它主要测定为可溶性的膳食纤维、不可溶性膳食纤维和总膳食纤维三种。
膳食纤维实际上属于碳水化合物的范畴。
膳食纤维的物化特性主要包括5个方面：（1）很高的持水力。
（2）对阳离子有结合和交换能力。
（3）对有机化合物有吸附螯合作用。
（4）具有类似填充剂的充盈作用。
（5）可改变肠道系统中的微生物群系组成。
膳食纤维的测定方法主要有三种，包括非酶－重量法、酶重量法和酶化学法。
非酶重量法是一个比较古老的方法，只能用于粗纤维的测定。
而中性洗涤剂法也只能测定不溶性的膳食纤维。
酶重量法却可以测定总膳食纤维（包括可溶和不可溶性膳食纤维），也是AOAC的标准方法。
酶化学法是AOAC最新承认的另一个标准方法，但此法易受仪器条件的限制，不适用于普通实验室。
目前国标采用的还是中性洗涤剂法，食物成分表中列出的数据都是不溶性膳食纤维，所以下文先介绍不溶性膳食纤维的测定方法。
（一）中性洗涤剂法1. 原理在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。
2. 适用范围GB 12394—90适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定。
3. 仪器（1）烘箱：110～130℃。
（2）恒温箱：（37±2）℃。
（3）纤维测定仪。
不同种类食物中膳食纤维的测定
第33卷 第3期2004年 5月卫 生 研 究J OURNAL OF HYGIENE RESEARCH Vol.33 No.3May 2004 331文章编号:1000-8020(2004)03-0331-03#论著#不同种类食物中膳食纤维的测定阴文娅 黄承钰 冯靓1四川大学华西公共卫生学院,成都 610041摘要:目的 分析不同种类食物中总膳食纤维、可溶性及不溶性膳食纤维的含量,完善我国食物成分中膳食纤维数据,为指导和干预慢性病人的饮食治疗提供科学依据。
方法 根据2002年中国食物成分表中的食物分类方法,选择不同亚类中的植物性食物,使用Foss Tecator 膳食纤维分析仪,采用酶-重量法分析其中总膳食纤维、可溶及不可溶膳食纤维含量。
结果 干豆类食物的总膳食纤维含量最多,平均为36%,其次是粗粮类和鲜豆类,分别是16%和14%,而细粮,蔬菜类和水果类的总膳食纤维含量较低,小于10%。
豆类食物中的可溶性膳食纤维明显高于其它种类食物;干豆类和粗粮类的不可溶性膳食纤维含量较高;鲜豆类、薯类、蔬菜类的SDF P IDF 明显高于干豆类和谷类食物。
结论 酶重量法测定食物中膳食纤维其重现性较好,不同种类食物膳食纤维含量与组成差异较大,本研究结果可建议患有糖尿病、高血脂等慢性病的病人可增加可溶性膳食纤维含量较高的鲜豆类、薯类及蔬菜类食物的摄入;而患有肥胖症、便秘等肠道疾病的病人可增加不溶性膳食纤维含量高的干豆及粗粮类食物的摄入。
关键词:食物 膳食纤维 酶-重量法中图分类号:R15113 文献标识码:ADetermination of total,soluble and insoluble dietary fiber in foodsYin Wenya ,Huang C hengyu ,Feng LiangSchool of Public Health,Sichuan University,Chengdu 610041,ChinaAbstract :Objective To determinate the total,soluble and insoluble dietary fiber in di fferent kinds of food so as to provide the references for guiding the diet for control and preven tion of chronic diseases.Methods The contents of total,soluble and insoluble dietary fiber in 33food samples were determined by enzymatic -gravimetric method.Results The average total dietary fiber(TDF,g P 100g edible part)in dry beans,flesh beans and whole grains were 36%,14%,16%respectively,and that of refine grains,vegetables and frui ts were lower than 10%.The contents of soluble dietary fiber in beans were highes t,and the contents of insoluble dietary fiber in dry beans and other grains were higher.C onclusion The repeatability of the analysis method was good,the contents and pattern of dietary fiber in different kinds of food were largely varied.Key words :dietary fiber,enzymatic -gravi metric method,food作者简介:阴文娅,讲师,博士1浙江省疾病控制中心,杭州 3100091970年以前营养学中没有/膳食纤维(dietary fiber)0这个名词,而只有/粗纤维(crude fiber)0。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
总膳食纤维测定的介绍
1、在α-淀粉酶的作用下，PH为6的磷酸盐缓冲溶液，95—100度下加热15分
钟。
2、用蛋白酶在PH为7.5时60度培养30分钟。
3、用淀粉葡(萄)糖苷酶在PH为4.0---4.6下60度培养30分钟。
4、4体积的95%的乙醇沉淀。
5、过滤。
6、用78%和95%的乙醇和丙酮清洗沉淀物。
7、烘干称重。
8、干样可以拿去做凯氏定氮，也可以在525度的马弗炉里灰份5个小时，然后
去称重。
不溶的膳食纤维的定义为进行烘干前用乙醇进行清洗并用温水洗涤后残留物。
总膳食纤维（TDF）—不溶膳食纤维= 可溶膳食纤维（SDF）
标准酶法测定食品和饲料中的总膳食纤维量
1、研磨分级样品
2、在105度的烘箱烘干并恒重，在干燥箱中冷却到室温。
3、如果样品脂肪含量高于10%，需要用石油醚进行脱脂，在最终结果中再进行
校正。
4、称出0.5—1克的样品，并转移到400毫升的烧杯中。
5、用α-淀粉酶在50毫升的PH为6的磷酸盐缓冲溶液中培养15分钟，培养温
度为95—100度，温度可以用温度计控制。
6、冷却到室温，并用0.275 N 浓度的氢氧化钠溶液调节PH到7.5。
7、将烧杯和样品一起转移到磁力搅拌培养器中（GDE）。
8、在搅拌的情况下，加入蛋白酶在60度的情况下培养30分钟。
9、冷却到室温，用0.325的盐酸调节PH值为4.0—4.6。
10、在搅拌的情况下，加淀粉葡(萄)糖苷酶，在60度时培养30分钟。
11、通过加4体积的95%的乙醇沉淀可溶性膳食纤维，并且在室温下沉淀大
约1个小时。
12、称量已经添加了0.5克的硅藻土(作为助滤剂)玻璃坩埚.
13、将坩埚放在CSF6 (或者FIWE6)上,倒入上述操作的沉淀物,并用
V ACUUM进行吸液排空,用78%的乙醇溶液进行洗涤转移沉淀物。
14、用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤玻璃坩埚中的沉淀物两次，再用10毫
升95%的乙醇溶液洗涤两次，10毫升的丙酮溶液洗涤两次并排除废液。
15、在105度的烘箱中烘一夜，在干燥器中冷却。
16、计算结果，要减去坩埚的重量Q和硅藻土的重量。
17、减去不消化的蛋白和灰份含量来矫正结果。
总膳食纤维的测定（TDF）
方法原理：
总膳食纤维的测定方法是结合酶法和重量差量法来测定的。
相同的（四份重复的）脱脂的干燥食品样，用α-淀粉酶在稳定加热的情况下进行胶化，然后用淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）消化，去掉淀粉，用蛋白酶去掉可消化的蛋白。
可溶性的膳食纤维是在乙醇溶液中的沉淀物。
残留物过滤，通过乙醇、丙酮溶液洗涤，再烘干称重。
其中一个样品用来化验不能消化的蛋白，另外的一个进行灰份。
总膳食纤维是消化后的残留物的重量减去不能消化的蛋白和灰份。
试剂
1、石油醚，试剂级的。
2、体积比为95%的乙醇，分析级的。
3、体积比为78%的乙醇。
将207毫升的蒸馏水放入含有1升的95%的乙醇的量
筒中，摇匀混合。
4、丙酮，试剂级的。
5、磷酸盐缓冲液，0.08M,PH为6.0。
6、α-淀粉酶，热稳定，可溶解的。
7、蛋白酶溶液。
溶解50毫克到1毫升的磷酸盐缓冲溶液，会加强活力。
8、淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）溶液。
9、氢氧化钠溶液，1.0 N,试剂级的。
10、氢氧化钠溶液，0.275 N。
11、盐酸溶液, 1.0 N,试剂级的。
12、盐酸溶液,0.325N。
13、硅藻土，酸性洗涤的。
注：A、使用蒸馏水或者去离子水进行溶解。
B、此方法所需酶的量可以从不同的公司来获得。
如NOVO INDUSTRI，SIGMA CHEMICAL CO,. MERCK，等。
C、酶的纯度应该由生产者来确定。
如果不知道酶的活性，必要时可以参考现有的资料。
酶的稳定性也要可以控制，所进行整个过程使用的物质可以列为下表（SIGMA CHEMICAL CO）：
原料实验活性样品重量克希望的重复性胶质果胶酶 0.1 95---100 半乳聚糖半纤维素酶 0.1 95---100 酪蛋白蛋白酶 0.3 0—2
β-葡聚糖葡聚糖酶 0.1 95—100 淀粉(普通的) 淀粉酶 1.0 0—2
淀粉(小麦的) 淀粉酶 1.0 0—1
样品处理
从大量的原料中提取典型的样品，在105度的烘箱（或者70度的真空烘箱中）中干燥一个晚上，在干燥箱中冷却。
干燥状态下研磨到0.3—0.5毫米大小。
如果样品不能够加热，冷冻干燥。
如果样品脂肪含量超过10%，则需要在石油醚中降
脂3次，25毫克/升的样品。
注意脂肪的含量要校正最后的结果。
膳食纤维的测定
空白实验应该在整个实验过程中进行，最后要从结果中扣除以去掉试剂等因素对结果的影响。
将1克样品，称重精度到0.1毫克,在400毫升的烧杯中,混合到50毫升PH为6的磷酸缓冲溶液中,加磁力搅拌子,加100微生的热稳定的α-淀粉酶溶液,彻底混合,盖上铝箔。
放到100度的水浴中，让样品温度保持在95—100度保持15分钟，控制好温度，然后从水浴中移出，冷却到室温。
用10毫升的0.275N 的氢氧化钠溶液调节PH到7.5,向GDE中添加冷水将温度降到60度,加100微升的蛋白酶溶液(50毫克放在1毫升磷酸盐缓冲液中).烧杯盖上滤箔连续搅拌的情况下在60度时培养30分钟。
冷却到室温，用0.325N 的盐酸调节PH到4.0—4.6,用PH计控制PH值。
添加300毫升的淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）溶液，盖上铝箔在连续搅拌的情况下60度水浴培养30分钟。
拿掉搅拌子，280毫升的95%的乙醇预热60度，在室温下沉降60分钟。
完全干净的玻璃坩埚，放在525度的马弗炉烘干1小时，冷却到室温，用水清洗，在空气中晾干。
添加0.5克的硅藻土,玻璃坩埚在130度的烘箱中恒重一个小时,精度0.1毫克。
同硅藻土一起称重并放在CSF6 （FIWE6）的过滤器中，利用真空。
用漏斗转移酶消解完的沉淀物，滤出液用导管进行收集。
用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤沉淀物3次，10毫升的95%的乙醇溶液洗涤2次，10毫升的丙酮溶液洗涤2次。
如果胶状的滤膜使的过滤能力下降，保持液体状态，用细微的空气来吹表面（仪器上操作），整个清洗过程需要半个小时。
在105度的烘箱中（70度的真空箱中）将玻璃坩埚连同沉淀物和硅藻土一起烘干一个晚上，冷却到室温，称重精度为0.1毫克。
沉淀物的重量是最终的重量减掉坩埚的重量和硅藻土的重量（需要的重复样）。
其中一个沉淀物的样用凯氏方法分析不能消化的蛋白含量（N*6.25）,第二个沉淀物的样在525度的马弗炉中烘干5个小时,在干燥箱中冷却称重(精度0.1毫克),灰份的重量是前步的总重量减掉坩埚和硅藻土的重量后剩下的重量。
计算
%空白中的蛋白百分含量（SB）=空白中的蛋白含量/空白的残留量*100
%空白中灰分含量（CB）=空白中的灰分量/空白的残留量*100
空白量=空白中的残留物*[1-（PB+CB）/100]
%样品的蛋白含量（SP）=样品中的蛋白量/样品残留物量*100
%样品灰分含量（SA）=样品中灰分量/样品残留物量*100
%TDF={残留物量-[（PC+CC）*残留物量/100]-空白量}/样品重量*100
简化为：
%TDF=[残留量*（100-PC-CC）-空白量]/样品重量
注：这里的残留量是指重复空白或者样品的所获得的平均残留量这里的样品量是指两个样品的平均重量。